GM_1对异种神经移植后再生和修复的研究

目的 :观察GM1 对异种神经移植后神经纤维再生和修复的效果。方法 :移植前将兔胫神经反复冻融处理。选大鼠30只 ,分GM1 组 (20只 ) :移植前将胫神经浸泡于0 1 %GM1 液中10min ;对照组 (10只 ) :未经任何处理 ,将兔胫神经移植于两组大鼠坐骨神经。术后第2、4、6、8和10周 ,将辣根过氧化物酶(HRP)注入大鼠坐骨神经吻合部远侧端。结果 :GM1 组术后第2周和第4周起分别在同侧L4～5脊神经节和腰段脊髓前角见到HRP标记细胞 ,而对照组从第4周和第6周起在同侧L4～5脊神经节和腰段脊髓前角见到标记细胞 ,术后动物不同存活期GM1组标记细胞数均明显多于对照组 (P<0 01) ,标记细胞数量随神经移植后存活期的延长而增加。术后10周有髓纤维再生率GM1 组明显高于对照组 (P<0 01)。结论 :GM1

神经节苷脂GM1联合尼莫地平对脑缺血再灌注后细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响

目的:探讨大鼠脑缺血再灌注损伤后神经节苷脂GM1联合尼莫地平治疗对神经细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达的影响。方法:36只清洁级健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(n=4)、模型组(n=16)、药物治疗组(n=16)。线栓法制备大脑中动脉缺血再灌注模型(MCAO模型),于缺血2h再灌注6h,12h,24h,72h。采用TUNEL法检测神经细胞凋亡,免疫组织化学法染色检测Bcl-2、Bax蛋白,并进行统计学分析。结果:1与模型组比较,药物治疗组神经细胞凋亡计数随再灌注时间的延长显著减少,差异有显著性(P<0.05)。2与模型组比较,药物治疗组随再灌注时间延长,Bcl-2蛋白表达明显上调;而Bax蛋白表达随再灌注时间的延长,表达逐渐减弱,有显著性差异(P<0.05)。结论:在脑缺血半暗带区,神经节苷脂联合尼莫地平干预治疗,通过上调Bcl-2表达,以及下调Bax表达,能够减少神经细胞凋亡,从而发挥神经细胞保护作用。

舒血宁和神经节苷酯GM1联合治疗血管性痴呆33例

目的:观察舒血宁和神经节苷酯GM1联合治疗血管性痴呆的临床疗效。方法:以舒血宁和胞二磷胆碱联合治疗作为对照组,舒血宁和神经节苷酯GM1联合治疗为观察组,以MMSE评分、FAQ量表、神经功能缺失程度评分等评价治疗效果。结果:舒血宁和神经节苷酯GM1联合治疗组对血管性痴呆患者MMSE评分、FAQ量表、神经功能缺失程度评分的影响较对照组明显。结论:舒血宁和神经节苷酯GM1联合能更进一步改善血管性痴呆患者的认知功能和日常生活能力。

GM1对缺氧缺血新生大鼠神经元凋亡及Bax/Bcl-2表达的影响

目的观察新生大鼠缺氧缺血(hypoxia-ischemia,HI)性脑损伤后脑细胞凋亡的情况,探讨单唾液酸四己糖神经节苷脂(single four hexose ganglioside sialic acid,GM1)对HI后神经元及凋亡相关基因Bax/Bcl-2表达的影响。方法选择新生7日龄SD新生大鼠108只,随机分为3组,缺氧缺血组(HI组),假手术对照组(control组),缺氧缺血+神经节苷脂组(GM1组)。每组36只。采用结扎右侧颈总动脉并吸入低氧混合气体制备缺氧缺血性脑损伤(hypoxia-ischemia brain damage,HIBD)模型。用原位末端转移酶标记技术法检测神经元凋亡情况,用免疫组织化学链霉亲合素生物素酶复合物法检测Bax/Bcl-2的表达。结果正常新生大鼠海马组织神经元凋亡率较低,与对照组比较HI组新生大鼠神经元凋亡明显增加(P<0.05),GM1可明显改善HI诱导的神经元凋亡。正常新生大鼠海马组织Bax和Bcl-2均有一定程度表达,HI可导致Bax表达增加,Bcl-2表达减少,腹腔给于GM1可逆转HI诱导的Bax和Bcl-2表达。结论 GM1可明显抑制HI诱导的神经元凋亡,调节Bax/Bcl-2表达可能是其脑保护的作用机制之一。

