甜瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum)专化型的初步研究

本研究获得的甜瓜枯萎病病株9株分离物(南通市6株,新疆3株),经PDA培养性状发现,其在菌落颜色、质地和生长速率方面存在差异,大型分生孢子的大小为(19.54～41.11)μm×(4.90～8.16)μm,与西瓜枯萎病菌的大型分生孢子有较大差异。胚根法成株期致病性测定结果发现,本研究的甜瓜枯萎病菌分离物在不同鉴别寄主和鉴别品种上致病性存在专化型和生理小种方面的差异,但分离物中不存在西瓜枯萎病菌。利用核糖体转录间隔区保守序列设计引物,PCR检测也证明本研究甜瓜枯萎病菌不同分离物中不存在西瓜枯萎病菌。

山西省重要作物萎蔫病病原镰刀菌(Fusarium)种类的鉴定(Ⅰ)

在分析国内外镰刀菌(Fusarium Link)种类鉴定现状的基础上,运用培养性状和形态特征综合分析的方法,对山西省三个地区七市县5种作物上采集的5个镰刀菌菌株进行了种类鉴定。鉴定出2个种,其中4个菌株属于镰刀菌属美丽组的尖孢镰刀菌(F.oxysporum Schl.),另一个菌株属于镰刀菌属李瑟组的串珠镰刀菌(F.moniliforme Shel-don)。5种作物病原镰刀菌种类分别是:棉花枯萎病菌(F.oxysporum)、西瓜枯萎病菌(F.oxysporum)、黄瓜枯萎病菌(F.oxysporum)、亚麻枯萎病菌(F.oxysporum)和玉米青枯病菌(F.moniliforme)。

瓜类枯萎病菌尖镰孢专化型研究初报

１９８９年在郑州、开封两市郊区采集黄瓜、西瓜、瓠瓜和冬瓜枯萎病株，经分离鉴定，其病菌都是尖镰孢（ＦｕｓａｒｉｕｍｏｘｙｓｐｏｒｕｍＳｃｈｌ．）。用１０种瓜类作物鉴别寄主鉴定，瓜类枯萎病菌，可分为４个专化型：黄瓜枯萎病菌属尖镰孢黄瓜专化型（Ｆ．ｏｘｙsｐｏｒｕｍＳｃｈｌ．ｆ．ｓｐ．ｃｕｃｕｍｅｒｉｎｕｍＯｗｅｎ）；西瓜枯萎病菌属尖镰孢西瓜专化型（Ｆ．ｏｘｙｓｐｏｒｕｍＳｃｈｌ．ｆ．ｓｐ．ｎｉｖｅｕｍ（Ｅ．Ｆ．Ｓｍｉｔｈ）ＳｎｙｄｅｒａｎｄＨａｎｓｅｎ）；瓠瓜枯萎病菌属尖镰孢葫芦专化型（Ｆ．ｏｘｙｓｐｏｒｕｍＳｃｈｌ．ｆ．ｓｐ．ｌａｇｅｎａｒｉａｅＭａｔｕｏａｎｄＹａｍａｍｏｔｏ）；冬瓜枯萎病菌是一个新的专化型，定名为尖镰孢冬瓜专化型（Ｆ．ｏｘｙｓ－ｐｏｒｕｍＳｃｈｌ．ｆ．ｓｐ．ｂｅｎｉｎｃａｓａｅＳ．Ｚ．ＷａｎｇａｎｄＹ．Ｃ．Ｗｕｆ．ｓｐ．ｎｏｖ．）。尖镰孢酯酶同工酶酶谱测定结果表明，４个专化型的酶谱明显不同。

几种瓜类枯萎病菌专化型的AFLP分析

利用AFLP分子标记技术对西瓜、冬瓜、黄瓜和甜瓜4个不同专化型的10个菌株进行了分析,结果表明10对引物对供试菌株扩增出550条带,其中多态性带175条,占总带数的31.8%。对供试菌株的AFLP指纹图谱聚类分析,可将其划分为FOGI、FOGII、FOGIII和FOGIV 4个类群(FOGs),分别为西瓜专化型菌株、冬瓜专化型菌株、黄瓜专化型菌株和甜瓜专化型菌株,聚类结果与菌株的专化型间存在明显的对应关系。

