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Role of glutathione transferase in phase separation of FUS and TAF15 in neurons
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作者 Kiyoung Kim 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS 2025年第7期1999-2000,共2页
Amyotrophic lateral sclerosis(ALS)is a progressive neurodegenerative disorder characterized by the degeneration of motor neurons in the brain and spinal cord,leading to muscle weakness,paralysis,and ultimately death(C... Amyotrophic lateral sclerosis(ALS)is a progressive neurodegenerative disorder characterized by the degeneration of motor neurons in the brain and spinal cord,leading to muscle weakness,paralysis,and ultimately death(Cleveland and Rothstein,2001).Frontotemporal lobar degeneration(FTLD)is a neurodegenerative disease affecting the frontal and temporal lobes of the brain,leading to changes in behavior,personality,and language(Van Langenhove et al.,2012).Both ALS and FTLD are classified as proteinopathies in which abnormal protein aggregation and accumulation in neurons contribute to the disease pathogenesis.Fused in sarcoma(FUS)is a DNA/RNA-binding protein involved in various cellular processes,including transcriptional regulation,RNA splicing,and DNA repair.Mutations in the FUS gene have been linked to familial ALS,highlighting the importance of FUS in the disease pathogenesis(Vance et al.,2009).In ALS and FTLD,aberrant post-translational modifications(PTMs)of FUS,such as phosphorylation,acetylation,and methylation,have been implicated in the promotion of FUS aggregation and neurotoxicity(Choi et al.,2023).Therefore,understanding the regulatory mechanisms of FUS PTMs is crucial for developing targeted therapies against these diseases. 展开更多
关键词 DEGENERATION fuS AGGREGATION
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薏苡仁油联合5-FU对结肠癌HCT-116细胞株增殖、凋亡的影响 被引量:1
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作者 王韬 费建东 +1 位作者 聂双发 李磊 《西部中医药》 2024年第1期9-12,共4页
目的:分析薏苡仁油联合5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对结肠癌HCT-116细胞株增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazdium,MTT)法测定不同浓度薏苡仁油、5-FU以及薏苡仁油+5-FU对人结肠癌HCT... 目的:分析薏苡仁油联合5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对结肠癌HCT-116细胞株增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazdium,MTT)法测定不同浓度薏苡仁油、5-FU以及薏苡仁油+5-FU对人结肠癌HCT-116细胞株的生长抑制效应;采用流式细胞术检测细胞凋亡情况;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测生存蛋白(Survivin)mRNA表达水平。结果:薏苡仁油、5-FU、5-FU+薏苡仁油均对人结肠癌HCT-116细胞增殖产生一定抑制作用,且薏苡仁油浓度越高,作用时间越长,细胞增殖抑制率越高,3组比较差异有统计学意义(P<0.05);与薏苡仁油组及5-FU组相比,5-FU+薏苡仁油组细胞增殖抑制率更高,差异有统计学意义(P<0.05)。薏苡仁油组、5-FU组、5-FU+薏苡仁油组的细胞凋亡率均高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);薏苡仁油浓度越高,细胞凋亡率也越高,差异有统计学意义(P<0.05);5-FU+薏苡仁油组细胞凋亡率高于5-FU组及薏苡仁油组,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组相比,不同浓度薏苡仁油组Survivin mRNA表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);5-FU组Survivin mRNA表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);5-FU+薏苡仁油组Survivin mRNA表达较5-FU组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:薏苡仁油能抑制结肠癌HCT-116细胞增殖,诱导细胞凋亡,与5-FU联合应用能发挥药物协同作用,其作用机制可能与调控Survivin mRNA表达有关。 展开更多
