血清可溶性白细胞G抗原在宫颈癌及癌前病变的临床诊断意义

目的探讨血清可溶性白细胞G抗原(sHLA-G)在宫颈癌及癌前病变中的临床诊断价值。方法用酶联免疫吸附法(ELISA)法测定同期230例宫颈癌患者、120例宫颈上皮内瘤样变(CIN)患者及30例健康自愿者的血清sHLA-G水平及电化学免疫发光法测定血清中宫颈癌相关抗原(TA-4)和SCC-Ag水平,分析其在各组间的差异及与宫颈癌临床病理特征之间的关系。结果 (1)血清中sHLA-Ag、TA-4及鳞形细胞癌相关抗原(SCC-Ag)水平的比较:血清sHLA-G浓度各组间的差异有统计学意义(P=0.000);宫颈癌组明显高于对照组和CIN各组(P=0.000,P=0.000,P=0.002,P=0.006);CINⅢ级组明显高于CINⅠ级组和对照组(P=0.001,P=0.021)。各组间血清TA-4浓度的差异有统计学意义(P=0.006);宫颈癌组明显高于对照组、CINⅠ级组和CINⅡ级组(P=0.003,P=0.008,P=0.018);CINⅢ级组明显高于对照组与CINⅠ级组(P=0.023,P=0.031)。各组间血清SCC-Ag浓度间的差异有统计学意义(P=0.000);宫颈癌组明显高于对照组、CINⅠ级组与CINⅡ级组(P=0.000,P=0.001,P=0.007);CINⅢ级组明显高于对照组和CINⅠ级组(P=0.013,P=0.021)。(2)血清sHLA-G与宫颈癌病理特征的关系:宫颈癌患者血浆中sHLA-G水平与FIGO分期和淋巴结转移密切相关(P=0.008,P=0.031),而与患者年龄、肿瘤大小及病理类型无关(P>0.05)。宫颈癌FIGO分期Ⅲ、Ⅳ期患者的血清sHLA-G水平明显高于Ⅰ、Ⅱ期患者(U=7.125,P=0.008),伴淋巴结转移患者的血浆sHLA-G水平明显高于淋巴结转移阴性患者(U=4.651,P=0.031)。结论血清sHLA-G水平检测有助于宫颈癌及CINⅢ的早期诊断及病情评估,有可能成为一种新的早期诊断指标。但其与发生宫颈癌及癌前病变的特异性分析仍有待进一步的相关研究。

用牛丝虫G抗原的ELISA诊断犬、狨猴、鹿、牛和人丝虫病的研究

根据不同种属问丝虫具有交叉抗原反应的特点，选用牛腹腔丝虫的提纯Ｇ抗原，应用ＥＬＩＳＡ的多种方法检测实验动物和人丝虫病血清抗体，可用于该病的诊断，现场应用并具有灵敏度高、特异性强的特点。尤其是对犬丝虫病和人丝虫病的检出率各为９７％和９５．５８％，假阳性率都在３％以下，与其他几种寄生虫的交叉反应亦极少，可用于现场大规模的人或犬丝虫病诊断。

卵裂期胚胎sHLA-G抗原表达及其与胚胎发育和种植的关系

【目的】通过对卵裂期胚胎培养液可溶性人类白细胞抗原G(sHLA-G)的定性和定量分析,了解卵裂期胚胎sHLA-G抗原表达及其与胚胎发育和种植的关系。【方法】应用免疫发光WesternBlot了解卵裂期胚胎sHLA-G和HLA-I类抗原的表达情况;应用双抗体夹心法ELISA了解卵裂期胚胎培养液中sHLA-I类抗原的表达量与胚胎发育和种植的关系。【结果】①胚胎培养液中以sHLA-G抗原为主,其它sHLA-I类抗原量极少或不存在,因此用培养液中sHLA-I类抗原的量来估计培养液中sHLA-G的含量是可行的。②卵裂期胚胎培养液中1级胚胎sHLA-I类抗原的绝对吸光度(A)值为0.077±0.006;2级胚胎为0.064±0.002;3级胚胎为0.043±0.002;3组比较差异有显著性(P=0.014)。胚胎种植率与胚胎sHLA-I类抗原绝对A值的相关系数为0.426,P=0.004。它们的表达量与胚胎发育和种植的有关。【结论】卵裂期胚胎培养液中sHLA-G的表达量与胚胎发育和种植的有关。

