短间隔连续部分肝切除(SISPH)中糖原、G-6-Pase和RNA变化分析

以 4种短间隔连续部分肝切除模型 (shortintervalsuccessivepartialhepatectomy ,SISPH)为材料 ,分析了连续部分肝切除 (succesivepartialhepatectomy ,SPH)次数和方式对肝糖原和RNA含量和分布及葡萄糖 6 磷酸酶 (G 6 Pase)活性和分布的影响 ,发现 :( 1)上述因素均可显著影响它们的活性或含量和分布 ;( 2 )肝糖原含量变化与G 6 Pase活性无显著相关性。

3-羟基根皮苷对小鼠血糖及糖异生关键酶G-6-Pase的影响

探究湖北海棠(Malus hupehensis(Pamp.) Rehd.)叶中主要成分3-羟基根皮苷对小鼠血糖及糖异生关键酶葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase, G-6-Pase)的影响,为稳定血糖提供可行方案.采用葡萄糖氧化酶法测定胰岛素抵抗模型HepG2细胞的葡萄糖摄取;注射链脲佐菌素建立二型糖尿病小鼠模型,血糖试纸测定小鼠糖耐量、空腹血糖及餐后血糖;蛋白印迹法检测G-6-Pase的表达.结果表明:3-羟基根皮苷增强了胰岛素抵抗细胞模型对葡萄糖的摄取;3-羟基根皮苷增强了不同健康状况下,小鼠的糖耐受能力,升高正常小鼠空腹血糖水平,降低糖尿病小鼠空腹血糖水平,降低正常小鼠及糖尿病小鼠餐后血糖水平;高血糖水平时,抑制G-6-Pase表达,低血糖水平时增加G-6-Pase表达.因此,3-羟基根皮苷不仅具有降低糖尿病小鼠血糖的作用,还具有稳定血糖,减少血糖波动的作用,其机制与双向调节G-6-Pase表达相关.

二甲双胍对糖尿病非酒精性脂肪性肝病大鼠G-6-Pase表达的影响

目的观察二甲双胍对糖尿病非酒精性脂肪性肝病大鼠G-6-Pase表达的影响。方法 SD大鼠(雄性)随机分为正常对照组(10只),肥胖组(12只),糖尿病组(10只),二甲双胍治疗组(9只)。采用RT-PCR方法测定4组大鼠肝组织中葡萄糖6磷酸酶(G-6-Pase)mRNA表达,并测定各组空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)及空腹胰岛素(Fins)。结果糖尿病组及糖尿病二甲双胍控制组大鼠肝脏G-6-Pase mRNA均较肥胖组明显增高(P<0.05),糖尿病二甲双胍控制组G-6-Pase mRNA较糖尿病组明显降低(P<0.05)。肝HE染色糖尿病二甲双胍控制组大鼠肝脏脂肪变性程度减轻。结论二甲双胍可改善大鼠糖尿病非酒精性脂肪性肝病的肝脏病理学损害,其机制可能与G-6-Pase下调有一定关系。

活血行气方药物血清对SGC-7901人胃癌细胞Mg^(2+)-ATP酶G-6-P酶活性影响的实验研究

目的:观察活血行气方药物血清对SGC-7901人胃癌细胞Mg2+-ATP酶、G-6-P酶活性的影响。方法:采用酶细胞化学染色方法检测SGC-7901人胃癌细胞Mg2+-ATPase、G-6-Pase活性。结果:药物血清组Mg2+-ATP酶和G-6-P酶的酶反应颗粒变小,数量减少,密度减低,活性下降,明显低于对照组(P<0.05)。结论:活血行气方药物血清具有降低SGC-7901人胃癌细胞Mg2+-ATPase、G-6-Pase活性的作用。

