宁夏无果枸杞芽提取物对慢性温和不可预见性应激小鼠学习、记忆的影响

目的:探讨宁夏无果枸杞芽提取物(fruitless lycium-sprout extracts,FLE)对成年慢性应激小鼠学习、记忆功能,血清和脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)的活性、丙二醛(MDA)含量及脑组织中神经细胞粘附分子(NCAM)表达的影响。方法:将40只成年昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、FLE低剂量组(FLE1组)和高剂量组(FLE2组),每组10只;采用慢性温和不可预见性应激(chronic mild unpredictable stress,CUMS)方法建立小鼠抑郁模型。在造模完成后灌胃给药,1次/d,连续灌胃6周,FLE1组、FLE2组分别用质量体积百分比为10%、20%的FLE每日0.2 ml/10 g灌胃,正常对照组及模型组灌胃等量生理盐水。用Morris水迷宫实验检测各组小鼠的学习记忆能力,黄嘌呤氧化酶法测定血清和脑组织SOD活性,硫代巴比妥酸法测定MDA水平,免疫组化染色法检测脑组织中N-CAM蛋白的表达。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠的目标象限停留时间减少,隐藏平台象限获得时间延长,血清SOD活性降低,MDA水平提高,脑组织中N-CAM表达下调(P<0.01);与模型组比较,FLE2组的目标象限停留时间延长,隐藏平台象限获得时间缩短,血清和脑组织中SOD活性均增加,MDA含量均降低(P<0.05),脑组织中N-CAM表达均上调(P<0.001)。结论:FLE可以提高CUMS小鼠学习和记忆的能力,其机制可能与抗氧化作用有关。

宁夏无果枸杞芽提取物对自然衰老小鼠SOD、MDA及NCAM的影响

目的观察宁夏无果枸杞芽醇提取物(FLE)对老年小鼠学习、记忆功能、血浆和脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及神经细胞黏附分子(NCAM)在海马和皮质表达的影响。方法将60只13个月龄自然衰老KM小鼠分为老年对照组和FLE低剂量组(FLE1组)、FLE中剂量组(FLE2组)、FLE高剂量组(FLE3组),每组15只;另将15只6个月龄KM小鼠做为成年对照组。FLE1、FLE2、FLE3组分别用质量/体积百分比为5%、10%、20%FLE灌胃,0.2mL.(10g.d)-1,老年对照组和成年对照组灌胃等量生理盐水,连续8周。用Morris水迷宫实验检测各组小鼠学习记忆能力;黄嘌呤氧化酶法测定血清和脑组织SOD活性,硫代巴比妥酸法测定MDA水平;免疫组化SP法检测小鼠脑组织中NCAM的表达。结果与成年对照组比较,老年对照组小鼠的空间搜索平台停留时间百分比降低,血清SOD活性降低,MDA水平提高(P<0.01),脑组织中NCAM表达下调(P<0.01)。与老年对照组比较,FLE2、FLE3组的学习记忆能力均提高、血清和脑组织中SOD活性均增加,MDA水平降低,脑组织中NCAMs表达均上调(P<0.05)。结论 FLE能够改善自然衰老KM小鼠的学习记忆能力,其机制可能与FLE的抗氧化和上调脑组织中NCAM表达有关。