冬瓜枯萎病病原鉴定及种质资源田间抗性评价

在大田自然发病状态下,对36份来自国内外的冬瓜种质资源进行抗枯萎病性鉴定,结果表明:7份材料表现高抗,占总数的19.4%;11份材料表现中抗,占总数的30.6%;10份材料表现轻抗,占总数的27.8%;8份材料表现感病,占总数的22.2%;不同冬瓜种质资源的不同生长时期对枯萎病的抗性表现明显不同;研究发现,不同皮色的冬瓜资源对枯萎病的田间抗病性也明显不同,其中黑皮冬瓜资源最为抗病,其次为粉皮冬瓜资源,而青皮冬瓜对枯萎病的抗性较差;通过对病原形态、培养特性及对瓜类作物的致病性测定研究,将引起广西冬瓜枯萎病的病原鉴定为尖镰孢冬瓜专化型。

尖孢镰刀菌专化型及生理小种分子检测研究进展

尖孢镰刀菌分子检测工作在枯萎病病原菌分子诊断与防治中具有重要意义。本研究综述了DNA分子标记、毒性基因和转座子等技术在尖孢镰刀菌专化型及其生理小种鉴别方面的应用,指出了各检测方法优缺点,并对今后的研究方向进行展望。

大麦条锈菌专化型鉴定及其致病性初步分析

【目的】对2012年采自甘肃省和青海省大麦(青稞)上的条锈菌进行了专化型鉴定和致病类型测定,并选用甘肃省和青海省的16份大麦上的条锈菌和11份小麦上的条锈菌对27份大麦品种进行了苗期致病性测定.【方法】采用涂抹接种及撒孢子粉接种的方法.【结果】16份大麦条锈菌标样均为大麦条锈菌小麦专化型,其致病类型鉴定为贵22-9、贵22-56、贵22-82、贵22-91、水11-13、水11-13(中四感)、水11-102、水11-157、水11-200、水11-203和小麦条锈菌5个未归类型。大麦条锈菌对大麦品种‘果洛’‘藏青25’‘昆仑1号’‘康青3号’‘昆仑12号’的毒性频率分别为56.25%、37.50%、25.00%、62.50%、21.43%,小麦条锈菌对大麦品种‘果洛’‘藏青25’‘昆仑1号’‘康青3’‘昆仑12号’的毒性频率分别为36.36%、18.18%、54.54%、45.45%、9.09%.【结论】大麦品种‘果洛’‘康青3号’‘藏青25’‘昆仑1号’和‘昆仑12号’可被采自大麦和小麦上的条锈菌侵染,为共同感病寄主.

香蕉枯萎病病原菌Six同源基因的鉴定

为鉴定香蕉枯萎病病原菌Six同源基因,通过BLASTP分析从香蕉枯萎病病原菌1号生理小种菌株N2基因组中鉴定了Six1和Six6同源基因,从4号生理小种B2菌株基因组中鉴定了Six1、Six2、Six6和Six8同源基因。采用PCR扩增从亚热带4号生理小种菌株基因组DNA中扩增到Six7同源基因,并从其它一些1号和4号生理小种菌株基因组DNA中也扩增到了Six2和Six8同源基因。上述结果表明,不同古巴专化型菌株Six基因组成可能不同。该研究结果为进一步研究香蕉枯萎病病原菌Six基因的功能奠定了基础。

尖孢镰刀菌致病性菌株遗传多样性的ISSR分析

致病性尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）是一种世界性分布的作物土传病原真菌,为明确其不同寄主及专化型菌株遗传差异性和亲缘关系,利用ISSR分子标记技术对来源于不同寄主（专化型）及地理分布的43个菌株进行了遗传多样性分析。结果表明,供试的15条引物通过ISSR-PCR扩增,共扩增出147条条带,其中多态性条带为144条,平均多态性条带达98.0%。43个菌株的聚类结果表明,各菌株间的遗传相似系数为0.67~0.97,且遗传多样性与其寄主和地理来源没有明显的相关性。进一步将供试菌株中葫芦科与茄科作物尖孢镰刀菌分别进行聚类分析,当遗传相似系数为0.84时,16个葫芦科的菌株可分为6个ISSR类群;当遗传相似系数为0.77时,16个茄科的菌株亦可分为6个ISSR类群;且均表现为相同寄主或专化型菌株因地理来源不同,被归属于不同的ISSR类群,说明寄主或专化型相同的菌株与地理来源存在一定的相关性。

