白腐菌Funalia trogii以稻草进行固体发酵产漆酶的研究

研究了硬毛粗毛盖孔菌Funalia trogii以稻草为培养基质进行固体发酵产生高活性漆酶。在筛选合适的碳源、氮源和硫酸铜浓度的基础上,开展四因素正交实验,筛选出最优培养方案,即以稻草粉为基质,淀粉0.5%、尿素0.3%、硫酸铜1%(质量分数),湿度为70%的条件下培养7天后漆酶活性即可达到145.42 U/gds。在最优方案条件下连续培养,发现该菌在稻草粉培养基质上培养28天产生的漆酶活性能达到最高,为1 518.76 U/gds。而在增加培养规模的情况下,以最优方案培养28天的漆酶活性平均能达到1 753.49 U/gds。

硬毛粗盖孔菌多糖分级醇沉及抗氧化活性研究

通过对硬毛粗盖孔菌进行液体发酵培养获得菌丝,以冻干菌丝为原料,采用超声辅助热水法提取多糖。用不同终浓度的乙醇溶液(40%、60%和80%)进行沉淀,分别得到(FCP-40、FCP-60和FCP-80)3个组分。同时,运用不同方法对其化学组成、结构特征和抗氧化活性进行了探究。结果表明,3个组分的多糖均含有核酸和蛋白质,其中FCP-40的总糖含量最高,FCP-80的蛋白质含量最高。不同醇沉组分多糖均含有较长侧链和较多分支且都是三螺旋多糖。3种多糖均具有剂量依赖性的抗氧化活性,且羟基(·OH)清除能力相较DPPH自由基清除能力而言效果更显著。

硬毛盖孔菌胞外多糖组分分析及其在卷烟烟气中的转移率

为开发新型天然菌物香料,利用Sepharose CL-6B凝胶柱对发酵产硬毛盖孔菌胞外多糖(EPS)进行了分离纯化,采用红外光谱(IR)分析了2种多糖组分的结构,并测定了其在卷烟烟气中的转移率。结果表明:2种硬毛盖孔菌EPS组分①和②在810,880和910 cm-1处有吸收峰,说明多糖①和②含有甘露糖结构,且具有α和β糖苷键;当EPS添加量在0.02%～0.10%之间时,其在卷烟烟气中的转移率从1.58%增至3.39%。

硬毛粗盖孔菌预处理对玉米秸秆酶水解及组分变化的影响

以硬毛粗盖孔菌(Funalia trogii)为研究对象,比较其在不同预处理时间的产酶特征、预处理前后玉米秸秆酶解产糖量及其组分变化。结果表明,硬毛粗盖孔菌对木质素的降解以漆酶和锰过氧化物酶的协同作用为主导,漆酶和锰过氧化物酶活最高分别为341 IU/g和33 IU/g。经生物预处理14 d后的玉米秸秆酶解产糖量可达到350.74 mg/g秸秆,较原料提升184%。玉米秸秆组分的变化与其酶解增效密切相关,F.trogii预处理14 d后木质素和半纤维素含量分别降低了33.99%和36.61%,而纤维素仅降解8.77%,木质素和半纤维素的选择性降解,可显著降低玉米秸秆酶解抗性屏障,提升其酶解糖化效率。硬毛粗盖孔菌预处理玉米秸秆可实现木质纤维素的高效转化,缩短预处理时间,降低处理成本。

硬毛粗盖孔菌产漆酶条件优化及其对日落黄的降解作用

以硬毛粗盖孔菌(Funalia trogii)为研究对象,考察培养基组成及培养条件等对其发酵产漆酶的影响,并进一步研究漆酶对食用合成色素日落黄的降解脱色效果。结果表明,最适培养基组成及培养条件为:玉米淀粉25 g/L,蛋白胨2 g/L,Cu^(2+)1.5 mmol/L,香兰素1 mmol/L,培养温度30℃、初始p H6.0,摇床转速200 r/min,硬毛粗盖孔菌培养8 d后发酵液漆酶活力为(329±12) U/m L,是初始培养条件下的11.96倍。漆酶粗酶液对日落黄呈现出较高的降解脱色作用并可耐受高浓度底物(800 mg/L),50～200 mg/L日落黄脱色率均可达90%以上,漆酶介体ABTS可提升对日落黄脱色效率及速率,并降低高浓度底物对漆酶的抑制作用,曲酸的加入则抑制了漆酶活性,导致漆酶对日落黄的脱色率仅为7.14%。本研究为漆酶资源在食品行业的深入开发与应用提供理论依据。