镉对大鼠输精管损伤及锌保护的超微结构与葡萄糖-6-磷酸酶细胞化学的研究

目的研究小剂量氯化镉对大鼠输精管近、远段的影响及锌的保护作用。方法用１％氯化镉（２ｍｇ／ｋｇ体重）腹腔注射雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠后４ｈ到６０ｄ及镉、锌联合注射后３ｄ、１５ｄ取材。采用电镜观察和葡萄糖－６－磷酸酶（Ｇ－６－Ｐａｓｅ）电镜细胞化学定量研究。结果镉注射４ｈ后，输精管主细胞出现超微结构改变，３～７ｄ改变最明显，１５ｄ后有所减轻，６０ｄ后基本恢复正常。主细胞的主要改变为线粒体肿胀，内质网扩张及髓样结构增多。镉注射后４ｈ，远段主细胞Ｇ－６－Ｐａｓｅ反应产物明显减少，３ｄ最少，１５ｄ反应产物增多。镉、锌联合注射后超微结构及Ｇ－６－Ｐａｓｅ活性损伤均较单纯镉组轻。结论锌对镉所致大鼠输精管主细胞超微结构损伤及远段主细胞Ｇ－６－Ｐａｓｅ活性影响有明显保护作用。

大鼠心肌葡萄糖-6-磷酸酶活性的电镜观察

作者报告电镜下大鼠心肌内葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)的分布情况。结果表明,G-6-Pase定位在心肌细胞的肌质网膜、核内外膜、线粒体的内外膜和嵴、闰盘处的肌膜、肌间毛细血管内皮细胞的核膜和内质网膜以及红细胞膜上。在上述的不同部位中,该酶的活性是不同的。

蟾蜍毒素对S180荷瘤小鼠肉瘤细胞Mg^(2+)-ATP酶、葡萄糖-6-磷酸酶活性的影响

目的探讨醇溶性蟾蜍毒素对S180荷瘤小鼠肉瘤细胞Mg2+-ATP酶(Mg2+-ATPase)、葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)活性的影响。方法乙醇溶解蟾蜍分泌物原浆,采用减压蒸馏等方法,进一步部分分离纯化,获得醇溶性的蟾蜍毒素混合物(Ethanol extract of toad venom,简称EET),将其作用于S180荷瘤小鼠模型,计算肿瘤抑制率,应用酶化学染色法观察S180肉瘤细胞酶活性的变化。结果蟾蜍毒素组和氟脲嘧啶组的肿瘤抑制率分别为35.6%和36.9%(P<0.05),细胞质膜标志酶Mg2+-ATPase、内质网标志酶G-6-Pase反应颗粒变小,数量减少,密度变低,提示酶活性明显下降。结论蟾蜍毒素可降低S180荷瘤小鼠肉瘤细胞质膜标志酶Mg2+-AT-Pase及内质网标志酶G-6-Pase的活性,抑制肿瘤细胞的生长。

益气活血解毒方对Lewis肺癌小鼠癌细胞Mg^(2+)-ATP酶、葡萄糖-6-磷酸酶活性的影响

目的观察益气活血解毒方药对小鼠Lewis肺癌癌细胞Mg2+-ATP酶、葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-P酶)活性的影响。方法应用酶细胞化学染色法观察Lewis肺癌细胞酶活性的改变。结果质膜标志酶Mg2+-ATPase、内质网标志酶G-6-Pase反应颗粒变小,数量减少,密度减低,提示酶活性明显下降。结论益气活血解毒方药降低肺癌细胞质膜标志酶Mg2+-ATPase及内质网标志酶G-6-Pase活性。

二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌肝细胞超微结构及葡萄糖—6—磷酸酶细胞化学的观察

二乙基亚硝胺诱发实验性肝癌过程中,用电镜观察肝结节内肝细胞及G-6-Pase的改变,结果显示:(1)肝细胞问的连接较正常为少,部分区域的细胞连接消失,细胞问隙增宽。(2)部分肝细胞核有凹陷,核仁肿大,胞质内线粒体嵴变短而少,粗面内质网膜上核糖体脱落,糖原颗粒减少。(3)少数细胞的细胞核增大,胞质内游离核糖体丰富,各细胞器不发达。(4)诱癌第8周,肝细胞内G-6-Pase呈阳性反应,12周后为阴性。这些特点可认为是肝细胞去分化的主要指示。

