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用Fura-2/AM测定细胞内游离钙浓度的方法 被引量:51
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作者 张均田 李锡明 +3 位作者 石成璋 李明 刘雨 刘云 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第11期655-658,共4页
新型Ca^(2+)荧光指示剂F ura-2/AM由中国医学科学院药物研究所合成。本文详细介绍了用F ura-2/AM测定神经细胞、巨噬细胞和主动脉条平滑肌细胞内游离钙的方法。经比较,国产与Sigma产F ura-2/AM的质量相同。
关键词 fura-2/am 细胞 游离钙 测定
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应用Fura-2/AM检测分离的神经细胞内游离钙及其变化 被引量:50
2
作者 李明 王峻峰 +1 位作者 韩济生 张均田 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第12期890-894,共5页
本文以酶法制备新生大鼠脑细胞悬液,运用近年来发展起来的Fura-2技术,检测此神经细胞内游离钙(以下简写为[Ca^(2+)]i)及其变化。结果表明:在静息状态下,其[Ca^(2+)]i为240±5nmol/L。高钾去极化可使[Ca^(2+)]i成倍增加.钙拮抗剂vera... 本文以酶法制备新生大鼠脑细胞悬液,运用近年来发展起来的Fura-2技术,检测此神经细胞内游离钙(以下简写为[Ca^(2+)]i)及其变化。结果表明:在静息状态下,其[Ca^(2+)]i为240±5nmol/L。高钾去极化可使[Ca^(2+)]i成倍增加.钙拮抗剂verapamil和Ilifedipinc能阻断高钾升高[Ca^(2+)]i的作用。实验结果证明了所制备的神经细胞悬液的可用性及建立的Fura-2测定[Ca^(2+)]i方法的可靠性。 展开更多
关键词 fura-2/am 脑细胞 钙离子
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利用Fura-2/AM荧光探针法和LCSM法研究受磁场处理S.aureus细胞Ca^(2+)的跨膜行为 被引量:8
3
作者 马海乐 许审时 +1 位作者 何荣海 段玉清 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2012年第2期407-410,共4页
研究受脉冲磁场处理金黄色葡萄球菌(S.aureus)细胞Ca2+的跨膜行为,为此研究了表征S.aureus胞内Ca2+浓度变化Fura-2/AM荧光探针检测法,并检测了不同脉冲数下经脉冲磁场处理后S.aureus细胞荧光强度的变化,采用激光共聚焦扫描显微镜(LCSM)... 研究受脉冲磁场处理金黄色葡萄球菌(S.aureus)细胞Ca2+的跨膜行为,为此研究了表征S.aureus胞内Ca2+浓度变化Fura-2/AM荧光探针检测法,并检测了不同脉冲数下经脉冲磁场处理后S.aureus细胞荧光强度的变化,采用激光共聚焦扫描显微镜(LCSM)观察了经脉冲磁场处理前后S.aureus胞内Ca2+浓度的变化。研究结果表明,Fura-2/AM可成功的负载于S.aureus中,可以应用于S.aureus胞内游离钙离子浓度变化的测定。经脉冲磁场处理后,S.aureus胞内钙离子浓度显著上升,且与活菌数的减少高度相关,相关度达到-0.989 15;胞内光点显著增多,光点荧光强度明显增大,说明大量胞外钙离子跨膜进入胞内。因此,可以判断微生物细胞膜通透性的改变和胞内Ca2+浓度的上升是高强度脉冲磁场具有杀菌作用的重要原因。 展开更多
关键词 fura-2/am荧光探针 激光共聚焦显微镜 金黄色葡萄球菌 钙离子 脉冲磁场
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Fura-2/AM荧光法测定日本血吸虫培养细胞内游离钙离子浓度 被引量:7
4
