复方贞术调脂方对HepG2细胞胰岛素抵抗的作用及机制研究

目的观察复方贞术调脂方(FTZ)对胰岛素抵抗(IR)HepG2细胞的作用,为开拓FTZ的治疗范围,阐明FTZ调节糖脂代谢的机制提供实验依据。方法用高浓度胰岛素诱导HepG2细胞使其产生胰岛素抵抗,用高、中、低3个剂量的FTZ干预后,葡萄糖氧化酶法检测HepG2细胞培养液上清液中葡萄糖的含量,实时荧光定量PCR检测HepG2细胞胰岛素信号PI-3Kp85 mRNA的表达,Western blot检测HepG2细胞胰岛素信号转导蛋白IRS1表达。结果模型细胞培养基上清液中葡萄糖含量高于正常细胞(P<0.05)。给予FTZ(1、25、100μg/mL)后,HepG2细胞培养基上清液中葡萄糖含量均低于模型细胞葡萄糖含量(P<0.05)。胰岛素抵抗细胞与正常细胞相比PI-3Kp85 mRNA和IRS1的蛋白表达显著降低(P<0.05)。给予FTZ干预后,与胰岛素抵抗细胞相比PI-3Kp85 mRNA和IRS1的蛋白表达显著增加(P<0.05)。结论FTZ可改善胰岛素抵抗HepG2细胞对葡萄糖的摄取。其改善胰岛素抵抗的作用机制之一可能是通过上调胰岛素信号PI-3Kp85 mRNA和IRS1蛋白质在胰岛素抵抗HepG2细胞的表达。

复方贞术调脂方对游离脂肪酸诱导的胰岛素抵抗HepG2细胞的作用

目的探讨复方贞术调脂方(FTZ)对游离脂肪酸(FFA)诱导的胰岛素抵抗Hep G2细胞NF-κBIRS1-GLUT4通路的影响,阐明FTZ缓解胰岛素抵抗的作用机制。方法采用FFA诱导Hep G2细胞使其产生胰岛素抵抗,3个剂量的FTZ干预后,葡萄糖氧化酶法检测Hep G2细胞培养液上清液中葡萄糖的含量,酶联免疫法检测Hep G2细胞培养液上清液中TNF-α、IL-6的含量,Western blot检测Hep G2细胞中NF-κB、IRS1、GLUT4蛋白表达,采用PDTC阻断NF-κB蛋白,测定其下游靶点IRS1的蛋白表达。结果FTZ可降低细胞上清液中葡萄糖、TNF-α、IL-6的含量,下调NF-κB的蛋白表达,上调IRS1和GLUT4的蛋白表达。阻断NF-κB之后,再加入FTZ,IRS1的蛋白表达量较未阻断时显著降低。结论 FTZ可改善FFA诱导的胰岛素抵抗,其作用机制可能是通过抑制NF-κB介导的IRS1-GLUT4通路来改善胰岛素抵抗。NF-κB是FTZ作用的关键靶点。

复方贞术调脂方对高脂血症小鼠甘油三酯代谢的影响

目的观察复方贞术调脂方(FZT)对高脂血症小鼠体内甘油三酯(TG)代谢的影响。方法采用高脂纯化配方饲料喂养建立高脂血症小鼠模型,经FZT治疗5个月,测量体质量、进食量,血浆总胆固醇(TC)、TG、游离脂肪酸(FFA)以及肝脏和肌肉中TG的含量,进行脂负荷实验(OFTT),观察其对小鼠体内TG代谢的影响。结果与正常组比较,模型组体质量增长量、附睾周围脂肪,血浆中TC、TG、FFA,肝脏中TG含量均明显升高(P<0.01);与模型组比较,FZT组血浆及肝脏TG含量明显降低(P<0.01),体质量及附睾周围脂肪、皮下脂肪质量有不同程度的降低。FZT不影响小鼠的进食量,但有抑制体质量过快增长的趋势。结论 FZT能显著改善高脂血症小鼠的TG代谢,抑制肠道外源性脂质的吸收可能是FZT降低机体TG水平的机制之一,其具体作用机制有待进一步研究。