关键词 结肠癌 增殖 凋亡 薏苡仁油 5-氟尿嘧啶
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SLC6A9对结直肠癌细胞生长和对5-FU药物敏感性的影响 被引量:1
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作者 张岩 田素礼 +1 位作者 周勇旭 刘昶 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第7期1236-1241,共6页
目的:研究溶质载体家族6成员9(solute carrier family 6 member 9,SLC6A9)表达对结直肠癌细胞增殖、迁移和5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)药物敏感性的影响。方法:TCGA数据库分析、实时荧光定量PCR和Western blot分析检测SLC6A9在结... 目的:研究溶质载体家族6成员9(solute carrier family 6 member 9,SLC6A9)表达对结直肠癌细胞增殖、迁移和5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)药物敏感性的影响。方法:TCGA数据库分析、实时荧光定量PCR和Western blot分析检测SLC6A9在结肠癌组织、正常结肠细胞系(NCM460)和结直肠癌细胞系(SW620、HCT116、HT29、Lovo和SW480)中的表达。将SCL6A9过表达质粒及阴性对照(SLC6A9 OE、Vector)转染HT29细胞,将SCL6A9小干扰RNA及阴性对照(SLC6A9 siRNA1#、siRNA2#和Scramble)转染SW620细胞。划痕愈合实验和Transwell实验检测各组细胞的迁移、侵袭能力。Western blot和细胞免疫荧光检测EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin的表达水平。利用CCK-8法和构建裸鼠移植瘤模型检测SLC6A9过表达对结直肠癌细胞5-FU药物敏感性的影响。结果:与正常结肠组织和NCM460细胞相比,SLC6A9在结肠癌组织和结直肠癌细胞系中低表达(均P<0.05)。SLC6A9过表达引起E-cadherin蛋白表达增加,Vimentin蛋白水平降低,抑制结直肠癌细胞的迁移、侵袭(P<0.05)。SLC6A9低表达引起E-cadherin蛋白表达降低,Vimentin蛋白水平增加,促进结直肠癌细胞的迁移、侵袭能力(P<0.05)。SLC6A9过表达提高了5-FU的药物敏感性,并使肿瘤生长缓慢,质量减轻(P<0.05)。而SLC6A9低表达降低了5-FU的药物敏感性(P<0.05)。结论:SLC6A9过表达能够抑制结直肠癌细胞的迁移、侵袭和EMT进程,并增强5-FU对结直肠癌细胞的药物敏感性。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 SLC6A9 细胞迁移和侵袭分析 EMT 5-fu 异种移植模型实验
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ONECUT2高表达介导胃癌复发患者5-FU化疗耐药
4
作者 朱海峰 陈述 +1 位作者 龙卫国 王旭 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2024年第1期19-24,共6页
目的:探究One cut结构域家族成员2(ONECUT2)是否可以作为对5-FU耐药的胃癌复发患者的治疗靶点。方法:利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析ONECUT2基因在胃癌患者及胃癌复发患者的表达情况。利用基因集富集分析(GSEA)评估TCGA数据库中ONE... 目的:探究One cut结构域家族成员2(ONECUT2)是否可以作为对5-FU耐药的胃癌复发患者的治疗靶点。方法:利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析ONECUT2基因在胃癌患者及胃癌复发患者的表达情况。利用基因集富集分析(GSEA)评估TCGA数据库中ONECUT2表达量与药物代谢相关生物学过程的相关性。利用CCK-8细胞毒性实验评估胃癌细胞敲低或过表达ONECUT2对5-FU的耐药情况。分析30例胃癌术后复发患者ONECUT2表达量与5-FU治疗效果的相关性。结果:TCGA数据库分析显示,在经受过化疗且复发的胃癌患者中,ONECUT2高表达的患者无病间隔期(disease-free interval,DFI)更短。GSEA分析结果表明,ONECUT2高表达与异生药物代谢通路呈正相关,这提示可能与胃癌患者的耐药相关。体外实验中,敲低ONECUT2降低胃癌细胞对5-FU的半数抑制浓度(IC_(50))值;反之,过表达ONECUT2增加细胞对5-FU的IC_(50)值。30例胃癌复发患者对5-FU的药物敏感性与ONECUT2表达量相关。结论:胃癌复发患者的ONECUT2表达量更高,ONECUT2高表达与胃癌复发患者的5-FU耐药相关,可能是潜在的治疗靶点。 展开更多
关键词 One cut结构域家族成员2 胃癌复发 5-fu耐药 GSEA 细胞毒性 半数抑制浓度
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山萘酚逆转肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu的作用机制研究