急性氟中毒大鼠心肌葡萄糖—6—磷酸酶活性的电镜观察

本文报告了急性氟中毒大鼠心肌葡萄糖—6—磷酸酶(G—6—Pase)活性的电镜观察结果。结果表明:急性氟中毒时大鼠心肌G—6—Pase的活性明显增强。

猕猴淋巴结淋巴细胞ATP酶、C-6-P酶超微结构定位

应用电镜酶细胞化学方法对猕猴淋巴结淋巴细胞ATP酶与G-6-P酶定位进行了研究。结果表明:ATP酶反应颗粒主要定位在淋巴细胞膜质膜内侧。在核膜内侧也可见到清晰的酶反应沉淀物。G-6-P酶反应颗粒主要在内质网表面。两种酶定位与人类相似。结果提示:此法酶反应特异性强,敏感性高。可用于判定实验动物免疫淋巴细胞功能状态。

利拉鲁肽对糖尿病小鼠肝糖异生关键酶PEPCK及G6pase的表达影响及机制探讨

目的观察利拉鲁肽对糖尿病小鼠肝糖异生关键酶葡萄糖-6-磷酸(G-6-Pase)及磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPCK)的表达影响及机制探讨。方法动物实验设计分3组:正常对照组(雄性C57小鼠,n=5),腹腔注射生理盐水;模型对照组(雄性KK-Ay糖尿病小鼠,n=5),腹腔注射生理盐水;利拉鲁肽干预组(雄性KK-Ay糖尿病+药物干预小鼠,n=5),腹腔注射利拉鲁肽。3组小鼠均在在相同的饲养环境下饲养。干预8周,检测小鼠的血糖,采用Western blot方法检测FOXO1,隐花色素1(cryptochrome 1,CRY1),E3泛素蛋白酶DDB1,糖异生关键酶葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)及磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPCK)的表达情况。结果与模型对照组相比,利拉鲁肽干预组血糖显著下降;利拉鲁肽干预后糖尿病小鼠肝DDB1,FOXO1,G6Pase与PEPCK的表达减少,而隐花色素1(cryptochrome 1,CRY1)的表达增加。结论利拉鲁肽可以下调糖尿病小鼠肝糖异生关键酶G6Pase及PEPCK的表达,其作用可能与下调E3泛素蛋白酶DDB1有关。

