G蛋白偶联受体4、Ki-67、生存素与高危HPV感染的相关性及诊断宫颈癌价值

目的:探讨G蛋白偶联受体4(LGR4)、Ki-67、生存素(Survivin)表达与高危型人乳头瘤病毒(hr-HPV)感染的相关性及对宫颈癌的诊断价值。方法:回顾性选取2021年9月-2022年6月本院诊治的hr-HPV感染患者102例临床资料,根据感染类型分为多重感染组(n=61)与单一感染组(n=41),根据并发宫颈癌为宫颈癌组(n=33)与非宫颈癌组(n=69),分别对比两组LGR4、Ki-67、Survivin表达,分析LGR4、Ki-67、Survivin阳性表达与hr-HPV多重感染的相关性及诊断宫颈癌效能。结果:多重感染组LGR4(51.68±12.68pg/ml)、Ki-67阳性细胞率(83.5±13.2)%、Survivin阳性细胞率(86.8±14.7)%均高于单一感染组(42.65±6.79pg/ml、70.6%±11.9%、Survivin 74.6%±12.5%),宫颈癌组LGR4(58.04±12.39pg/ml)、Ki-67阳性细胞率(89.9±11.7)%、Survivin阳性细胞率(94.2±11.4)%均高于非宫颈癌组(43.27±7.39pg/ml、72.8%±11.0%、76.0%±12.8%)(均P<0.05)。Kendall's tau-b相关性分析,LGR4、Ki-67、Survivin阳性表达与hr-HPV多重感染呈正相关(P<0.05)。LGR4、Ki-67、Survivin阳性表达高水平组宫颈癌发生率高于低水平组(P<0.05)。受试者工作特征曲线分析显示,LGR4、Ki-67、Survivin诊断宫颈癌的曲线下面积值分别为0.880、0.856、0.875,敏感度分别为97.0%、78.8%、81.8%,特异度分别为100.0%、89.9%、89.9%。结论:LGR4表达、Ki-67及Survivin阳性细胞率会随着HPV感染类型而发生异常改变,动态监测可为诊断宫颈癌提供重要参考。

G蛋白偶联受体激酶4对大鼠血管平滑肌细胞AT_1受体的调节作用

目的应用siRNA干扰抑制大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞G蛋白偶联受体激酶4(G protein-coupled recep-tor kinase 4,GRK4)的表达,探讨GRK4对血管紧张素Ⅱ1型(angiotensinⅡtype 1,AT1)受体的调节作用。方法免疫组化检测大鼠回结肠动脉血管平滑肌组织GRK4蛋白表达;以大鼠胸主动脉平滑肌细胞株(A10细胞株)为研究对象,免疫印迹检测GRK4、AT1受体蛋白表达变化,免疫共沉淀检测GRK4和AT1受体的相互作用和AT1受体磷酸化改变。结果大鼠动脉平滑肌组织GRK4表达良好;siRNA干扰后,GRK4蛋白表达明显下降(P<0.05);AT1蛋白表达降低(P<0.05),AT1受体磷酸化明显增强(P<0.05);GRK4和AT1受体存在共连接,抑制GRK4表达后增加GRK4与AT1受体之间的共连接。结论 GRK4能够调控大鼠胸主动脉平滑肌细胞AT1受体蛋白表达及其磷酸化状态,该调节作用可能与两者的共连接有关。