5
作者 梁大敏 杨正久 +2 位作者 张子萍 钱静 毛朝坤 《天津医药》 CAS 2024年第9期900-906,共7页
目的探讨山萘酚(KAE)对肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu功能的影响。方法采用KAE处理Bel-7402/5-Fu细胞,将细胞分为对照组和药物组(0.064、0.320、1.600、8、40、200μmol/L KAE);根据干扰DNA依赖性激酶催化亚基(DNA-PKcs)、加入蛋白酶体抑制... 目的探讨山萘酚(KAE)对肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu功能的影响。方法采用KAE处理Bel-7402/5-Fu细胞,将细胞分为对照组和药物组(0.064、0.320、1.600、8、40、200μmol/L KAE);根据干扰DNA依赖性激酶催化亚基(DNA-PKcs)、加入蛋白酶体抑制剂MG132或加入自噬抑制剂CQ,将细胞分为si-NC组和DNA-PKcs干扰(siRNA-1664、siRNA-2142、siRNA-3785)组,对照组、KAE组和KAE+si-DNA-PKcs组,对照组、KAE+DMSO组、KAE+MG132组和KAE+CQ组。采用CCK-8检测细胞增殖,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot检测组蛋白H_(2)AX磷酸化(γ-H_(2)AX)、DNA-PKcs、DNA双链断裂修复/V(D)J重组蛋白(Artemis)和药泵基因(P-gp)mRNA和蛋白的表达,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,蛋白稳定性实验检测DNA-PKcs蛋白稳定性,免疫共沉淀检测DNA-PKcs蛋白泛素化。结果与对照组相比,8μmol/L KAE处理细胞24 h可抑制约50%的细胞增殖能力,选择此时间和浓度进行后续研究。与对照组相比,KAE组γ-H_(2)AX mRNA和蛋白表达水平升高,DNA-PKcs、Artemis和P-gp mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05);与对照组相比,KAE促进Bel-7402/5-Fu细胞周期阻滞于G2/M期,增加细胞凋亡;与si-NC组相比,siRNA-1664能显著下调DNA-PKcs mRNA和蛋白表达水平(P<0.05);与KAE组相比,KAE+si-DNAPKcs组进一步促进了KAE对细胞的效应;与对照组相比,KAE+DMSO组DNA-PKcs蛋白表达水平降低(P<0.05);与KAE+DMSO组相比,KAE+MG132组DNA-PKcs蛋白表达水平升高(P<0.05),而KAE+CQ组DNA-PKcs蛋白表达水平无明显变化(P>0.05);与对照组相比,KAE+DMSO组促进DNA-PKcs蛋白的泛素化,而KAE+MG132组则可抑制其泛素化(P<0.05)。结论KAE能够诱导肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu的细胞凋亡和细胞周期阻滞。 展开更多
关键词 肝细胞 山萘酚 细胞凋亡 细胞周期 Bel-7402/5-fu DNA-PKCS
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How to Make a Story Beautiful: On Aesthetic Dialectics of Liao zhai zhi yi
6
作者 LI Hong-xiang 《Journal of Literature and Art Studies》 2016年第6期695-707,共13页
How to write a beautiful story? It is an important question to Chinese writers because novel has not been regarded as a formal genre until late Qing Dynasty. Pu Songling answers this question with his work Liao zhai ... How to write a beautiful story? It is an important question to Chinese writers because novel has not been regarded as a formal genre until late Qing Dynasty. Pu Songling answers this question with his work Liao zhai zhi yi (Strange tales from a Chinese studio). This paper aims to study his narrative arts. There are four sections included. In part 1, this paper introduces a definition of the aesthetic dialectics and its embodiment in Chinese classical literary theory; in part 2, this paper takes the Liao zhai story as example to interpret Pu Songling's dialectic relation between description and narration; in part 3, I will show how Liao zhai presents beauty by unexpected but reasonable changes; and in last part, I give more importance to the stories concerning ordinary things for the reason that Pu Songling could make them interesting and beautiful. In the end, the paper concludes that Pu Songling is successful storyteller by using dialectic arts, which should be learned by Chinese writers. 展开更多
