扶正透邪解毒化瘀方对不同时间点老年肺炎大鼠炎症及免疫功能的影响

目的:探讨扶正透邪解毒化瘀方对多重耐药铜绿假单胞菌肺炎老年大鼠炎症反应与免疫功能的态影响。方法:将实验老年大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、西药对照组、中药组、中药提前给药组、中西医结合观察组,动态观察不同时间点各组老年大鼠炎症指标的变化及淋巴细胞增殖水平的变化。结果:中药提前给药组及中西医结合观察组疗效显著,中药组对感染早期的炎症水平改善明显;中西医结合观察组可使T淋巴细胞增殖能力趋于正常;中药提前给药组、中西医结合观察组能抑制感染后B淋巴细胞的增殖并使其趋于正常。结论:扶正透邪解毒化瘀方能够调节感染早期老年大鼠机体过度的免疫炎症反应,中西医结合治疗能够纠正多重耐药铜绿假单胞菌感染后紊乱的免疫状态,中药提前给药能够对多重耐药铜绿假单胞菌感染后的炎症反应及免疫紊乱起到一定的预防及治疗作用。

基于LC-MS/MS和靶点网络探讨扶正透邪解毒化瘀方对多重耐药铜绿假单胞菌的干预机制

[目的]从药物作用靶点层面探讨扶正透邪解毒化瘀方体外干预多重耐药铜绿假单胞菌的药效物质基础和直接/协同机制。[方法]通过液相色谱-串联质谱联用(LC-MS/MS)、中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)筛选扶正透邪解毒化瘀方化学成分;通过Stitch数据库查找上述成分以及亚胺培南、头孢他啶、环丙沙星作用于铜绿假单胞菌的蛋白靶点;运用Cytoscape 3.9.1构建“中药—化学成分—作用靶点网络图”和“蛋白质-蛋白质互作网络”;筛选该方与抗菌药物共同作用靶点;借助DAVID数据库对靶点进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。[结果]LC-MS/MS共鉴定出108个化学成分,TCMSP数据库共筛选出155个化学成分,去重后共得到162个化学成分,其中42个化学成分能够直接作用于铜绿假单胞菌240个靶蛋白;网络药理学筛选出17个核心成分,以黄酮类、甾醇类、萜类为主,其中β-谷甾醇、槲皮素、木犀草素度值较高;该方分别与亚胺培南、头孢他啶、环丙沙星有3/3/17个共同作用靶点,4种药物共同作用靶点2个,共同作用靶点主要作用于细菌能量和生化代谢、DNA复制、蛋白质功能、表面多糖形成等途径;GO和KEGG富集分析提示该方主要与调节细菌能量和生化代谢、调控DNA/蛋白质稳态、影响细菌胞质胞膜以及干预对细菌起保护作用的表面多糖和生物被膜合成等密切相关。[结论]扶正透邪解毒化瘀方具有多成分、多靶点、多途径干预铜绿假单胞菌的特点,发挥主要干预作用的化学成分以黄酮类、甾醇类、萜类为主,直接/协同抗菌药物干预铜绿假单胞菌的机制与影响细菌遗传、代谢、生物被膜形成等相关。研究从药物作用靶点层面为从天然药物中开发抗菌药物提供了一定的思路和借鉴。

名中医曹志群基于“虚、瘀、毒”理论防治慢性萎缩性胃炎“炎、癌”转化经验

“炎、癌”转化是慢性萎缩性胃炎发生癌变的重要机制。曹志群教授扎根临床多年,对于防治慢性萎缩性胃炎“炎、癌”转化积累了丰富的临床经验,曹老师认为“虚、瘀、毒”为“炎、癌”转化的关键病机,其中正气亏虚是“炎、癌”转化的根本,瘀血、毒邪既是病机演变过程中的病理产物,也是致病因素,该转化总体上呈现出本虚标实、虚实夹杂之特性。曹老师将病因、病机和临床表现三者有机地进行结合,以及综合内镜、病理表现,提出以“扶正化瘀解毒”为基本治则,创立芪莲舒痞方以扶正补虚培中州、化瘀行滞通其络、解毒祛邪以防变,在改善临床症状,逆转萎缩、肠上皮化生、异型增生以及降低胃癌发生率方面,效果显著,体现了中医“治未病”之“既病防变”的原则,为中医防治慢性萎缩性胃炎“炎、癌”转化提供思路和方法。

