斑褐孔菌多糖的分离纯化及结构表征

目的对从斑褐孔菌中分离纯化出的均一酸性多糖BHP90-3L进行结构解析和表征。方法采用DEAE-琼脂糖凝胶、Sephadex G-75等柱色谱,对斑褐孔菌多糖进行分离纯化。运用单糖组成分析、红外分析、甲基化分析和核磁共振图谱分析等方法,对分离得到的斑褐孔菌酸性多糖BHP90-3L的绝对分子量(M_(w))、单糖组成、糖苷键类型、糖苷键连接方式和构象等进行研究,确定其结构。结果BHP90-3L是一种分子量为9.489×10^(3) Da的酸性杂多糖,主要含有甘露糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖,各单糖组成摩尔比为2.78∶1.72∶7.17∶1.00;由GC-MS和核磁结果推测BHP90-3L主链连接方式是→6)-α-D-Man p-(1→、→3)-β-D-Glc p-(1→、→3)-β-D-Glc p A-(1→、→3,4)-α-D-Man p-(1→、→6)-α-D-Man p-(1→,其中→3)-β-D-Glc p-(1→、→3)-β-D-Glc p A-(1→均具有重复单元,侧链仅有β-D-Gal p-(1→。刚果红试验表明BHP90-3L不具有三股螺旋结构。结论斑褐孔菌多糖BHP90-3L是从斑褐孔菌中分离得到的新的均一酸性多糖,对其结构的研究,为斑褐孔菌多糖的进一步开发利用提供参考依据。

斑褐孔菌石油醚提取物体外抗肿瘤活性研究

探讨斑褐孔菌石油醚提取物(PEFP)体外抗肿瘤活性及其机制。采用磺酰罗丹明染色法(SRB法)考察PEFP对人肝癌细胞SMMC-7721、人胃癌细胞SGC-7901、人喉癌上皮细胞Hep-2增殖的影响。倒置相差显微镜、透射电镜观察PEFP作用SMMC-7721后的细胞形态及超微结构的变化;流式细胞术检测PEFP作用SMMC-7721后细胞周期的改变情况。实验结果显示PEFP对上述三种人恶性肿瘤细胞均表现出明显的抑制效果,且呈剂量效应关系,其半数抑制浓度(IC50)分别为52.72、69.18、58.88μg/mL。取1/2 IC50浓度的PEFP作用于SMMC-7721 48 h后,细胞形态结构及细胞周期发生改变,G0/G1期细胞增多,S期细胞明显减少。PEFP可能通过阻滞SMMC-7721细胞周期于G0/G1期来抑制肿瘤细胞的增殖,具有较明显体外抗肿瘤活性。

斑褐孔菌液体培养碳氮源及pH值的优选

利用液体深层发酵方法对斑褐孔菌液体培养碳、氮源及pH值进行了优选。结果表明:斑褐孔菌液体培养基较适碳源为米酒,葡萄糖,适宜的氮源为黄豆粉,酵母浸膏,蛋白胨,适合菌丝体生长及在胞外产生多糖的最适pH值为5.5。

斑褐孔菌不同发酵产物中黄酮含量的比较研究

对利用不同碳源、氮源发酵培养得到的斑褐孔菌菌丝体和野生型斑褐孔菌的子实体进行了黄酮含量的测定。结果表明,以米酒为碳源进行发酵有利于斑褐孔菌菌丝体中黄酮类成分的积累,葡萄糖次之,黄酮含量分别是2.01%,1.64%。黄豆粉为氮源有利于黄酮类成分的积累,酵母浸膏、蛋白胨次之,黄酮含量分别为2.01%、1.82%、1.64%。

中药斑褐孔菌对β-受体的阻滞作用

通过28例β-受体亢进症患者一次性口服中药斑褐孔菌片前后心电图的变化、探讨其对β-受体的影响。结果显示因β-受体亢进所致的异常ST—T波经服用斑褐孔菌后均可恢复正常。经与西药β-受体阻滞剂心得安对照,结果相似。从心电图学角度,提示斑褐孔菌具有对β-受体的阻滞作用。