基于G-四链体/硫黄素T无标记荧光适配体传感器快速检测氟苯尼考

硫黄素T(ThT)通过非共价相互作用与G-四链体结合,形成G-四链体/ThT复合物,呈现出较强荧光强度,而游离ThT荧光十分微弱。当存在氟苯尼考(FF)时,具有G-四链体结构的适配体(Apt)对靶标的高亲和力,使得Apt/FF复合物形成并释放ThT,荧光强度降低。基于这一特点,本研究设计一种灵敏快速的现场检测体系,用于检测氟苯尼考,即基于G-四链体/硫黄素T的无标记荧光适配体传感器。该适配体传感器的检测范围为0.0128~200 ng/mL,实际检出限0.0128 ng/mL,检测总时长10 min。同时,对实际加标样品(牛奶和鸡蛋)进行回收率计算,加标回收率在91.2%~117.1%之间。所建立的无标记荧光适配体传感器具有高特异性、成本低、耗时短等优点,可用于实际样品的现场检测。

硫黄素T与侧翼连接双链DNA的G-四链体高特异性作用

富G碱基的DNA序列在离子诱导下可形成G-四链体(G4),基于这一构型转化设计了大量的传感检测平台。其中的荧光检测平台是基于G4与荧光小分子的相互作用。但是,G4与荧光小分子的有效结合依赖于G4构型和体系中存在的离子种类和离子浓度,尤其是高Na^(+)浓度(140 mmol·L^(-1))。那么如何实现G4与荧光小分子普适性地有效结合,并不依赖于体系中的Na^(+)和Na^(+)浓度,是一个难题。在本研究中,以最简单的富G DNA序列凝血酶适体链TBA(thrombin binding aptamer)为例,在3’端和5’端分别增加10个碱基(TBA-10 bp),K^(+)诱导TBA-10 bp形成K^(+)稳定TBA(K^(+)-TBA,G4)并衔接含有10个互补碱基对的双链DNA(K^(+)-TBA-10 bp)。相较于K^(+)-TBA,硫磺素T与K^(+)-TBA-10 bp结合后的荧光强度增加了100倍,相互作用强度增加了1000倍,而且与体系中的Na^(+)(5–140 mmol·L^(-1))无关。结合荧光光谱,紫外吸收光谱和圆二色光谱发现硫磺素T特异性的嵌合于K^(+)-TBA和双链DNA衔接处的空腔内。有趣的是,这一结合模式不受G4构型的影响。该研究结果为研究G4与荧光小分子的有效结合提供了新视角,也为拓展G4在生物功能和生化检测领域的应用提供了实验依据。

基于对硫黄素T诱导的DNA G-四链体抑制作用检测银离子

发展了基于DNA探针的新型银离子免标记检测方法.富含C和G碱基的DNA序列可在荧光染料硫黄素T（ThT）的诱导下折叠形成四链体结构,并使ThT的荧光显著增强,但该ThT—DNA复合形成的四链体易被银离子破坏.依据此特性,设计了一种新型的免标记银离子传感器.银离子的响应范围为0.1 ～10μmol/L,检出限为60 nmol/L,具有较高的灵敏度.该方法已成功应用于湘江水和自来水样品中银离子的检测,结果表明ThT—DNA复合四链体有望提供一种可靠、高灵敏和特异的检测平台,实现复杂体系中银离子的定量分析.

基于硫代黄素T诱导G-四联体构成的生物传感器检测铅离子

硫代黄素T(ThT)荧光分子在自由状态下荧光强度很弱,通过在Tris-HCl缓冲液中加入Pb^2+的适配体即富含G的DNA序列,可与ThT荧光分子形成G-四联体结构,使荧光信号迅速增强;向溶液中加入Pb^2+,Pb^2+与其适配体有很好的结合特异性,可生成更牢固的G-四联体结构,使ThT分子被释放出来,导致溶液的荧光强度降低,基于此可检测溶液中的Pb^2+离子.实验中优化了缓冲溶液组成、ThT荧光分子浓度、Pb^2+适配体浓度及反应时间等条件.结果表明,在10 mmol/L Tris-HCl(pH=8.3,含2 mmol/L MgCl2)缓冲溶液中,ThT荧光分子和Pb^2+适配体的浓度分别为10μmol/L和200 nmol/L,反应10 min时,随着溶液中Pb^2+浓度的增加,荧光强度减弱.Pb^2+浓度在20~1000 nmol/L范围内时,荧光强度与Pb^2+的浓度呈现良好的线性关系(R 2=0.9941),检出限为1 nmol/L.实际水样测试结果表明,该方法的回收率在98.8%~101.3%之间.该传感器灵敏、快速、无需化学修饰荧光分子且成本低.

