G族黄曲霉毒素半抗原分子设计、抗原合成及抗体特性

根据黄曲霉毒素G_1(Aflatoxin G_1,AFG_1)的分子结构和活性位点,采用半缩醛法(SA)、环氧化物法(EP)和烯醇醚衍生物法(EED)制备G族AF人工抗原AFG_1-BSA,通过UV和SDS-PAGE进行鉴定。用AFG_1-BSA免疫Balb/C小鼠制备多克隆抗体(AFG_1 pAb),间接ELISA检测AFG_1pAb效价,阻断ELISA分析其敏感性,交叉反应试验分析其特异性。结果显示,AFG_1-BSA合成成功,3种合成方法中,SA法效果最好,AFG_1与BSA的分子结合比为4.32∶1,间接ELISA效价为1∶(6.4×10~3),阻断ELISA检测其IC_(500为13.6μg·kg^(-1),与AFG_2的交叉反应率(CR)为82.19%,与AFB_1、B_2无CR。表明获得高效价、敏感、特异、广谱的AFG pAb,为G族AF和AF总量免疫检测方法的建立奠定基础。