乳腺浸润性导管癌患者术后癌组织中真核翻译起始因子4e、3h和富含亮氨酸重复序列G-蛋白耦联受体5表达特征

目的检测乳腺浸润性导管癌患者术后癌组织中真核翻译起始因子(EIF)4e、3h和富含亮氨酸重复序列G-蛋白耦联受体(LGR)5的表达及其相关性。方法 132例乳腺浸润性导管癌术后组织蜡块及临床资料为研究组,经病理证实为正常乳腺小叶和导管上皮组织85例为对照组,选择EIF4e、3h和LGR5的多克隆性抗体,应用免疫组化SP法检测3种蛋白的表达。结果研究组EIF4e、3h和LGR5表达阳性率明显高于对照组,研究组EIF4e、3h和LGR5表达与肿瘤最大径、脉管浸润、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和Ki67的表达均具有相关性,EIF4e表达与淋巴结转移相关。研究组EIF4e和3h、EIF3h和LGR5表达正相关。结论乳腺浸润性导管癌患者术后组织中EIF4e、3h和LGR5高表达且具有协同作用,三者参与肿瘤的发生和进展,术后联合检测EIF4e、3h和LGR5的表达可能对判断预后有一定价值。

富含亮氨酸重复序列G-蛋白耦联受体5、血管内皮生长因子及其受体2在胃腺癌组织中表达

目的应用免疫组化方法检测胃腺癌中富含亮氨酸重复序列G-蛋白耦联受体(LGR)5、血管内皮生长因子(VEGF)和其受体(VEGFR)2的表达。方法 58例胃腺癌患者的临床资料及术后蜡块组织作为研究组,选择上述患者在距肿物边缘>5 cm、经病理主治医师证实为非癌组织的胃黏膜组织的蜡块组织47例作为对照组,应用免疫组化方法检测LGR5、VEGF和VEGFR2的表达。结果研究组中LGR5、VEGF和VEGFR2的阳性率均明显高于对照组,研究组中LGR5、VEGF和VEGFR2的阳性率与浸润深度和脉管浸润相关,LGR5的阳性率与分化程度、Ki67增殖指数相关,VEGF和VEGFR2的表达与肿瘤的最大径相关。相关性分析显示研究组中LGR5和VEGF、VEGF和VEGFR2均具有正相关性。结论 LGR5、VEGF和VEGFR2在胃腺癌术后组织中高表达,三者可以促进肿瘤的形成和进展。LGR5可能与VEGF和VEGFR2蛋白的表达有协同作用。

肺腺癌中富含亮氨酸重复序列G-蛋白耦联受体5、上皮型和神经型黏附素表达

目的检测肺腺癌组织中富含亮氨酸重复序列G-蛋白耦联受体(LGR)5、上皮型(E-)和神经型黏附素(N-cadherin)的表达特征。方法55例肺腺癌患者临床资料和术后蜡块组织作为观察组,45例距肿物边缘大于3 cm正常肺组织作为对照组。应用免疫组化SP法检测两组中LGR5、E-和N-cadherin的表达。结果两组中LGR5、E-和N-cadherin的阳性率差别显著。观察组中LGR5、E-和N-cadherin的阳性率均与肿瘤最大径及淋巴结转移相关,LGR5的阳性率与伴有坏死有关,E-和N-cadherin与伴有脉管内瘤栓相关。线性相关分析显示观察组中LGR5和E-cadherin的表达具有负相关性,而其他指标间未见相关性。结论肺腺癌术后组织中LGR5、E-和N-cadherin均表达异常,三者对肿瘤的形成和肿瘤的进展可能有促进作用。LGR5与E-cadherin可能具有负向协同作用。