作者 彭延 董惠芬 +2 位作者 蒋明森 钟沁萍 明珍平 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2003年第2期139-141,F001,共4页
目的 研究用钙荧光探剂 (Fura- 2 / AM)检测静息状态下日本血吸虫培养细胞内的游离钙离子浓度 ([Ca2 + ]i) ,以及β-巯基乙醇对培养细胞 [Ca2 + ]i的影响。方法 将 18d虫龄的日本血吸虫童虫制成细胞悬液 ,贴壁法接种于 30 ml培养瓶中 ... 目的 研究用钙荧光探剂 (Fura- 2 / AM)检测静息状态下日本血吸虫培养细胞内的游离钙离子浓度 ([Ca2 + ]i) ,以及β-巯基乙醇对培养细胞 [Ca2 + ]i的影响。方法 将 18d虫龄的日本血吸虫童虫制成细胞悬液 ,贴壁法接种于 30 ml培养瓶中 ,培养液为 RPMI- 16 4 0含 2 0 %小牛血清及常量抗生素。在培养的 0 - 3d,制备日本血吸虫细胞悬液 ,采用 Fura- 2 / AM钙荧光探剂测定正常静息状态下及加入β-巯基乙醇后日本血吸虫培养细胞内的 [Ca2 + ]i。结果 正常静息状态下 ,培养 0 d的日本血吸虫培养细胞内的 [Ca2 + ]i为 188.2 nmol/ L ;培养 1- 3d的 [Ca2 + ]i两两比较差异无显著性(P>0 .0 5 ) ,它们的平均值为 (187.0± 10 .7) nm ol/ L ,与培养 0 d的 [Ca2 + ]i比较 ,差异也无显著性(P>0 .0 5 )。β-巯基乙醇可使日本血吸虫培养细胞内 [Ca2 + ]i明显升高 (P<0 .0 1) ,并随浓度的增加而升高。结论 培养 1- 3d,静息状态下日本血吸虫培养细胞内的 [Ca2 + ]i比较稳定 ,β-巯基乙醇能影响日本血吸虫培养细胞内的 [Ca2 + 展开更多
关键词 日本血吸虫 fura-2/am 细胞内游离钙离子 β-巯基乙醇
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Fura-2/AM 法和 MTT 法筛选多药抗药性逆转剂的比较 被引量:6
5
作者 符立梧 潘启超 林广云 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期401-405,共5页
为了验证新方法Fura2/AM法筛选多药抗药性逆转剂的效果,以新方法Fura2/AM法与传统方法MTT法进行筛选多药抗药性逆转剂的比较研究。结果显示Fura2/AM法与MTT法的筛选结果基本一致(相关系数γ=0... 为了验证新方法Fura2/AM法筛选多药抗药性逆转剂的效果,以新方法Fura2/AM法与传统方法MTT法进行筛选多药抗药性逆转剂的比较研究。结果显示Fura2/AM法与MTT法的筛选结果基本一致(相关系数γ=086,P<001),且Fura2/AM法有操作简单、快速、灵敏、重复性好及测定过程不需无菌操作等的特点,适用于大规模的筛选。 展开更多
关键词 肿瘤 fura-2/am MTT法 多药抗药性 逆转剂 筛选
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用Fura-2/AM检测皮层神经细胞〔Ca^(2+)〕_i的方法 被引量:4
6
作者 母敬郁 王峤 +3 位作者 王之光 杨世杰 边疆 杨翰仪 《白求恩医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期119-120,共2页
关键词 fura-2/am 神经细胞 胞内游离钙离子浓度 荧光测定 脑缺血 迟发性神经元死亡
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用Fura-2/AM检测巨噬细胞〔Ca^(2+)〕_i影响因素分析 被引量:2
7
作者 王斌 杜冠华 陈敏珠 《安徽医科大学学报》 CAS 1997年第1期83-84,共2页
用Fura┐2/AM检测巨噬细胞〔Ca2+〕i影响因素分析王斌1杜冠华2陈敏珠1作者单位:1安徽医科大学临床药理研究所,合肥2300322中国医学科学院药物研究所,北京100050用Ca2+荧光指示剂Fura-2/A... 用Fura┐2/AM检测巨噬细胞〔Ca2+〕i影响因素分析王斌1杜冠华2陈敏珠1作者单位:1安徽医科大学临床药理研究所,合肥2300322中国医学科学院药物研究所,北京100050用Ca2+荧光指示剂Fura-2/AM检测活细胞胞浆游离钙浓度(〔Ca... 展开更多
