2株GⅡb亚群猪流行性腹泻病毒分离、鉴定及变异分析

为了分离猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)变异毒株,了解其进化趋势及致病性,并为后续PEDV特性及疫苗研发提供候选毒株,本研究将PEDV阳性样品接种于Vero细胞传代,采用间接免疫荧光试验(IFA)对分离株进行鉴定,基于RT-PCR及第2代测序技术进行全基因组测序、同源性比对及遗传进化分析,通过动物致病性试验进行毒力测定。IFA表明2株分离株能与PEDV S蛋白抗体发生特异性反应,确定为PEDV。2株毒株与参考毒株核苷酸同源性为95.6%~98.7%,属于变异毒株GⅡb群。分离的2株毒株分别命名为CH-HNKF-03和CH-HNPDS-01株。CH-HNKF-03和CH-HNPDS-01对哺乳仔猪攻毒后18 h即可发病,于24~56 h均出现典型的水样腹泻、呕吐、消瘦、脱水等症状,96 h内全部死亡。综上所述,本研究获得2株GⅡb亚群PEDV变异强毒株,为新型PEDV疫苗研发提供了候选毒株。