^bⅡ6和弦在肖邦《g小调叙事曲》中的“控制力”

《g小调叙事曲》是肖邦创作的第一首钢琴叙事曲,在这首叙事曲中,为了满足叙事的需要,肖邦运用了许多独特的手法:如运用多种曲式原则共建的混合曲式来构建作品;沿用主题—动机贯穿发展法来组织音乐材料;运用换音来对旋律进行华彩装饰等。通过这些创新性手法的运用,使得内容与形式获得统一,达到良好的音乐叙事目的。然而通过分析我们发现:整部作品在乐思呈示与发展、调性布局与曲式结构等方面,bⅡ6和弦发挥着极其重要的结构作用。其作品的主题、调性、曲式结构都置于bⅡ6和弦的控制之下,音乐形象凝练集中、鲜明生动,形式与内容有机结合,音乐和诗歌完美统一。

Toll样受体4参与介导黄曲霉毒素G1对大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的致损伤作用

目的在基因水平上探讨Toll样受体4(TLR4)参与介导黄曲霉毒素G1(AFG1)对肺泡Ⅱ型上皮细胞的致损伤生物学效应,及其作用机制和途径。方法分离、纯化、培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞并配置3个不同浓度的AFG1液体。实验随机分为正常组、实验组、溶剂对照组,每组6个样本。正常组加入同等量的无菌生理盐水;实验组加入不同浓度的AFG1液(高、中、低浓度分组),溶剂对照组加入同等量的二甲基亚砜(DMSO),终浓度为0.4 ml/L;同时处理24 h后在上述5组提取细胞mRNA,采用RT-PCR法检测各组TLR4 mRNA、NF-κBmRNA、TNF-αmRNA和IL-6mRNA的表达水平。结果正常组肺泡Ⅱ型上皮细胞上TLR4 mRNA、NF-κBmRNA、TNF-αmRNA和IL-6mRNA的表达量较低。实验组经AFG1液作用后,各项指标的表达量显著高于正常组(P<0.05)和溶剂对照组(P<0.05),且呈浓度依赖性增高。溶剂对照组各项指标的表达量与正常对照组相比,无显著性差异(P>0.05)。结论 TLR4→NF-κB→炎症介质信号转导通路参与AFG1对AT-Ⅱcells的损伤作用。

基于π…π和C-H…π作用力构筑的磺酰腙镍(Ⅱ)配合物的超分子组装(英文)

在温和条件下,以对甲苯磺酰氯为初始原料合成了具有新颖Ni-O(磺酰基)配键的磺酰腙镍(Ⅱ)配合物NiL2(HL:4-甲基-N′-(吡啶-2-亚甲基)苯磺酰肼)。晶体结构研究表明,该配合物仅通过π…π和C-H…π作用组装成两种不同类型的二聚体,一是通过平行四重芳基环绕(P4AE:由面对面(OFF)和边对面(EF)π堆积组成)相互作用组装而成,二是仅通过OFF相互作用进行组装。沿着c轴方向,两类二聚体通过P4AE和OFF作用的组合,以"头碰头"形式组装成一维链。每个二聚体均包含了两种不同的对映体形式。利用B3LYP/6-31++G**方法,对两种二聚体结构单元单点能计算表明,具有P4AE作用的二聚体存在着OFF和EF的协同作用,也印证和和支持了实验结果。光谱研究确证溶液中Ni(Ⅱ)和HL形成了物质的量之比为1∶2配合物。