人类白细胞抗原G基因5’上游调控区多态性与慢性丙型病毒性肝炎病毒载量的关系

目的探讨人类白细胞抗原G(HLA-G)基因5’上游调控区(URR)多态性与慢性丙型病毒性肝炎(简称丙型肝炎)病毒(HCV)载量的相关性。方法回顾性分析2015年4—12月在大连市公共卫生临床中心(原大连市第六人民医院)住院并确诊为慢性丙型肝炎的195例患者的临床资料。收集患者血样并提取基因组DNA和病毒核酸,采用聚合酶链式反应扩增HLA-G 5’-URR,然后使用基因测序技术检测患者HLA-G 5’-URR的16个多态性位点,采用定量PCR方法测定患者血清HCV病毒载量,分析HLA-G基因5’-URR基因多态性与HCV病毒载量的关系。结果195例慢性HCV感染者HLA-G基因5’-URR的16个多态性位点中,-762C>T、-725C>G>T、-716T>G、-689A>G、-666G>T、-633G>A、insG540、-509C>G、-486A>C、-443G>A、-400G>A、-398A>G、-201G>A和-56C>T 14个位点不同基因型患者的HCV病毒载量差异无统计学意义(P>0.05),而-477C>G、-369C>A 2个位点不同基因型患者的HCV病毒载量差异有统计学意义(P<0.05)。两两比较结果显示,-477C>G位点CG基因型的HCV病毒载量高于GG基因型(P<0.05),-369C>A位点AC基因型的病毒载量高于AA基因型(P<0.05)。结论HLA-G基因5’-URR-477C>G位点CG基因型的HCV病毒载量高于GG基因型,-369C>A位点AC基因型的HCV病毒载量高于AA基因型,可能与HLA-G的表达水平改变有关。

彩色多普勒超声检查联合血清妊娠相关血浆蛋白-A、抑制素A、可溶性人类白细胞抗原G检测在先兆流产诊断和预后评估中的价值

目的:探讨彩色多普勒超声联合血清妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)、抑制素A(INHA)、可溶性人类白细胞抗原G(sHLAG)在先兆流产诊断和预后中的价值。方法:选取108例先兆流产患者为研究对象,按治疗后妊娠结局分为继续妊娠组(65例)和流产组(43例),另选同期产检正常的健康孕妇为对照组(60例)。比较三组血清PAPP-A、sHLAG、INHA水平及子宫动脉搏动指数(PI)、阻力指数(RI)、收缩期最高流速与舒张最低流速比(S/D),受试者工作特征曲线(ROC)分析血清PAPP-A、sHLAG、INHA及子宫动脉PI、RI、S/D单独和联合对先兆流产的诊断和预测价值。结果:108例先兆流产患者经保胎治疗10d,保胎失败43例,保胎成功65例。子宫动脉PI、RI、S/D值比较,流产组高于继续妊娠组,继续妊娠组高于对照组,血清PAPP-A、sHLAG水平比较,对照组高于继续妊娠组,继续妊娠组高于流产组,INHA水平流产组高于继续妊娠组,继续妊娠组高于对照组(均P<0.05)。血清PAPP-A、sHLAG、INHA和超声指标联合对先兆流产的诊断AUC较各指标单独诊断AUC升高(均P<0.05)。结论:彩色多普勒超声及血清PAPP-A、sHLAG、INHA联合对先兆流产的诊断及预后评估价值较高。

人类白细胞抗原G(HLA-G)与非小细胞肺癌的研究进展

人类白细胞抗原G(HLA-G)属于非经典主要组织相容性复合体Ⅰb(MHCⅠb)类分子,包括膜结合型和可溶性HLA-G两种形式,通过相应受体调节多种免疫细胞的功能,是形成母胎耐受、肿瘤免疫逃逸的重要免疫学机制之一。非小细胞肺癌(NSCLC)在肺癌中占比最高且预后差,研究发现HLA-G的基因多态性及表达水平与NSCLC发生发展密切相关,提示HLA-G可作为NSCLC早期诊断、亚型区分、治疗及预后等潜在的生物标志物,具有辅助诊断依据的临床价值,对其机制的深入研究更可能提供NSCLC诊疗的新策略。