基于G-四链体/硫黄素T的荧光生物传感器检测Pb^(2+)

本研究利用Pb^(2+)与硫黄素T(ThT)对功能核酸G-四链体(G4)中心位点的竞争关系,构建了一种荧光生物传感器用于Pb^(2+)的简单灵敏检测。ThT可以特异性结合G4,且在结合后显示出明显的荧光信号。Pb^(2+)能与G4形成更稳定的结构,故而当溶液中存在Pb^(2+)时,ThT会从G4-ThT体系中被竞争释放出来,失去受G4束缚状态下的刚性结构,从而降低了其荧光强度。在最优条件下,该体系荧光信号与Pb^(2+)浓度在5~1000 nmol/L范围内呈现良好的线性关系,检测限为1.6 nmol/L,同时实现对中药材独活中Pb^(2+)含量的加标测定。方法具有操作简便、响应快速以及高选择性超灵敏的特点,在Pb^(2+)检测方面有良好的应用潜力。

以G-三链体/硫黄素T为探针非标记荧光法检测DNA

为了获得一种简单、灵敏、低成本的DNA检测方法,提出了一种非标记荧光定量检测DNA的方法。信号探针(Signal DNA)和封闭探针(Block DNA)通过部分杂交形成双链DNA结构。所形成的双链DNA结构与靶标DNA作用,释放出一段富G的DNA序列;此富G的DNA序列可形成G-三链体(G-triplex,G3),可结合硫黄素T(ThT)形成G3/ThT复合物,产生强的荧光信号。通过测定体系中荧光的强度,实现对目标DNA的定量检测,检出限为21 nmol/L。该方法不需要标记荧光染料,成本低,操作简单,灵敏高,在DNA定量检测领域有良好的应用前景。

国机重工T100G-3型履带推土机

T100G-3型履带推土机是国机重工立足目前用户对产品外观、工作环境、操作舒适性等越来越高的基础上研发的一款设备,是国机重工2013年"1+1"重点开发项目。该机具有新颖的外观造型设计和优化的人机工程学设计,改进了驾驶室和操纵舒适性,全面提升了产品覆盖件、地板、油箱、仪表等的工艺性和可靠性。该机采用顶置式空调系统,提高了空间操作舒适性。采用整体仪表,使检测更直观。

光通信关键器件Interleaver的原理和进展

Interleaver(梳状分波器)是DWDM光通信系统中的重要无源器件。对比介绍几种类型 Interleaver的原理、结构、性能,并分析它们的发展趋势。

G-三链体可视化核酸传感器用于四环素的检测

四环素因其广谱活性和低成本,在畜牧业和水产养殖中被广泛用于预防细菌感染和提高生长速度,四环素的过度使用导致抗生素在食品中残留,严重威胁人类的健康。硫代黄素T(ThT)可以嵌入到特殊核酸结构中,从而荧光强度得到强激发实现信号输出。本文中四环素适配体可与富G序列结合形成双链,但四环素存在时优先与适配体结合,经解除结合后的富G序列可自身折叠形成G-三链体结构,增强了ThT的荧光强度,依据靶标浓度与ThT荧光强度良好的线性关系,实现对四环素的定量检测。本方法在四环素浓度为1 nmol/L-1μmol/L范围内有良好线性,R^(2)高达0.99,检测限为0.07 nmol/L,并且在25 min内可以完成检测。因此,一种基于G-三链体的双链竞争内劈裂可视化方法被开发出来并实现了四环素的简便、快速、灵敏、特异、低成本的检测。

左G-正则环

刻画了左G-正则环的结构与性质,以及T-纯内射模、T-余扭模、τ-内射模之间的关系.