G-蛋白耦联受体、组织蛋白酶-D和CD133在结肠腺癌中的表达及相关性

目的检测结肠腺癌中富含亮氨酸重复序列G-蛋白耦联受体(LGR)5、组织蛋白酶-D(Cath-D)和白细胞分化抗原133(CD133)的表达,探讨其关系及临床意义。方法选择130例结肠腺癌术后留取的蜡块及患者的临床资料作为观察组,77例结肠黏膜上皮内瘤变的患者作为对照组,77例正常结肠黏膜组织作为正常对照组,采用免疫组化方法检测3组中LGR5、Cath-D和CD133的表达。结果 3组LGR5、Cath-D和CD133表达的阳性率差别有统计学意义(P<0.000 1)。观察组中LGR5、Cath-D和CD133的表达均与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期密切相关,线性相关分析显示观察组中LGR5和CD133的表达具有正相关性,而其他指标之间无相关性。结论结肠腺癌中LGR5、Cath-D和CD133高表达,LGR5和CD133具有的协同正向作用,对肿瘤进展具有明显的促进作用。联合检测LGR5、Cath-D和CD133的表达可能对判断预后和协助临床分期有一定价值。

性别决定区Y框蛋白2、含亮氨酸重复序列G-蛋白偶联受体5在宫颈癌中的表达及与临床病理特征的关系分析

目的探讨性别决定区Y框蛋白2(Sox-2)、含亮氨酸重复序列G-蛋白偶联受体5(Lgr5)在宫颈癌中的表达及与临床病理特征的关系。方法收集2016年3月至2017年9月郑州市妇幼保健收治的经病理检查证实的74例宫颈癌、39例宫颈上皮内瘤变及36例正常宫颈组织石蜡包埋标本,应用免疫组化S-P法检测上述组织标本Sox-2、Lgr5蛋白表达情况,并分析Sox-2、Lgr5蛋白表达与宫颈癌患者性别、体质量、病理类型、肿瘤分化程度、临床分期、肿瘤浸润深度、淋巴结转移之间的关系。结果Sox-2、Lgr5蛋白在宫颈癌组织中阳性表达率分别为77.03%、79.73%,均高于宫颈上皮内瘤变组织(38.46%、41.03%)和正常宫颈组织(5.56%、2.78%),差异均有统计学意义(P均<0.05)。Sox-2、Lgr5蛋白在宫颈癌组织中阳性表达率与患者性别、体质量、病理类型均无关(P均>0.05);Sox-2、Lgr5蛋白在宫颈癌组织中阳性表达率与患者的肿瘤分化程度、临床分期、肿瘤浸润深度、淋巴结转移有关,肿瘤分化程度为低分化、临床分期为Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤浸润深度为T3~T4、有淋巴结转移患者Sox-2、Lgr5蛋白在宫颈癌组织中阳性表达率高于肿瘤分化程度为高中分化、临床分期为Ⅰ~Ⅱ期、肿瘤浸润深度为T1~T2及无淋巴结转移患者(P均<0.05)。结论Sox-2、Lgr5在宫颈癌中均呈高表达,且表达水平与患者疾病进展有着密切关系。

肠道干细胞G蛋白耦联受体5的作用机制与影响因素

位于隐窝基底部的含有亮氨酸重复序列的G蛋白耦联受体5(Lgr5)是肠道干细胞的标记物,以其独特的内化特性增强Wnt/β-catenin信号,通过Wnt/β-catenin信号通路调节肠道细胞增殖,利用IQGAP1影响肠道干细胞(ISCs)的细胞骨架以及细胞黏附力。此外,Lgr5还接受白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-22、mi R-100-5p等影响因素的调节。而当隐窝中的肠道菌群消失时,Lgr5+ISCs异位于隐窝顶部,诱导细胞凋亡增加。因此,Lgr5受多种因素影响并发挥其独特的作用,在调节ISCs增殖分化和稳定中扮演重要角色。