G蛋白偶联受体4对人乳头瘤病毒感染宫颈癌组织新生血管建立的影响和诊断价值

目的探究G蛋白偶联受体4（G-protein coupled receptor 4，LGR4）对人乳头瘤病毒（human papilloma virus，HPV）感染宫颈癌组织新生血管建立的影响和诊断价值。方法选取自2016年3月至2017年12月间来我院接受检查的HPV感染的宫颈癌患者、宫颈癌前病变者和宫颈健康者各30例作为研究对象，经研究对象本人同意后进行标本采集。免疫组化法观察三种组织标本的LGR4的阳性率，筛检试验观察LGR4在宫颈癌的分化、分期和分型中的诊断价值，观察LGR4阳性组织中相关促血管生成因子的表达。结果健康组织、癌前病变组织和宫颈癌组织中LGR4表达差异有统计学意义（χ2＝24.104，P＝0.000），且宫颈癌组织内LGR4的表达阳性率80.0%（24/30）显著高于健康组16.7%（5/30）和癌前病变组织50.0%（15/30），差异均有统计学意义（P均〈0.05）。LGR4的灵敏度80.00%，特异度83.33%，阳性预测值82.76%，阴性预测值80.65%，诊断准确率81.67%和Kappa值为0.63，一致性良好。不同年龄、不同分化程度和不同临床分期LGR4阳性率相比，差异均有统计学意义（P均〈0.05）。实验室结果显示，在宫颈癌前病变组织和宫颈癌LGR4阳性组织中超敏C反应蛋白、降钙素原、血管内皮因子和生长因子β均显著高于LGR4阴性组织，差异均有统计学意义（t值分别为9.247、2.925、39.669、15.348，P均〈0.05）。结论LGR4能够促进宫颈癌组织内新生血管的建立，对宫颈癌和宫颈癌前病变具有一定的诊断价值。

富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体4基因缺陷导致寿命缩短和多器官组织衰老

目的:研究富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体4(LGR4)基因缺失对小鼠寿命以及衰老相关表型的影响。方法:在正常繁殖、饲养状态下,观察LGR4基因敲除小鼠与衰老相关的表型,并记录每只小鼠的出生时间和死亡时间,比较LGR4基因敲除小鼠与正常小鼠的自然寿命差异;此外,收集2组老年小鼠的不同组织(如皮肤、眼睛、肺脏、肝脏、脾脏等),进行病理切片和苏木精-伊红(HE)染色,观察各组织形态学改变。结果:LGR4基因敲除小鼠中位生存期为17.25个月,野生型小鼠中位生存期为22.75个月,2组生存率存在明显差异(P<0.001);但是,年龄>20个月的2组小鼠生存率并无统计学差异。组织学结果提示,老龄LGR4基因敲除小鼠的皮肤出现明显的结构异常,包括角质层不平整、毛囊稀少、皮下脂肪层变薄、血管减少。结论:LGR4基因缺失缩短小鼠的全程寿命,但并不影响老龄小鼠的生存率。

G蛋白偶联受体激酶4对内皮素B型受体的异常调节在原发性高血压发生中的作用

目的探讨G蛋白偶联受体激酶4（G protein-coupled receptor kinase 4,GRK4）对内皮素B型受体（endothelin receptor B,ETB）的异常调节在原发性高血压中的作用及机制。方法选用12～14周龄,体质量300 g左右的雄性自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rats,SHRs）及其对照鼠（Wistar-Kyoto,WKY）各10只,通过无创鼠尾测压仪测定血压,采用右肾上腺静脉插管灌注ETB受体特异性激动剂BQ3020后观察尿流速及尿钠排泄率,荧光定量PCR检测大鼠肾脏GRK4 mRNA水平,Western blot测定大鼠肾脏GRK4及ETB受体的蛋白表达差异,免疫共沉淀法检测ETB受体磷酸化情况,在动物水平观察高血压状态下ETB受体的功能情况。结果 ETB受体激动剂BQ3020对WKY大鼠有明显利尿排钠作用,且这种利尿排钠作用可以被ETB受体抑制剂BQ788阻断,但在SHR大鼠BQ3020的利尿排钠作用受损[尿流速：（11.23±2.16）vs（3.49±1.32）,P〈0.05];尿钠排泄率：[（1 551.43±393.47）vs（601.16±128.15）,P〈0.05];在SHR大鼠肾皮质GRK4的蛋白水平及mRNA水平均较WKY大鼠高[蛋白：（1.38±0.10）vs（0.85±0.07）,P〈0.05];mRNA：[（2.23±0.15）vs（0.78±0.16）,P〈0.05],SHR大鼠ETB受体总蛋白水平与WKY大鼠相比差异无统计学意义（P〉0.05）,但ETB受体磷酸化水平增高。结论 GRK4可能通过对内皮素B型受体的异常调节,参与了原发性高血压发生与发病。

