反相高效液相色谱法测定牛初乳保健食品中免疫球蛋白G的含量

目的:建立一种测定牛初乳保健食品中免疫球蛋白G的反相高效液相色谱法。方法:样品采用磷酸盐缓冲液涡旋振荡提取,经Protein G固相免疫亲和小柱净化后,使用高效液相色谱仪(搭载紫外检测器)检测,紫外波长为280 nm,采用C反相色谱柱(4.6×250 mm, 5μm)分析。流动相为0.1%三氟乙酸-水溶液和乙腈,梯度洗脱分离,外标法定量。结果:色谱分离过程可在10 min内完成,免疫球蛋白G在10~100μg/mL范围内线性良好,相关系数R=0.999 6。检出限为0.5 g/kg,定量限为1.7 g/kg。3个浓度水平的方法加标回收率为92.2~97.5%,方法精密度为0.20~1.18%。样品经前处理后4℃冰箱内保存,在24 h内稳定性良好。结论:该方法特异性强,灵敏度、精确度高,符合方法学验证要求,可快速、准确地对保健食品中免疫球蛋白G进行分析检测。