关键词 巨噬细胞 腹膜 fura-2/am 钙代谢
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Fura-2/AM法测定大鼠脑缺血后细胞内游离钙浓度 被引量:4
8
作者 安明顺 马建荣 任年军 《昆明医学院学报》 2002年第2期5-9,共5页
目的 :观察大鼠全脑缺血后 3d时的脑细胞内游离钙离子浓度 ([Ca2 + ]i)水平 ,介绍用Fura - 2 /AM法测定 [Ca2 + ]i的具体测定方法 ,探讨脑缺血后脑细胞内游离钙浓度变化的可能机制 .方法 :2 0只Wistar大鼠随机分成对照组和实验组 ,采用... 目的 :观察大鼠全脑缺血后 3d时的脑细胞内游离钙离子浓度 ([Ca2 + ]i)水平 ,介绍用Fura - 2 /AM法测定 [Ca2 + ]i的具体测定方法 ,探讨脑缺血后脑细胞内游离钙浓度变化的可能机制 .方法 :2 0只Wistar大鼠随机分成对照组和实验组 ,采用流行的传统四血管阻断法加以修改改良制作大鼠脑缺血动物模型 ,取假手术动物作对照组 ,用新型Ca2 + 荧光指示剂Fura - 2测定全脑缺血后 3d时的脑细胞内游离钙浓度 .结果 :对照组 [Ca2 + ]i为 (2 6 2 83± 90 12 )nmol/L ,实验组 [Ca2 + ]i为 (371 39± 89 0 0 )nmol/L ;用t -检验进行统计学分析 ,P =0 0 143<0 0 5 ,两者差异具有显著性 .结论 :大鼠全脑缺血后 3d时的脑细胞内游离钙离子浓度 ([Ca2 + ]i) 展开更多
关键词 fura-2/am 测定 大鼠 脑缺血 细胞内游离钙 浓度 细胞悬液
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Fura-2/AM荧光探针法用于大肠杆菌胞内游离钙的测定 被引量:2
9
作者 卢群 丘泰球 《广东药学院学报》 CAS 2006年第3期318-319,330,共3页
目的探讨经超声处理后大肠杆菌胞内游离钙的变化。方法超声波作用影响大肠杆菌,用Fura-2/AM探针法测定胞内游离钙的变化。结果经超声作用后的大肠杆菌胞内游离钙水平升高,打开了钙依赖性的离子通道,膜两侧离子交流加速,膜通透性增加。结... 目的探讨经超声处理后大肠杆菌胞内游离钙的变化。方法超声波作用影响大肠杆菌,用Fura-2/AM探针法测定胞内游离钙的变化。结果经超声作用后的大肠杆菌胞内游离钙水平升高,打开了钙依赖性的离子通道,膜两侧离子交流加速,膜通透性增加。结论Fura-2/AM荧光探针法可用于微生物大肠杆菌胞内游离钙的测定。经一定条件下超声作用后的大肠杆菌胞内游离钙水平升高。 展开更多
关键词 fura-2/am 大肠杆菌 荧光探针 游离钙
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用Fura-2/Am测定血小板胞浆游离钙浓度 被引量:3
10
作者 丁敏 钟梁 《大学化学》 CAS 2004年第4期48-49,62,共3页
推荐荧光探针Fura 2
关键词 血小板胞浆 游离钙 浓度测定 荧光探针fura-2/am 荧光分光光度法
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应用Fura-2/AM和Sulphinpyrazone测定大鼠海马细胞胞浆游离C^(2+)浓度 被引量:2
11
作者 温宝书 张敏 +1 位作者 张乐之 吕金胜 《四川生理科学杂志》 1997年第2期1-3,6,共4页
本研究进行了Fura-2/AM和Sulphinpyrazone测定大鼠海马细胞胞浆游离Ca^(2+)浓度([Ca^(2+)]i)的方法学探索,发现海马细胞可将Fura-2/AM外排和房室化,质膜有机阴离子转运抑制剂Sulphinpyrazone能阻断这些过程,且对细胞Ca^(2+)应答无不良影... 本研究进行了Fura-2/AM和Sulphinpyrazone测定大鼠海马细胞胞浆游离Ca^(2+)浓度([Ca^(2+)]i)的方法学探索,发现海马细胞可将Fura-2/AM外排和房室化,质膜有机阴离子转运抑制剂Sulphinpyrazone能阻断这些过程,且对细胞Ca^(2+)应答无不良影响,提高了检测的灵敏度。结论,Sulphinpyrazone可做为海马细胞[Ca^(2+)]_1测定的常规试剂。 展开更多