血清可溶性人类白细胞抗原G、白介素-17水平预测先兆流产患者保胎结局的研究

目的 分析血清可溶性人类白细胞抗原G(sHLA-G)、白介素-17(IL-17)水平预测先兆流产患者保胎结局的价值。方法 选取2018年1月至2020年6月在海南省中医院接受保胎治疗的90例先兆流产患者作为研究对象,于治疗10d时根据保胎结局分为成功组(n=71)与失败组(n=19)。统计患者相关资料,分析治疗前血清sHLA-G、IL-17水平预测先兆流产患者保胎结局的价值。结果 90例患者中保胎失败19例,占21.11%;失败组与成功组血清sHLA-G、IL-17、孕酮(P)水平比较,差异具有统计学意义(P<0.05);受试者工作特征(ROC)曲线显示,先兆流产患者保胎治疗前血清sHLA-G、IL-17水平预测保胎失败风险的曲线下面积(AUC)均>0.80,均有较理想的预测价值,且联合预测价值最高。结论 保胎治疗前血清sHLA-G低表达、IL-17过表达可能提示先兆流产患者保胎失败风险高。

过敏性鼻炎患儿血清HLA-G、Claudin-1水平变化及与病情严重程度的关系

目的 探讨过敏性鼻炎患儿血清人类白细胞抗原G(HLA-G)、封闭蛋白1(Claudin-1)水平的变化及其与病情严重程度的关系。方法 选取该院2021年7月1日至2022年7月1日收治的86例过敏性鼻炎患儿作为观察组,同期在该院体检的34例健康儿童作为对照组。采用酶联免疫吸附试验检测两组血清HLA-G、Claudin-1水平并进行比较。比较治疗前及治疗过程中观察组患儿过敏性鼻炎症状量表(SFAR)和伴随症状的视觉模拟量表(VAS)评分,分析不同SFAR、VAS评分患儿血清HLA-G、Claudin-1水平。采用Spearman法分析血清HLA-G、Claudin-1水平与SFAR和VAS评分的相关性。结果 与对照组相比,观察组血清HLA-G水平较高,Claudin-1水平较低,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组在治疗30周、1年后HLA-G水平明显降低,Claudin-1水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与治疗前比较,治疗30周、1年后观察组SFAR评分降低,VAS评分轻度/中重度比例减少,差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析结果显示,过敏性鼻炎患儿血清HLA-G水平与病情严重程度呈正相关(r_(SFAR)=0.433,P<0.05;r_(VAS)=0.442,P<0.05),Claudin-1水平与病情严重程度呈负相关(r_(SFAR)=-0.483,P<0.05;r_(VAS)=-0.468,P<0.05)。结论 过敏性鼻炎患儿血清HLA-G水平较高,Claudin-1水平较低,且与病情严重程度相关,二者具有作为诊断和评价疾病标志物的潜力。

HPV感染相关CIN患者血清HLA-E和HLA-G表达与疾病进展及治疗后复发的相关性

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)感染相关宫颈上皮内瘤变(CIN)患者血清人类白细胞抗原E(HLA-E)、人类白细胞抗原G(HLA-G)表达及临床意义。方法选取2021年6~12月在河北中石油中心医院治疗的HPV感染相关CIN患者120例作为观察组,选取同期无HPV感染的CIN患者60例作为对照组,检测两组血清HLA-E和HLA-G表达水平,分析血清HLA-E和HLA-G表达与患者临床资料、治疗后复发的关系。结果观察组血清HLA-E和HLA-G水平分别为(75.59±18.28)pg/mL和(30.20±9.92)ng/mL,高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组CIN分级Ⅱ/Ⅲ级患者血清HLA-E和HLA-G分别为(83.33±13.90)pg/mL和(34.54±7.18)ng/mL,高于CIN分级Ⅰ级(P<0.05);观察组高危型HPV感染者血清HLA-E和HLA-G分别为(78.82±17.70)pg/mL和(32.23±9.43)ng/mL,高于低危型HPV感染者(P<0.05)。观察组血清HLA-E和HLA-G表达与CIN分级呈正相关(P<0.05)。复发患者治疗后1周血清HLA-E和HLA-G分别为(68.32±8.73)pg/mL和(24.43±5.58)ng/mL,高于未复发患者(P<0.05)。结论HPV感染相关CIN患者血清HLA-E和HLA-G表达与CIN分级呈正相关,同时与患者治疗后复发有一定关系。

