雌激素受体GPER在乳腺癌中的研究现状

G蛋白偶联雌激素受体(G protein-coupled estrogen receptor,GPER,也称GPR30)在多种类型细胞中均可介导雌激素信号,其在乳腺癌、子宫内膜癌等激素敏感性肿瘤细胞中的作用尤为明显。雌激素及抗雌激素药物通过激活GPER促进下游信号通路的活化及靶基因的表达进而参与乳腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭及他莫昔芬耐药等恶性生物学行为。目前发现表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的转活是GPER引发下游生物学效应的关键靶点。此外,GPER还被认为是预测三阴乳腺癌患者预后的潜在生物学标志物之一,对GPER的深入研究可能为乳腺癌患者的综合性评估和临床治疗打开更广阔的前景。

膜型雌激素受体ER-α36的分子结构及相关信号传导途径研究进展

ER-α36由ER-α66衍生而来,它的5'末端和3'末端没有转录活性区AF-1和AF-2,仅保留了ER-α66的DNA结合区、核定位信号区和配体依赖区。ER-α66定位于细胞核,而ER-α36主要锚定于细胞膜和细胞质,故ER-α36属于膜型雌激素受体。与ER-α66相比,ER-α36具有更强大的配体依赖活性,可对内、外源性雌激素迅速做出反应,在数秒至数分钟内快速激活信号通路,并与各类信号因子(如Ca2+、PKA、PKC、IGF)协同,参与细胞内的信号级联反应,介导了雌激素的非基因组信号途径。ER-α36与胞内多种信号通路存在着交叉对话现象,并参与介导细胞内的快速信号途径,如腺苷酸环化酶途径(AC)、蛋白激酶C途径(PKC)、G蛋白偶联途径、磷脂酰三磷酸肌醇激酶PI3K/AKT信号途径、丝裂原活化蛋白激酶MAPK/ERK信号途径、Ca2+通路和Src激酶激活的信号途径。上述信号途径可归纳为3种主要的信号通路:Ras-Raf-MEK-MAPK通路、Src-PI3K-AKt通路、PLC-PKC-c AMP-PKA。

天香丹胶囊通过调节G蛋白偶联雌激素受体保护心肌缺血再灌注损伤

目的探讨天香丹胶囊(TXD)对预处理去卵巢雌性合并心肌缺血再灌注(I/R)大鼠心肌损伤的保护作用与其可能机制。方法将60只SD雌性大鼠摘去卵巢后随机分为假手术组、模型组、阳性对照组、低、中、高3个剂量实验组,每组10只。阳性对照组灌胃0.8 mg·kg^(-1)雌二醇溶液,低、中、高剂量实验组分别灌胃给予0.2、0.4和0.8 g·kg^(-1)天香丹溶液,假手术组、模型组灌胃等量双蒸水。连续处理60 d。末次给药12 h后建立心脏缺血再灌注模型;其中假手术组只穿线不结扎,另取10正常SD雌性大鼠为正常组(不做任何处理)。用酶联免疫吸附试验法检测血清中大鼠心肌肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性、三磷酸肌醇(IP3)的含量;用微量法检测血清中乳酸脱氢酶(LDH);用MTB微板法检测心肌组织中Ca^(2+)浓度;用苏木精-伊红染色检测大鼠心肌组织病理变化;用蛋白质印迹法检测心肌组织中G蛋白偶联雌激素受体(GPER)、磷脂酶C(PLC-β)、三磷酸肌醇受体(IP3R)以及肌浆网钙ATP酶(SERCA2)蛋白表达水平。结果正常组、假手术组、模型组、阳性对照组和高剂量实验组的血清中CK-MB活性表达分别为(64.88±4.70)、(65.86±4.40)、(161.40±10.97)、(78.31±6.64)和(79.62±7.43)pg·mL^(-1);Ca^(2+)浓度分别为(3.20±0.11)、(3.41±0.12)、(5.05±0.15)、(4.10±0.12)和(4.18±0.18)mmol·L^(-1);模型组与假手术组比较,高剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。正常组、假手术组、模型组、阳性对照组和高剂量实验组的GPER蛋白相对表达水平分别为0.74±0.06、0.73±0.04、0.36±0.03、0.67±0.06和0.65±0.05;模型组与假手术组比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);阳性对照组、高剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论TXD对I/R大鼠心肌损伤有保护作用,可能与调节GPER/PLC/IP3R通路有关。

GPER在TNBC中介导的相关通路分析

三阴性乳腺癌(TNBC)是乳腺肿瘤中最具侵袭性的分子亚型,占所有乳腺癌的10%~15%,且预后最差。其特点是缺乏雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)表达,缺乏人表皮生长因子受体2(ERBB2/HER2)过表达或基因扩增,故早期TNBC被认为是一种不依赖雌激素的乳腺癌。乳腺癌的治疗主要包括激素治疗、抗HER2治疗和化疗,故TNBC长期以来缺乏有效的靶向治疗和精确的治疗选择,直到G蛋白偶联雌激素受体(GPER)的发现才揭示出TNBC的雌激素介导通路。有研究表明GPER与TNBC促转移途径有关,这些结果为研究GPER介导雌激素在TNBC中的致癌作用提供了新的见解,为TNBC的治疗提供了新思路。综述了与GPER相关的各通路及其作为TNBC潜在治疗靶点的合理性,为探究治疗TNBC的有效作用通路提供理论基础。