扶正解毒化瘀方对MDRPA感染肺炎大鼠血清炎症细胞因子水平的影响

目的:观察扶正解毒化瘀方对多重耐药铜绿假单胞菌(MDRPA)感染肺炎大鼠血清炎症细胞因子水平的影响,分析其治疗机制。方法:将150只SD大鼠随机分为5组,每组30只,其中模型组、中药组、哌拉西林/他唑巴坦(TZP)组、中西结合组采用经口气管插管法制备MDRPA急性肺炎模型,空白组则以等量生理盐水代替菌液。造模后1 d、3 d、5 d,TZP组各有10只大鼠分别给予TZP腹腔注射,日3次,中药组各有10只大鼠分别给予扶正解毒化瘀方颗粒剂溶液(7 g/kg)灌胃2次/日,中西结合组各有10只大鼠分别给予上述两种药物干预。药物干预完毕后,每组每个时间点6只大鼠取材,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10、γ干扰素(IFN-γ)水平。结果:①造模后3 d,与模型组比较,中药组和中西结合组血清TNF-α水平均显著降低(P<0.01)。②造模后3 d,与模型组比较,中药组、TZP组和中西结合组血清IL-1β水平均降低(P<0.05或P<0.01);造模后5 d,与模型组比较,TZP组和中西结合组血清IL-1β水平均明显降低(P<0.05)。③各组不同时间点血清IL-6和IL-10水平差异均无统计学意义(P>0.05)。④造模后1 d,与模型组比较,中西结合组血清IFN-γ水平明显升高(P<0.05)。结论:扶正解毒化瘀方可下调MDRPA感染肺炎大鼠血清IL-1β、TNF-α表达,并上调IFN-γ表达,此可能为该方减轻炎症反应、促进机体免疫炎性损伤修复的机制之一。

基于PI3K/AKT/NF-κB信号通路调控细胞凋亡探讨扶正解毒化瘀方抗人呼吸道合胞病毒的作用机制

观察扶正解毒化瘀方对人呼吸道合胞病毒(Human respiratory syncytial virus,HRSV)感染相关细胞凋亡的影响,探究其抗病毒作用机制。体外实验确定扶正解毒化瘀方对人喉癌上皮细胞(Hep-2)的细胞毒作用,选取最大无毒浓度(TC0)进行干预实验;以HRSV A亚型感染Hep-2细胞,设细胞对照组、病毒对照组、利巴韦林药物对照组及扶正解毒化瘀方组,显微镜下观察细胞病变,通过酶联免疫吸附测定(ELISA)检测炎性因子调节的正常T细胞表达和分泌(RANTES)水平,Western Blot检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/苏氨酸激酶(AKT)/核因子κB(NF-κB)通路相关蛋白表达,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测凋亡相关蛋白的mRNA相对水平。与细胞对照组相比,病毒对照组细胞病变明显,细胞上清RANTES水平升高,细胞PI3K/AKT/NF-κB通路相关蛋白AKT、糖原合成酶激酶-3(GSK-3β)、NF-κBp65表达增加,凋亡相关蛋白Fas、Bax、TRAIL的mRNA水平升高,两组间差异具有统计学意义(P<0.05)。而扶正解毒化瘀方能改善细胞病变,显著降低RANTES水平,抑制AKT、GSK-3β、NF-κBp65蛋白表达,降低Fas、Bax、TRAIL mRNA水平(P<0.05)。扶正解毒化瘀方可抑制HRSV感染所致细胞病变,减轻炎症反应,其机制可能与抑制PI3K/AKT/NF-κB通路激活,减少细胞凋亡有关。

扶正解毒化瘀方通过NLRP3炎性体减轻多重耐药铜绿假单胞菌慢性肺炎肺损伤的作用机制

目的:观察扶正解毒化瘀方通过干预NLRP3炎性体减轻多重耐药铜绿假单胞菌(MDRPA)慢性肺炎肺损伤的作用机制。方法:将大鼠随机分为正常组、模型组、中药组、西药组、中+西组,通过经口气管插管法建立MDRPA慢性肺炎大鼠模型。中药组予扶正解毒化瘀方灌胃,每次1.4 g/mL,2次/d;西药组予哌拉西林他唑巴坦钠腹腔注射,每8小时1次;中+西组为两药联用。观察各时点肺组织病理变化。通过qPCR和Western blot观察NLRP3炎性体相关指标的基因和蛋白表达。结果:与模型组比较,中药组NLRP3 mRNA和Caspase-1 mRNA水平在第14天和21天显著降低(P<0.05),中药组、西药组和中+西组第14天时NLRP3、IL-1β蛋白表达水平均显著下降(P<0.05)。与模型组比较,中药组在第7、14天肺泡结构更完整,免疫细胞浸润更少,第21天时免疫细胞浸润和纤维细胞形成也更少。结论:扶正解毒化瘀方能明显减轻MDRPA慢性肺炎大鼠肺组织损伤,可能是通过调节NLRP3炎性体的表达而发挥作用。