Fura-2荧光指示剂法研究稀土离子跨红细胞膜的作用

文章采用 Fura- 2荧光指示剂法研究了稀土离子跨红细胞膜的作用 ,结果发现 ,即使在很低的浓度下也能检测到稀土离子的跨膜现象 。

Fura-2/AM法测定大鼠脑缺血后细胞内游离钙浓度

目的 :观察大鼠全脑缺血后 3d时的脑细胞内游离钙离子浓度 ([Ca2 + ]i)水平 ,介绍用Fura - 2 /AM法测定 [Ca2 + ]i的具体测定方法 ,探讨脑缺血后脑细胞内游离钙浓度变化的可能机制 .方法 :2 0只Wistar大鼠随机分成对照组和实验组 ,采用流行的传统四血管阻断法加以修改改良制作大鼠脑缺血动物模型 ,取假手术动物作对照组 ,用新型Ca2 + 荧光指示剂Fura - 2测定全脑缺血后 3d时的脑细胞内游离钙浓度 .结果 :对照组 [Ca2 + ]i为 (2 6 2 83± 90 12 )nmol/L ,实验组 [Ca2 + ]i为 (371 39± 89 0 0 )nmol/L ;用t -检验进行统计学分析 ,P =0 0 143<0 0 5 ,两者差异具有显著性 .结论 :大鼠全脑缺血后 3d时的脑细胞内游离钙离子浓度 ([Ca2 + ]i)

Fura-2荧光探针法检测细胞内La^(3+)

使用Fura - 2荧光探针技术 ,检测细胞内的镧离子浓度 [La3+]i 变化 ,研究其跨膜行为。结果显示 ,细胞外镧 [La3+]o(0 .1mmol/L)可使细胞内镧离子浓度增加 ,说明镧离子能够跨越小鼠心肌细胞膜 ,讨论了跨膜机理。

用热聚法固定指示剂的光纤氧气传感器研究

采用热聚法将甲叉双丙烯酰胺 (MBBA)聚合并共价交联在硅烷化的玻璃微珠上 ,同时将指示剂Ru(Ⅱ ) 邻啡咯啉配合物物理包埋于聚合物中 ,研制了一种基于荧光猝灭原理的光纤氧气传感器 .采用NaHSO3 O2 MnSO4体系引发MBBA水溶液热聚合反应 ,通过确定NaHSO3 ,MnSO4,MBBA和Ru(phen) 3 Cl2 的最佳反应浓度以及玻璃微珠的尺寸 ,优化了聚合反应条件 ,改善了指示剂的固定效果 ,制备了性能较好的传感器探头 .该传感器的检测下限为 5× 10 -6(V/V) ,响应时间为 10s .该传感器连续工作 5 0min ,重复性标准偏差为± 1% .

新型红色荧光粉NaLa(MoO_4)_2∶Sm^(3+)的微波辅助溶胶-凝胶法合成及发光性能研究

采用微波辅助溶胶-凝胶法合成了NaLa(MoO_4)_2∶Sm^(3+)新型系列红色荧光粉。通过热重-差热分析仪分析了前驱体的热分解过程,运用X射线衍射仪、扫描电镜及荧光分光光度计等手段分别对样品的物相结构、微观形貌、发光性质等进行分析表征。结果表明:前驱体在700℃以上煅烧即可得到NaLa(MoO_4)_2的纯相;800℃煅烧所得样品粒度均匀,尺寸约为700~800 nm;所合成的NaLa(MoO_4)_2∶Sm^(3+)主要的激发峰位于307 nm、364 nm、377 nm、405 nm、469 nm处,其中最强的激发峰位于405 nm;发射光谱主要由571 nm、607 nm、647 nm处的三个发射峰组成,分别对应Sm^(3+)的4G5/2→6H5/2、4G5/2→6H7/2、4G5/2→6H9/2跃迁,其中最强发射峰位于647 nm处,说明样品在紫外、近紫外及蓝光区均可被激发,且发出红光。研究发现:煅烧温度为800℃、Sm3+掺杂浓度为0.04时,样品发光强度最大,其浓度淬灭主要是由电偶极-电偶极相互作用引起的。

用Fura-2/Am测定血小板胞浆游离钙浓度

推荐荧光探针Fura 2

荧光法研究头孢唑啉对人外周血淋巴细胞钙浓度的影响

Ca^2＋作为第二信使调控细胞内许多重要的生物和病理过程。近年来用荧光探针来检测细胞内钙离子已成为一种比较灵敏的检测手段。Fura-2是一种比率型探针，与钙离子结合后它的荧光显著增强，激发光谱发生位移，340／380nm可以消除由细胞厚度和探针数量等可变因素所造成的影响。