雌激素调控三阴乳腺癌生物学行为及其信号机制的研究进展

乳腺癌是女性最常见恶性肿瘤,按雌激素受体(ER)表达情况,可将乳腺癌大致可分为ER阳性和ER阴性两类,三阴性乳腺癌(TNBC)是ER阴性乳腺癌,不表达ER、孕激素受体(PR)或Her-2受体。TNBC侵袭性和转移性较强,临床预后较差,缺乏特异性治疗靶点,需要一种有效的治疗方法。研究显示,雌激素不仅可调控ER阳性乳腺癌的生物学行为,同时还对TNBC生物学行为如细胞增殖、迁移和侵袭等产生影响,而发挥介导作用的重要受体就是G蛋白偶联雌激素新受体(GPER)。本文主要就近年来雌激素对TNBC生物学行为的影响及其信号机制研究进展进行综述。

GPR30在乳腺癌患者中的表达及其临床意义

目的研究G蛋白偶联受体30(GPR30)在雌激素受体阴性乳腺癌患者乳腺病理组织中的表达情况及临床意义。方法 123例乳腺癌患者的病理标本,进行免疫组化染色,观察GPR30的表达情况。结果 GPR30表达于63.41%的乳腺癌患者中,ER(+)患者表达率64.29%,其中TAM治疗耐药表达率高达69.23%。结论 GPR30在雌激素受体阴性的乳腺癌内分泌治疗中具有重要作用。

GPER介导的丹参酮ⅡA抗三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移作用机制研究

目的:基于体外细胞实验,探索丹参酮ⅡA对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移的抑制作用及其分子机制。方法:选取三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231,利用细胞增殖实验检测丹参酮ⅡA对MDA-MB-231细胞增殖的作用,并筛选适宜的药物浓度;应用划痕实验检测丹参酮ⅡA对MDA-MB-231细胞迁移率的影响;Western Blot法检测丹参酮ⅡA对G蛋白偶联雌激素受体(G protein-coupled estrogen receptor,GPER)及基质金属蛋白酶9(Matrix metalloprotein-9,MMP-9)表达的影响。结果:细胞增殖实验结果显示,丹参酮ⅡA可以抑制MDA-MB-231细胞增殖,且呈剂量依赖性(P<0.05);划痕实验结果显示,丹参酮ⅡA可以抑制MDA-MB-231细胞迁移,且呈剂量依赖性(P<0.01),加入GPER特异性抑制剂G15后迁移率有所上升(P<0.01)。Western Blot结果显示,丹参酮ⅡA可以显著下调GPER和MMP-9蛋白的表达水平并呈剂量依赖性(P<0.05),加入GPER特异性抑制剂G15后,MMP-9表达有所上升(P<0.01)。结论:丹参酮ⅡA可以抑制三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移,其机制可能与抑制GPER介导的MMP-9表达相关。

他莫昔芬对三阴乳腺癌细胞饥饿耐受的影响及其机制研究

目的探讨他莫昔芬(TAM)对三阴乳腺癌(TNBC)MDA-MB-468细胞耐受饥饿的影响,研究G蛋白偶联雌激素受体-自噬相关蛋白Beclin-1(GPER-Beclin-1)通路在其中的作用。方法用血清饥饿方法建立模型细胞,并分为对照组和实验组。另取常规培养的MDA-MB-468细胞作为空白组。对照组和实验组分别以1‰二甲基亚砜和5μmol·L^(-1)TAM处理48 h,空白组常规培养48 h。用siRNA转染技术沉默模型细胞中GPER表达,并分为GPER-NC组(空载转染)和GPER-si组(转染GPER)。GPER-NC组和GPER-si组均以5μmol·L^(-1)TAM处理8 h。用结晶紫染色法检测细胞贴壁存活率,用蛋白印迹法检测LC3B和Beclin-1蛋白表达,并评估自噬能力。结果血清饥饿48 h,实验组、对照组和空白组细胞的贴壁存活率分别为(128.77±6.66)%,(101.00±3.26)%和(177.25±4.45)%,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ相对蛋白表达量分别为(142.15±5.25)%,(100.33±4.55)%和(65.34±8.78)%,Beclin-1相对蛋白表达量分别为(156.22±7.88)%,(101.25±3.80)%和(97.97±8.90)%,实验组和对照组的上述指标比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。血清饥饿48h,GPER-NC组和GPER-si组细胞的贴壁存活率分别为(103.55±6.68)%和(49.74±5.15)%,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ相对蛋白表达量分别为(98.36±6.68)%和(64.54±5.25)%,Beclin-1相对蛋白表达量分别为(105.39±6.68)%和(31.03±8.76)%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 TAM能增强TNBC MDA-MB-468饥饿耐受能力,该效应可能与GPER-Beclin-1通路激活自噬有关。