IVF-ET胚胎培养液中sHLA-G、MMP-9与胚胎质量及临床妊娠关系

目的:分析体外受精-胚胎移植(IVF-ET)胚胎培养液中可溶性人类白细胞抗原G(sHLA-G)、基质金属蛋白酶(MMP-9)与胚胎质量、临床妊娠的关系。方法:收集2017年1月-2023年1月在本院生殖中心接受IVF-ET治疗的女性患者107例临床资料及标本,新鲜胚胎移植后收集胚胎培养液,分别取未移植的正常受精胚胎中优质胚胎、中等胚胎、劣质胚胎对应胚胎培养液,酶联免疫吸附实验检测胚胎培养液中sHLA-G、MMP-9水平,比较不同胚胎质量对应的胚胎培养液sHLA-G、MMP-9水平及其相关性;记录IVF-ET患者临床妊娠情况并分为临床妊娠组、未妊娠组,比较两组胚胎培养液中的sHLA-G、MMP-9水平及其他临床资料,logistic回归分析胚胎培养液中sHLA-G、MMP-9水平与临床妊娠关系。结果:107例未移植的正常受精胚胎中共收集127份胚胎培养液标本,其中优质胚胎培养液44份、中等胚胎培养液52份、劣质胚胎培养液30份,其胚胎培养液sHLA-G、MMP-9水平逐渐降低,胚胎培养液sHLA-G、MMP-9水平与胚胎质量正相关(均P<0.01)。107例IVF-ET获得临床妊娠69例,临床妊娠率64.6%,未妊娠组胚胎培养液sHLA-G(8.11±1.63 ng/ml)、MMP-9水平(0.45±0.17 ng/ml)均低于临床妊娠组(10.63±2.41 ng/ml、0.61±0.12 ng/ml),第三日卵裂球数(6.0±1.8个)、优质胚胎率(45.6±12.1)%低于临床妊娠组(8.9±1.8个、64.8%±15.9%)(均P<0.05);logistic回归分析,sHLA-G、MMP-9、第三日卵裂球数、优质胚胎率等均是影响IVF-ET患者临床妊娠因素。结论:IVF-ET患者胚胎培养液中sHLA-G、MMP-9水平与胚胎质量正相关,sHLA-G、MMP-9、第三日卵裂球数、优质胚胎率等降低均是IVF-ET患者临床妊娠影响因素。

HMGA1、sHLA-G联合TSGF检测在宫颈癌早期筛查及病情评估中的应用

目的分析血清高迁移率族蛋白A1(HMGA1)、可溶性白细胞G抗原(sHLA-G)联合恶性肿瘤特异生长因子(TSGF)检测在宫颈癌早期筛查及病情评估中的应用价值。方法选取2019年2月至2022年2月安徽医科大学第二附属医院收治的110例宫颈癌患者(恶性组),另选取本院同期收治的宫颈上皮内瘤变110例作为良性组,及健康体检女性110名作为对照组。受试对象均进行HMGA1、sHLA-G、TSGF检测。对比三组HMGA1、sHLA-G、TSGF表达水平,收集恶性组患者资料,对比不同临床分期、分化程度、淋巴结转移者HMGA1、sHLA-G、TSGF表达水平,绘制ROC曲线分析HMGA1、sHLA-G、TSGF联合检测对宫颈癌筛查的价值。结果HMGA1、sHLA-G、TSGF表达水平由高到低依次为恶性组>良性组>对照组,比较差异有统计学意义(P<0.05)。临床Ⅲ-Ⅳ期、低分化、淋巴结转移者HMGA1、sHLA-G、TSGF表达水平分别高于临床Ⅰ~Ⅱ期者、中-高分化、淋巴未转移者,差异有统计学意义(P<0.05)。依据ROC曲线可知,HMGA1、sHLA-G、TSGF对宫颈癌诊断AUC值分别为0.781(95%CI:0.699~0.861)、0.706(95%CI:0.607~0.804)、0.722(95%CI:0.629~0.816),HMGA1+sHLA-G+TSGF联合诊断的AUC值为0.813(95%CI:0.717~0.896),高于三者单独检测(P<0.05)。结论HMGA1、sHLA-G、TSGF表达水平与宫颈癌恶性程度相关,三者联合检测可提高宫颈癌早期筛查效能,或可作为宫颈癌筛查及诊断的指标应用于临床。