神经节苷脂GM1治疗急性脑梗死的临床观察

急性脑梗死是神经内科常见病，其发病率呈上升趋势，目前尚无特效药物治疗，笔者应用神经节苷脂GM1（申捷）治疗急性脑梗死，取得了较好的疗效，现总结如下。

新生大鼠脑缺氧缺血后海马CA_1区HSP70表达及GM_1作用

目的 :研究新生大鼠缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)后海马CA1区 70ku热休克蛋白 (HSP70 )表达、病理学损伤变化和外源性单唾液酸四已唐神经节苷脂 (GM1)对HSP70表达及病理学损伤的影响 .方法 :建立HIBD模型 ,用免疫组化及苏木素 伊红 (HE)染色方法检测缺氧缺血 (HI)和GM1干预后不同时间点脑海马组织HSP70阳性细胞及病理学改变 .结果 :HI后新生大鼠海马CA1区仅能检出少量阳性HSP核蛋白 (仅在核内表达的蛋白 ) ,海马CA1区神经元呈较严重的缺血损伤性改变 .而GM1组可见应激蛋白HSP70明显表达 ,2 4h达高峰 .结论 :GM1可使新生大鼠海马CA1区HSP70表达上调 ,减轻脑缺氧缺血后病理损伤 。

脑出血微创穿刺引流术腔内注射GM-1对脑水肿影响的影像学观察

目的在脑出血微创穿刺引流术腔内注入单唾液酸四已糖神经节苷脂钠(monosialoteterahexosylgangliosides,GM-1)对脑水肿的影响进行临床初步观察。方法 47例脑出血患者微创引流术适应证者,均进行微创引流术冲洗,并间断每次注入2万U尿激酶以溶解血肿。治疗组(n=24)在血肿腔内间断注入GM-1(20 mg以3mL生理盐水稀释共5 mL,8 h 1次,连用3 d);单纯引流的常规治疗组(n=23),通过定期脑CT测定比较脑水肿的影像学变化。结果治疗组患者脑水肿程度明显低于对照组(P<0.05)。结论脑出血微创引流术血肿腔内注入神经节苷脂可明显降低脑出血引发的脑水肿程度。

单唾液酸神经节苷脂治疗急性缺血性脑梗死的临床研究

目的探讨应用单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)在急性脑梗死中的治疗作用。方法将59例急性脑梗死患者随机分为治疗组和对照组。对照组采用疏血通注射液,治疗组在对照组基础上加用GM1注射液,分别在治疗前后采用美国国立卫生研究院卒中评分法(NIHSS)和日常生活活动量表(Barthel指数)对患者进行神经功能评分和日常生活活动的能力评分。结果治疗后治疗组NIHSS评分和BI评分〔分别为(11.6±4.6)分和(49.1±7.4)分〕与对照组〔分别为(14.5±2.5)分和(35.1±4.6)分〕比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论GM1治疗急性缺血性脑梗死有显著疗效,它能促进神经功能的早期康复。