硬毛粗盖孔菌生物学发育特征及其GC-MS分析

【目的】研究硬毛粗盖孔菌(Funalia trogii)子实体不同生长阶段的生物学特性及脂溶性化学成分的变化,为深入了解其生长过程中内部化学物质的变化规律及开发利用提供基础。【方法】采用徒手切片法对不同生长时期的组织结构进行显微镜观察并记录;通过GC-MS检测硬毛粗盖孔菌不同生长时期的脂溶性成分,并将检测结果进行对比。【结果】在子实体个体发育过程中,表层菌丝首先分化出盖面组织,经过3次从白色蜂窝状结构至浅黄褐色菌毛的转变过程,菌肉逐渐增厚,内部空腔数量增多、总空间增大。灰褐色或浅黄褐色的齿状菌管起源于盖面组织边缘的菌丝组织。待子实层发育成熟后,部分栅栏状细胞层变为普通丝状菌丝,互相靠近交织,在齿状菌管之间相连,最终形成与自然状态下形态、结构相近的子实体个体。GC-MS分析显示,硬毛粗盖孔菌不同生长时期共检测出10种脂溶性化学成分,其中菌球期检测出8种,盖面组织发育完成期全被检测出(10种),子实体形成期检测出8种,3个时期共检测出56个脂溶性化合物。【结论】硬毛粗盖孔菌个体经过盖面组织分化、菌管与子实层分化以及子实层中菌丝变化3个阶段,可以发育形成类自然状态的子实体;且不同生长阶段的脂溶性成分种类和含量都不同。

硬毛粗盖孔菌子实体提取物对小鼠免疫功能及抗氧化能力的影响

通过注射环磷酰胺(80 mg·kg^-1)建立小鼠免疫抑制模型,分别灌胃给药小鼠硬毛粗盖孔菌(Funalia trogii)子实体石油醚、乙酸乙酯提取物(高、中、低剂量分别为20、10、5 mg·kg^-1)以及水提取物(高、中、低剂量分别为150、75、37.5 mg·kg^-1),通过测定脏器指数,观察HE染色切片和免疫组化切片,测定血清中免疫细胞因子、丙二醛、超氧化物歧化酶、溶菌酶、溶血素含量及总抗氧化能力,研究其对小鼠免疫功能及抗氧化能力的影响。结果表明:与模型组比较,水提取物高剂量组的胸腺、肝脏指数极显著增高,脾脏指数显著增高;乙酸乙酯提取物高剂量组的脾脏、肝脏指数极显著增高。水提取物高剂量组血清细胞因子IL-2、IL-4的分泌量极显著增加。水提取物高剂量组丙二醛的含量显著降低,且显著低于阳性组;水提取物高剂量组超氧化物歧化酶的含量显著增加;乙酸乙酯、水提取物高剂量组的总抗氧化能力极显著增强。水提取物各组的胸腺、脾脏细胞数量明显增加。研究表明硬毛粗盖孔菌子实体提取物能够增强小鼠的免疫功能及抗氧化能力,为其进一步开发利用提供参考。

木质素对硬毛粗毛盖孔菌固态发酵漆酶的影响

解析固态基质木质素与漆酶产量间的关系是促进固态发酵漆酶产业化的基础。考察了木质素含量变化对固态基质可降解性、水分分布特征以及对硬毛粗毛盖孔菌固态发酵漆酶产量的影响。结果表明随着木质素减少,漆酶产量增加,木质素为130 mg/g时,漆酶产量达到161.5 U/g,是对照组的3.42倍,木质素进一步减少漆酶产量未显著增加;木质素减少有利于改善固态基质可降解性,增加微生物可利用水。木质素是影响硬毛粗毛盖孔菌固态发酵产漆酶的重要因素,建立碱预处理工艺改变固态基质木质素含量,是提高固态发酵漆酶产量的重要途径。