有氧运动和补充魔芋葡甘聚糖通过调节PI3K/FoxO1通路有效预防高脂膳食大鼠肝脏胰岛素抵抗的形成

目的:探讨有氧运动和补充魔芋葡甘聚糖(KGM)对高脂膳食(HFD)大鼠肝脏胰岛素抵抗(in-sulin resistance,IR)形成的干预作用、交互作用及其机制。方法:50只SD大鼠被随机分为正常对照组(NC)、HFD对照组(HFC)、HFD+KGM组(HFK)、HFD+运动组(HFE)、HFD+运动+KGM组(HFEK),每组10只。除NC组大鼠喂饲标准饲料外,其余各组大鼠在喂饲HFD的同时,HK和HEK组每天以50 mg/kg体重的剂量灌服KGM,HE和HEK组每天晚上进行60 min的无负重游泳运动训练,每周6次,10周后取材并检测各组大鼠空腹血糖(FPG)、空腹血清胰岛素(FINS)含量以及肝脏磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)、叉头转录因子1(FoxO1)、葡萄糖6磷酸酶(G-6-Pase)和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)的含量,并计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果:(1)与NC组相比,HFD大鼠FPG、FINS含量以及HOMA-IR显著升高(P<0.01),肝脏PI3K含量显著降低(P<0.01),Akt、FoxO1、G-6-Pase和PEPCK含量显著升高(P<0.01)。(2)通过双因素方差分析,有氧运动和KGM可显著降低HFC组大鼠肝脏PEPCK(P<0.05,P<0.01)和G-6-Pase(P<0.01)含量、FPG(P<0.05)、FINS水平(P<0.01)和HOMA-IR(P<0.01);有氧运动联合KGM虽然对降低HFD大鼠FPG水平无显著性交互作用(P>0.05),但对降低HFD大鼠肝脏PEPCK、G-6-Pase、FINS含量和HOMA-IR有显著性的交互作用(P<0.01,P<0.05,P<0.01,P<0.05)。(3)有氧运动可显著性升高HFD大鼠肝脏PI3K含量(P<0.01)、显著性降低FoxO1含量(P<0.05);KGM可极显著性降低FoxO1含量(P<0.01);有氧运动联合KGM对升高PI3K和降低FoxO1含量有显著性交互作用(P<0.05)。结论:(1)长期的高脂膳食可以抑制肝脏PI3K/FoxO1信号通路,增加肝糖异生,诱导肝脏胰岛素抵抗的形成。(2)有氧运动或补充魔芋葡甘聚糖可以通过改善肝脏PI3K/FoxO1信号通路,抑制肝糖异生,有效预防高脂膳食大鼠肝脏胰岛素抵抗的形成,维持空腹血糖的稳定。魔芋葡甘聚糖的补充在一定程度上对有氧运动预防高脂膳食大鼠肝脏胰岛素抵抗的形成具有附加作用。

松茸多糖抑制高脂诱导的小鼠2型糖尿病机制研究

目的:探讨松茸多糖(TMP)对小鼠2型糖尿病(T2DM)模型的干预作用,阐明TMP抗T2DM的作用机制。方法:利用超声-微波协同萃取法对松茸子实体提取物进行萃取得到TMP。采用高脂饮食诱导构建小鼠T2DM模型。将T2DM小鼠随机分为模型组(HFG组)、罗格列酮阳性对照组(Rosi组)、TMP低剂量组(TMP1组)和TMP高剂量组(TMP2组)。HFG组给予生理盐水灌胃,Rosi组给予罗格列酮灌胃,TMP1组和TMP2组给予TMP灌胃。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)和Western Blot法检测小鼠肝组织中磷酸烯醇丙酮酸羧激酶(PEPCK)和葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)的表达,采用Western blot法检测小鼠肝组织中腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)的表达。结果:与HFG组比较,TMP可显著降低T2DM小鼠体重和空腹血糖(P<0.01);TMP可使T2DM小鼠肝组织中PEPCK和G-6-Pase的m RNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01);TMP可显著提高T2DM小鼠肝组织中AMPK蛋白的磷酸化水平。结论:TMP可能通过促进肝脏AMPK的磷酸化,抑制PEPCK和G-6-Pase的表达,进而抑制肝脏糖异生,发挥抗T2DM的作用。

实验性隐睾诱导小鼠生精细胞凋亡的研究

目的研究手术隐睾所致成年小鼠生殖细胞凋亡及相关调节因子ｂｃｌ－２、ｂａｘ蛋白在曲细精管中的定位、变化。方法以末端脱氧核糖核酸转移酶介导的ｄＵＴＰ缺口末端标记法（ｔｅｒｍｉｎａｌｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｙｌｔｒａｎｓ－ｆｅｒａｓｅ－ｍｅｄｉａｔｅｄｄＵＴＰｎｉｃｋ－ｅｎｄｌａｂｅｌｉｎｇｍｅｔｈｏｄ，ＴＵＮＥＬ）检测凋亡的生殖细胞，生物素－抗生物素蛋白ＤＣＳ（ｂｉ－ｏｔｉｎ－ａｖｉｄｉｎＤｃｅｌｓｏｒｔｅｒ）体系间接免疫荧光法检测Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ蛋白在曲细精管中的定位、分布。结果隐睾术后３ｄ，手术侧睾丸重量及细胞凋亡数量与对侧无明显区别。而６～１５ｄ，睾丸重量明显减轻，凋亡细胞明显增多，以精母细胞、精子细胞为主。在正常小鼠曲细精管中，ｂｃｌ－２大量表达，呈散在的颗粒状存在于各级生精细胞中，以精子细胞胞质为主。Ｂａｘ蛋白表达量较少，一部分也以散在的颗粒存在于各级生精细胞质中，另一部分则较致密地分布于曲细精管基底部。隐睾术后３ｄ，Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ的表达与对侧无明显区别；６～１５ｄ，Ｂｃｌ－２明显下降，Ｂａｘ明显增加。结论隐睾明显诱导生殖细胞凋亡，Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ蛋白对生殖细胞的凋亡有重要调节作用，提示温?