病毒性乙型肝炎患者Th细胞亚群与ALT、IgG、C_3的相关性研究

目的 :探讨慢性重型乙型肝炎、慢性乙型肝炎、乙型肝炎无症状病毒携带者血清IL 2、IFN γ、IL 4与ALT、IgG、C3 的关系 ,了解乙肝患者肝损伤的病理机制。方法 :6 4份血清用ABC ELISA法测定IL 2、IL 4、IFN γ ,用透射比浊法测定IgG、C3 ,用酶法测定ALT。结果 :(1)血清ALT、IgG水平在无症状病毒携带者、慢性肝炎、慢性重型肝炎中水平逐次增高 ,C3 水平却依此降低 ;(2 )慢性重型肝炎ALT与IL 2、IFN γ有正相关性、与IL 4无显著相关性 ,IgG与IL 4无显著相关性 ,C3 与IL 2、IFN γ负相关 ;慢性肝炎ALT与IL 4、IL 2、IFN γ均无显著相关性 ,IgG与IL 4呈正相关、而与IL 2、IFN γ无相关性 ;(3)动态观察无症状病毒携带者 6月 ,测定以上 5个指标 3次 ,3次结果 5个指标均无显著性差异。结论 :慢性重型肝炎以Th1类细胞因子占优势 ,慢性肝炎以Th2类细胞因子占优势 ,进一步证实肝功能损害的严重程度和Th1的免疫应答的强度有关 ,IgG和C3 随着病情进展而变化。

2株GⅡb亚群猪流行性腹泻病毒分离、鉴定及变异分析

为了分离猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)变异毒株,了解其进化趋势及致病性,并为后续PEDV特性及疫苗研发提供候选毒株,本研究将PEDV阳性样品接种于Vero细胞传代,采用间接免疫荧光试验(IFA)对分离株进行鉴定,基于RT-PCR及第2代测序技术进行全基因组测序、同源性比对及遗传进化分析,通过动物致病性试验进行毒力测定。IFA表明2株分离株能与PEDV S蛋白抗体发生特异性反应,确定为PEDV。2株毒株与参考毒株核苷酸同源性为95.6%~98.7%,属于变异毒株GⅡb群。分离的2株毒株分别命名为CH-HNKF-03和CH-HNPDS-01株。CH-HNKF-03和CH-HNPDS-01对哺乳仔猪攻毒后18 h即可发病,于24~56 h均出现典型的水样腹泻、呕吐、消瘦、脱水等症状,96 h内全部死亡。综上所述,本研究获得2株GⅡb亚群PEDV变异强毒株,为新型PEDV疫苗研发提供了候选毒株。

病毒巨噬细胞炎症蛋白Ⅱ对293T细胞APOBEC3G表达的影响

目的探讨病毒巨噬细胞炎症蛋白Ⅱ(vMIP-Ⅱ)对载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3G(APOBEC3G)表达的影响及其机制。方法转染vMIP-Ⅱ质粒(vMIP-Ⅱ质粒组)、空质粒(空质粒组)至293T细胞。定量PCR和Western 印迹法分析转染vMIP-Ⅱ基因对293T细胞APOBEC3G表达的影响。空质粒组、vMIP-Ⅱ质粒组细胞分别加入1 000 IU/ml干扰素α(IFN-α),培养36 h后,Western印迹法检测空质粒组、vMIP-Ⅱ质粒组、空质粒+ IFN-α组、vMIP-Ⅱ质粒+ IFN-α组APOBEC3G的蛋白水平。对转染vMIP-Ⅱ质粒的293T细胞,分别用75 μmol/L JAK/STAT信号通路抑制剂AG490和20 μmol/LERK信号通路抑制剂U0126处理,24 h后收集细胞总蛋白,Western印迹法检测APOBEC3G蛋白水平。构建包含APOBEC3G启动子的荧光素酶报告基因重组质粒,启动子片段包括APOBEC3G全长启动子序列(POS)与长度1 560、960、720、480、420、360、330、240 bp序列及APOBEC3G启动子序列中不含调控元件的区域(NEG),将荧光素酶报告基因重组质粒和vMIP-Ⅱ质粒共转染293T细胞为实验组,以与空质粒共转染的293T细胞为对照,检测APOBEC3G启动子活性,分析vMIP-Ⅱ调控APOBEC3G转录活性的关键启动子作用区域。统计学比较采用t检验、单因素方差分析、LSD-t检验。结果 vMIP-Ⅱ转染组APOBEC3G mRNA、蛋白水平(2.500 ± 0.013、1.472 ± 0.013)均高于对照组(1、0.364 ± 0.030,t值分别为 6.22、6.54,均P < 0.05)。空质粒组、vMIP-Ⅱ质粒组、空质粒+ IFN-α组、vMIP-Ⅱ质粒+ IFN-α组APOBEC3G水平(分别为1、2.030 ± 0.108、2.700 ± 0.081、2.600 ± 0.099)差异有统计学意义(F = 67.026,P < 0.001),vMIP-Ⅱ质粒组与空质粒+ IFN-α组差异无统计学意义(t = 3.46,P > 0.05)。vMIP-Ⅱ质粒组、vMIP-Ⅱ质粒+ AG490组、vMIP-Ⅱ质粒+ U0126组APOBEC3G水平(0.617 ± 0.025、0.179 ± 0.061、0.359 ± 0.012)差异有统计学意义(F = 70.019,P < 0.001),后两组均低于vMIP-Ⅱ质粒组(t值分别为9.66、11.836,P < 0.01)。荧光素酶活性检测显示,转染了POS、1 560、960、720、480、420、360、330、240 bp及NEG序列的vMIP-Ⅱ质粒组启动子活性差异有统计学意义(F = 81.092,P < 0.001),从720 bp片段至480 bp片段,APOBEC3G启动子活性降低幅度巨大。结论 vMIP-Ⅱ上调APOBEC3G的表达,可能是通过JAK/STAT信号通路或作用于APOBEC3G转录活性的关键启动子区域。