复方贞术调脂方改善内质网应激防治小鼠NAFLD研究

目的:观察复方贞术调脂方对长期高脂饮食致非酒精性脂肪肝(NAFLD)小鼠的防治作用及肝脏内质网应激(ERS)的调节作用。方法:采用高脂纯化配方饲料喂养建立NAFLD小鼠模型,同时防治性给予复方贞术调脂方20 w,通过观察血浆、肝脏的总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平、肝组织病理形态学以及脂质代谢和ERS相关基因的表达,考察复方贞术调脂方对NAFLD的防治作用及机制。结果:与正常对照组比较,模型组血浆及肝脏组织中TC、TG含量及肝组织PERK mRNA表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,复方贞术调脂方低剂量组血浆及肝组织中TC、TG含量均显著降低(P<0.05),肝组织XBP-1、PERK、SREBP-1c mRNA表达显著下调(P<0.05)。结论:复方贞术调脂方能显著缓解长期高脂饮食诱导的小鼠NAFLD形成,调节肝脏ERS可能是其作用途径之一。

复方贞术调脂方调节肝脏脂肪酸组成防治非酒精性脂肪肝

目的:基于肝脏脂肪酸代谢探讨复方贞术调脂方(Fufang Zhenzhu Tiaozhi Formula,FTZ)对高脂饮食所致的脂代谢紊乱的作用及其可能机制。方法:C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常对照组、模型组、二甲双胍阳性对照组、FTZ低、高剂量组;除对照组外,高脂饮食造模同时给药16周;检测小鼠空腹血糖(Fasted PlasmaGlucose,FPG)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、总胆固醇(Total Cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(Low DensityLipoprotein-Cholesterol,LDL-C)、游离脂肪酸(Nonesterified Fatty Acid,NEFA)等血液指标,给药16周后进行口服糖耐量实验(Oral Glucose Tolerance Test,OGTT),并计算曲线下面积(Area Under The Curve,AUC);ELISA法检测血浆中空腹胰岛素(Fasted Insulin,FINS)浓度;HE染色、油红O染色观察肝脏病理情况;采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)检测肝脏脂肪酸含量。结果:给药16周后,FTZ可以有效降低糖脂代谢紊乱小鼠血浆中FPG、TG、TC、LDL-C、NEFA和FINS浓度,并且可降低HOMA-IR值(Homeostasis Model Assessment-Insulin Resistent,HOMA-IR);OGTT结果显示FTZ可有效减少AUC值(P<0.05)。油红O染色结果显示FTZ可有效减少肝脏脂滴大小与数量。GC-MS结果显示FTZ可降低脂代谢紊乱小鼠肝脏总脂肪酸(Total Fatty Acids,TFA),其中主要的饱和脂肪酸(Saturated Fatty Acid,SFA)的含量下降,而大部分多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated Fatty Acid,PUFA)的PUFA/TFA值有不同程度的升高。结论:FTZ可改善高脂饮食导致的糖脂代谢紊乱小鼠肝脏脂代谢,其机制与降低其肝脏中的SFA和升高肝脏中的PUFA相关。

复方贞术调脂方非糖脂代谢依赖的促能量代谢作用

目的探究复方贞术调脂方(FTZ)在不同的情况下对能量代谢的作用。方法通过肛温测定、棕色脂肪组织线粒体耗氧量实验、实验动物综合监测系统等手段,对aP2-SREBP1c脂肪代谢障碍小鼠、C57正常小鼠、氯丙嗪诱导的低温小鼠3种模型小鼠的能量代谢情况进行研究,观察FTZ在能量代谢方面的作用。结果在aP2-SREBP1c脂肪代谢障碍小鼠实验中,模型组线粒体耗氧量显著下降,给予高、中、低剂量的FTZ治疗12周后,其线粒体耗氧量均出现升高,中、低剂量组与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);在C57正常小鼠实验中,FTZ组小鼠的肛温、耗氧量、热量值与对照组比较差异无统计学意义,但可以增加小鼠晚间的呼吸商(P<0.05),即增强小鼠晚间的代谢活性;而在氯丙嗪诱导的低体温模型小鼠中,FTZ可以阶段性缓解由氯丙嗪导致的低温小鼠的肛温。且能够增强低温小鼠的耗氧量(P<0.05)、呼吸商(P<0.05)。在正常小鼠和低温模型小鼠中,FTZ对小鼠的热量值无明显变化。结论 FTZ不仅能促进糖脂代谢紊乱下的能量代谢,还能促进非糖脂代谢异常情况下的低代能量代谢小鼠的能量代谢。说明FTZ能促进病理状态,而不是生理状态下机体的能量代谢。