基于G-三链体DNA探针的汞离子检测新方法

开发简单快速的汞离子(Hg^(2+))检测新方法对人类了解重金属污染具有重要的意义.基于G-三链体DNA探针设计一种非标记的荧光方法用于汞离子检测.富含G碱基的DNA序列能自主装形成G-三链体结构.在没有Hg^(2+)存在的情况下,G-三链体DNA能与荧光染料硫黄素T结合生成非标记的荧光探针.硫黄素T与G-三链体结合后,ThT的荧光信号会显著增强.在Hg^(2+)存在的情况下,G-三链体DNA环部的胸腺嘧啶T能与Hg^(2+)发生反应,从而改变DNA的构型,抑制G-三链体结构的形成,使得ThT的荧光减弱.该方法通过对ThT-G-三链体的荧光强度变化实现溶液中的Hg^(2+)离子的检测.对该方法的可行性进行论证,并对实验条件进行优化.实验结果表明该方法可用于Hg^(2+)检测,并具有良好的灵敏度和选择性.

度量空间的g-函数新刻划

g 函数是研究度量空间与广义度量空间的有力工具之一 近年来 ,人们给出了度量空间关于g 函数的许多不同的刻划 ,此文借助于g 函数给出了度量空间的一些新刻划 。

基于G-三链体分子信标的多聚核苷酸激酶荧光检测新方法

G-三链体(G3)由三段连续G碱基的富G序列组成的,因其潜在的生物学功能和特殊的结构受到越来越多的关注。G3序列能结合硫磺素T(ThT)发出强荧光,以此作信号报告分子,本文提出了一种基于G3分子信标(MB)的T4多聚核苷酸激酶(PNK)荧光检测新方法。有T4 PNK时,P1的5'末端被磷酸化,P1/G3MB双链结构中的P1被外切酶酶切,封闭在G3MB中的G3序列不能结合ThT,得到弱荧光信号。无T4 PNK时,P1/G3MB双链结构能阻止外切酶酶切,G3MB被打开,释放G3序列结合ThT荧光增强。该方法对T4 PNK检测的线性范围为0.0002~0.01 U/μL,检测限为0.0002 U/μL。该方法具有操作简便、成本低和选择性高等优点,并可用于T4 PNK酶活性抑制剂的评估。

佛山地区三种葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变型的研究

目的 :探讨佛山地区小儿G 6 PD缺乏症患儿基因突变类型。方法 :使用突变特异性扩增系统 (amplit icationrefractorymutationsystem ,ARMS)方法测定经G 6 PD /6磷酸葡萄糖酸脱氢酶 (6PGD )比值法二次检验证实的患儿 42例静脉血 ,并对其中 3例阳性标本进行分子克隆核测序。结果 :42例标本中 ,G13 88A突变 17例 ,占40 5 % ;G13 76T突变 12例 ,占 2 9% ;A95G突变 3例 ,占 7 1% ,未定型 10例 ,经核苷酸序列分析证实检测正确。结论 :ARMS法是一种用于检测G 6 PD基因突变较理想的方法。G 6 PD基因突变型G13 88A、G13 76T及A95G是佛山地区G 6

硫磺素T诱导G-四链体核酸适体的氡累积辐射剂量荧光检测新方法

目的应用核酸适体9-3-35和硫黄素T,建立放射性惰性气体氡的非标记荧光传感分析新方法。方法用硫磺素T诱导富G序列核酸适配体9-3-35形成稳定的G-四链体结构,产生荧光信号,采集氡辐射得到稳定的子体铅,加入Pb^(2+)后导致体系荧光信号敏锐变化,灵敏检测氡。结果 Pb^(2+)离子浓度为1.0 nmol/L^125.0 nmol/L时,荧光强度改变量(ΔF)与Pb^(2+)离子浓度呈现良好的线性关系,ΔF=9.13cPb+163.40,r=0.995 3;氡累积浓度为3.0×104Bq·h/m^3~2.2×105Bq·h/m^3时,ΔF值与氡累积浓度之间的数学定量模型为ΔF=35.59cRn+229.51,r=0.994 0。新方法对铅的检出限为0.312 nmol/L,对氡的检出限为1.87×103Bq·h/m^3,低于国家标准方法中氡的累积测量的检出限(2.1×103Bq·h/m^3)。结论本方法可以灵敏检测氡,在氡的采样和检测过程中避免了辐射危害;可直接测定氡样品,操作简单,成本低廉,拓展了核酸适体对放射性物质和气体的荧光传感检测新领域。

