不同培养条件及方法对组培暗紫贝母生长的影响

暗紫贝母(Fritillaria unibracteata Hisao et K.C.Hsia)是百合科植物,其鳞茎为川贝来源之一,具有清热润肺、化痰止咳、散结等功效。但由于它喜寒凉气候,为高山、高原特有植物,只能野生生长在3000～3500 m的高山上,栽培很难成活。为了弥补野生资源的不足,探讨药材生产新途径。

不同基源川贝母镇咳、祛痰功效差异性实验研究

目的:观察4种不同基源川贝母镇咳、祛痰的功效差异。方法:(1)将健康豚鼠70只,完全随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组、暗紫贝母组、梭砂贝母组、卷叶贝母组和甘肃贝母组7组,连续给药3d,末次给药30min后,雾化吸入枸橼酸60s。记录咳嗽的潜伏期、5min内咳嗽的次数。(2)将健康小鼠60只,随机分为空白对照组、阳性对照组、暗紫贝母组、梭砂贝母组、卷叶贝母组和甘肃贝母组6组,连续给药3d,末次给药30min后,由腹腔注射0.5%酚红溶液0.5mL/只。30min后,处死小鼠,取出气管,冲洗,再加入5%碳酸氢钠溶液0.1mL,离心,取上清液,用酶标仪(波长570nm)测定OD值、祛痰指数。结果:(1)与卷叶贝母比较,暗紫贝母组、梭砂贝母组均能延长咳嗽潜伏期(P<0.05)。(2)与梭砂贝母组、甘肃贝母组、卷叶贝母组分别比较,暗紫贝母组能促进酚红排泌OD(opticaldensity)值增加(P<0.05,P<0.01)。结论:4种不同基源川贝母在镇咳、祛痰功效方面可能存在一定的差异,在镇咳方面暗紫贝母、梭砂贝母优于卷叶贝母、甘肃贝母,在祛痰方面暗紫贝母优于甘肃贝母、卷叶贝母、梭砂贝母。

暗紫贝母内生真菌Fusarium sp.A14次生代谢产物抗氧化活性研究

本文采用石油醚(30~60℃)、乙酸乙酯、二氯甲烷、正丁醇和乙醇5种溶剂依次对暗紫贝母内生真菌Fusarium sp.A14发酵液进行提取,获得5种不同极性馏分。用DPPH·、ABTS^+·清除活性和FRAP活性对其进行了抗氧化活性评价,用福林酚法和NaNO_2-Al(NO_3)_3-Na OH比色法测定了各馏分中总多酚含量(TPC)和总黄酮含量(TFC),最后用TLC自显影法和HPLC法分析抗氧化活性成分。抗氧化活性及TPC和TFC测定结果表明,后四种溶剂提取馏分具良好的抗氧化活性,以乙酸乙酯和正丁醇提取馏分活性最强,且抗氧化活性与TPC和TFC存在明显相关性。此外,TLC自显影分析结果表明抗氧化活性成分具有多样性;HPLC分析结果表明乙酸乙酯和二氯甲烷中馏分中有多种具较强抗氧化活性的酚酸类物质,如儿茶素、咖啡酸、木樨草素和阿魏酸。本研究表明:暗紫贝母内生真菌Fusarium sp.A14具有能够生产已知或者未知抗氧化活性物质的潜力,其在医药健康领域具有重要应用价值。本试验为其进一步开发和利用奠定了基础。

组织培养暗紫贝母的药理作用

以组织培养的暗紫贝母(FritillariaunibracteataHsiaoetK.C.Hsia)为材料,野生暗紫贝母为对照,用不同溶剂提取,得4个化学组分:总生物碱部分、总皂甙部分、水溶性部分和脂溶性部分,并以生药粉为阳性对照进行药效学试验。结果表明:组培贝母与野生贝母有相似的止咳、祛痰作用;总皂甙部分与总生物碱部分均为川贝有效活性成分,t检验表明两者之间无显著性差异;经TLC检查,总生物碱部分与总皂甙部分无化学成分重叠。