G抗原7、细胞角蛋白十九片段和癌胚抗原在非小细胞肺癌转移中的预测价值

目的 探讨G抗原7(G antigen 7,GAGE7)、细胞角蛋白十九片段(cytokeratin 19 fragment, CYFRA21-1)和癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)转移中的预测价值,以确定NSCLC转移的潜在风险因素。方法 选取2018年1月—2021年10月的NSCLC住院患者226例,分为转移组103例和无转移组123例。比较2组患者的肿瘤标记物、肺癌自身七项抗体和血常规指标,结合受试者临床资料,使用logistic回归分析来确定风险因素,用受试者工作曲线(ROC)来评估NSCLC转移的诊断价值。结果 logistic回归表明,GAGE7、CEA、CYFRA21-1是NSCLC患者转移的独立危险因素(P<0.05)。GAGE7、CYFRA21-1、CEA以及三者联合的AUC分别为0.610、0.770、0.781以及0.845,三者联合的AUC高于单独检测。GAGE7的敏感度和特异度分别为75.00%和56.07%;CYFRA21-1的敏感度和特异度分别为87.18%和63.10%;CEA的敏感度和特异度分别为88.89%和68.02%。三者联合敏感度和特异度分别为84.00%和73.51%。结论 GAGE7、CYFRA21-1、CEA联合检测可提高预测NSCLC转移的敏感度和特异度。

牛流行热病毒糖蛋白G_1抗原表位在毕赤酵母中的表达和抗原性鉴定

从包含牛流行热病毒G蛋白基因的质粒pMD-G中克隆G1抗原表位区基因,亚克隆进表达载体pPIC9K,构建重组载体pPIC9K-G1,线性化后电转化毕赤酵母GS115,通过G418压力和PCR法筛选阳性重组酵母进行诱导表达。经SDS-PAGE、脱糖基化分析、Western blot、ELISA、兔体免疫实验和特异性分析,表明该基因在GS115中表达并进行了适度的糖基化,表达蛋白有良好的生物学活性和特异性,可作为包被抗原,开发ELISA诊断试剂盒。

低剂量静脉注射人免疫球蛋白治疗不明原因反复流产的效果及对可溶性人白细胞抗原G的影响

目的评估低剂量静脉注射人免疫球蛋白(IVIG)治疗不明原因反复流产(URSA)的效果及对外周血可溶性人白细胞抗原G(sHLA-G)的影响。方法将60例URSA患者分为试验组和对照组两组,每组30例。试验组在妊娠前静脉给予IVIG0.2g/kg;确定妊娠后给予同等剂量IVIG,每4周1次,至妊娠20周。对照组给予传统中药或孕激素治疗。观察两组的活产率和有效率(超过以往妊娠4周及以上为有效)。于治疗前和妊娠6～8周随机留取试验组和对照组静脉血各15份,同期健康育龄期未孕及早孕6～8周妇女的静脉血标本各20份。采用酶联免疫吸附法检测血清sHLA-G、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素-10(IL-10)水平。结果试验组应用IVIG后的妊娠率为93.3%(28/30)。试验组的活产率和有效率分别为85.7%(24/28)和92.9%(26/28),明显高于对照组的56.7%(17/30)(P=0.021)和63.3%(19/30)(P=0.011)。试验组应用IVIG后有1例(3.3%)患者发生轻微恶心,减慢IVIG输入速度后反应消失。对照组和试验组患者孕前血清sHLA-G水平分别为(61.37±35.57)和(62.70±37.24)U/ml,明显低于健康育龄期妇女的(88.49±25.37)U/ml(P<0.05)。妊娠后试验组患者的血清sHLA-G和IL-10水平分别为(34.19±14.21)U/ml和(11.71±2.75)pg/ml,明显高于对照组的(23.71±12.83)U/ml(P=0.043)和(8.71±3.01)pg/ml(P=0.008)。结论孕前后应用低剂量IVIG治疗URSA安全有效,其可能是通过上调患者体内sHLA-G和IL-10水平来改善胚胎发育。