硬毛粗盖孔菌饲料添加剂对牛体重及免疫功能的影响

为研究硬毛粗盖孔菌饲料添加剂对牛体重、血液生化指标及免疫功能的影响,本文采用单因素试验,选择体重相近的12月龄西门塔尔公牛20头,随机分成4组,每组5头,A组饲喂基础日粮为空白对照,B、C、D组在基础日粮中分别添加1%、3%、5%的硬毛粗盖孔菌饲料添加剂。试验期为30 d。在试验结束时测定牛的体重、生化指标及免疫功能。结果表明:与空白组相比,(1)试验B、C、D组的平均日增重(ADF)分别提高了20.1%、52.97%和29.4%(P<0.01),饲料转化率分别提高了16.54%、34.59%和22.56%;(2)B组的尿素(UREA)降低了10.39%(P<0.05);C组的尿素(UREA)和胆固醇(TCHE)降低了11.35%和6.63%(P<0.05),血糖(GLUC)则提高了8.39%(P<0.05);D组的尿素(UREA)和胆固醇(TCHE)降低了10.96%和6.31%(P<0.05),血糖(GLUC)和总蛋白(TP)提高了7.04%和5.35%(P<0.05);(3)免疫指标中C组的IgA、IL-2、IL-4分别提高了27.99%、39.02%和37.63%(P<0.05),IgG提高了21.06%(P<0.01);D组中IFN-γ提高了15.58%(P<0.05),IgG提高了15.64%(P<0.01)。因此,硬毛粗盖孔菌饲料添加剂可以提高西门塔尔公牛的体重和免疫功能。

垂柳茎腐病病原鉴定及其生物学特性测定

通过对海南种植的垂柳上发生的茎腐病病原菌进行形态学特征鉴定、ITS序列分析和致病性测定,确认引起海南垂柳茎腐病的病原菌为硬毛粗毛盖孔菌[Funalia trogii(Berk.)Bondartsev&Singer]。生物学特性测定结果显示,光照可以抑制菌丝生长,菌丝生长的最适温度为34℃,最适p H值为6.0,可溶性淀粉和酵母浸膏为最佳碳源和氮源。

基质异质性对硬毛粗盖孔菌固态发酵产漆酶的影响

固态基质是固态发酵的核心,为了探究其异质性对固态发酵效率的影响,以不同部位玉米秸秆(鞘、茎、髓、叶)为固态基质,以硬毛粗盖孔菌(Funalia trogii)发酵生产漆酶,测定固态基质化学组成与物理性质,考察固态基质理化性质与漆酶产量关系,进一步从细胞壁角度探讨固态基质与微生物相互作用。结果表明,以髓为固态基质时,菌丝茂密且漆酶产量最高(110.70 U/g),鞘为固态基质时产量最低(26.40 U/g);髓具有最高的还原糖得率(239.44 mg/g)和较低的灰分含量,而鞘具有最低的还原糖得率(154.29 mg/g)和最高的半纤维素含量(36.65%);漆酶产量与木质素及还原糖得率呈显著正相关(P<0.05),与半纤维素及灰分呈显著负相关(P<0.05)。研究显示,固态基质异质性是影响固态发酵效率的重要因素。

硬毛粗盖孔菌过氧化氢酶家族基因鉴定及表达分析

硬毛粗盖孔菌是一种结实能力强的耐热真菌,为了探究其过氧化氢酶(CAT)基因家族的基本特征和功能,分别对不同交配型单核体Ct001_29和Ct001_31基因组的CAT基因家族进行了鉴定,并分析了不同CAT家族基因在不同温度条件下培养的菌丝、原基和子实体中的表达特征。硬毛粗盖孔菌基因组上有3个CAT基因(Ctcat1–Ctcat3),编码510–743个氨基酸;Ctcat1、Ctcat2和Ctcat3的等位基因之间的结构及序列相对保守,但编码区也存在少量SNP变异(6–14个)。在25℃培养菌丝和35℃培养菌丝、原基及子实体中,35℃菌丝的CAT酶活最高,为278 U/mg蛋白,原基期CAT酶活最低,为4 U/mg蛋白。Ctcat2的表达丰度显著高于Ctcat1和Ctcat3,Ctcat1和Ctcat3具有相似的表达模式,在35℃菌丝、原基和子实体中均上调表达;而Ctcat2具有相反的表达模式,在35℃菌丝、原基和子实体中均下调表达。此外,Ctcat2在原基时期、Ctcat3在25℃菌丝和35℃菌丝中具有偏好表达,Ct29cat2和Ct29cat3的表达量均高于各自的等位基因。本研究所发现的CAT等位基因表达偏好为进一步揭示大型真菌CAT的基因功能奠定了基础。