SK-2DQF定量荧光测定方法探讨

准确测定样品的含油浓度是现场定量荧光识别油气显示的前提和基础。该文针对目前现场应用的定量荧光技术在测定高浓度含油样品时的荧光猝灭问题,通过大量的实验提出了一种改进的定量荧光测定方法。文章结合实例详细阐述了该方法的重复性与实用性。对SK-2DQF定量荧光测定方法在现场的快速普及起到了积极的促进作用。

用Fura 2－AM检测血小板胞浆游离钙浓度

本文对应用荧光指示剂Ｆｕｒａ２－ＡＭ（国产）测定血小板胞浆游离钙浓度的某些实验条件进行了探讨。结果表明：实验最适ｐＨ范围为７．３５～７．４５。实验不受溶血、黄疸及高脂血样品的干扰。批内ＣＶ４．９８％，批间ＣＶ５．６％。正常成人参考值为１６７．７５±２０．６６ｎｍｏｌ／Ｌ。与使用进口Ｆｕｒａ２－ＡＭ（Ｓｉｇｍａ产品）检测结果比较，结果无统计学差异，相关系数：γ＝０．９８。

拟南芥花粉细胞质游离钙离子荧光测定法

以拟南芥花粉为材料,利用低温装载法在完整的花粉粒中,成功地载入酯化形式的钙离子荧光探针Fura-2/AM。利用荧光比率分析法对花粉细胞质中游离钙离子的分布特点进行研究并测定了花粉细胞内游离钙离子浓度。结果表明花粉萌发初期细胞质内游离钙离子呈极性分布,萌发沟附近的钙离子浓度明显高于其它部位,萌发孔附近最高,花粉细胞核中最低。花粉粒细胞萌发状态下的[Ca2+]i=246±38nmol/L,该值与花粉粒细胞萌发状态下游离钙离子浓度用其它方法测得值接近,进一步表明所建立的用Fura-2/AM检测拟南芥花粉粒细胞质游离钙离子的方法是可靠的。

新型Ba_2ZnS_3∶Cu荧光粉的合成及其发光性能

采用双坩埚嵌套高温固相法在950℃下成功地合成了Ba2ZnS3∶Cu荧光粉,探讨了工艺条件和Cu掺杂量对样品发光亮度的影响,用X射线粉末衍射(XRD)、扫描电子显微镜(SEM)和荧光分光光度计分别对其结构、形貌和发光性能进行了表征。结果表明:样品具有单一的Ba2ZnS3晶相结构;与Ba2ZnS3基质不同,该荧光粉的激发光谱在近紫外区存在一个从275～350nm的宽激发带,归因于Cu发光中心的吸收;该荧光粉在近紫外光激发下发出明亮的黄光,发射中心波长位于560nm处,是一种良好的黄光材料。

Na^+/Ca^(2+)交换介导的Nd^(3+)跨淋巴细胞膜的行为研究

利用Fura 2荧光浓度指示剂法对Na+ Ca2 + 交换介导的Nd3+ 跨人外周血淋巴细胞膜行为进行了一系列研究 .结果表明 :当细胞形成向外的Na+ 梯度时Nd3+ 能跨膜进入细胞 ,电压依赖性L 型Ca2 + 通道对Nd3+ 进入无贡献 ,提出了Na+ Ca2 +交换系统是Nd3+ 进入细胞的主要途径 ;在安全浓度范围内进入胞内的游离Nd3+ 浓度与胞外的Nd3+ 浓度成正比 ,计算表明进入胞内的最大游离Nd3+ 浓度为 ( 3 67± 0 32 )× 10 - 1 4 mol·L- 1 ;当胞外pH值降低时进入胞内的游离Nd3+ 浓度减小 ,胞内游离Ca2 + 浓度减小时进入的游离Nd3+ 浓度略微增大 ,胞外Nd3+ 和Ca2 + 竞争Na+ Ca2 + 交换位点 ;结果进一步推测进入胞内的Nd3+ 可被质膜钙泵泵出胞外 ,初步实验表明进入胞浆中的Nd3+ 会在内质网中进一步累积 。