G蛋白耦联受体、CD44v6和E-cadherin在卵巢黏液性腺癌中的表达及意义

目的应用免疫组化方法检测卵巢黏液性腺癌中富含亮氨酸重复序列G-蛋白耦联受体(LGR)5、白细胞分化抗原(CD)44v6和上皮型黏附素(E-cadherin)的表达特点。方法 114例卵巢黏液性腺癌术后组织蜡块及临床资料作为观察组,收集卵巢交界性黏液性囊腺瘤术后的组织蜡块70例作为对照组,收集卵巢黏液性囊腺瘤术后的组织蜡块70例作为正常对照组,应用免疫组化方法检测LGR5、CD44v6和E-cadherin的表达。结果 LGR5、CD44v6和E-cadherin 3组中表达阳性率的差别显著,观察组中LGR5、CD44v6和E-cadherin的表达与肿瘤的最大径、脉管浸润、TNM分期、腹水中是否有癌细胞密切相关。观察组中LGR5和E-cadherin、CD44v6和E-cadherin的表达呈负相关性。结论卵巢黏液性腺癌术后组织中LGR5、CD44v6和E-cadherin异常表达,三者对肿瘤癌变及肿瘤进展过程中可能起促进作用。LGR5和CD44v6可能通过抑制E-cadherin的表达发挥促进肿瘤进展的作用。

G蛋白偶联受体5在脑胶质瘤病理组织中的表达及临床意义

目的 探讨G蛋白偶联受体5（LGR5）分子在脑胶质瘤病理组织的表达及其意义.方法 选择由不同病理分级脑胶质瘤组织以及正常脑组织构建的组织芯片,以抗人LGR5抗体和辣根过氧化物酶标记的抗大鼠抗体进行免疫组织化学染色,采用Aperio病理扫描系统结合两位病理科医师进行读片和结果分析.结果 LGR5分子在正常脑组织呈弱表达;脑胶质瘤组织中LGR5的表达明显高于正常脑组织;LGR5在病理Ⅰ级癌瘤组织和正常脑组织表达无明显差异;LGR5在病理Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ级癌瘤组织表达明显增高,并明显高于正常脑组织和病理Ⅰ级脑胶质瘤组织.结论 LGR5高表达于脑胶质瘤组织,可能是脑胶质瘤病理诊断的潜在标记分子.

结直肠癌组织中Lgr5、GATA6表达变化及临床意义

目的探讨结直肠癌(CRC)组织中富含亮氨酸重复单位的G蛋白耦联受体5(Lgr5)和转录调节因子GATA结合蛋白6(GATA6)的表达变化及临床意义。方法选取手术切除CRC组织41例为实验组,其配对的癌旁正常组织(距离癌组织边缘>5cm)作为对照组。采用免疫组化法检测组织中Lgr5、GATA6表达,分析两者与结直肠癌临床病理特征的关系,Spernman秩相关分析两者的相关性。结果CRC组织及癌旁正常组织中Lgr5蛋白高表达率分别为60.98%(25/41)、12.20%(5/41),比较差异有统计学意义(P<0.05);CRC组织及癌旁正常组织中GATA6蛋白高表达率分别为63.41%(26/41)、21.95%(9/41),比较差异有统计学意义(P<0.05)。Lgr5蛋白高表达率与CRC的TNM分期、淋巴结转移有关(P均<0.05),与患者性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、分化程度和浸润深度无关(P均>0.05)。GATA6蛋白高表达率与CRC的浸润深度、淋巴结转移有关(P均<0.05),与患者性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、分化程度和肿瘤分期无关(P均>0.05)。Spernman秩相关分析结果显示,CRC组织中Lgr5、GATA6蛋白表达呈正相关(r=0.327,P<0.05)。结论CRC组织中Lgr5、GATA6呈高表达,二者可能协同促进CRC的发生发展。