暗紫贝母化学成分研究

目的：研究暗紫贝母的化学成分。方法：采用反复硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶、氧化铝柱色谱等方法进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定化合物结构。结果：从暗紫贝母乙醇提取物的氯仿萃取部位分离得到9个化合物,分别鉴定为：cyclo-（Pro-Leu）（1）、咖啡碱（2）、贝母辛（3）、香草醛（4）、对羟基苯甲醛（5）、硬脂酸甘油酯（6）、7-ketositosterol（7）、β-谷甾醇（8）、胡萝卜苷（9）。结论：其中,化合物1、2和6为首次从贝母属中分离得到,化合物1、2、4~6为首次从该植物中分离得到。

暗紫贝母和梭砂贝母治疗急性支气管炎(痰热咳嗽)的多中心、随机、双盲、对照试验

目的:比较不同基源川贝母(暗紫贝母、梭砂贝母)止咳、化痰功效差异性,确定最能代表川贝母止咳、化痰功效的基源种。方法:募集216例急性支气管炎(痰热咳嗽)的患者,随机分为两组。暗紫贝母组108例,采用暗紫贝母超细粉2g,口服,每日3次,疗程5d。梭砂贝母组108例,采用梭砂贝母超细粉2g,口服,每日3次,疗程5d。结果:共有210例完成了试验,其中暗紫贝母组106例、梭砂贝母组104例。随着用药时间的推进,暗紫贝母组和梭砂贝母组咳嗽、咯痰不爽及其他中医证候分值均呈降低的趋势。暗紫贝母组、梭砂贝母组主证(咳嗽、咯痰不爽)改善程度差异无统计学意义(P>0.05),次证(咽干、大便干结)改善程度差异有统计学意义(P<0.05)。暗紫贝母组、梭砂贝母组中医证候疗效比较有统计学差异(P<0.05)。暗紫贝母组和梭砂贝母组不良事件发生率比较,两组差异无统计学意义(P>0.05),且两组无严重不良事件发生。结论:暗紫贝母与梭砂贝母单独用于治疗"痰热咳嗽",均能缓解咳嗽、咯痰不爽、胸闷、咽干、尿黄、大便干结的症状,在改善咽干、大便干结症状方面暗紫贝母优于梭砂贝母。两种基源川贝母中,暗紫贝母可能更能代表川贝母清热润肺、止咳化痰之功。

大孔吸附树脂分离纯化湖北贝母总生物碱的研究

目的:研究湖北贝母总生物碱的纯化方法。方法:采用50%乙醇提取,D101型大孔吸附树脂分离纯化的方法。结果:提取物中的湖北贝母总生物碱含量达到74%。结论:D101型大孔吸附树脂适合分离纯化湖北贝母总生物碱。

高效液相色谱法同时测定太白贝母与暗紫贝母中9种核苷类成分的含量

建立太白贝母和暗紫贝母中9种核苷类成分（尿嘧啶、胞苷、鸟嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鸟苷、胸苷、腺苷、2＇-脱氧腺苷）的高效液相色谱法（HPLC）分析方法,并对核苷类的含量进行比较。采用Venusil MP C18（2）（4.6mm×250 mm,5μm）色谱柱,甲醇-水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 m L/min,柱温35℃,检测波长260 nm为分析条件。在设定的试验条件下,9种核苷在30 min内实现了良好的分析,待测核苷成分在各自线性范围内,峰面积积分值与进样量质量浓度呈良好的线性关系（r=0.999 0~0.999 9）,平均回收率为96.68%~101.35%（RSD〈3%）。结果表明：不同品种及同一品种不同商品名称的太白贝母和暗紫贝母中均含有9种核苷类成分,但含量上均存在差异,其中尿苷、鸟苷和腺苷含量较高,而尿嘧啶、胞苷、鸟嘌呤、腺嘌呤、胸苷、2＇-脱氧腺苷含量较低。松贝中核苷类成分的含量略低于青贝。太白贝母中胞苷、尿苷、鸟苷、胸苷、腺苷、2＇-脱氧腺苷及其总含量整体上呈现出随着生长年限（花生大贝、花生小贝〉大尖、中尖、小尖〉松尖）增加而含量降低趋势,但尿嘧啶、鸟嘌呤、腺嘌呤含量呈现出随着生长年限增加而增加的趋势。从整体上看,太白贝母中核苷类成分的含量高于暗紫贝母,具有化学等同性,2种基源的川贝母作为同一药材使用是可行的。