关键词 Liao zhai BEAUTY change aesthetic dialectics NARRATION
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盐浓度对FUS蛋白相分离的调控研究
7
作者 陈家媛 王艳伟 《生物过程》 2024年第2期89-97,共9页
肉瘤融合蛋白(Fused in sarcoma, FUS)是来自异质核糖核蛋白家族的RNA结合蛋白。FUS在细胞内参与了DNA损伤修复,RNA剪接、转录、翻译等多种生理过程,这些过程与其生理条件下通过液液相分离(liquid-liquid phase separation, LLPS)形成... 肉瘤融合蛋白(Fused in sarcoma, FUS)是来自异质核糖核蛋白家族的RNA结合蛋白。FUS在细胞内参与了DNA损伤修复,RNA剪接、转录、翻译等多种生理过程,这些过程与其生理条件下通过液液相分离(liquid-liquid phase separation, LLPS)形成的类液滴状无膜细胞结构密切相关。在这个过程中FUS通过LLPS形成的生理性液滴状结构可能会老化成为病理性的聚集体,如水凝胶、包涵体和淀粉样纤维等。并且这些病理性聚集体被发现与肌萎缩性侧索硬化症(Amyotrophic lateral sclerosis, ALS)、额颞叶变性(Frontotemporal lobe degeneration, FTLD)等多种神经退行性疾病相关。本文进一步研究了影响FUS发生LLPS和病理性沉淀的相关因素,我们发现FUS蛋白LLPS和形成病理性聚集体是蛋白质浓度依赖的。在低蛋白浓度下FUS不会发生相分离,随着蛋白浓度的升高FUS蛋白开始发生LLPS现象,但是当蛋白浓度继续升高时则会形成淀粉样纤维聚集体。值得注意的是,这个过程受到盐浓度的显著影响,无盐和低盐浓度下发生LLPS的FUS蛋白,却在中、高盐浓度时迅速形成病理性的不规则聚集体。在FUS蛋白的LLPS过程中随着时间的变化液滴会不断变大,液滴在不同溶液中的生长效率为:无盐 > KCl > NaCl。 展开更多
关键词 fuS 液液相分离 病理性聚集体
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Dialectical Thermodynamics’Solution to the Conceptual Imbroglio That Is the Reversible Path
8
作者 José C. Íñiguez 《Journal of High Energy Physics, Gravitation and Cosmology》 CAS 2024年第2期775-799,共25页
According to the second law of thermodynamics, as currently understood, any given transit of a system along the reversible path proceeds with a total entropy change equal to zero. The fact that this condition is also ... According to the second law of thermodynamics, as currently understood, any given transit of a system along the reversible path proceeds with a total entropy change equal to zero. The fact that this condition is also the identifier of thermodynamic equilibrium, makes each and every point along the reversible path a state of equilibrium, and the reversible path, as expressed by a noted thermodynamic author, “a dense succession of equilibrium states”. The difficulties with these notions are plural. The fact, for example, that systems need to be forced out of equilibrium via the expenditure of work, would make any spontaneous reversible process a consumer of work, this in opposition to common thermodynamic wisdom that makes spontaneous reversible processes the most efficient transformers of work-producing-potential into actual work. The solution to this and other related impasses is provided by Dialectical Thermodynamics via its previously proved notion assigning a negative entropy change to the energy upgrading process represented by the transformation of heat into work. The said solution is here exemplified with the ideal-gas phase isomerization of butane into isobutane. 展开更多
关键词 Thermodynamic Reversibility Solution to Inconsistencies dialectical Thermodynamics