结直肠癌组织中LGR5、CSF1R蛋白的表达及其临床意义

目的探讨富含亮氨酸重复单位的G蛋白耦联受体5(LGR5)与集落刺激因子1受体(CSF1R)在结直肠癌样本中的表达及其预后价值。方法回顾性选取2016年2月至2019年1月南通大学附属如皋医院初诊并行手术治疗的114例结直肠癌患者,通过免疫组化染色检测配对组织样本中LGR5、CSF1R蛋白的表达水平,分析它们与结直肠癌患者临床病理资料及总生存期(OS)的关系。采用多因素Cox分析明确LGR5、CSF1R在结直肠癌患者中的预后意义。结果LGR5、CSF1R蛋白在结直肠癌组织中的阳性表达率分别为61.4%(70/114)和63.2%(72/114),均显著高于癌旁组织(P<0.05)。LGR5阳性表达与肿瘤直径、淋巴血管浸润、浆膜侵犯及远处转移显著相关(P均<0.05)。CSF1R阳性表达者浆膜侵犯、淋巴结转移及淋巴血管浸润风险显著高于阴性表达者(P均<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线显示LGR5(中位OS:45.1 vs 56.1)、CSF1R(中位OS:42.3 vs 59.2)阳性表达与结直肠患者不良预后显著相关。LGR5表达(HR=2.385,95%CI:1.254~4.534,P=0.008)、CSF1R表达(HR=3.652,95%CI:1.986~6.713,P=0.001)、TNM分期(HR=2.711,95%CI:1.366~5.380,P=0.004)及淋巴血管浸润(HR=1.940,95%CI:1.035~3.636,P=0.039)是结直肠癌患者预后不良的独立预测因素。结论LGR5、CSF1R蛋白在结直肠癌组织中呈明显阳性表达,二者可作为患者预后不佳的独立预测因子。

干细胞标志分子LGR5研究:肿瘤治疗新靶点

背景:近期研究表明,肿瘤干细胞在肿瘤的发生发展中起关键性作用,因此对其标记分子的研究必将对肿瘤发生发展的了解及肿瘤的临床诊断、治疗都带来深远的影响。目的:综述干细胞标志分子LGR5在干细胞和肿瘤干细胞中的研究进展。方法:由第一作者在PubM ed数据库及万方数据库中检索1998年1月至2014年12月有关LGR5与干细胞/肿瘤干细胞研究的相关文献。英文检索词为"LGR5,stem cell,cancer stem cells",中文关键词为"LGR5,干细胞,肿瘤干细胞"。计算机初检得到178篇文献,阅读标题和摘要进行初筛,排除与研究目的相关性差及内容陈旧、重复的文献123篇,纳入55篇符合标准的文献。结果与结论:LGR5是肠道、胃、毛囊等干细胞的表面标志分子,并与结直肠癌、胃癌、肺癌、卵巢癌、肝癌、基底细胞癌等多种肿瘤的发生发展预后密切相关,是肿瘤干细胞的候选标志分子,有望成为肿瘤治疗的新靶点。研究发现R-spondins(RSPOs)是LGR5的高亲和力配体,二者相结合参与Wnt信号通路,调节细胞增殖分化。

Lgr5在干细胞及肿瘤中的研究进展

Lgr5是近年来新发现的一种重要的7次跨膜G蛋白偶联受体,属于糖蛋白激素受体类,与促甲状腺激素受体、黄体激素受体和卵泡刺激素受体同源。最新研究证明,Lgr5是Wnt信号通路下游的靶向基因,可作为肠等部位的干细胞标志物,且其表达的产物在胚胎和器官的发育以及多种肿瘤的发生、发展屮均发挥着重要作用。Lgr5有望成为肿瘤治疗的新靶点,探讨Lgr5在干细胞生物学及肿瘤中的作用已成为目前学者们研究的热点。该文就Lgr5在干细胞及肿瘤研究中的新进展进行综述。