Y_2Ti_2O_7∶Tm^(3+)的制备及其发光性能研究

采用溶胶-凝胶法(Sol-gel)制备了不同烧结温度和Tm3+掺杂浓度的Y2Ti2O7∶x Tm(x=0.005,0.01,0.03,0.05)荧光粉,分别采用X射线衍射分析仪(XRD)、透射电子显微镜(TEM)和荧光光谱仪对样品的晶型结构、形貌以及发光性能进行了表征。XRD结果表明,所得到的样品为单一立方相烧绿石结构。样品在361nm紫外光激发下发射出蓝光,其峰值波长为456 nm,对应于Tm3+的1D2→3F4跃迁。1 000℃烧结的Y2Ti2O7∶0.01Tm3+样品具有较好的发光性能。样品在456 nm处的相对发光强度随Tm3+掺杂浓度的增大先升高后降低,在Tm3+摩尔分数为1%时达到最大,即出现了浓度猝灭现象。

AngⅡ对人心房细胞内游离钙浓度的影响及大蒜素的拮抗作用

目的研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人心房细胞[Ca2+]i的影响以及AngⅡ受体拮抗剂大蒜素的拮抗作用。方法急性分离单个人心房肌细胞,实验分4组:对照组、AngⅡ组(加入终浓度为0.1μmol/L的AngⅡ)、大蒜素组(加入终浓度为50μmol/L的大蒜素)和AngⅡ+大蒜素组(大蒜素50μmol/L和AngⅡ0.1μmol同时加入)。以Fluo-3/AM荧光指示剂负载,应用激光共聚焦显微镜技术,分别于加入干预药物后即刻与15min检测[Ca2+]i变化。结果对照组和大蒜素组人心房肌细胞内荧光强度和光密度值较低。AngⅡ加入后即刻光密度值开始增加,15min后荧光强度和光密度值显著增高,差异有显著性意义(P<0.05)。而AngⅡ+大蒜素组光密度值低于AngⅡ组,差异有显著性意义(P<0.05)。结论AngⅡ可引起人心房肌细胞内钙超载,大蒜素能显著减轻AngⅡ诱导的人心房肌细胞内Ca2+超载。

CuSO_4对2.2.15细胞的影响

目的:探讨硫酸铜(CuSO4)对2.2.15细胞代谢及HBV复制和表达的影响及其机制. 方法:采用MTT法检测CuSO4对2.2.15细胞的毒性,流式细胞仪检测细胞周期.透射电镜法,Annexin V/PI双染后双变量流式细胞仪观察CuSO4对2.2.15细胞凋亡的影响,采用时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)检测不同浓度的CuSO4作用后2.2.15细胞上清中HBsAg,HBeAg的P/N 值.Taq man荧光定量PCR检测不同浓度CuSO4作用后上清中HBVDNA滴度. 结果:MTT实验确定CuSO4在培养液中对2.2.15细胞的最大无毒剂量是128μmol/L.CuSO4作用后可引起细胞周期的改变,肝癌细胞被阻滞在G2+M期,且呈量效相关性.但是未发现CuSO4有诱导凋亡的作用,CuSO4干预12 d的结果显示2.2.15细胞上清中HBsAg,HBeAg的滴度及HBVDNA 的复制水平与对照组无明显差别. 结论:CuSO4有明显的细胞毒作用,可引起肿瘤细胞周期的改变及细胞坏死,提示了铜的抗癌作用的分子机制,CuSO4 短期处理2.2.15细胞后暂未发现其对HBV复制和表达的影响.

细菌脂多糖对培养心肌细胞胞浆游离钙浓度的影响

正常细胞在静息状态下,胞浆游离钙浓度维持在10-7mol/L水平。产生钙信号的激动剂作用于细胞时,引起胞浆游离钙浓度升高,进而影响细胞功能。文献报告细菌脂多糖在体内和体外影响细胞对钙的摄取和转运。本研究采用quin-2荧光指示剂法测定培养心肌细胞胞浆游离钙浓度,观察脂多糖对心肌细胞基础水平胞浆游离钙浓度的影响。

PLC对血小板游离钙离子浓度作用实验条件研究

对荧光法测定磷酯酶C对血小板细胞质游离钙离子浓度作用的实验条件进行了研究.结果表明,在本实验条件下,Fura 2／AM合适的浓度为4μmol／L;最适pH为7.4;血小板的浓度在1×108～3×108个／L;保护剂ASA及激活剂ADP的浓度分别为0.937mmol／L和20mmol／L;波长选用350nm和380nm;背景值对实验结果没有影响.

酶联免疫吸附试验检测金黄色葡萄球菌C_2型肠毒素

金黄色葡萄球菌肠毒素(简称肠毒素)引起的食物中毒占食物中毒总数的50%以上。肠毒素的快速诊断方法很多,如免疫扩散、放射免疫、免疫荧光、反向间接血球凝集试验和酶联免疫吸附试验(ELISA)等。ELISA