基因转染Gβγ亚基抑制剂对哮喘小鼠β受体水平和环磷酸腺苷的影响

目的研究基因转染Gβγ亚基抑制剂对哮喘小鼠β受体水平和环磷酸腺苷(cAMP)的影响。方法建立哮喘小鼠动物模型,经尾静脉注射转染携有Gβγ亚基抑制剂基因(βARKct)的表达质粒。用Westernblot检测基因表达。放免法检测小鼠肺部的β受体和cAMP的水平。结果(1)哮喘小鼠β受体和cAMP水平均比正常对照组明显下降(P<0.05)。(2)βARKct在经基因转染7d后的小鼠肺部有表达。(3)βARKct转染后肺部β受体的数目和cAMP受体水平均比空载质粒转染组显著上调(P<0.05)。结论基因转染βARKct对哮喘小鼠β受体和cAMP的下降有抑制作用。

G蛋白β、γ亚基对M2受体的磷酸化的影响

目的:探讨G蛋白β、γ亚基在调节G蛋白偶联受体激酶活性的重要作用和G蛋白β、γ亚基影响M2受体磷酸化新的作用机制。方法:利用四个柱层析分离G蛋白α亚基与G蛋白β、γ亚基;将纯化的G蛋白β、γ亚基、GRK-2,[γ-P32]标记的ATP与mAChR2,共同保温,聚丙烯酰胺凝胶电泳,凝胶片干燥后放射性自显影检测M2受体磷酸化结果。结果:G蛋白β、γ亚基在没有激动剂存在的情况下明显增强M2受体的磷酸化。氨甲酰胆碱明显增强M2受体的磷酸化,阿托品或肝素(GRK2抑制剂)完全阻断M2受体的磷酸化。M2受体的磷酸化是依赖激活剂如氨甲酰胆碱作用发生的,这种依赖关系呈明显的剂量关系。结论:G蛋白β、γ亚基是通过上调GRK2活性增强M2受体的磷酸化的。说明Gβγ同Gα一样均可引起效应蛋白的激活,在细胞信号转导中起同样重要作用,共同介导一系列的生物学效应。

G蛋白偶联受体激活Rho GTPases的研究

G蛋白偶联受体是细胞表面一类重要的受体蛋白。它将各种胞外刺激传导入胞内 ,促使位于G蛋白下游的RhoGTPases活化 ,活化的RhoGTPases作用于效应因子后调控MAPK及转录因子的活性 ,从而调控细胞的增殖、分化或调亡。但这一复杂的调控机制还未被完全了解 ,本文拟从GPCRs的多样性和G蛋白α、β和γ亚基在信号通路中不同程度的激活 ,来探讨G蛋白偶联受体活化RhoGTPases的可能机制。

心肌细胞L型Ca^2＋通道激活的信号转导

心肌细胞膜上的L型Ca^2+通道具有重要的生理意义，尤其在信号转导中发挥重要作用。近年来，由于膜片钳与分子生物学技术的发展，人们对离子通道的认识更加深入。有关L型Ca^2+通道的信号转导途径日渐清晰，本文分别在蛋白激酶A、蛋白激酶C、磷脂酰肌醇3激酶、G蛋白βγ亚基等途径对心肌L型Ca^2+通道调节信号转导的研究进展作一综述。

Farlp等重要信使分子与真核细胞的定向功能

目的 :综述真核细胞信号传导通路在其趋化、内吞、分化等生命活动中的作用。方法 :查阅近年来主要有关文献分析评述。结果 :以受体耦联G蛋白为起点 ,有Far1p等重要信使分子参与的信号传导通路 ,对酵母菌有性生殖过程中的定向移动有重要作用。结论