神经节苷脂促进周围神经再生的实验

目的:观察神经节苷脂对冷冻处理后的异体周围神经移植再生的影响。方法:实验于2001-06/2003-12在广西医科大学中心实验室完成。选取健康成年新西兰大白兔36只,取4只作为供体,切取双侧坐骨神经,制成10mm神经段,深低温冷冻储存2周备用。其余32只作为受体,随机分为神经节苷脂组与正常对照组,16只/组,将兔左侧坐骨神经造成10mm长缺损,用复温后的同种异体神经进行移植桥接。神经节苷脂组每天每只局部注射质量浓度为1g/L的神经节苷脂溶液1mL,连续14d;正常对照组不做任何处理。两组分别于术后2,4,8,12周随机取4只进行电生理检查、组织学观察、超微结构观察、肌肉湿重测定以及形态学定量分析。结果:作为受体的32只兔全部进入结果分析,中途无脱落。①两组兔术后大体观察比较:正常对照组均有足底及足趾溃疡,神经节苷脂组有6只发生足跟溃疡。两组动物左后肢均无力,行走不稳。②两组兔术后不同时期电生理检测结果比较:与正常对照组传导速度、电位波幅比较,术后2,4,8周神经节苷脂组基本无变化(P>0.05),术后12周明显升高[(28.62±2.42),(21.78±2.43)m/s;(5.48±0.36),(4.67±0.53)mV;P均<0.05]。③两组兔术后不同时期组织学观察结果比较:术后2周,正常对照组有髓神经纤维髓鞘崩解,许旺细胞增生不明显;神经节苷脂组崩解反应较正常对照组慢,许旺细胞增生明显。术后4周,正常对照组许旺细胞增生活性低,有髓神经纤维密度低;神经节苷脂组许旺细胞增生活跃,有髓神经纤维密度较大;术后12周,正常对照组有髓神经纤维数量少,神经束膜间毛细血管增生明显,神经纤维瘢痕化明显;神经节苷脂组有髓神经纤维数量较多,有少许神经纤维瘢痕化,神经束膜间毛细血管清晰。④两组兔术后12周超微结构观察比较:正常对照组可见结缔组织无定形结构中夹杂少量变性神经纤维,轴突电子密度低且有空泡,许旺细胞细胞器及有髓轴突稀少,部分再生轴突及髓鞘发生wallerian变性脱髓;神经节苷脂组可见大量神经纤维髓鞘增厚和)旺氏细胞细胞器更丰富,轴突电子密度深且均匀,许旺细胞外有完整基膜包绕,变性神经纤维少。⑤两组兔术后不同时期肌肉湿重Guadros指数的测定:术后4,8,12周,神经节苷脂组均明显高于正常对照组(P均<0.05),表明正常对照组肌萎缩较重。⑥两组兔术后不同时期再生神经纤维各项指标测定结果比较:与正常对照组有髓神经数目、纤维直径、髓鞘厚度及轴突直径比较,术后2,4,8周神经节苷脂组基本无变化(P>0.05),术后12周均明显高于正常对照组[(2183.6±184.3),(1520.2±124.3)个/400倍视野;(16.45±1.86),(10.08±1.62)μm;(6.48±0.72),(4.72±0.56)μm;(4.40±0.42),(3.04±0.34)μm;P均<0.05]。结论:再生神经能够顺利地通过移植体进入远端,使再生神经传导速度、有髓神经纤维数目、肌湿重等指标明显升高,证明兔同种异体神经经冷冻处理后桥接神经缺损可引导神经纤维再生,且外源性神经节苷脂可促进异体移植周围神经的再生。