宁夏无果枸杞芽提取物对自然衰老小鼠学习记忆、MAO、GSH-Px及ChAT活性的影响

目的观察宁夏无果枸杞芽提取物(FLE)对自然衰老小鼠学习、记忆功能,脑组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、单胺氧化酶(MAO)、乙酰胆碱转移酶(ChAT)的活力的影响,探讨FLE抗衰老机制。方法将60只13月龄自然衰老昆明小鼠分为老年对照组和FLE低剂量组(FLE1组)、FLE中剂量组(FLE2组)、FLE高剂量组(FLE3组),每组15只;另将15只6月龄昆明小鼠做为成年对照组。FLE1组、FLE2组、FLE3组分别用质量/体积百分比为5%、10%、20%FLE灌胃,0.2mL·(10g·d)-1,老年对照组和成年对照组灌胃等量生理盐水,连续8周。用Morris水迷宫检测各组小鼠给药前后的学习记忆能力;分光光度法检测脑组织中GSH-Px、MAO和ChAT的活性;免疫组化方法检测小鼠大脑皮层和海马区的ChAT的表达。结果给药后,与成年对照组比较,老年对照组小鼠逃避潜伏期延长、目标象限停留时间百分比缩短(P<0.01),脑组织中MAO活力增高,GSH-Px、ChAT活性降低(P<0.01);与老年对照组比较,FLE2组、FLE3组小鼠逃避潜伏期缩短、目标象限停留时间百分比延长(P<0.01),FLE3组脑组织中MAO活性降低、GSH-Px活性明显升高(P<0.01),FLE2及FLE3组脑组织中ChAT活性增高(P<0.01);FLE各组间比较,FLE3组治疗效果较FLE1组及FLE2组好(P<0.01)。结论较高浓度的FLE能够改善自然衰老昆明小鼠的学习记忆能力,其机制可能与FLE提高GSH-Px活性,降低MAO活性,发挥抗氧化作用以及上调脑组织中ChAT的活性,提高脑组织中乙酰胆碱含量有关。

宁夏无果枸杞芽提取物对老年小鼠小肠组织中FOXO1、β-catenin表达的影响

目的观察宁夏无果枸杞芽提取物(FLE)对衰老小鼠小肠上皮FOXO1、β-catenin表达的影响。方法将60只13月龄自然衰老昆明小鼠分为老年对照组和FLE低剂量组(FLE1组)、FLE中剂量组(FLE2组)、FLE高剂量组(FLE3组),每组15只;另将15只6月龄昆明小鼠做为成年对照组。FLE1组、FLE2组、FLE3组分别用质量/体积百分比为5%、10%、20%FLE灌胃,0.2 m L·10 g-1·d-1,老年对照组和成年对照组灌胃等量生理盐水,连续8周。应用PCR技术与免疫蛋白印迹技术(Western-Blot),检测小鼠小肠组织中FOXO1、β-catenin mRNA和蛋白表达。结果与成年对照组比较,老年对照组小鼠小肠组织中FOXO1、β-catenin mRNA与蛋白表达下调(P<0.05)。与老年对照组比较,FLE1、FLE2 FOXO1、β-catenin mRNA表达无明显增加(P>0.05);FLE3组的FOXO1、β-catenin mRNA和蛋白表达均上调(P<0.01)。结论高剂量FLE能够上调小肠组织中FOXO1、β-catenin mRNA和蛋白表达。

宁夏无果枸杞芽水提物对老年小鼠Wnt通路信号分子表达的影响

目的观察宁夏无果枸杞芽水提物(aqueous extract of fruitless lycium sprout,AEFLS)对老年小鼠Wnt/β-catenin通路信号分子的影响。方法13月龄C57BL/6J小鼠随机分为老年对照组和AEFLS低浓度组(AEFLS1组)、中浓度组(AEFLS2组)和高浓度组(AEFLS3组),6月龄小鼠为成年对照组。AEFLS1组、AEFLS2组、AEFLS3组小鼠分别用浓度为5 mg·kg^-1、10 mg·kg^-1、20 mg·kg^-1的AEFLS灌胃,每天0.2 mL/10 g,老年组及成年对照组小鼠灌胃等量生理盐水,持续8周。用尼氏染色观察海马CA3区锥体细胞尼氏染色情况;RT-PCR法检测小鼠脑海马区β-连环蛋白(β-catenin)mRNA、人叉头框蛋白O1(FoxO1)mRNA和T细胞特异性转录因子4(TCF4)mRNA的表达;免疫组组织化学染色和Western blot技术检测β-catenin、FoxO1和TCF4蛋白的表达。结果尼氏染色结果显示:给予中浓度的AEFLS干预后,海马CA3区锥体细胞层蓝色深染细胞明显增多;给予低浓度或高浓度的AEFLS干预后,蓝色深染的细胞较中浓度组及成年对照组少。RT-PCR结果显示:与成年对照组比较,老年对照组β-catenin mRNA、FoxO1 mRNA表达水平降低,TCF4 mRNA表达水平升高(P均<0.05);与老年对照组比较,AEFLS3组β-catenin mRNA、FoxO1 mRNA水平增高,TCF4 mRNA水平降低(P均<0.05)。免疫组化及Western blot检测结果显示:与成年对照组比较,老年对照组β-catenin、FoxO1蛋白表达降低,TCF4蛋白表达增加(P均<0.05);与老年对照组比较,AEFLS2组β-catenin蛋白及AEFLS3组β-catenin、FoxO1蛋白表达增加,AEFLS3组TCF4蛋白表达降低(P均<0.05)。结论中、高浓度宁夏AEFLS可能通过上调老年小鼠Wnt/β-catenin通路信号分子FoxO1、β-catenin基因和蛋白的表达,下调TCF4基因和蛋白的表达,从而发挥神经保护作用。