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一步/分步载药法对LDH/5-FU的粒径及形貌影响
9
作者 李雪 王怡轩 张瑞平 《广州化工》 CAS 2024年第5期61-63,共3页
层状双氢氧化物(LDH)是一种带正电性的无机层状载体,其用于负载电负性的药物可实现药物的缓控释。使用了一步载药法及分步载药法将带负电的药物5-氟尿嘧啶(5-FU)负载于LDH层间,合成了药物递送系统LDH/5-FU。通过不同的载药方法得到了LDH... 层状双氢氧化物(LDH)是一种带正电性的无机层状载体,其用于负载电负性的药物可实现药物的缓控释。使用了一步载药法及分步载药法将带负电的药物5-氟尿嘧啶(5-FU)负载于LDH层间,合成了药物递送系统LDH/5-FU。通过不同的载药方法得到了LDH/5-FU,拍摄了其透射电镜图,并观察了其粒径分布。结果表明,一步载药法合成的LDH/5-FU粒径在2 000 nm左右,PDI较大,分布不均匀,易团聚;分步载药法合成的LDH/5-FU粒径在200 nm左右,PDI相对较小,分布更为均匀。 展开更多
关键词 层状双氢氧化物 5-氟尿嘧啶 药物负载 LDH/5-fu
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SETD5介导AKT1磷酸化调控结肠癌细胞的迁移和5-FU敏感性
10
作者 黄开禹 史建国 程勇 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期586-591,共6页
目的:探讨含SET结构域蛋白5(SETD5)对结肠癌细胞增殖、迁移和对5-氟尿嘧啶(5-FU)药物敏感性的影响及机制。方法:常规培养结肠癌细胞,用Lipofectamine 2000将siSETD5-NC、si-SETD5-1~3质粒转染至HT-29细胞中,将其分为对照组(未处理)、si-... 目的:探讨含SET结构域蛋白5(SETD5)对结肠癌细胞增殖、迁移和对5-氟尿嘧啶(5-FU)药物敏感性的影响及机制。方法:常规培养结肠癌细胞,用Lipofectamine 2000将siSETD5-NC、si-SETD5-1~3质粒转染至HT-29细胞中,将其分为对照组(未处理)、si-SETD5-NC组、si-SETD5组和si-SETD5+SC79组,si-SETD5+SC79组HT-29细胞转染质粒的同时用10µmol/L SC79处理。qPCR法检测NCM460、HT-29和LoVo细胞中SETD5 mRNA表达,流式细胞术、细胞划痕法、WB法和CCK-8法分别检测各组HT-29细胞的凋亡情况、迁移能力、相关蛋白的表达,以及对5-FU的敏感性。结果:SETD5 mRNA在HT-29、LoVo细胞中均呈高表达(均P<0.01)。在HT-29细胞中成功地敲减了SETD5 mRNA(P<0.01)。敲减SETD5 mRNA可明显抑制HT-29细胞的增殖活性(P<0.01)、迁移能力(P<0.01)、相关蛋白(SETD5、p-PI3K、p-AKT1、p-mTOR蛋白)的表达(均P<0.01)、促进细胞凋亡(P<0.01),且提高其对5-FU的敏感性(P<0.01),这些作用均可被AKT激活剂SC79部分阻挡(P<0.05或P<0.01)。结论:SETD5在HT-29、LoVo细胞中高表达,SETD5通过PI3K/AKT1通路促进结肠癌HT-29细胞的增殖、迁移,且降低其对5-FU的敏感性,SETD5是结肠癌临床诊断、治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 结肠癌 含有SET结构域蛋白5 蛋白激酶B磷酸化 增殖 迁移 5-氟尿嘧啶 耐药
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儿茶素通过促进胃癌细胞铁死亡增强化疗药物5-FU的杀伤作用
11
作者 徐涛 井文君 刘静 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第16期2981-2989,共9页
目的:探讨儿茶素对胃癌化疗效果的影响及机制。方法:使用5-FU(100μg/mL)处理胃癌细胞AGS和GC7901,分别处理0 h、3 h、6 h、9 h、12 h、16 h、24 h,通过PI染色及流式细胞术检测胃癌细胞AGS及GC7901的死亡情况;Western Blot实验检测正常... 目的:探讨儿茶素对胃癌化疗效果的影响及机制。方法:使用5-FU(100μg/mL)处理胃癌细胞AGS和GC7901,分别处理0 h、3 h、6 h、9 h、12 h、16 h、24 h,通过PI染色及流式细胞术检测胃癌细胞AGS及GC7901的死亡情况;Western Blot实验检测正常胃黏膜上皮细胞RGM-1、胃癌细胞AGS和GC7901铁死亡相关特征蛋白谷胱甘肽过氧化酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)及重肽铁蛋白(ferritin heavy polypeptide,FTH)的表达,Image J软件测量灰度值;将胃癌细胞分别设置为对照组、5-FU处理组、5-FU联合Catechin处理组和5-FU联合DMSO处理组,分别通过PI染色及流式细胞术检测细胞死亡,通过C11-BODIPY581/591染色及流式细胞术检测脂质过氧化物积累,通过Western Blot实验检测铁死亡相关特征蛋白的表达,通过吸光光度法检测细胞裂解物中游离Fe^(2+)的含量;分离线粒体和细胞质组分,检测各个分组中线粒体内游离Fe^(2+)含量和细胞质内游离Fe^(2+)含量,并通过Mito-Ferro Green染色进一步验证增量Fe^(2+)的细胞内定位;Western Blot方法检测血红素加氧酶1蛋白(heme oxygenase 1,Hmox1)在各分组中的表达并通过Image J软件测量灰度值;将胃癌细胞分别设置为对照组、5-FU处理组、5-FU组联合Catechin处理组、5-FU联合Catechin和siRNA-NC处理组、5-FU联合Catechin和siRNA-Hmox1处理组,检测线粒体游离Fe^(2+)含量、脂质过氧化物积累及细胞死亡。