神经节苷脂对脑缺血再灌注大鼠海马Fas表达的影响

目的探讨单唾液酸神经节苷脂(GM)1对脑缺血再灌注大鼠海马Fas表达的影响。方法 72只SD大鼠随机分为假手术组(8只)、GM1治疗组(32只)、缺血再灌注组(32只)。GM1治疗组和缺血再灌注组依据缺血后再灌注的不同时间点再分为6h、12h、24h、3d共4个小组。应用免疫组织化学方法和Western blot方法检测各组大鼠海马Fas蛋白的表达。结果免疫组织化学方法结果显示假手术组大鼠海马有一定量的Fas蛋白表达(0.17±0.02),而缺血再灌注组大鼠海马的Fas蛋白阳性表达显著升高,各时点分别为0.42±0.11、0.51±0.13、0.55±0.13及0.62±0.15,3d时表达最高;与相同时间点的缺血再灌注组比较,GM1治疗组的Fas蛋白阳性表达则明显降低,各时点分别为0.29±0.09、0.34±0.11、0.37±0.12、0.43±0.12(均P<0.05)。Western blot结果与此结果类似。结论 GM1很可能通过减少Fas蛋白的表达参与脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。

神经节苷脂联合丹参酮治疗急性脑梗死患者的疗效观察

目的观察神经节苷脂联合丹参酮对急性脑梗死患者的治疗效果。方法急性脑梗死患者86例,按病例对照研究的方法分组,对照组43例,以丹参酮注射液30 mL+5%葡萄糖注射液250 mL静脉滴注,1次/d,共14 d;联合治疗组43例,在丹参酮治疗基础上联合以神经节苷脂80 mg+5%葡萄糖注射液250 mL静脉滴注,1次/d,共14 d。两组基础用药治疗相同。比较两组患者于治疗前、后神经功能缺损程度(NIHSS)及日常生活活动量(ADL)评分,并进行疗效评定。结果联合治疗组在治疗后14 d NIHSS评分及ADL评分与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组临床疗效明显优于对照组(P<0.05),其神经功能缺损程度明显改善,日常生活能力明显提高。结论神经节苷脂联合丹参酮能更好地改善急性脑梗死患者的预后,降低患者的神经功能的缺损程度。

GM1神经节苷脂贮积症一例临床特点及GLB1基因突变分析

目的探讨GM1神经节苷脂贮积症的临床表现及β-半乳糖苷酶基因(GLB1)突变特点。方法回顾分析1例2018年3月于郑州大学附属儿童医院神经内科就诊的,经酶学及基因检测诊断的GM1神经节苷脂贮积症患儿的临床资料,并复习相关文献。结果男性患儿,4岁1个月,主要临床表现为精神运动发育倒退;β-半乳糖苷酶活力低(8.0 nmol·g^-1·min^-1)。目标序列捕获和二代测序检测发现患儿GLB1基因内含子区域存在两处杂合突变:c.458-2A(IVS4)>G和c.1068+5G(IVS10)>A,均为剪切位点突变;Sanger测序验证结果显示c.1068+5G(IVS10)>A突变来源于患儿母亲,c.458-2A(IVS4)>G为新发变异,患儿该基因为复合杂合突变。结论GM1神经节苷脂贮积症是一种罕见的神经退行性疾病,酶活性检测及基因检测有助明确诊断。

神经节苷脂GM1与神经系统疾病

神经节苷脂是一类含唾液酸的鞘糖脂，在脑内的含量非常丰富。它不但能够促进神经细胞分化、神经突生长以及突触形成，而且参与了神经可塑性的调节和脑损伤后的功能恢复。GM1是迄今研究最为深入的神经节苷脂，对细胞内Ca^2＋稳态的调节被认为是GM1神经营养／神经保护作用的基础，而它与神经营养因子的相互作用则是其神经保护作用的关键。此外，它还具有抗兴奋性毒性、抗氧化、扩血管等作用。各种神经变性疾病以及缺血缺氧性脑病均与神经元脱失和凋亡有关，而GM1的神经营养序申经保护作用能在这些疾病的治疗中发挥重要作用。目前，GM1已被广泛用于帕金森病、卒中、新生儿缺血缺氧性脑病、脑外伤、脊髓损伤以及周围神经病的治疗，对其作用机制的进一步研究有望为上述疾病的治疗提供新的思路。