尖镰孢酯酶同功酶的测定及其在专化型鉴定上的应用

对尖镰孢（ＦｕｓａｒｉｕｍｏｘｐｓｐｏｒｕｍＳｃｈｌ．）酯酶同功酶的测定结果表明：不同培养条件对尖镰孢酯酶同功酶有明显影响，其酶带数，酶带颜色深浅、宽窄和Ｒｆ值都有明显差异，以培养液成分和培养液偏碱时影响较大，培养温度和培养天数影响较小。在同一培养条件下重复测定同一专化型，酶谱表现稳定，没有差异。测定黄瓜、西瓜、瓠瓜、冬瓜、棉花和芝麻上的尖镰胞的酯酶同功酶谱明显不同。这个方法可用于鉴定尖镰胞的专化型。

瓜类枯萎病发生机理研究进展

对国内外瓜类抗枯萎病的致病因子及其生理分化、致病机理、抗病机制、抗性遗传、抗性筛选等进行了综述,并对该领域存在的问题以及发展方向进行了讨论.

尖孢镰刀菌寄主专化型脂肪酸生物标记鉴别特性

【目的】分析不同寄主尖孢镰刀菌脂肪酸生物标记的结构组成和分布特性,建立尖孢镰刀菌寄主专化型脂肪酸生物标记鉴别模型。【方法】通过脂肪酸鉴定系统(Sherlock MIS)对来自于西瓜、香蕉和花生寄主的22株尖孢镰刀菌进行脂肪酸生物标记检测,采用聚类分析方法分析尖孢镰刀菌脂肪酸的同质性,采用主成分分析提取尖孢镰刀菌寄主专化型特征脂肪酸,利用Bayes逐步判别方法,建立尖孢镰刀菌寄主专化型判别模型。【结果】从供试的22个菌株中检测到8种脂肪酸,其中常见脂肪酸有6条,相对含量60%以上的主要脂肪酸有16:0、18:0和18:2 CIS 9,12/18:0a。对常见脂肪酸进行聚类分析,结果表明脂肪酸与尖孢镰刀菌寄主专化型的系统发育存在着对应关系。对常见脂肪酸进行主成分分析,得到尖孢镰刀菌脂肪酸中的特征脂肪酸有5个,分别为14:0(X1)、16:0(X2)、16:1 CIS 9(W7)(X3)、18:0(X4)和18:2 CIS 9,12/18:0a(X5)。利用Bayes逐步判别分析,建立的尖孢镰刀菌寄主专化型判别模型为Y1=-183.06+12.24X1+8.05X2+5.39X4+3.58X5、Y2=-174.09+10.40X1+7.96X2+5.40X4+3.42X5、Y3=-173.97+14.85X1+7.25X2+6.58X4+3.53X5,当1≤Yi<2时,菌株的寄主为西瓜;当2≤Yi<3时,菌株的寄主为香蕉;当Yi>3时,菌株的寄主为花生,且模型判对的概率为0.91。利用这套模型,对从西瓜、香蕉、花生上采集的56株尖孢镰刀菌寄主专化型进行判别,准确率达92.86%。【结论】脂肪酸生物标记可以作为尖孢镰刀菌寄主鉴别指标,脂肪酸14:0、16:0、18:0、18:2 CIS 9,12/18:0a是判别尖孢镰刀菌寄主的4个重要指标,建立的判别模型比较符合实际,有很好的应用价值。