大气细颗粒物对G蛋白偶联受体激酶4的异常调节在尿钠排泄中的作用

目的探讨大气细颗粒物(fine particle,fine particulate matter,PM2.5)对G蛋白偶联受体激酶4(G proteincoupled receptor kinase 4,GRK4)的异常调节及其影响尿钠排泄在高血压病发生、发展中的作用。方法以Wistar-Kyoto(WKY)大鼠来源肾脏近曲小管上皮细胞(renal proximal tubule,RPT)株为研究对象,观察在PM2.5刺激对细胞活力、Na+-K+-ATP酶活性以及GRK4、D1R表达的变化;以小干扰RNA(siRNA)技术沉默GRK4,观察PM2.5对Na+-K+-ATP酶活性的影响。结果不同浓度PM2.5(10、50、100μg/mL)处理WKY大鼠RPT细胞株24 h后,细胞活力无明显差异(P>0.05)。PM2.5干预组(100μg/mL)Na+-K+-ATP酶活性明显高于对照组(P<0.05),且对10-6mol/L非诺多泮(fenoldopam)的作用较对照组减低(P<0.05)。不同浓度PM2.5(10、100μg/mL)干预后RPT细胞的GRK4表达明显高于对照组(P<0.05),多巴胺D1受体的蛋白表达明显低于对照组(P<0.05)。以siRNA技术沉默GRK4后,PM2.5对Na+-K+-ATP酶活性的作用较对照组无明显差异(P>0.05)。结论 PM2.5通过调节GRK4表达,进而调控D1受体的表达和Na+-K+-ATP酶活性,参与了对尿钠排泄的调节。

G蛋白偶联受体激酶4变异体A142V与血压昼夜节律的相关性

目的观察G蛋白偶联受体激酶4(GRK4)变异体A142V与高血压患者血压昼夜节律变化的关系。方法根据动态血压昼夜节律变化,将110例高血压患者分为杓型组48例和非杓型组62例,分析GRK4的SNPA位点变异体A142V在两组中的分布。结果杓型组与非杓型组GRK4变异体A142V分布存在显著差异;杓型组以野生型GG分布为主,而非杓型组AG+AA突变基因型分布显著高于杓型组(P<0.05)。结论 GRK4 A142V变异体与高血压患者血压昼夜节律变化有关,携带A142V变异体的患者夜间血压更易升高。

G蛋白偶联受体激酶4在高血压中的研究进展

原发性高血压是心血管系统的常见疾病之一,目前,我国高血压患病率约20%,影响人群超过2亿[1-3],而且呈现继续增高的趋势。原发性高血压可以引起脑血管病,肾小动脉硬化,左心室肥厚,充血性心力衰竭,肾衰竭和猝死等,严重影响着人们的身体健康,因此明确高血压的发病机制显得尤为重要。原发性高血压的发病机制极其复杂,遗传因素、环境因素以及众多的神经体液因子共同作用调控着血压的变化。这些体液因子包括多巴胺、血管紧张素、利钠肽、