微波消解-原子吸收法分析并比较四种贝母中的微量元素

利用火焰原子吸收分光光度法（FAAS）及石墨炉原子吸收分光光度法（GFAAS）测定了浙贝、象贝、东贝、川贝4种贝母中15种微量元素的含量。同时考察了不同微波消解条件对分析结果的影响,确定了原子吸收分光光度法测定的最佳条件,并且以微量元素含量作为指标对其进行了主成分分析。实验结果表明,微波消解法操作简便、快速、样品消解完全,空白值低,选择性好,方法相对标准偏差小于3.96%,回收率在91.0%-108.7%。主成分分析法在反映不同样品微量元素含量的差异程度上具有应用价值。

基于AOTF-近红外光谱技术的川贝母药材即时快速鉴别研究

目的探索建立一种针对川贝母药材的即时快速分析方法。方法收集贝母类药材共81批,应用便携式AOTF近红外光谱仪采集其光谱,通过主成分分析法(PCA)分别对贝母类药材、川贝母类药材及商品"松贝"与伪品进行快速鉴别。结果该方法实现了川贝母类药材与非川贝母药材的快速鉴别,能有效区分川贝母类药材,并可快速甄别"松贝"及其混伪品。结论该方法是一种简便、快速、低耗、无损的新型分析技术,能用于川贝母类药材的快速鉴别。

湖北贝母总生物碱平喘作用及其机理的研究

目的研究湖北贝母总生物碱对豚鼠的平喘作用及其机理。方法采用豚鼠整体动物引喘和豚鼠离体气管螺旋条的实验方法,分别研究湖北贝母总生物碱对乙酰胆碱-组胺(Ach-Histamine)整体动物的平喘作用、对离体气管平滑肌基础张力的影响及对各种致痉剂收缩气管平滑肌的抑制作用。结果湖北贝母总生物碱在4 mg/kg剂量下灌胃给药1 h后,能明显延长Ach-Histamine所致豚鼠哮喘的引喘潜伏期,表现出良好的平喘效应;对豚鼠离体气管平滑肌的基础张力无显著影响;对Histamine和5-HT引起的收缩也无明显的抑制作用;但对于Ach引起的收缩,湖北贝母总生物碱在2.5mg/L的浓度时即呈现出显著的抑制作用(P<0.01),对20μmol/L Ach的IC50为13.130 4 mg/L;湖北贝母总生物碱可使Ach量效累积曲线向右平移,而最大效应不降低。结论湖北贝母总生物碱对豚鼠具有较强的平喘作用,其机理可能与竞争性拮抗气管平滑肌M受体从而扩张气管平滑肌作用有关。

湖北贝母二萜聚合物的结构研究

目的 研究湖北贝母二聚物的结构。方法 采用硅胶柱层析从湖北贝母 Fritillaria hupehensis H siao et K .C.Hsia中分得 3个对映 -贝壳杉烷型聚合二萜鄂贝缩醛 A(fritilleinide A)、鄂贝酸酯 C(fritillebin C)和鄂贝酸酯 D (fritillebin D)。结果 经理化常数、光谱分析及与标准品对照 ,证明它们的结构为 ent- kauran- 16β,17- acetalent- 16 β- kauran- 17- (S) aldehyde( ) ,ent- 16 - hydroxy- kanran- 17- yl ent- 16 - kauran- 17- oate( ) ,ent- 16 α- hydroxy-kauran- 17- yl ent- 16β- kauranoate ( )。结论 这

FTIR直接测定法对川贝母和珠贝、小东贝的区别鉴定

目的 对川贝母、浙贝母和东贝母进行区别鉴定。方法 采用傅里叶变换红外光谱法直接测定植物中药材的红外光谱。结果 川贝母、浙贝母和东贝母的红外光谱差别较大。结论 可以采用 FTIR直接、快速、准确地测定同属不同种的川贝母。