结果:胃癌细胞在5-FU处理0~12 h内,随处理时间增长死亡率逐渐升高,然而在处理12~24 h内死亡率变化不明显表现出耐药性;胃癌细胞中铁死亡相关特征蛋白GPX4、SLC7A11和FTH的表达量显著高于正常胃黏膜上皮细胞(P<0.05);与对照组相比,处理24 h后,5-FU联合Catechin处理组细胞死亡数量、脂质过氧化物积累都显著升高(P<0.05),同时铁死亡相关特征蛋白GPX4、SLC7A11、FTH的表达量显著降低(P<0.05);5-FU联合Catechin处理组细胞质游离Fe^(2+)含量变化不明显而线粒体中游离Fe^(2+)含量显著升高(P<0.05),Hmox1蛋白表达量显著升高(P<0.05);与5-FU联合Catechin和siRNA-NC处理组相比,5-FU联合Catechin和siRNA-Hmox1处理组线粒体游离Fe^(2+)含量、脂质过氧化物积累和细胞死亡数量显著降低(P<0.05)。结论:儿茶素通过增强Hmox1的表达诱导线粒体铁离子浓度升高导致胃癌细胞脂质过氧化物积累促进5-FU诱导的胃癌细胞铁死亡。 展开更多
关键词 儿茶素 5-氟尿嘧啶 细胞铁死亡 二价铁离子 血红素加氧酶1
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LncRNA SOX2OT靶向SIRT1/自噬通路增强胆管癌细胞5-FU耐药
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作者 辛辰 王笑影 +5 位作者 李响 陈宇 王雪 宁佳曦 杨适 王忠琼 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期187-193,共7页
目的探讨LncRNASOX2OT靶向SIRT1/自噬通路调节胆管癌细胞5-FU耐药的机制。方法将未用5-FU处理HCCC-9810细胞和不同浓度(50、100、150、200μg/mL)5-FU处理的HCCC-9810细胞分为对照组和模型组,qRT-PCR检测LncRNA SOX2OT、SIRT1 mRNA表达... 目的探讨LncRNASOX2OT靶向SIRT1/自噬通路调节胆管癌细胞5-FU耐药的机制。方法将未用5-FU处理HCCC-9810细胞和不同浓度(50、100、150、200μg/mL)5-FU处理的HCCC-9810细胞分为对照组和模型组,qRT-PCR检测LncRNA SOX2OT、SIRT1 mRNA表达水平,Western blot检测SIRT1、Beclin1、LC3和p62蛋白表达。pcDNA3.1-SOX2OT和pcDNA3.1-NC转染HCCC-9810/5-FU耐药细胞,CCK-8检测细胞耐药性,划痕实验检测细胞迁移能力,qRT-PCR检测LncRNASOX2OT、SIRT1 mRNA表达水平,Western blot检测SIRT1、Beclin1、LC3和p62表达。在以上基础上做了Rescue实验,将OV-SOX2OT(2μg/孔)和si-NC(75pmol/孔)、OV-SOX2OT(2μg/孔)和si-SIRT1(75pmol/孔)分别共转染HCCC-9810/5-FU耐药细胞,分组为OV-SOX2OT+si-NC组和OV-SOX2OT+si-SIRT1组,以证明LncRNASOX2OT通过SIRT1影响自噬,并由此影响胆管癌细胞对5-FU的耐药性。RNAPulldown验证SOX2OT与SIRT1的靶向结合关系。结果不同浓度的5-FU均能抑制HCCC-9810细胞增殖(P<0.05)。与对照组相比,模型组SIRT1、Beclin1(P<0.001)和p62(P<0.01)蛋白表达、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值(P<0.001)、SIRT1和LncRNA SOX2OT mRNA水平(P<0.05)均明显增加。与OV-NC组相比,OV-SOX2OT组细胞迁移能力、SIRT1、Beclin1(P<0.001)和p62(P<0.05)蛋白表达、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值(P<0.001)、SIRT1和LncRNASOX2OTmRNA(P<0.05)水平均明显增加。沉默SIRT1表达导致LncRNASOX2OT过表达的HCCC-9810细胞对5-FU的耐药性显著降低。与OV-SOX2OT+si-NC组相比,OV-SOX2OT+si-SIRT1组SIRT1(P<0.001)、p62和Beclin1(P<0.01)蛋白表达、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值(P<0.01)、SIRT1 mRNA(P<0.05)水平均明显降低。RNA Pulldown检测结果显示SOX2OT能够直接与SIRT1结合。结论LncRNA SOX2OT通过上调SIRT1表达促进自噬来增强胆管癌HCCC-9810细胞5-FU耐药性。 展开更多
关键词 LncRNASOX2OT SIRT1 自噬 胆管癌细胞 5-fu耐药
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敲减MET表达对喉癌Hep-2细胞增殖、迁移及5-FU和顺铂敏感性的影响
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作者 张翠红 肖淑芬 +3 位作者 张建军 贺占国 范才 马博敬 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期857-863,共7页