关键词 钙离子 fura-2/am Sulphinpyrazone
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用Fura-2/AM测定肺炎链球菌粘附A549细胞后胞浆游离钙离子浓度
12
作者 徐邦牢 尹一兵 冯泰宝 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2002年第5期254-255,共2页
目的 :通过体外实验 ,研究肺炎链球菌 (Streotococcus pneumoniae,S.pn)是否可触发肺 型上皮细胞 (A5 49)胞浆 [Ca2 +] i 浓度的改变。方法 :用 F ura-2 /AM荧光探针负载 A5 49细胞后测定 S.pn粘附A5 49细胞 3 0、60、90 min的胞内 [Ca... 目的 :通过体外实验 ,研究肺炎链球菌 (Streotococcus pneumoniae,S.pn)是否可触发肺 型上皮细胞 (A5 49)胞浆 [Ca2 +] i 浓度的改变。方法 :用 F ura-2 /AM荧光探针负载 A5 49细胞后测定 S.pn粘附A5 49细胞 3 0、60、90 min的胞内 [Ca2 +] i 浓度。结果 :S.pn粘附 A5 49细胞 3 0、60、90 min后的胞内 [Ca2 +] i均高于对照 [(187.4± 17.3 ) nmol/L ] ,并达到饱和 ,分别为 (4 87.5± 3 8.1)、(5 48.2± 3 5 .6)、(5 5 7.2± 47.5 )nmol/L。结论 :上述结果提示 S.pn粘附 A5 49细胞可增加胞浆内 [Ca2 +] i 展开更多
关键词 fura-2/am 测定 肺炎链球菌 粘附 A549细胞 胞浆游离钙离子浓度
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应用Fura-2/Am检测血小板胞浆游离钙浓度 被引量:4
13
作者 王喜安 李建华 +2 位作者 肖正达 金冠球 谢宇野 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期331-332,共2页
以新型荧光指示剂Fura-2/Am检测血小板胞浆内游离钙浓度,并探讨检测过程中的某些实验条件。结果表明:正常成人参考值为137.6±15.2nmol/L,95%正常值范围为107.8~167.4nmol/L。批内及批间变异系数CV分别为6.22%、4.6%... 以新型荧光指示剂Fura-2/Am检测血小板胞浆内游离钙浓度,并探讨检测过程中的某些实验条件。结果表明:正常成人参考值为137.6±15.2nmol/L,95%正常值范围为107.8~167.4nmol/L。批内及批间变异系数CV分别为6.22%、4.6%,重复性较好。且实验不受正常饮食,溶血、黄应及高脂样品的干扰,证实此方法是一种较为简便可靠的检测血小板胞浆游离钙浓度的方法。 展开更多
关键词 血小板 胞浆 fura-2
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用Fura-2/AM测定益康唑诱导鼠白血病WEHI-3细胞凋亡后细胞质游离钙浓度
14
作者 刘芳 邹萍 +1 位作者 张敏 吴耀辉 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期432-434,共3页
