Fisetin经c－Fos／NFATc1信号通路抑制小鼠巨噬细胞分化为破骨细胞的研究

目的：探讨Fisetin阻断c－Fos／NFATc1信号通路对钛颗粒诱导小鼠巨噬细胞向破骨细胞分化的影响。方法体外培养小鼠巨噬细胞RAW264．7，根据处理条件不同分为5组：A组（空白对照组）、B组（钛颗粒对照组）、C组（1．25μmol／L Fisetin＋钛颗粒）、D组（2．5μmol／L Fisetin＋钛颗粒）、E组（5μmol／L Fisetin＋钛颗粒）。采用CCK－8法检测各组RAW264．7细胞增殖活性。培养6天后，抗酒石酸酸性磷酸酶（ TRAP）染色检测各组细胞破骨细胞（细胞核≥3）数目，免疫印迹法检测各组细胞中c－Fos／NFATcl蛋白表达，RT－PCR法检测c－Fos／NFATc1的基因表达。结果 CCK－8法检测结果显示各组RAW264．7细胞增殖能力差异无统计学意义（P＞0．05）。 TRAP染色结果显示各组细胞均有TRAP阳性多核细胞生成，B组TRAP阳性多核细胞数目最高，C、D、E组呈现逐渐减少趋势，A组最少。 RT－PCR和Western blot检测表明，B组c－Fos／NFATc1表达最高，C、D、E组表达逐渐减少，与B组比较差异具有统计学意义（ P＜0．05）。结论 Fisetin可通过c－Fos／NFATc1信号通路抑制钛颗粒作用下小鼠巨噬细胞向破骨细胞的分化，其抑制程度与Fisetin药物浓度有关。