青海高原地区胎儿生长受限患者胎盘组织人类白细胞相关抗原G表达的研究

目的：探讨青海高原地区胎儿生长受限（FGR）患者人类白细胞相关抗原G（HLA-G）mRNA及蛋白的表达及临床意义。方法：收集2015年1~12月在青海大学附属医院产科分娩的20例FGR患者（FGR组）和20例正常妊娠妇女（正常妊娠组）的胎盘组织,采用实时荧光定量PCR及Western blot分析检测HLA-G mRNA及蛋白在两组胎盘组织中的表达差异。结果：FGR组胎盘组织中HLA-G mRNA表达水平（0.449±0.116）,明显低于正常妊娠组（0.963±0.226）,差异有统计学意义（P=0.000）。FGR组胎盘组织HLA-G蛋白表达灰度值（0.375±0.101）,亦明显低于正常妊娠组（0.797±0.177）,差异有统计学意义（P=0.002）。结论：青海高原地区FGR患者胎盘组织HLA-G mRNA及蛋白表达水平均明显降低,HLA-G的表达量降低在FGR的发生发展过程中可能起着重要的作用。

血清可溶性人类白细胞抗原G与孕酮联合检测预测先兆流产妊娠结局的临床价值

目的探讨血清可溶性人类白细胞抗原G(s HLA-G)与孕酮联合检测预测先兆流产妊娠结局的临床价值。方法选择2014年1月—2015年11月在辽阳市第三人民医院就诊临床诊断为先兆流产孕妇77例,根据妊娠结局将其分为继续妊娠组(45例)和难免流产组(32例)。另随机选取该院同期诊断的正常孕妇20例作为正常妊娠组。检测比较3组血清s HLA-G和孕酮水平。结果 3组血清s HLA-G和孕酮水平总体比较差异均有统计学意义(P<0.05)。继续妊娠组和难免流产组血清s HLA-G和孕酮水平均低于正常妊娠组,差异均有统计学意义(P<0.05)。难免流产组血清s HLA-G和孕酮水平均低于继续妊娠组,差异亦均有统计学意义(P<0.05)。结论孕妇血清中s HLAG和孕酮水平过低可能预示妊娠失败。

牛流行热病毒G_1抗原表位基因在大肠杆菌中的表达、纯化及抗原性鉴定

从包含牛流行热病毒G蛋白基因的质粒pMD-G中克隆G1抗原表位区基因,与表达载体pGEX-4T-1连接,成功构建重组质粒pGEX-G1。重组质粒转化BL21(DE3),以IPTG进行诱导,并确定了最佳表达条件的IPTG浓度为0.1mmol/L、反应温度为16℃、诱导时间为18h。可溶性表达的目的蛋白经Glutathione Sepharose TM4B介质纯化,纯度达80%;以包涵体形式存在的重组蛋白以2%的脱氧胆酸钠洗涤、0.5%的N-十二烷基肌氨酸钠溶解、透析复性、Glutathione Sepharose TM4B纯化后,纯度达85%以上。Western blot试验表明纯化的目的蛋白有良好的反应原性。经间接ELISA检测,测得牛流行热病毒12份阳性血清的OD490值平均为1.813±0.231,12份阴性血清的OD490值平均为0.359±0.032,差异极显著(P<0.01)。将重组蛋白作为抗原免疫兔子,试验兔均产生了高滴度的抗体,证实该蛋白有免疫原性。将目的蛋白作为包被抗原,测得8份狂犬病病毒阳性血清的OD490值平均为0.324±0.031,与所测12份阴性血清的OD490值接近,说明不存在交叉反应。以上结果均证实纯化后的重组蛋白有良好的生物学活性和特异性,可作为包被抗原,开发ELISA试剂盒。