1株高致病性基因2型猪流行性腹泻病毒毒株的分离鉴定

为了研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)流行毒株的生物学特性,采集仔猪临床腹泻病料进行病毒分离,结果显示,接种病料的Vero细胞连续盲传3代后可观察到明显的细胞病变,通过间接免疫荧光试验确定导致细胞病变的病毒为PEDV,毒株命名为JMS。通过RT-PCR扩增JMS毒株S基因并进行系统进化树分析发现,JMS属于GⅡb基因型。采用500 TCID50(半数组织细胞感染量)的剂量对3日龄仔猪进行攻毒发现,攻毒仔猪表现出严重的临床症状,并在48 h内死亡,致死率为100%。对仔猪剖检和病理组织切片检查发现,攻毒仔猪肠壁变薄,绒毛结构破损、变短甚至脱落。综上,本研究分离到1株高致病性PEDV毒株,为后续探究PEDV流行毒株生物学特性以及相关疫苗研发奠定了基础。

高效液相色谱法同时测定番茄酱中红2G、酸性橙Ⅱ和罗丹明B的研究

目的建立高效液相色谱测定番茄酱中红2G、酸性橙Ⅱ和罗丹明B的方法。方法样品加丙酮-水(95∶5,V/V)涡旋后超声提取、低温高速离心,取上清液不过滤头直接进样,以乙腈-乙酸铵缓冲液进行梯度洗脱,紫外检测器在532 nm(红2G)、487 nm(酸性橙Ⅱ)和549 nm(罗丹明B)测定,外标法定量。结果检测的红2G、酸性橙Ⅱ和罗丹明B在1.0~20.0μg/mL范围内有良好的线性关系,相关系数分别为0.99994、0.99971和0.99987,检出限0.1~0.2 mg/kg,加标回收率83.0%~100.2%,相对标准偏差RSD为0.3%~3.6%。结论高效液相色谱法操作简单、灵敏、准确、适用范围广,可用于番茄酱中红2G、酸性橙Ⅱ和罗丹明B的同时测定。

固相萃取结合超高效液相色谱-串联质谱法同时检测食品中的6种工业染料

建立了超高效液相色谱一串联质谱（UPLC-MS／MS）同时检测食品中6种工业染料含量的方法。样品用含50％甲醇和1％甲酸的50mmol／L乙酸铵溶液进行提取、WAX弱阴离子交换固相萃取柱进行净化后，采用多反应监测（MRM）模式进行检测，基质曲线外标法定量。其中酸性橙Ⅱ采用负离子模式检测，其余5种染料采用正离子模式检测。碱性橙Ⅱ、罗丹明B、碱性嫩黄O、罗丹明6G、碱性桃红T的定量限为1．6μg／kg，酸性橙Ⅱ为6．0μg／kg；碱性橙Ⅱ、罗丹明B、碱性嫩黄O、罗丹明6G、碱性桃红T的线性范围为1．0～100．0μg／L；酸性橙Ⅱ的线性范围为5．0～100pg／L，线性相关系数均大于0．999。6种染料的回收率为70．3％～109．2％；相对标准偏差（RSD）为2．6％～14．1％。本方法灵敏度高，操作简单高效，适合于食品中6种非法添加工业染料的定量及确证分析。