神经节苷脂对缺氧缺血性脑病新生儿神经精神运动发育商值的影响

目的探讨神经节苷脂(GM1)对缺氧缺血性脑病(HIE)新生儿神经行为发育的影响。方法 68例HIE新生儿,随机分为GM1治疗组35例,常规治疗组33例。2组患儿分别于3个月龄和6个月龄时测定神经精神运动发育商(DQ)值。结果 GM1治疗组HIE患儿3个月龄和6个月龄DQ值均高于常规治疗组,差异有统计学意义(P<0.05);GM1治疗组6个月龄发育障碍发生率低于常规治疗组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 GM1可改善HIE新生儿的神经行为发育,降低HIE患儿发育障碍发生率。

GM-1对人胚胎干细胞定向诱导分化神经细胞的作用

目的探索外源性神经节苷脂(GM-1)对人胚胎干细胞(hESC)诱导分化成神经细胞的作用,为临床治疗提供理论依据。方法将人胚胎干细胞(SDU-hESm-1)悬浮培养形成拟胚体(EB),EB再贴壁培养诱导分化神经细胞,分别于悬浮培养EB阶段和EB贴壁培养阶段的神经分化培养基中加入浓度为0、0.5、5、50μg/mL的GM-1,观察EB的形成,计数神经标记性抗原Nestin和β-Tubulin阳性细胞百分率。结果含GM-1的神经分化培养基诱导生成"透亮EB",分化出Nestin和β-Tubulin阳性细胞明显多于不含GM-1培养基诱导出的神经细胞数量,不含GM-1形成的EB发黑;在悬浮培养形成EB开始加GM-1比EB贴壁培养开始加GM-1产生Nestin和β-Tubulin阳性细胞数目更多,但2个加GM-1阶段产生的神经细胞百分率均随GM-1浓度增加而增大。结论首次发现GM-1可以诱导hESC定向分化神经细胞,定向产生神经前体细胞(Nestin阳性),在hESC定向分化神经细胞的过程中,悬浮培养EB阶段加入GM-1更有利于hESC的定向分化。

单唾液酸四己糖神经节苷脂钠治疗自发性脑出血恢复期的疗效观察

目的观察单唾液酸四己糖神经节苷脂钠注射液在治疗自发性脑出血恢复期的疗效和安全性。方法用前瞻、随机、对照的方法选择自发性脑出血恢复期(即发病3周)患者62例,随机分为注射液治疗组32例和对照组30例,治疗组予以单唾液酸四己糖神经节苷脂钠注射液40 mg加入0.9%氯化钠注射液250 mL静脉滴注,每天1次,疗程15 d;对照组予以胞磷胆碱0.75 g加入0.9%氯化钠注射液250 mL静脉滴注,每天1次,疗程15 d。同时于治疗前及治疗5、10、15 d采用CT扫描,计算水肿及血肿大小,并对两组患者进行Barthel Inclex评分,根据两组分值结果进行疗效评判。结果治疗5、10、15 d治疗组水肿及血肿少于对照组(P<0.05),Barthel Inclex评分指数优于对照组(P<0.05)。结论单唾液酸四己糖神经节苷脂钠注射液治疗自发性脑出血恢复期的疗效明显优于现有常规治疗方法。

GM1治疗急性脑梗死的疗效观察

目的:评价GM 1治疗急性脑梗死的疗效。方法:将120例急性脑梗死患者分为两组,分别给予GM 1(治疗组)和胞二磷胆碱注射液(对照组)治疗15 d。结果:治疗后两组M ESSS评分有统计学差异(P<0.05),临床总有效率治疗组为74.3%,对照组42.7%,两组比较有统计学差异(P<0.01)。结论:GM 1治疗急性脑梗死有明显疗效。