G蛋白偶联受体激酶4调控小鼠肾脏急性缺血再灌注损伤的机制探讨

目的探讨G蛋白偶联受体激酶4(G protein-coupled receptor kinase 4,GRK4)对小鼠肾脏急性缺血再灌注损伤的影响及其作用机制。方法取SPF级健康野生型[8周龄、体质量(21.34±0.42)g]和GRK4转基因型[8周龄、体质量(21.87±0.68)g]C57BL/6小鼠,各12只。各型分别按随机数字表法分为4组(n=6):野生型假手术对照组、野生型肾脏缺血再灌注损伤组、GRK4转基因型假手术对照组、GRK4转基因型肾脏缺血再灌注损伤组。假手术对照组均采用开腹后不阻断肾动脉血流;缺血再灌注损伤组均采用夹闭肾动脉缺血45 min再灌注24 h,建立小鼠肾脏I/R模型。各组处死小鼠后,取血标本进行肾功能检测(血肌酐、血尿素氮);HE染色观察肾脏病理形态改变,并行肾小管损伤半定量评分;测定肾脏组织中过氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)等氧化应激水平改变;TUNEL染色检测肾脏组织中细胞凋亡情况;蛋白质免疫印记方法检测各组小鼠肾脏组织中GRK4和AT1受体的蛋白表达变化。结果野生型小鼠肾脏I/R模型后肾功能受损,血肌酐、血尿素氮升高,肾脏小管上皮细胞脱落、死亡(P<0.05);肾脏组织中GRK4蛋白表达含量增加,差异有统计学意义(P<0.05)。在GRK4过表达小鼠上研究结果发现,过表达GRK4的肾脏在缺血再灌注损伤后,肾功能损害进一步加重;肾脏病理损伤评分明显增加(P<0.05)。肾脏氧化应激水平明显上升,总SOD下降和MDA升高(P<0.05);肾脏凋亡细胞数目显著增多(P<0.05)。肾脏组织中AT1受体表达量增加(P<0.05),AT1受体含量的升高可以加重小管细胞氧化应激和凋亡的发生。结论 GRK4可以通过上调肾脏AT1受体表达,增加肾脏氧化应激水平和肾小管细胞凋亡,加重肾脏缺血再灌注损伤。

G蛋白偶联受体激酶4基因变异与原发性高血压的相关性

目的探讨G蛋白偶联受体激酶4基因变异与原发性高血压的关联。方法应用等位基因特异性PCR结合实时荧光分析的方法,对中国江苏南通地区102例健康人,93例原发性高血压患者的CRK 4多态位点A 486V进行基因分型,并进行关联分析。结果V等位基因频率原发性高血压组(56.9%)显著高于正常血压对照组(44.1%),差别有统计学意义(P<0.05),高血压组中V/V基因型频率(32.4%)明显高于对照组(18.3%,P<0.05)。结论在中国江苏南通地区汉族人中,GRK 4多态位点A 486V可能与原发性高血压的发病有关,V/V基因型是遗传易患因子。

G蛋白偶联受体激酶4突变A142V基因对大鼠血管平滑肌细胞AT_1受体的影响

目的研究人G蛋白偶联受体激酶4(GRK4)变异体A142V对大鼠血管平滑肌细胞(VMSCs)血管紧张素Ⅱ1型(AT1)受体及其介导的VMSCs增殖的影响,以期了解GRK4引起原发性高血压的原因。方法构建与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合表达的慢病毒载体,包装慢病毒,感染A10细胞并进行鉴定;免疫印迹方法检测AT1受体蛋白变化;采用分光光度法检测GRK4活性,免疫共沉淀检测GRK4和AT1受体的共连接;[3 H]胸腺嘧啶掺入的方法检测增殖变化。结果转染hGRK4γA142V细胞的GRK4酶活性显著升高,AT1受体表达显著升高,GRK4和AT1受体共连接作用降低,AngⅡ刺激细胞增殖效应显著增强。结论转染hGRK4变异体A142V增加GRK4活性,引起AT1受体的功能增强和VMSCs的增殖作用增加。