腐皮镰孢霉的现代分类学

本文综述了腐皮镰孢霉(Fusarium solani)的分类,包括分类变迁、全形态、专化型分类和遗传基础。作者认为种名腐皮镰孢霉[(Fusarium solani(Mart.)Sace.]是正确的,有性态为赤球丛赤壳(Nectria hacmatococca Berk.et Br.).种下按交配型结合致病性分专化型值得借鉴和提倡。

条形柄锈菌大麦专化型分布区域的新发现

在26个小麦品种和20个大麦品种上,对采自陕西、青海和河南的10份大麦条锈病菌标样进行了致病性测定。除陕西的2份标样被鉴定为小麦专化型条中29号小种外,其余来自3省的8份标样均属大麦专化型。首次发现并证实了条形柄锈菌大麦专化型(Pucciniastriiformis West.f.sp.hordei)在中国西藏以外地区的分布,并确认大麦上发生的条形柄锈菌可以是大麦专化型,也可以是小麦专化型。

瓜类枯萎病研究进展

枯萎病又称蔓割病、萎凋病,是瓜类作物上最主要的病害之一,一直是国内外研究的热点。该病是由尖孢镰刀菌侵染引起的一种土传、种传维管束病害,防治困难且病原菌具有寄主专化性,在全球大部分的瓜类产区均有发生,给我国及世界各国的农业生产造成了巨大的经济损失。本文结合最新的研究内容,对瓜类枯萎病病原菌寄主专化型、病原菌全基因组测序与致病机制、病原菌分子检测、寄主抗病分子机制以及病害防治措施进行了概述,并对今后的研究方向进行展望。

茄科尖孢镰刀菌3个专化型细胞壁降解酶的比较

对茄科作物致病尖孢镰刀菌番茄专化型(Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici,FOL)、茄子专化型(F.oxysproum f. sp. melongenae,FOM)和辣椒专化型(F.oxysporum f. sp. capsicum,FOC)细胞壁降解酶多聚半乳糖醛酸酶(PG)、果胶甲基半乳糖醛酸酶(PMG)、多聚半乳糖醛酸反式消除酶(PGTE)、果胶甲基反式消除酶(PMTE)及纤维素酶(Cx)进行比较。对3个专化型分别在寄主植物体内细胞壁降解酶活性测定表明:发病茄子和番茄体内酶活性从高到低依次为PG、PMG、PGTE、Cx 和PMTE,发病辣椒体内酶活性从高到低依次为PG、PGTE、PMG、PMTE 和Cx。体外诱导试验发现,FOC所产生的PG活性比FOM和FOL高,而FOM所产生的PGTE比FOC和FOL高,3个专化型的PMG、PMTE和Cx活性没有显著差异。通过PG同工酶薄层等电聚焦电泳分析,FOL、FOM和FOC分别产生5、5、3个PG同工酶,各有1条特异的PG同工酶条带。推测此3个专化型PG同工酶的差异可能和病原菌的致病作用和寄主专化性差异有关。