目的 通过体外实验 ,研究益康唑 (Econazole)是否可触发鼠白血病细胞株WEHI 3细胞胞质 [Ca2 + ]i浓度的改变。方法 用Ca2 + 荧光探针 (Fura 2 /AM )负载WEHI 3细胞后测定Econazole作用WEHI 3细胞 12、 18、2 4h的胞内 [Ca2 + ]i浓度... 目的 通过体外实验 ,研究益康唑 (Econazole)是否可触发鼠白血病细胞株WEHI 3细胞胞质 [Ca2 + ]i浓度的改变。方法 用Ca2 + 荧光探针 (Fura 2 /AM )负载WEHI 3细胞后测定Econazole作用WEHI 3细胞 12、 18、2 4h的胞内 [Ca2 + ]i浓度。结果 Econazole作用WEHI 3细胞 12、 18、 2 4h后的胞内 [Ca2 + ]i均高于对照组(80 6± 15 3)nmol/L ,分别为 (131 2± 11 2 ) ,(15 6 5± 2 0 1) ,(182 1± 13 6 )nmol/L。结论 提示Econazole作用WEHI 3细胞可增加细胞质内 [Ca2 + ]i浓度。 展开更多
关键词 fura-2 AM测定 益康唑 白血病 WEHI-3细胞 细胞凋亡 细胞质 游离钙 钙浓度 免疫学
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钙荧光探针Fura-2/AM对大肠杆菌细胞的负载行为 被引量:1
15
作者 邵梅 王洪梅 +2 位作者 刘志洪 沈萍 蔡汝秀 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期805-807,共3页
Fura-2/AM作为一类高效的钙离子荧光探针,在动物细胞中已得到较成功的应用,但在微生物细胞分析方面鲜见报道。该文系统研究了该探针的荧光光谱特征及其在大肠杆菌细胞内的负载行为,并考察了在大肠杆菌细胞中钙离子与Fura-2的结合情况。... Fura-2/AM作为一类高效的钙离子荧光探针,在动物细胞中已得到较成功的应用,但在微生物细胞分析方面鲜见报道。该文系统研究了该探针的荧光光谱特征及其在大肠杆菌细胞内的负载行为,并考察了在大肠杆菌细胞中钙离子与Fura-2的结合情况。为利用其研究大肠杆菌等微生物细胞内钙离子浓度及钙离子跨膜行为奠定了基础。 展开更多
关键词 Fua-2/am 荧光探针 大肠杆菌 负载
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Fura-2/AM法测定突触体内游离Ca^(2+)浓度的方法 被引量:8
16
作者 Chen Liuhua Yan Yujia He Zhengwen, et al(Neurological and Neurosurgical Institute of Ncurosurgery, Xiangya Hospital, Hunan Medical University, Changsha 410008) 《湖南医科大学学报》 CSCD 1998年第4期375-378,共4页
采用新型Ca2+荧光指示剂Fura-2,测定冷冻伤性脑水肿时突触体内游离钙的离子浓度。
关键词 冷冻伤 突触体 游离钙离子 fura-2 脑水肿
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用Fura-2双波长荧光法测定低剂量电离辐射对小鼠脾细胞游离钙的影响 被引量:3
17
作者 傅海青 吕喆 鞠桂芝 《白求恩医科大学学报》 CSCD 1999年第6期679-681,共3页
目的:探讨低剂量电离辐射免疫增强效应的机理。方法:采用Fura-2/AM 双波长荧光测定法研究了低剂量电离辐射全身照射后小鼠脾T淋巴细胞内游离钙离子浓度(〔Ca2+ 〕i)对次佳浓度Con A(5 m g/L)反应性的变... 目的:探讨低剂量电离辐射免疫增强效应的机理。方法:采用Fura-2/AM 双波长荧光测定法研究了低剂量电离辐射全身照射后小鼠脾T淋巴细胞内游离钙离子浓度(〔Ca2+ 〕i)对次佳浓度Con A(5 m g/L)反应性的变化。结果:静息状态下的小鼠脾淋巴细胞内游离钙离子浓度为95.0±14.0 nm ol/L,ConA 可使小鼠脾T淋巴细胞内游离钙离子浓度增加69.4±7.6 nm ol/L,上升至峰值时间为79.2 s。75、100 和200 m Gy 全身照射后24 h,Con A 诱导的小鼠脾T淋巴细胞内游离钙离子动员明显高于假照射组(P< 0.01)。结论:低剂量电离辐射的免疫兴奋效应与其增强淋巴细胞内〔Ca2+ 展开更多
关键词 低剂量电离辐射 脾细胞 fura-2/am 钙离子