血清G蛋白偶联受体-4、β-肌动蛋白表达对胃癌诊断的价值

目的检测胃癌患者血清G蛋白偶联受体-4(leucine rich repeat containing G protein coupled receptor 4,LGR4)、β-肌动蛋白(β-actin)表达水平及其在胃癌分期诊断中的研究价值。方法收集2016年10月至2019年10月在新疆维吾尔自治区喀什地区第二人民医院消化内科收治的胃癌患者517例作为研究组,并根据美国癌症联合会第7版胃癌分期标准,将胃癌患者分为四组:Ⅰ期123例、Ⅱ期121例、Ⅲ期210例、Ⅳ期63例;同时选取358例良性胃病患者作为对照组。采用酶联免疫吸附实验法分别测定血清LGR4、β-actin水平;采用logistic回归分析影响胃癌发生的危险因素;采用受试者工作曲线(receiver operator characteristic curves,ROC)分析血清LGR4、β-actin水平对胃癌的诊断价值。结果各组间性别、年龄、AFP差异无显著性(P>0.05),与对照组比较,胃癌Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期各组患者的铁蛋白水平依次降低(P<0.05),糖类抗原CA724(carbohydrate antigen,CA724)、糖类抗原CA199(carbohydrateantigen,CA199)、癌胚抗原(carcinoembryonicantigen,CEA)、同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)水平、血清LGR4、β-actin水平依次升高(P<0.05);经logistic回归分析显示,血清LGR4、β-actin、水平高均是胃癌发生的独立危险因素(P<0.05);经ROC曲线分析显示,血清LGR4、β-actin诊断胃癌发生的ROC曲线下面积分别为0.865(95%CI:0.840~0.887;P<0.001)与0.862(95%CI:0.838~0.885;P<0.001);血清LGR4、β-actin水平联合诊断胃癌的ROC曲线下面积为0.927(95%CI:0.907~0.943;P<0.001)。结论胃癌患者外周血血清β-actin、LGR4表达均上调,均是引起胃癌发生独立危险因素,因此对预测胃癌发生具有一定临床价值。

胃癌患者血清β-肌动蛋白和G蛋白偶联受体-4的表达及临床意义

目的研究胃癌患者血清β-肌动蛋白(β-actin)及G蛋白偶联受体-4(LGR4)的表达及其在胃癌中的诊断价值。方法选取2018年2月—2020年6月呼和浩特市第二医院诊治的103例胃癌患者(观察组)及同时期的胃良性肿瘤患者52例(对照组),采用酶联免疫吸附法分别测定血清中β-actin与LGR4的表达水平,分析其与临床病理参数的关系,绘制ROC曲线分析β-actin与LGR4对胃癌的诊断。结果观察组患者血清中β-actin与LGR4的表达水平均高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05),血清β-actin、LGR4在低~中分化、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期及无淋巴结转移胃癌患者的表达高于高分化、Ⅰ~Ⅱ分期和有淋巴结转移患者(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示:血清中β-actin与LGR4的截断值为3.21、47.62 pg/mL时,诊断胃癌的ROC-AUC分别为0.747、0.782,联合检测为0.869。结论胃癌患者血清中β-actin、LGR4的表达水平升高,且在低~中分化、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期及无淋巴结转移患者中高表达,二者联合检测有可能作为诊断胃癌的分子标志物。

G蛋白偶联受体激酶4(GRK4)在高血压中的研究进展

原发性高血压是多种心脑血管疾病的重要危险因素,会损害心、脑、肾等重要脏器,最终导致器官功能的衰竭。G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptors,GPCRs)是真核生物中最大且种类最丰富的一类膜蛋白受体家族,介导了人体许多细胞信号通路,参与调节人体血压等正常生理功能。在GPCRs的信号转导过程中,G蛋白偶联受体激酶(G protein-coupled receptor kinases,GRKs)能够使活化的GPCR脱敏,终止其介导的信号转导通路,从而导致高血压的发生。在GRK家族成员中,GRK4具有固有活性,在血压调控相关的组织和器官中均有表达,和高血压的发生有着密切关联。本文将从GRK4对血压的调控机制、GRK4基因多态性、GRK4和高血压药物基因组学等方面综述GRK4在高血压中的研究进展。