目的:探究敲减间质表皮转化因子(MET)表达对人喉鳞状细胞癌(LSCC)Hep-2细胞生长、迁移及5-氟尿嘧啶(5-FU)和顺铂敏感性的影响。方法:通过基因表达综合数据库(GEO)及癌症基因组图谱(TCGA)数据库数据分析人LSCC组织中MET mRNA的表达水平;... 目的:探究敲减间质表皮转化因子(MET)表达对人喉鳞状细胞癌(LSCC)Hep-2细胞生长、迁移及5-氟尿嘧啶(5-FU)和顺铂敏感性的影响。方法:通过基因表达综合数据库(GEO)及癌症基因组图谱(TCGA)数据库数据分析人LSCC组织中MET mRNA的表达水平;常规培养正常人支气管上皮细胞16HBE与人LSCC细胞Hep-2、KBV200和TU212,采用qPCR法和WB法检测16HBE、Hep-2、KBV200和TU212细胞中MET基因和蛋白的表达水平。用LipofectamineTM3000将MET敲减质粒(si-Met)和对照质粒(si-NC)转染至Hep-2细胞中,分为空白对照组,si-NC组和si-Met组。采用MTT法、流式细胞术、划痕愈合实验分别检测各组Hep-2细胞的增殖、迁移能力、周期分布以及对5-FU和顺铂的敏感性。结果:数据库数据分析显示LSCC组织中MET mRNA呈高表达(P<0.05),Hep-2、KBV200和TU212细胞中MET mRNA和蛋白的表达水平也均明显高于16HBE细胞(均P<0.01)。敲减MET表达后,Hep-2细胞中METmRNA及蛋白表达水平均明显降低(P<0.01或P<0.001)、细胞增殖活力显著下降(P<0.0001)、G0/G1期细胞数量明显升高(P<0.0001)、S期细胞数量明显降低(P<0.0001)。敲减MET表达后,不同浓度5-FU或顺铂对细胞增殖的抑制率均显著升高、药物半数抑制浓度(IC50)均降低(均P<0.0001),划痕愈合率明显降低、迁移能力下降(均P<0.05)。结论:MET在人LSCC组织和细胞中呈高表达,敲减MET可有效抑制Hep-2细胞中MET的表达,抑制细胞增殖、迁移能力,使其周期阻滞于G1期,增强Hep-2细胞对5-FU和顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 喉鳞状细胞癌 间质表皮转化因子 增殖 迁移 5氟尿嘧啶 顺铂 药物敏感性
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大剂量醛氢叶酸+5FU持续滴注48小时(双周疗法)治疗晚期大肠癌的临床研究 被引量:115
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作者 张力 林忠 +5 位作者 夏忠军 陈丽昆 陈茹琴 姜文奇 何友兼 管忠震 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第4期296-299,共4页
目的 :评价大剂量醛氢叶酸 +5FU持续滴注 48小时 (双周疗法 )治疗晚期大肠癌的客观疗效及毒副反应。方法 :本临床研究采用大剂量醛氢叶酸 +5FU持续滴注 48小时 ,每两周重复一次 (双周疗法 )的方案治疗5 2例晚期大肠癌病人 ,所有病人均接... 目的 :评价大剂量醛氢叶酸 +5FU持续滴注 48小时 (双周疗法 )治疗晚期大肠癌的客观疗效及毒副反应。方法 :本临床研究采用大剂量醛氢叶酸 +5FU持续滴注 48小时 ,每两周重复一次 (双周疗法 )的方案治疗5 2例晚期大肠癌病人 ,所有病人均接受 4疗程化疗。结果 :CR 2例 ,PR 15例 ,NC 18例 ,PD 17例 ,有效率为32 6 9%。病人的主要毒副反应为外周静脉炎、粘膜炎、腹泻、恶心和呕吐、骨髓抑制、脱发等。除外周静脉炎较严重外 ,其余毒性均为Ⅰ~Ⅱ度 ,病人耐受良好。结论 :大剂量醛氢叶酸 +5FU持续滴注 48小时 (双周疗法 )治疗晚期大肠癌疗效较好 ,方案是安全的 ,病人耐受性良好 ,值得在临床上推广使用。 展开更多
关键词 晚期大肠癌 大剂量 溶氢叶酸 5fu 药物疗法
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伴FUS/ERG融合基因急性白血病3例并文献复习 被引量:2
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作者 熊术道 胡林辉 +4 位作者 蒲莲芳 王会平 张翠 杨冬冬 翟志敏 《临床荟萃》 CAS 2015年第10期1126-1129,共4页
目的通过分析伴FUS/ERG融合基因急性白血病(AL)临床及实验室检查特点,提高人们对伴FUS/ERG融合基因阳性AL的认识及诊治水平。方法回顾性分析我院3例伴FUS/ERG融合基因阳性AL患者临床资料,分析和讨论其发病机制、临床表现、诊断、治疗及... 目的通过分析伴FUS/ERG融合基因急性白血病(AL)临床及实验室检查特点,提高人们对伴FUS/ERG融合基因阳性AL的认识及诊治水平。方法回顾性分析我院3例伴FUS/ERG融合基因阳性AL患者临床资料,分析和讨论其发病机制、临床表现、诊断、治疗及预后。结果 3例伴FUS/ERG融合基因阳性AL患者中,1例为急性B淋巴细胞白血病(B-ALL),另2例为急性髓系白血病(AML);3例患者发病年龄轻(平均年龄13岁),外周血白细胞高;B-ALL患者完全缓解,停药3年后出现右侧睾丸T淋巴母细胞瘤;1例AML患儿确诊18天后死亡;另1例AML患者经化疗获得完全缓解,但出现新的白血病细胞克隆(CD34+CD117-CD33+CD64+CD4+CD45+++)。结论伴FUS/ERG融合基因阳性AL的发病年龄相对年轻,见于除AML-M3以外的各型AL;白血病细胞负荷大,病情危重,疗效差,易复发,预后不良;FUS/ERG融合基因检测应作为初诊AL分子诊断的常规检测项目。 展开更多
关键词 白血病 基因 fuS/ERG融合基因
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5FU8小时静滴联合CF、卡铂治疗晚期鼻咽癌的临床研究 被引量:5
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作者 李宇红 何友兼 +1 位作者 黄慧强 刘冬耕 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第3期295-296,317,共3页
目的:根据5FU、CF药代动力学特点,设计5FU连续8小时静滴,CF100mg,在5FU静滴第0、4、8小时3次静推的CF/5FU给药方案,联合卡铂对晚期鼻咽癌患者进行临床研究,重点摸索该联合化疗方案的剂量限制性毒性... 目的:根据5FU、CF药代动力学特点,设计5FU连续8小时静滴,CF100mg,在5FU静滴第0、4、8小时3次静推的CF/5FU给药方案,联合卡铂对晚期鼻咽癌患者进行临床研究,重点摸索该联合化疗方案的剂量限制性毒性及5FU的最大耐受剂量(MTD)。方法:将符合入选条件的病例分组,每组35例。5FU剂量从500mg/(m2·d)开始,以125mg/(m2·d)逐渐递增,直至最大耐受剂量,CF300mg、卡铂300~350mg/m2剂量固定不变。结果:共21例晚期鼻咽癌患者进入该临床试验,5FU的最大耐受剂量为1000mg/(m2·d),口腔粘膜炎是该联合化疗方案的主要剂量限制性毒性。初步观察该方案有较率为762%。结论:5FU连续8小时静滴与CF、卡铂联合化疗可提高5FU剂量强度,推荐Ⅱ期临床试用时5FU剂量为750~875mg/(m2·d),共5天,3~4周重复一次。该方案对晚期鼻咽癌有较高缓解率,但确切疗效尚待进一步证实。 展开更多