两种剂量GM1注射液治疗急性脑梗死的临床研究

目的:观察不同剂量神经节苷脂(GM1)对急性脑梗死患者神经功能恢复的治疗效果。方法:120例急性脑梗死患者随机分为大剂量GM1组(n=40)、小剂量GM1组(n=40)和安慰剂组(n=40)。在治疗前1d、治疗后14d时分别对患者神经功能评价。结果:治疗后,各组的NDS评分下降、日常生活活动能力(Barthelindex,BI)评分提高;与安慰剂组相比,GM治疗组患者神经功能恢复水平明显提高(P<0.05);GM治疗组组间比较,大剂量GM1组治疗效果好于小剂量GM1组(P<0.05)。结论:GM1能够促进急性脑梗死损伤后神经功能的恢复,疗效呈剂量依赖性。

牛蒡子复方制剂对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨牛蒡子复方制剂(阿克亭)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其可能的机制。方法:①实验于2004-09/2005-01在哈尔滨医科大学动物实验中心及病理实验室完成。选用健康雄性Wistar大鼠84只。将大鼠随机分为6组:假手术组,模型组,神经节苷脂组及牛蒡子复方制剂大、中、小剂量组,每组14只,每组又随机分为再灌注1,24h2个时相点,每个时相点7只进行观察。②采用改良线栓法制作大脑中动脉缺血再灌注模型,每组模型均缺血30min,随机使其中的7只再灌注1h,另外7只再灌注24h。神经节苷脂组在缺血即刻腹腔注射神经节苷脂(购自TRBPharmaS.A,2mL/支,生产批号20037)30mg/kg,牛蒡子复方制剂(牛蒡子生药,3g/mL,生产批号20050618,由乌苏里江制药责任有限公司提供)大、中、小剂量组在缺血即刻分别腹腔注射牛蒡子复方制剂100,50,10mg/kg,模型组给予等量生理盐水。③于大鼠缺血30min再灌注1,24h进行神经病学评分(0分:无神经功能缺失症状,活动正常者;1分:不能伸展对侧前爪者;2分:爬行时出现向左转圈者;3分:行走时身体向偏瘫侧倾倒者;4分:不能自发行走,意识丧失者)。④采用苏木精-伊红染色,光镜下观察脑组织变性坏死程度。⑤采用免疫组化分析方法观察Caspase-3蛋白的表达变化。⑥多组间比较采用单因素方差分析,同一时间点两组间比较采用Dunnett-t检验,不同时间点的比较采用两样本t检验。结果:进入结果分析大鼠保持为84只。①神经病学评分:神经节苷脂组和牛蒡子复方制剂各剂量组明显低于模型组(t=-2.951～-5.477,P<0.05),牛蒡子复方制剂各剂量组与神经节苷脂组比较,差异不明显(P>0.05)。②病理形态改变:模型组再灌注1h可见部分神经细胞核浆分界不清,细胞水肿;模型组再灌注24h病灶中心区神经细胞脱失范围增大,梗死血管周围出现大片空泡区。神经节苷脂组及牛蒡子复方制剂各剂量组与模型组比较,坏死区缩小,神经元受损减轻。③脑组织Caspase-3阳性细胞数:模型组再灌注1和24h明显多于假手术组(t=23.221,25.025,P<0.01),模型组、神经节苷脂组、牛蒡子复方制剂各剂量组再灌注24h时明显多于再灌注1h(t=2.298～4.322,P<0.05);神经节苷脂组、牛蒡子复方制剂各剂量组再灌注1和24h明显少于模型组(t=-6.823～-15.917,P<0.01);牛蒡子复方制剂小剂量组明显多于神经节苷脂组和牛蒡子复方制剂大、中剂量组(t=6.080,6.336,P<0.01)。结论:Caspase-3在局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织中活性显著增高;神经节苷脂及牛蒡子复方制剂均能降低神经功能缺失评分、抑制Caspase-3的激活,提示其脑保护作用可能与抑制缺血区Caspase-3激活从而抑制细胞凋亡有关,牛蒡子复方制剂大中剂量抑制Caspase-3激活的作用强于小剂量,与神经节苷脂作用差异不明显。