融雪时间对川贝母生长的影响

为了探讨融雪时间对川贝母种子、鳞茎及幼苗发芽生长的影响,在青藏高原东部的高山雪场观察了早融、中融、晚融3个不同融雪时间发生部位上川贝母种子和鳞茎的个体重量、种子数量、种子萌发率及幼苗第一片叶的长度,并对不同融雪部位生长的植株进行了比较。结果表明,随着融雪时间的推迟,川贝母的单花种子数和种子重量逐渐增加,和早融部位生长的植株相比,晚融部位生长的植株单花种子数和种子重量分别增加了40.3%和24.6%;但是鳞茎的重量表现出了相反的趋势,和早融部位生长的植株相比,晚融部位生长的植株鳞茎重量降低了22.4%。另外,川贝母的种子大小对幼苗的萌发率没有显著的影响,但对幼苗的第一片叶子长度有明显的影响,和早融部位生长的植株相比,晚融部位生长的植株第一片叶子长度增加了41.6%。说明晚融的积雪有利于川贝母种子产量的提高,而早融的积雪有利于鳞茎的生长。

遮光和施氮对暗紫贝母形态特征和生物量分配的影响

根据最优分配理论（optimal partitioning theory,OPT）,在自然环境中,由于地上和地下资源在空间上的分离,陆生植物需要调整其地上和地下部分的生物量分配以平衡对资源的吸收.研究结果显示：在植物地上资源严重受限时,叶片的生物量分配相对增加;而地下资源严重受限时,根的生物量分配相对增加.

暗紫贝母研究进展

暗紫贝母(Fritillaria unibracteataHsiao et K.C.Hsia)为百合科贝母属植物为中药材川贝母(Balbus Fritillariae unibracteatae)的主要来源之一,具有清热润肺、化痰止咳及散结等功效,是中国特有的历史悠久的传统中药。为了解近几年来对暗紫贝母的研究现状,从植物学、化学成分分析、药理学、分子生物等方面对暗紫贝的研究进展进行了综述。

生长调节物质对组培暗紫贝母小鳞茎生长的影响

应用正交实验研究了生长调节物质病毒唑（ｒｉｂａｖｉｒｉｎ）、茉莉酸甲酯（ｊａｓｍｏｎｉｃａｃｉｄｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒ）、油菜素内酯（ｂｒａｓｉｎｏｌｉｄｅ）、腐殖酸钠（ｓｏｄｉｕｍｈｕｍａｔｅ）对组织培养暗紫贝母（ＦｒｉｔｉｌａｒｉａｕｎｉｂｒａｃｔｅａｔａＨｉｓａｏｅｔＫ．Ｃ．Ｈｓｉａ）小鳞茎生长的影响，发现病毒唑有显著活性。进一步对不同浓度病毒唑的效果进行优化试验，结果表明：病毒唑１０ｍｇ／Ｌ是提高小鳞茎生长率的最适浓度。

暗紫贝母研究现状

为了保证贝母属植物的合理利用,现对川贝母植物的基源植物暗紫贝母的本草考证、植物来源、提取工艺、化学成分、以及药理研究进行综述.

贝母提取物中因大孔吸附树脂带入有机残留物的定量测定

采用顶空气相色谱法,对湖北贝母提取物中因D101型大孔吸附树脂可能带入的有机残留物,如正己烷、苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯和二乙烯基苯进行定量检测。结果表明,该方法操作简便、准确可靠,精密度RSD小于5.0%,峰面积与浓度有良好的线性关系,回收率符合要求,可用于定量检测湖北贝母提取物中因D101型大孔吸附树脂带入有机溶剂的残留量。

FAAS测定暗紫贝母中的9种元素含量

采用火焰原子吸收光谱法对产自青海果洛州的暗紫贝母中Cu、Zn、Fe、Mn、Ca、K、Na、Mg、Cd共9种金属元素进行了分析测定．在选定的测定条件下，青海暗紫贝母中各元素间相互干扰小，对测定结果无明显影响．方法的校准曲线线性关系良好（r=0．9973～0．9999），方法回收率在97．00％～102．00％之间（n=7），RSD值（n=7）在0．17％～1．43％之间．青海暗紫贝母中Ca、K、Na、Mg含量较高，研究结果为合理开发暗紫贝母资源提供科学依据．