G蛋白偶联受体激酶4的生物学特性及其研究进展

G蛋白偶联受体激酶(GRKs)属于丝氨酸/苏氨酸激酶家族,由7个成员(GRK1-7)组成。GRKs通过磷酸化活化的G蛋白偶联受体(GPCRs)、非GPCR或非受体底物参与细胞的生理和病理活动。GRK4是迄今了解最少的GRK家族成员。笔者就其与原发性高血压发病、抗高血压药物疗效、细胞增殖和肿瘤关系方面的研究进展进行综述。

LGR4对鼻咽癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移及上皮间质转化的影响

目的 探讨富含亮氨酸重复G蛋白偶联受体-4(leucine-rich repeats containing G protein-coupled receptor 4,LGR4对鼻咽癌C666-1细胞的增殖、凋亡、侵袭、迁移和上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法 利用韦恩图将GEO数据库测序数据GSE15903、GSE89804和GSE103611三组数据取交集得出差异基因。通过生物信息学分析LGR4在鼻咽癌组织及正常鼻咽上皮组织、鼻咽癌治疗后的转移或未转移组织中的表达,RT-qPCR和Western blot检测LGR4在鼻咽癌C666-1细胞和正常鼻咽上皮细胞NP69中的表达水平。将鼻咽癌C666-1细胞进行慢病毒感染分为NC组(转染阴性对照)、KD1组和KD2组(敲低组),采用Western blot测定LGR4和上皮表型E-cadherin的表达,采用CCK-8、克隆形成实验、流式细胞术、划痕实验及Transwell实验检测细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移。结果 韦恩图显示GSE89804、GSE15903和GSE103611数据集的差异基因是LGR4。GSE12452数据分析结果显示,与正常鼻咽上皮组织相比,LGR4在鼻咽癌组织中表达上调(P<0.05)。GSE103611数据分析结果显示,与鼻咽癌治疗后未转移组织相比,LGR4在鼻咽癌治疗后转移组织中表达上调(P<0.05)。与NP69细胞相比,LGR4在鼻咽癌C666-1细胞中的mRNA和蛋白表达水平均显著上调(均P<0.001)。与NC组相比,敲低LGR4可抑制鼻咽癌C666-1细胞增殖(均P<0.05)、侵袭及迁移能力(均P<0.001),促进凋亡和C666-1细胞中E-cadherin的表达(均P<0.001)。结论 LGR4在鼻咽癌C666-1细胞中表达上调,敲低LGR4抑制C666-1细胞的增殖、侵袭迁移,促进凋亡和上皮间质转化。

RGS4在药物依赖受体信号通路中的调节作用

药物依赖形成机制复杂,涉及多脑区、多受体信号通路的共同调节。G蛋白信号调节因子4(RGS4)可通过作用于多巴胺、阿片、代谢型谷氨酸等受体系统参与药物依赖形成的调节。笔者以RGS4为靶点,通过对多巴胺、阿片、代谢型谷氨酸受体系统的影响阐述RGS4在药物依赖相关受体信号通路中的调节作用。

不同高血压分级的2型糖尿病患者血清LGR4水平变化及意义

目的探讨不同高血压分级的2型糖尿病患者血清富含亮氨酸的G蛋白偶联受体-4(LGR4)水平的变化及临床意义。方法将240例2型糖尿病患者按照血压水平分为单纯2型糖尿病组(DS组)、2型糖尿病合并高血压1级组(DH1组)、2型糖尿病合并高血压2级组(DH2组)、2型糖尿病合并高血压3级组(DH3组)各60例,选取同期体检的健康人群60例为正常对照(NS)组。采用ELISA测定血清LGR4水平。采用Spearman相关分析法分析血清LGR4水平与血压、血糖的相关性,多元逐步回归分析影响2型糖尿病患者血清LGR4水平的因素。结果 DS组、DH1组、DH2组、DH3组血清LGR4水平均低于NS组,DH2组、DH3组血清LGR4水平均低于DS组,DH3血清LGR4水平均低于DH1组、DH2组(P均<0.05)。血清LGR4水平与SBP(r=0.29)、DBP(r=0.20)、高血压病程(r=0.17)、Hb A1c(r=0.13)呈正相关(P均<0.01)。以LGR4为因变量的逐步多元线性回归中,SBP、DSP是影响LGR4的主要因素。结论在不同血压等级的2型糖尿病患者中,血清LGR4水平随着血压的升高逐渐升高,血清LGR4水平对2型糖尿病合并高血压的发生可能存在一定的影响。