宁夏无果枸杞芽提取物对慢性肝纤维化小鼠抗氧化能力及TNF-α和IFN-γ的影响

目的研究宁夏无果枸杞芽提取物(FLE)对慢性肝纤维化损伤小鼠血清TNF-α和IFN-γ的影响,探讨FLE抗肝纤维化的机制。方法选取25只SPF级昆明小鼠,随机分为5组,每组5只,即正常对照组、模型组、无果枸杞芽提取物低剂量治疗组、中剂量治疗组和高剂量治疗组。应用CCL4制作小鼠慢性肝纤维化损伤模型,给予不同剂量FLE干预8周。取肝组织进行HE染色,观察肝组织病理形态改变;用黄嘌呤氧化酶法测定小鼠血清SOD活性,硫代巴比妥酸法测定MDA水平,ELISA法检测血清细胞因子TNF-α和IFN-γ的含量,观察FLE对其影响。结果模型组肝纤维组织增生明显,分隔包绕正常肝小叶,形成大小不等的结节,假小叶中肝细胞索排列紊乱,小叶中央静脉缺如,纤维组织中可见明显的炎性细胞浸润,肝细胞水肿;应用FLE干预后小鼠肝细胞水肿有不同程度的减轻,肝纤维结缔组织增生均减少,汇管区炎性细胞浸润均减少。与正常对照组比较,模型对照组血清SOD活性降低,MDA含量增高(P<0.05);与模型对照组比较,FLE中、高剂量治疗组小鼠血清中SOD活性均增加,MDA水平均降低(P<0.05);ELISA法检测结果显示,FLE中、高剂量治疗组小鼠血清中TNF-α含量与模型对照组相比较,差异有统计学意义(P<0.05);FLE低、中、高剂量治疗组小鼠血清IFN-γ的浓度与模型对照组相比较,均明显降低(P<0.05)。结论 FLE中、高剂量均可改善CCL4所致肝纤维化损伤,其机制与FLE提高小鼠抗氧化能力,减轻小鼠肝脏炎症反应有关,其中以高剂量组作用最为明显。

宁夏无果枸杞芽水提物对老年小鼠心肌细胞抗氧化及凋亡蛋白表达的影响

目的观察宁夏无果枸杞芽水提物对老年小鼠心肌细胞抗氧化能力及凋亡相关蛋白表达的影响。方法将13个月龄自然衰老的C57BL/6J小鼠分为老年对照组和AEFLS低剂量组(AEFLS1组)、AEFLS中剂量组(AEFLS2组)、AEFLS高剂量组(AEFLS3组)。AEFLS1组、AEFLS2组、AEFLS3组分别给予5、10、20mg/kg的AEFLS灌胃,老年对照组灌胃生理盐水,连续8周。分别用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法测定心脏组织SOD和MDA的水平;Western-blot技术和免疫组织化学方法检测小鼠心肌组织Bcl-2、Bax和Capase-3的表达。结果与老年对照组比较,AEFLS2和AEFLS3组MDA水平降低,SOD活性升高,差异有统计学意义(P<0.01)。Western-blot结果:与老年对照组比较,AEFLS2和AEFLS3组的Bcl-2蛋白光密度值升高,Bax和Capase-3蛋白光密度值降低(P<0.01);免疫组化结果:与老年对照组比较,AEFLS2和AEFLS3组Bcl-2蛋白免疫阳性表达均升高,Bax和Capase-3蛋白免疫阳性表达降低(P<0.01)。结论中、高剂量的AEFLS能提高衰老小鼠的心肌组织抗氧化能力,上调Bcl-2的表达,下调Capase-3和Bax的表达,发挥抗心肌细胞凋亡的作用。