关键词 氟尿嘧啶 鼻咽肿瘤 卡铂 5fu CF 药物疗法
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三氧化二砷对人AFP阳性胃癌细胞株FU97的作用及其机制 被引量:4
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作者 郏雁飞 汪运山 +4 位作者 周芳 胡安拉 马晓丽 肖东杰 苏占涛 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期169-172,共4页
目的研究三氧化二砷(As2O3)抑制AFP阳性胃癌(alpha-fetoprotein-producing gastric carcinoma,APGC)细胞株FU97增殖、诱导凋亡及其机制。方法MTT法检测药物效应;DNA凝胶电泳和流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡;化学发光法、实时荧光定量PCR... 目的研究三氧化二砷(As2O3)抑制AFP阳性胃癌(alpha-fetoprotein-producing gastric carcinoma,APGC)细胞株FU97增殖、诱导凋亡及其机制。方法MTT法检测药物效应;DNA凝胶电泳和流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡;化学发光法、实时荧光定量PCR及ELISA检测AFP、STAT3、VEGF表达变化。结果As2O3可明显抑制FU97细胞增殖,且呈时间和浓度依赖关系;DNA凝胶电泳显示出典型的凋亡特征性梯状条带;FCM检测在细胞周期G1期前出现亚二倍体凋亡峰;细胞周期分析显示G2/M期阻滞;化学发光法、免疫细胞化学法、实时荧光定量PCR以及ELISA结果证实As2O3可下调FU97细胞AFP、VEGF、STAT3基因的表达。结论As2O3可抑制FU97细胞的增殖、阻滞细胞周期进程诱导凋亡。同时通过下调AFP、VEGF、STAT3基因的表达阻止APGC的恶性进程。 展开更多
关键词 三氧化二砷 fu97 细胞凋亡 AFP阳性胃癌 AFP
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基因芯片分析筛选BEL-7402与BEL-7402/FU细胞中的差异miRNA表达基因 被引量:3
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作者 殷杰 杨晓燕 +4 位作者 虞佳 向琼 李倩 唐惠芳 雷小勇 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2012年第5期374-378,共5页
目的:探讨2种肝癌细胞BEL-7402细胞及BEL-7402/FU细胞中差异表达的miRNA并对其基因表达谱进行生物学信息分析。方法:采用TRIzol一步法提取BEL-7402细胞及BEL-7402/FU细胞的总RNA,并纯化mRNA,反转录合成荧光分子Hy3标记的cDNA探针,与基... 目的:探讨2种肝癌细胞BEL-7402细胞及BEL-7402/FU细胞中差异表达的miRNA并对其基因表达谱进行生物学信息分析。方法:采用TRIzol一步法提取BEL-7402细胞及BEL-7402/FU细胞的总RNA,并纯化mRNA,反转录合成荧光分子Hy3标记的cDNA探针,与基因芯片杂交;采用Genepix Pro 6.0图像分析软件对芯片图像进行分析,把图像信号转化为数字信号,然后以差异为2倍的标准来确定差异表达基因。结果:在333个基因表达谱的筛选中,发现有2个基因表达水平显著上调,331个基因表达水平显著下调。结论:miR-122,miR-195等基因组对表达肝癌细胞耐药基因表达谱有显著的影响,可能参与肝癌耐药的发生、发展。 展开更多
关键词 基因芯片 差异表达 BEL-7402细胞 BEL-7402 fu细胞 MIRNA
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昆明地区下寒武统节肢动物Guangweicaris Luo, Fu et Hu, 2007的再研究 被引量:3
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作者 杨杰 侯先光 董渭 《古生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期115-122,共8页
昆明地区下寒武统沧浪铺组乌龙箐段所产的节肢动物Guangweicaris Luo,Fu et Hu,2007,为研究寒武纪生命大爆发之后节肢动物辐射特征提供了重要资料。罗惠麟等(2007)在报道该节肢动物时,因标本不完整,对其头部和尾部特征均作了错误鉴别和... 昆明地区下寒武统沧浪铺组乌龙箐段所产的节肢动物Guangweicaris Luo,Fu et Hu,2007,为研究寒武纪生命大爆发之后节肢动物辐射特征提供了重要资料。罗惠麟等(2007)在报道该节肢动物时,因标本不完整,对其头部和尾部特征均作了错误鉴别和描述。笔者根据完整且保存有软体附肢的标本,对Guangweicaris Luo,Fu et Hu,2007作了重新研究和复原,据此讨论了该节肢动物的分类归属问题。 展开更多
关键词 Guangweicaris Luo fu ET HU 2007节肢动物 下寒武统沧浪铺组 昆明
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便携式输液泵输注5Fu的应用与观察 被引量:10
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作者 范纪云 周如贤 +1 位作者 赵九红 陈艳丽 《现代肿瘤医学》 CAS 2005年第1期144-144,共1页
关键词 输液泵 氟尿嘧啶(5fu) 持续输注 套管针
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