吗啡诱导大鼠镇痛耐受和脊髓GIRK1-2表达减少

【目的】观察G蛋白门控内向整流钾离子通道(GIRK)亚单位GIRK1和GIRK2在吗啡耐受大鼠脊髓背角的表达变化并探讨其调控机制。【方法】成年雄性SD大鼠连续7 d鞘内注射吗啡(15μg/d)建立吗啡耐受模型。在每天吗啡注射前30 min,鞘内注射蛋白激酶C-ε(PKCε)选择性抑制剂εV1-2(10μg),观察对吗啡耐受以及脊髓背角GIRK1和GIRK2表达的影响。24只大鼠随机平均分成四组:生理盐水组(saline)、吗啡组(morphine)、吗啡+生理盐水组(morphine+saline)和吗啡+εV1-2组(morphine+εV1-2)。所有大鼠在1 d、3 d、5 d和7 d,药物注射前和吗啡注射后30 min后检测热痛阈值,在第7天行为学测试结束后,免疫荧光检测脊髓背角GIRK1和GIRK2的表达。【结果】荧光双染显示,GIRK1和GIRK2主要分布于大鼠脊髓背角I-Ⅱ板层,且与μ阿片受体(MOR)共染。与生理盐水组相比,连续7 d鞘内注射吗啡导致吗啡镇痛效应显著下降(P<0.001),同时导致脊髓背角GIRK1(22.45±10.58vs.62.83±20.80,P<0.001)和GIRK2(23.67±8.78 vs.50.17±11.05,P=0.001)表达显著降低。荧光双染显示,PKCε与GIRK1和GIRK2在脊髓背角共染。鞘内注射εV1-2可以有效抑制吗啡耐受的形成(P<0.001),且抑制吗啡诱导的GIRK1(54.50±10.37 vs.19.33±9.48,P<0.001)和GIRK2(39.83±6.24 vs.15.83±9.58,P=0.001)表达降低。【结论】脊髓背角GIRK1和GIRK2下调与吗啡耐受密切相关,PKCε是吗啡诱导GIRK1和GIRK2下调的重要原因。

瑞芬太尼下调大鼠背根神经节和脊髓背角GIRK 2的表达

【目的】观察G蛋白门控内向整流钾离子通道亚单位2(GIRK2)在瑞芬太尼诱导的痛觉过敏大鼠背根神经节和脊髓背角中的表达和分布的变化。【方法】成年雄性SD大鼠尾静脉输注瑞芬太尼4μg/(kg·min)2 h建立痛觉过敏模型。瑞芬太尼注射后6 h、1 d、3 d和5 d,采用免疫荧光化学法观察GIRK2在瑞芬太尼诱导痛觉过敏大鼠的背根神经节(DRG)和脊髓背角中分布的变化。采用免疫印迹法检测大鼠背根神经节和脊髓背角GIRK2总蛋白和膜蛋白的表达。最后,采用行为学评价瑞芬太尼输注后,鞘内注射GIRK2特异性激动剂ML297对痛阈的影响。【结果】免疫荧光结果显示,在背根神经节和脊髓背角I-II板层,GIRK2主要与IB4阳性的小神经元及其神经纤维共定位,而瑞芬太尼注射后GIRK2表达显著降低。免疫印迹结果显示,静脉输注瑞芬太尼1 d后,与对照组相比,背根神经节GIRK2总蛋白(0.47±0.10 vs.1.01±0.17,P<0.001)和膜蛋白(0.47±0.11 vs.1.06±0.12,P<0.001)表达水平均显著减少;与背根神经节结果相一致的是,脊髓背角GIRK2总蛋白水平(0.52±0.09 vs.1.10±0.08,P<0.001)和膜蛋白表达水平(0.54±0.10 vs.1.01±0.13,P<0.001)也显著降低。行为学结果显示,与生理盐水组相比,在瑞芬太尼处理大鼠,ML297延长热撤足潜伏期的作用显著降低(P<0.001)。【结论】持续静脉输注瑞芬太尼可能通过诱导大鼠背根神经节和脊髓背角GIRK2表达下调诱发痛觉过敏。

G蛋白激活的内向整流型钾通道4基因研究进展

G蛋白激活的内向整流型钾通道4(GIRK4)是G蛋白偶联内向整流型钾通道家族成员之一,由KCNJ5编码,广泛分布于哺乳动物心、脑等组织器官。近年研究发现,GIRK4基因异常表达与心房纤颤相关,而且可能与肥胖、代谢综合征等众多其他临床疾病的发生、发展密切相关,阐明GIRK4基因在临床疾病中的病理生理机制对探讨一些临床疾病新的诊治思路具有重要的开拓性意义。

G蛋白门控内向整流钾通道在物质成瘾中的研究进展

G蛋白门控内向整流钾(GIRK)通道在中枢神经系统中广泛分布,具有维持神经元静息电位、调节兴奋性和神经递质释放等重要作用。研究表明,成瘾行为与大脑奖赏系统中GIRK通道的表达和活性关系密切,GIRK通道可能成为成瘾治疗的潜在靶点。本文总结了近年来GIRK通道在结构、脑内分布以及物质成瘾中的研究进展,为深入理解物质成瘾的分子调控机制提供理论基础,也为临床治疗提供新的分子靶标和治疗策略。

KCNJ11基因单核苷酸多态性E23K与2型糖尿病遗传易感性相关性分析

目的探讨钾离子内向整流通道蛋白亚单位11（potassium ion inward rectifying channel protein subunit 11,KCNJ11）基因E23K多态性与2型糖尿病（type 2 diabetes，T2DM）遗传易感性的关系。方法100例确诊T2DM患者为观察组，体检健康者100例为对照组，采用PCR-限制性片段长度多态性检测2组外周血有核细胞基因组DNA中KCNJ11基因E23K位点多态性，比较2组KCNJ11基因频率和等位基因频率，分析T2DM的相关危险因素。结果观察组体质量指数、腰臀比、三酰甘油、总胆固醇、空腹血糖、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数和非酯化游离脂肪酸高于对照组，高密度脂蛋白胆固醇、胰岛0细胞功能指数低于对照组（P〈0．05）；观察组KCNJ11基因E23K位点EE、EK、KK3种基因频率（38％、44％、18％）和E、K等位基因频率（60％、40％）与对照组（EE为33％、EK为52％、KK为15％，E为59％、K为41％）比较差异均无统计学意义（P〉0．05）；胰岛β细胞功能指数（OR=0．096，95％CI：0．316～0．441，P=0．000）、高密度脂蛋白胆固醇（OR=0．084，95％CI：0．039～0．268，P=0．000）是T2DM的保护因素，三酰甘油（OR=1．382，95％CI：1．082～1．964，P=0．041）、腰臀比（OR：2．765，95％CI：1．182～7．562，P=0．040）是T2DM的危险因素。结论KCNJ11基因E23K多态性与T2DM遗传易感性关系无明显相关性，胰岛β细胞功能指数和高密度脂蛋白胆固醇是T2DM的保护因素，三酰甘油和腰臀比是T2DM的危险因素。