2008～2014年中国6省市流行的人呼吸道合胞病毒B亚型G蛋白编码基因特征分析

人呼吸道合胞病毒(Human respiratory syncytial virus,HRSV)是引起婴幼儿下呼吸道感染的主要病原体之一。HRSV粘附蛋白(Attachment glycoprotein,G)是病毒膜表面糖蛋白,介导保护性免疫,是抗HRSV抗体和疫苗等的研究热点之一。为研究2008～2014年中国HRSV B亚型G蛋白编码基因的基因特征,于2008～2014年收集的363份HRSV阳性临床标本或病毒株中挑选89份代表株进行G蛋白编码基因全长核苷酸序列的扩增和测序,使用Sequencher 5.0进行序列的编辑,使用MEGA 5.0进行序列比对和亲缘关系进化树构建以及氨基酸变异分析。89份代表株分别挑选自中国北京、吉林、广东、河北、湖南、陕西6省市发热呼吸道感染患者鼻咽拭子或病毒分离株,基因型包括BA9、BA10、BAc、BA、CB1及SAB4,覆盖我国近年流行的优势基因型。亲缘关系分析显示,89株代表株可以分为6个分支,同一基因型G蛋白编码基因核苷酸序列荟聚为一个分支;89份代表株之间的核苷酸(氨基酸)遗传距离为0.03(0.04),与原型株CH-18537株的核苷酸(氨基酸)遗传距离为0.08～0.10(0.14～0.18),其中B5分支与原型株的核苷酸(氨基酸)遗传距离最远为0.10(0.18);氨基酸变异主要在第二高变区,其次为第一高变区。在中心保守区(aa164～176)以及CX3C模序区,89条HRSV B亚型G蛋白编码基因氨基酸序列与原型株CH-18537株一致。本研究表明2008～2014年中国HRSV B亚型G蛋白编码基因变异较多,但在中心保守区和CX3C模序区保守,本研究为我国HRSV的病毒学研究提供了基础科学数据。

建立同时测定调味品中非法添加的4种工业染料的SPE-UPLC-MS/MS法研究

目的建立SPE-UPLC-MS/MS检测方法测定调味品中非法添加的碱性橙、碱性玫瑰精、酸性橙Ⅱ及酸性金黄等工业染料。方法以含50%甲醇、1%甲酸的50mmol/L乙酸铵水溶液作为提取溶液,利用WAX弱阴离子交换固相萃取柱对样品进行净化,UPLC-MS/MS测定碱性橙、碱性玫瑰精、酸性橙Ⅱ及酸性金黄含量。结果方法的线性范围:碱性橙、酸性橙Ⅱ及酸性金黄0.0～500.0ng/ml;碱性玫瑰精0.0～25.0ng/ml,r≥0.9922。方法的定性检出限为:碱性橙、酸性橙Ⅱ及酸性金黄7.0μg/kg;碱性玫瑰精0.1μg/kg。定量检出限为:碱性橙、酸性橙Ⅱ及酸性金黄20.0μg/kg;碱性玫瑰精0.3μg/kg。高、低两个浓度水平的加标回收率89.5%～120.9%,相对标准偏差6.4%～27.1%。结论本方法灵敏、准确,可用于调味品中碱性橙、碱性玫瑰精、酸性橙Ⅱ及酸性金黄等非法添加的工业染料的同时测定及确证。

2013年海盐县诺如病毒流行株的监测和基因型分析

目的了解2013年海盐县诺如病毒流行株基因型谱分布。方法 2013年收集170例腹泻患者粪便标本,利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测诺如病毒核酸,挑选部分毒株进行核苷酸序列测定并构建系统进化树。结果检测170例腹泻患者粪便标本,诺如病毒阳性24份,检出率为14.12%;其中诺如病毒GⅠ基因组1份,占4.17%,序列测定为GⅠ.2基因型;GⅡ基因组23份,占95.83%,选4株进行序列测定,比对结果 1株属于GⅡ.4基因型2006b变异株,3株属于GⅡ.4基因型Sydney变异株。结论 2013年海盐县诺如病毒流行株基因型呈现多样性,以GⅡ.4 Sydney变异株为优势流行株,首次检出GⅠ基因组。