人类白细胞抗原-G5慢病毒表达载体构建与病毒包装

目的:构建人类白细胞抗原G5(HLA-G5)的表达载体,并进行慢病毒包装,为进一步研究HLA-G5功能提供基础工具。方法:人工合成HLA-G5全长序列经测序正确后,定向接入真核表达载体pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP,转化入大肠杆菌,酶切鉴定并测序正确后进行慢病毒包装和滴度测定。结果:经琼脂糖凝胶电泳鉴定、PCR鉴定及测序,HLA-G5表达质粒质量合格,序列比对与设计序列符合率100%,HLA-G5慢病毒滴度测定为7.06×108。结论:成功地构建了HLA-G5表达载体并完成了慢病毒包装,为今后的研究工作提供了基础工具。

血浆白细胞抗原G、白细胞介素10水平在传染性单核细胞增多症诊断中的价值

目的探讨血浆白细胞抗原G(HLA-G)及白细胞介素10(IL-10)水平诊断传染性单核细胞增多症的价值。方法选择62例传染性单核细胞增多症患儿为观察组,60例健康儿童为对照组。采用ELISA法检测两组血浆HLA-G、IL-10水平;采用直线相关分析法分析观察组血浆HLA-G与IL-10的相关性;绘制血浆HLA-G、IL-10水平及二者联合检测诊断传染性单核细胞增多症的受试者工作曲线(ROC曲线),比较其曲线下面积,计算血浆HLA-G、IL-10水平及二者联合检测诊断传染性单核细胞增多症的效能。结果观察组、对照组血浆HLA-G水平分别为(32.32±10.87)、(6.55±3.24)U/mL,IL-10水平分别为(94.17±15.52)、(13.31±7.66)pg/mL。观察组血浆HLA-G、IL-10水平均高于对照组(P均<0.05)。直线相关分析结果显示,观察组血浆HLA-G水平与IL-10水平呈正相关(r=0.497,P<0.05)。血浆HLA-G、血浆IL-10及二者联合检测诊断传染性单核细胞增多症的ROC曲线下面积分别为0.701、0.622、0.870。约登指数最大时血浆HLA-G、IL-10水平(截断值)分别为10.6 U/mL、25.7pg/mL,此时血浆HLA-G水平诊断传染性单核细胞增多症的灵敏度为0.665、特异度为0.703;血浆IL-10水平分别为0.626、0.612,二者联合检测分别为0.851、0.834。二者联合检测诊断传染性单核细胞增多症的ROC曲线下面积、灵敏度、特异度均高于HLA-G、IL-10单项检测(P均<0.05)。结论血浆HLA-G、IL-10水平均可用于传染性单核细胞增多症的诊断;二者联合检测的诊断效能优于单项检测。

人白细胞抗原G在耐药子宫内膜癌中的表达及作用研究

目的探讨人白细胞抗原G(human leukocyte antigen G,HLA-G)在耐药子宫内膜癌组织中的表达及作用。方法收集2014年12月至2018年12月于温州医科大学附属第一医院就诊的子宫内膜癌初治60例患者,按照化疗效果,将患者分成肿瘤组和耐药组,各30例;选取同时期子宫内膜正常的女性30例作为对照组。另将子宫内膜癌细胞分为无处理组(不做特殊处理)、紫杉醇组(培养基中加入10μmol/L紫杉醇)和HLA-G组(培养基中加入10μmol/L紫杉醇的同时,加入10ng/ml的HLA-G),分析HLA-G在子宫内膜癌细胞凋亡和增殖中的作用。采用免疫组化检测子宫内膜组织中Ki-67和HLA-G的表达,聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测耐药基因(MDR1)的表达,噻唑蓝比色法检测细胞增殖水平,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果肿瘤组和耐药组的Ki-67均高于对照组,差异有显著性(P<0.05),但肿瘤组和耐药组差异无显著性(P>0.05);子宫内膜组织内HLA-G表达与耐药基因MDR1水平呈正相关(r=0.690,P=0.013)。HLA-G能够促进子宫内膜癌细胞内MDR1表达,并能够减弱紫杉醇对子宫内膜癌细胞增殖的抑制作用和子宫内膜癌细胞凋亡的诱导作用。结论HLA-G在耐药子宫内膜癌组织中高表达,并能够抑制紫杉醇杀伤子宫内膜癌细胞。