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一种新型胞内游离钙离子检测探针Fura-2 被引量:2
18
作者 罗明志 屈颖 +1 位作者 马云彤 齐浩 《西安文理学院学报(自然科学版)》 2008年第1期40-43,共4页
钙离子是细胞内的一种重要的信号分子,采用各种荧光染料进行胞内钙离子浓度和分布检测对了解细胞生理活动具有重要意义。Fura-2是一种被用来测定胞内钙离子浓度的第二代紫外激发的双波长Ca2+荧光指示剂,结合比例荧光成像系统可以有效地... 钙离子是细胞内的一种重要的信号分子,采用各种荧光染料进行胞内钙离子浓度和分布检测对了解细胞生理活动具有重要意义。Fura-2是一种被用来测定胞内钙离子浓度的第二代紫外激发的双波长Ca2+荧光指示剂,结合比例荧光成像系统可以有效地检测胞内钙离子浓度和分布.本文介绍了Fura-2的基本化学性质、导入细胞的方式,以及采用比率荧光成像系统检测胞内钙离子浓度的优缺点及其对策. 展开更多
关键词 fura-2 fura-2/am 比率荧光检测系统 钙离子
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应用Fura-2/AM测定培养人视网膜色素上皮细胞内游离钙浓度的方法
19
作者 洪晶 陈明 +4 位作者 刘艳秋 陈君 吴景天 金鑫 蓝平 《中国实用眼科杂志》 CSCD 1997年第4期203-205,共3页
为探索应用Fura-2/AM测定培养人视网膜色素上皮细胞(RPE)内游离钙的方法。选用3—5代培养人RPE细胞,用0.1%胰蛋白酶消化后,应用Fura-2/AM负载进行荧光测定。结果:培养的人RPE细胞具有细胞存活力... 为探索应用Fura-2/AM测定培养人视网膜色素上皮细胞(RPE)内游离钙的方法。选用3—5代培养人RPE细胞,用0.1%胰蛋白酶消化后,应用Fura-2/AM负载进行荧光测定。结果:培养的人RPE细胞具有细胞存活力高,细胞数量充足的优点。在37℃水浴条件下,Fura-2/AM负载30分钟,DMEM室温温育10分钟,测定结果快捷、稳定。结论:在静息状态下,RPE细胞内钙浓度为192±30.43nmol/L,此值在文献报道范围内,加入乙酰胆碱后钙浓度为260.7±24.43nmol/L,说明乙酰胆碱通过与胆碱能受体结合调节细胞内钙的浓度。 展开更多
关键词 视网膜色素 上皮细胞 游离钙 fura-2/am
原文传递
利用荧光浓度指示剂fura-2研究稀土离子的跨膜行为 被引量:12
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作者 杨频 韦天新 +2 位作者 魏春英 王金希 樊大平 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第9期901-906,共6页
本文提出了利用fura-2测量细胞内游离稀土离子浓度的定量方法.实验结果表明,在模拟细胞内离子组成的条件下,稀土离子La^(3+)和Y^(3+)与fura-2形成1:1的配合物.其配合物的表观离解常数分别为161nmol·dm^(-3)和404nmol·dm^(-3),... 本文提出了利用fura-2测量细胞内游离稀土离子浓度的定量方法.实验结果表明,在模拟细胞内离子组成的条件下,稀土离子La^(3+)和Y^(3+)与fura-2形成1:1的配合物.其配合物的表观离解常数分别为161nmol·dm^(-3)和404nmol·dm^(-3),pH7.05.有未配对f电子的Nd^(3+),Ho^(3+),Sm^(3+),Dy^(3+),Ce^(3+),Yb^(3+)等稀土离子对荧光起萃灭作用.此性质使我们能够定性鉴定它们是否进入了细胞.我们使用如上性质,利用单细胞阳离子测试系统,以小鼠骨髓瘤细胞为模式细胞,研究了游离稀土离子的跨膜行为及部分体内小分子对稀土离子跨膜行为的影响.实验结果支持游离稀土离子不能通过细胞膜的假设,而且所研究的体内小分子在生理浓度下对稀土离子的跨膜也无明显作用. 展开更多
关键词 稀土 fura-2 小鼠 骨髓瘤细胞 跨膜行为 荧光
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