基于杨生褐盘二孢菌2个专化型的ITS2二级结构特征分析

【目的】杨生褐盘二孢菌在杨属的不同寄主上存在2个专化型,根据形态特征和现有的一些核酸分子序列标记上不易区分;本文在利用盘二孢属核糖体转录间隔区(ITS)序列构建的系统发育树基础上,结合ITS2区分2个专化型的特异性。【方法】对23株杨生褐盘二孢菌孢子形态特征观察。以基因组DNA为模板进行PCR扩增,得到ITS序列。对从NCBI数据库中下载的盘二孢属的参考ITS序列,分别利用最大似然法、最大简约法和贝叶斯法构建3种系统发育树。同时,结合应用The ITS2 database预测ITS2二级结构模型,从分子进化角度分析杨生褐盘二孢菌2个专化型的特性。【结果】在寄主叶片上挑取的病原菌孢子形态比较典型,而在培养基上培养的孢子形态差异较大,不能依据传统的芽管萌发数有效区分2个专化型。3种ITS序列系统发育树可区分盘二孢属的3个种,但无法将参考ITS序列准确定位到专化型中。通过比较盘二孢属ITS2二级结构发现:蔷薇盘二孢菌和苹果盘二孢菌种内的菌株以及包括参考ITS序列在内的杨生褐盘二孢菌同一专化型的ITS2二级结构模型完全相同,但3个种之间及杨生褐盘二孢菌2专化型之间,ITS2二级结构上有多个位点的碱基差异。其中,杨生褐盘二孢菌白杨专化型的ITS2二级结构中螺旋Ⅰ上第17位碱基为A,螺旋Ⅱ上第43和44位碱基为AC,螺旋Ⅲ的CBC位点上配对碱基是第76和114位碱基C和G,hemi-CBC位点上是第75位碱基U;黑杨专化型的ITS2二级结构中螺旋Ⅰ上第17位碱基为U,螺旋Ⅱ上第43和44位碱基分别为G和U,螺旋Ⅲ上CBC位点上配对碱基分别是第76和114位的碱基U和A,hemi-CBC位点上是第75位碱基C。杨生褐盘二孢菌2个专化型在这些结构上存在碱基变异。【结论】基于ITS序列构建的3种系统发育树能将盘二孢属真菌在种间水平上进行区分,但不能在种内区分;通过ITS2二级结构的比较可发现,盘二孢属内不同种和专化型的碱基存在明显差异,且种内专化型存在CBCs配对碱基差异。因此,ITS2二级结构和系统发育树是更有效地区分杨生褐盘二孢菌2个专化型的分子依据。

麻疯树腐皮镰孢根腐菌的寄主专化性初步研究

以麻疯树根腐病病原腐皮镰孢菌(Fusarium solani)的典型菌株为测试对象,对麻疯树6个不同种源、39种不同植物以及其他10个专化型寄主植物进行接种试验,并与其他专化型菌种进行形态学对比分析。结果表明,麻疯树腐皮镰孢菌对麻疯树不同种源均有致病性,而对其他植物种类(包括其他腐皮镰孢专化型寄主植物)均不具侵染性;其形态学特征与其他专化型菌系也有明显区别。根据研究结果,建议将引起麻疯树根腐病的腐皮镰孢菌定义为一个新的专化型,即腐皮镰孢麻疯树专化型Fusarium solani Sacc.f.sp.jatrophae。

尖孢镰刀菌遗传多样性研究进展

尖孢镰刀菌是一种主要的土传病原真菌,可侵染100多种具有重要价值的作物,包括经济作物、园艺作物、食用豆类以及豆科牧草等,引发作物枯萎导致根腐病。该菌从根部侵染植物,在植株全生育期均可引起植株发病,严重影响植物的生长发育、产量和品质。尖孢镰刀菌遗传多样性复杂,根据植物寄主已被细分为100多种专化型,同一专化型又可分为不同生理小种。通过植物寄主、生理生化和分子水平等方面综述了尖孢镰刀菌遗传多样性的研究进展,并对存在的问题及今后的研究重点进行了展望,以期为农业生产中尖孢镰刀菌的检测及有效防控提供理论依据。

苦瓜枯萎病菌的鉴定及其遗传多样性分析

对分离获得的32株苦瓜枯萎病菌菌株进行形态学特征和寄主专化型测定，结果表明，测试的苦瓜枯萎病菌株均为尖孢镰刀菌苦瓜专化型（Fusariumoxysporumf．sp．momordicae），这些菌株可以侵染苦瓜和瓠瓜幼苗，但不侵染其他葫芦科瓜类作物。对苦瓜枯萎病菌菌株的rDNA—ITS区（ITS1、5．8S和ITS2）序列进行扩增测序，结果显示其序列长度均为456bp；聚类分析表明测序菌株与镰刀菌属中尖孢镰刀菌不同专化型的菌株聚为一群。利用RAPD标记技术分析苦瓜枯萎病菌的遗传多样性，结果显示苦瓜枯萎病菌株与其他葫芦科瓜类作物枯萎病菌株间的遗传相似系数范围为0．59～0．99，当遗传相似系数为0．85时，供试的48个菌株分成10个类群（G1-10）。在RAPD聚类树中所有苦瓜枯萎病菌株聚在一个分支上（G，群），菌株间的遗传相似系数范围为0．92～1．00，具有较高的遗传相似性，且菌株的聚群与地理来源存在一定的相关性。