结肠癌组织中干细胞分子标志物LGR5的检测

目的探讨富含亮氨酸重复单位的G蛋白耦联受体5(LGR5)在人结肠癌中的表达情况及其与临床病理参数的关系。方法利用自主研发的一次成型组织芯片制作技术制作结肠癌组织芯片,用免疫组织化学染色(免疫组化)法检测246例结肠癌组织LGR5的表达,分析其与临床病理因素及预后的相关性。结果 LGR5在结肠癌远端正常对照组织、癌旁组织和癌灶组织中的表达率分别为8.7%、45.5%和44.7%(χ2=183.1,P<0.01);LGR5的阳性表达与组织分化程度相关(P<0.01);67例已死亡病例中LGR5表达阳性和阴性患者生存期分析无显著性差异(χ2=0.785,P>0.05)。结论 LGR5与结肠癌的组织分化程度相关,可能作为结肠癌早期筛查和后期靶向治疗的分子标志物。

下调Lgr5表达对结肠癌细胞上皮-间质转化及血管生成相关因子的影响

目的观察下调G-蛋白偶联受体5(Lgr5)基因表达对结肠癌(Colon cancer,CC)细胞侵袭和迁移及上皮-间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)和血管生成相关因子的影响。方法检测正常肠黏膜组织与结肠癌组织中Lgr5的表达差异;以正常肠黏膜细胞NCM460作为对照组,采用RT-PCR法和Western blot法从多种CC细胞株(HT-29、SW620、LoVo)中筛选出Lgr5相对表达量最高的肿瘤细胞株;下调LoVo细胞中Lgr5表达,将实验分为对照组(只转染Lip 2000)、si-NC组(转染Lip2000和无关序列)和si-Lgr5组(转染Lip2000和si-Lgr5序列),Transwell小室检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力;Western Blot法检测EMT相关蛋白波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达情况;酶联免疫吸附(ELISA)法检测血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(Basic fibroblast growth factor,BFGF)的含量。结果与正常肠黏膜组织相比,Lgr5在结肠癌组织中表达升高(P<0.001);LoVo细胞中Lgr5表达量较NCM460细胞和其他CC细胞株(HT-29,SW620)高;与对照组比较,si-Lgr5组细胞侵袭能力和迁移能力被抑制(P<0.05),N-cadherin、Vimentin蛋白表达降低,E-cadherin表达升高,VEGF和bFGF含量降低(P<0.05)。结论下调Lgr5表达,能够抑制LoVo细胞侵袭、迁移,其机制可能与抑制EMT和血管生成有关。

口腔鳞状细胞癌组织中VASH-1、LGR5的表达及相关性分析

目的分析口腔鳞状细胞癌组织中血管生成抑制蛋白-1(VASH-1)、富含亮氨酸重复序列G-蛋白偶联受体5(LGR5)的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学SP法对2016年3月至2018年3月唐山市协和医院收治的87例口腔鳞状细胞癌患者癌组织及癌旁组织中VASH-1、LGR5的表达情况进行检测,分析VASH-1、LGR5表达与口腔鳞状细胞癌患者临床病理特征的关系,并分析口腔鳞状细胞癌组织中VASH-1、LGR5表达的相关性。结果口腔鳞状细胞癌组织中VASH-1阳性率、LGR5阳性率均显著高于癌旁组织(P<0.05)。病理分级为Ⅰ级、肿瘤直径小于等于2cm、TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移的口腔鳞状细胞癌患者VASH-1阳性率、LGR5阳性率均显著低于病理分级为Ⅱ~Ⅲ级、肿瘤直径大于2cm、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移患者(P<0.05)。经Spearman相关性分析显示:口腔鳞状细胞癌组织中VASH-1表达和LGR5表达呈正相关(Rs=0.723,P=0.000)。结论口腔鳞状细胞癌组织中VASH-1、LGR5呈明显高表达,其水平与肿瘤直径、病理分级、淋巴结转移存在密切相关性,且VASH-1表达和LGR5表达呈正相关。