PCR可视化检测技术的开发及其在猪源性检测中的应用

该文以G-四链体和硫磺素T为报告体系,建立一种聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)可视化检测方法,仅需普通基因扩增仪和蓝光灯,即可在反应后通过肉眼观测荧光亮度直接判读结果,无需开盖,避免PCR产物污染问题的发生。并以猪源性DNA为检测目标设计特异性引物,建立猪源性可视化检测方法,通过对市售的牛、羊、兔、鸡、鸭肉对比,特异性良好,检测限达到0.01 ng/μL,可在混合肉DNA样品中检出1%的猪肉,并且能成功应用到实际食品样本的检测中。反应时间可控制在1 h以内,相较常用的实时荧光PCR,该方法既缩短时间,又不需要使用更昂贵的荧光PCR仪,且无需荧光基团修饰的探针,适合在简单的条件下进行快速定性检测。

高精度衍射光栅干涉式测量系统的主要误差分析与仿真

设计了一种高精度位移传感器——衍射光栅干涉仪系统。该系统利用半导体激光器作为光源,衍射光栅作为长度标准,其光学原理可以利用多普勒效应来阐述。给出当光栅存在沿X向、Y向上的位移偏差和绕X轴、Y轴和Z轴的转动误差时,引起干涉条纹质量变化和测量误差的定量关系,为测量系统在实际应用中进行误差修正提供依据。经分析可知,光栅沿X轴(光栅运动方向)、Y轴(光栅刻线方向)和Z轴的偏移几乎不会导致条纹信号变化;当光栅沿着X轴旋转时,条纹方向和间隔均发生了变化;当绕Z轴旋转时,条纹间隔没有变化但是方向发生了变化;当沿X轴和Y轴旋转后,条纹位置分别向右和向下移动。光栅沿Z轴移动误差小于0.05mm,绕X轴和Z轴旋转误差小于0.002rad,绕Y轴旋转误差小于0.005rad时,满足测量范围为1000mm时,精度为±3μm测量的要求。

基因多态性对儿童肾病综合征糖皮质激素治疗效果的影响

目的 探讨CYP3A4*18B(G20230A)、CYP3A5(A6986G)、ABCB1(C3435T)、NR1I2(A7635G)、MIF(G-173C)与儿童肾病综合征糖皮质激素治疗效果的相关性。方法 收集糖皮质激素敏感和糖皮质激素耐药的肾病综合征患儿各29例,采用序列特异引物引导的聚合酶链反应技术分析CYP3A4*18B(G20230A)、CYP3A5(A6986G)、ABCB1(C3435T)、NR1I2(A7635G)、MIF(G-173C)多态性在各组中的分布,并进行统计学分析。结果 糖皮质激素敏感组和糖皮质激素耐药组CYP3A4*18B(G20230A)、CYP3A5(A6986G)、ABCB1(C3435T)、NR1I2(A7635G)、MIF(G-173C)基因型和等位基因分布频率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CYP3A4*18B(G20230A)、CYP3A5(A6986G)、ABCB1(C3435T)、NR1I2(A7635G)、MIF(G-173C)基因多态性与儿童肾病综合征糖皮质激素治疗效果无明确关联。

多方向干涉图的获取技术

在全息干涉度量学中，尤其在光学计算机层析领域，多方向干涉图的捕获一直是未解决的难题，本文使用旋转干涉仪方法实现了多方向干涉图的捕获，为光学计算机层析技术提供了可靠的实验数据，在光学层析应用中取得了良好的效果。