LGR4、R-spondin2在胃癌组织中的表达及其预后相关性研究

目的:探讨富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体-4(LGR4)、R-spondin2在胃癌组织中的表达及其预后相关性。方法:2015年1月至2017年5月,151例胃癌患者术中癌灶组织151例,癌旁组织(距癌灶边缘≥5 cm)80例,采用免疫组织化学染色法检测组织中LGR4、R-spondin2表达,并分析其与胃癌患者临床病理特征的关系;采用乘积极限(K-M)法对胃癌患者进行生存分析,Log-rank检验比较显著性;采用COX回归模型分析胃癌患者预后影响因素。结果:与癌旁组织相比,癌灶组织LGR4、R-spondin2阳性表达率均较高(P<0.05)。胃癌组织中LGR4表达与性别、年龄均无关(P>0.05),与肿瘤直径、病理分级、临床分期、淋巴结转移均有关(P<0.05);R-spondin2表达与性别、年龄、肿瘤直径均无关(P>0.05),与病理分级、临床分期、淋巴结转移均有关(P<0.05)。151例胃癌患者在随访期内有72例死亡,病死率为47.68%,高于LGR4阴性表达者病死率(P<0.05),总生存期较短(P<0.05);R-spondin2阳性表达者病死率高于R-spondin2阴性表达者(P<0.05),总生存期较短(P<0.05)。COX多因素分析结果显示,LGR4阳性表达、R-spondin2阳性表达、低分化、Ⅲ~Ⅳ期、伴淋巴结转移均是影响胃癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论:胃癌组织中LGR4、R-spondin2均为高表达,且两者均与患者临床病理特征密切相关,是影响患者预后的独立危险因素,可能用于临床病情评估及预后死亡风险预测。

GPR120激动剂TUG891对诱导分化的3T3-F442A细胞的脂肪因子表达的影响

目的研究游离脂肪酸受体4/G蛋白偶联受体120(FFAR4/GPR120)激动剂TUG891对脂肪细胞的细胞因子mRNA水平的影响。方法 3T3-F442A细胞在含100 m L/L胎牛血清(FBS)的完全DMEM培养基中培养至接触抑制2 d后,换至诱导分化培养基继续培养2 d;随后,用含100 m L/L FBS、0. 24 IU/m L胰岛素的DMEM维持培养基培养2 d;最后,在含100 m L/L FBS的完全DMEM培养基培养6～8 d。当80%以上细胞出现脂滴沉积后,细胞分为对照组和10μmol/L FFAR4激动剂TUG891处理组。处理12 h后,应用反转录PCR检测3T3-F442A脂肪细胞内白细胞介素1(IL-1)、IL-6、IL-12、IL-8、IL-10、IL-15、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、抵抗素(resistin)的mRNA水平。结果 3T3-F442A细胞经诱导后分化为脂肪细胞。与对照组相比,TUG891处理组3T3-F442A脂肪细胞的IL-1、IL-6、IL-12、TNF-α和MCP-1的mRNA水平显著下降,IL-8、IL-10、IL-15和resistin的mRNA水平变化不明显。结论激活FFAR4/GPR120抑制脂肪细胞的细胞因子IL-1、IL-6、IL-12、TNF-α和MCP-1转录。