Lgr5、VEGF及VEGFR-2在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的探讨富含亮氨酸重复序列G-蛋白耦联受体(Lgr5)、血管内皮生长因子(VEGF)及血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)在结直肠癌和正常结直肠黏膜组织中的表达情况及与结直肠癌临床病理特征和预后的关系。方法选取90例结直肠癌患者癌组织标本作为观察组,选取其中10例患者癌旁正常结直肠黏膜组织标本作为对照组,应用免疫组化法检测2组标本中Lgr5、VEGF及VEGFR-2蛋白表达情况,分析Lgr5、VEGF及VEGFR-2表达与结直肠癌患者临床病理特征与预后的关系。结果观察组Lgr5、VEGF及VEGFR-2阳性表达率均明显高于对照组(P均<0.05)。观察组中Lgr5、VEGF及VEGFR-2阳性表达率与分化程度、有无淋巴结转移、临床分期、肿瘤大小、浸润深度均有明显相关性(P均<0.05),且线性相关性分析显示Lgr5、VEGF及VEGFR-2之间呈正相关性(P均<0.05);生存分析显示Lgr5、VEGF及VEGFR-2表达均与患者的预后相关(P均<0.05)。结论结直肠癌患者癌组织中Lgr5、VEGF及VEGFR-2高表达且具有协同正向作用,共同促进肿瘤的形成和进展。

胃癌组织中LGR5、HIF-1α 的表达与临床意义

目的探讨胃癌组织中富含亮氨酸重复序列G-蛋白偶联受体5(LGR5)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的阳性表达情况与相关性,以及与胃癌患者临床病理特征的关系。方法选取2019年1月—2019年12月徐州医科大学附属医院肿瘤外科收治的胃癌患者的临床资料,共包含126例胃癌组织及105例随机选择的癌旁组织。采用免疫组化法检测胃癌组织及癌旁组织中LGR5、HIF-1a的表达,比较两组的LGR5、HIF-1a阳性表达率,分析二者的相关性及其与胃癌患者临床病理特征的关系。结果LGR5、HIF-1α在胃癌组织中的阳性率均显著高于癌旁组织(P<0.05)。LGR5、HIF-1α的阳性表达率与胃癌患者的性别、年龄和肿瘤部位无明显相关性(P>0.05),而与肿瘤大小、分化程度、TNM分期和淋巴结转移明显相关(P<0.05)。进一步相关性分析结果显示,胃癌组织中LGR5与HIF-1α的表达呈正相关(r=0.389,P<0.05)。结论LGR5、HIF-1α在胃癌组织中的阳性率均显著高于癌旁组织;胃癌组织中LGR5、HIF-1α的表达与患者的临床病理特征相关;胃癌组织中LGR5与HIF-1α的表达呈正相关。

富含亮氨酸重复序列G-蛋白耦联受体5基因沉默对结肠癌干细胞生物学行为的影响

目的观察富含亮氨酸重复序列G-蛋白耦联受体5（LGR5）基因沉默对具有＂干性＂结肠癌球囊细胞生物学行为影响。方法采用RNA干扰技术沉默LGR5基因表达。利用脂质体Lipofectamine RNAi MAX将LGR5小干扰RNA （LGR5-siRNA）转染至HT29结肠癌球囊细胞，而转染对照siRNA细胞和未转染细胞分别作为阴性对照组和空白对照组。实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）和Western blot法检测转染48 h后球囊细胞LGR5 mRNA和蛋白表达；细胞计数试剂盒（CCK-8）法转染1、2、3、4 d球囊细胞增殖能力，球囊形成实验、Transwell小室实验、流式细胞术检测转染48 h后细胞自我更新、侵袭能力和细胞周期。结果转染48 h后，实验组LGR5 mRNA表达量（0.32±0.02）较空白对照组（1.00±0.16）和阴性对照组（0.99±0.12）明显下降（P＝0.000），蛋白表达亦显著下调（P＝0.000）；CCK-8实验结果显示，实验组细胞增殖能力明显减弱，4 d时空白对照组、阴性对照组和实验组吸光度（A）值分别为0.540±0.010、0.528±0.016、0.390±0.022（P＝0.000）；球囊形成实验结果显示实验组形成子代球囊数目[（21.33±2.08）个]明显少于空白对照组[（72.33±3.06）个]和阴性对照组[（70.67±2.52）个，P＝0.000]；流式细胞术检测结果显示实验组细胞明显阻滞于G0/G1期（P＝0.000）；Transwell小室实验结果显示，实验组穿膜细胞数[（35.60±6.74）个]较空白对照组[（86.47±7.85）个]和阴性对照组[（83.53±8.58）个]明显减少（P＝0.000）。结论LGR5基因沉默可抑制结肠癌球囊细胞增殖、自我更新及侵袭，LGR5对结肠癌干细胞生物学行为有重要调控作用。

激活TGR5缓解肾缺血再灌注后肾脏纤维化损伤

【目的】探讨激活胆汁酸受体TGR5在单肾缺血再灌注损伤合并对侧肾摘除(uIRIx)模型诱导的肾脏纤维化中的作用。【方法】体内实验:将C57BL/6J小鼠随机分成假手术(Sham)组、uIRIx组及uIRIx+石胆酸(LCA)组,每组6只,使用uIRIx模型诱导肾脏纤维化,通过血和尿生化指标评估肾脏功能,利用HE染色评估肾脏损伤程度,使用Masson染色及免疫组化对肾脏纤维化程度进行评估,并用Western Blotting检测肾脏皮质纤维化相关指标蛋白表达;分别在TGR5+/+小鼠及TGR5-/-小鼠中设置Sham组及uIRIx组,每组6只,利用Western Blotting检测各组肾脏纤维化程度。体外实验:在人源肾上皮细胞系HK2细胞中给予TGF-β1诱导促纤维化反应,给予LCA进行药物干预,利用鬼笔环肽染色标记细胞骨架,使用Western Blotting检测HK2细胞内纤维化相关指标蛋白表达。【结果】体内实验:与Sham组相比,uIRIx组小鼠血浆肌酐水平(P=0.007)及尿白蛋白/肌酐比(P=0.041)明显增加,肾脏皮质蛋白TGR5表达(P=0.002)下降,Fibronectin表达(P=0.020)及COL1A1表达(P<0.001)上升,同时伴有肾脏结构受损及胶原沉积加重,LCA干预有效改善肾脏功能,缓解肾脏损伤及纤维化程度;TGR5+/+小鼠与TGR5-/-小鼠相比,uIRIx诱导引起的Fibronectin表达(P<0.001)及COL1A1表达(P=0.001)增加。体外实验:TGF-β1诱导HK2细胞形态改变,细胞骨架解聚重组,促纤维化指标蛋白上调;LCA可有效抑制TGF-β1诱导的细胞形态改变及骨架解聚重组,呈浓度依赖性下调纤维化相关指标蛋白表达。【结论】LCA缓解uIRIx模型诱导的肾脏纤维化,TGR5基因敲除加重uIRIx诱导的肾脏纤维化;在HK2细胞中,LCA缓解TGF-β1诱导的细胞促纤维化反应。研究结果提示激活TGR5缓解缺血再灌注后肾脏纤维化损伤进程。

G蛋白耦联胆汁酸受体5在肺部疾病中的研究进展

G蛋白耦联胆汁酸受体5(TGR5)是胆汁酸受体之一,在人体和动物体内广泛表达,通过诱导环磷酸腺苷、信号转导和转录激活因子、核因子κB、细胞外调节蛋白激酶和蛋白激酶B信号通路,调节细胞增殖、炎症、黏附、迁移、胰岛素释放,参与免疫调节、能量代谢调节及癌症等发展过程。TGR5在多种疾病尤其肺部疾病中异常表达,本文旨在总结TGR5介导的信号通路及其在肺部疾病发病机制中的作用,有望成为新兴的治疗靶点。