恶性肿瘤患者癌周淋巴结电镜酶组化研究

应用电镜酶组织化学法对恶性肿瘤患者癌周淋巴结副皮质区淋巴细胞ATP酶、G-6-P酶进行了研究。结果:ATP酶、G-6-P酶活性明显减弱,颗粒变小,数量减少,密度降低。提示这些酶活性下降可能是导致恶性肿瘤患者细胞免疫功能降低的主要原因。

TNF-α对亚低温条件下大鼠肝细胞糖代谢的影响

目的探讨TNF-α对亚低温条件下大鼠原代肝细胞糖代谢的影响及其机制。方法培养SD大鼠原代肝细胞6天,分别在不同浓度TNF-α及不同温度下培养8h,观测培养肝细胞中葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)活性及细胞培养液中葡萄糖浓度的变化。结果在较低浓度TNF-α时G-6-Pase的活性降低,在较高浓度TNF-α时G-6-Pase的活性升高。亚低温组与常温组两组间G-6-Pase的活性变化无明显差异。亚低温组与常温组间葡萄糖的浓度仅在较高浓度TNF-α时有差异。结论TNF-α对培养原代肝细胞的糖代谢有影响,在TNF-α浓度较高时温度对培养原代肝细胞糖的代谢有影响。

胃癌和大肠癌患者血淋巴细胞酶活性的变化

目的探讨胃癌和大肠癌患者外周血淋巴细胞Mg2+-ATP酶和G-6-P酶活性变化与肿瘤生物学行为的关系。方法应用光镜酶细胞化学方法对人外周血淋巴细胞Mg2+-ATP酶与G-6-P酶定位,探讨酶活性与肿瘤生物学行为的关系。结果Mg2+-ATPase定位在淋巴细胞膜下方,G-6-Pase定位在细胞质内;两种酶平均光密度(AOD)值在胃癌和大肠癌患者组明显低于正常对照组(P<0.01),且低分化癌组低于高分化癌组(P<0.01),无淋巴结转移组高于有转移组(P<0.05)。结论外周血淋巴细胞Mg2+-ATP酶与G-6-P酶活性与胃肠肿瘤恶性度呈负相关。

半导体BaTiO_3陶瓷的压阻效应

介绍了半导体BaTiO3 陶瓷在不同的应力、温度和掺杂条件下所呈现的压阻效应 ,以及制约其压阻效应的因素 ,提出了该半导体BaTiO3

桦褐孔菌水提取物对STZ诱导的糖尿病大鼠糖异生和胆固醇合成关键酶表达的影响

[目的]探讨桦褐孔菌水提取物对STZ诱导的糖尿病大鼠糖异生和胆固醇合成关键酶表达水平的影响.[方法]制备STZ诱导的糖尿病大鼠模型,随机分为糖尿病模型组(阴性对照组)、阳性对照组、桦褐孔菌水提取物大、中、小剂量组.阳性对照组给予200mg/kg盐酸二甲双胍,桦褐孔菌水提取物给药组分别灌胃给予桦褐孔菌水提取物900,600,300mg/kg.每日1次,连续给药8周.实验前后测定大鼠空腹血糖、糖化血红蛋白、糖耐量及TG,TC,LDL-C,HDL-C等指标,检测肝组织PEPCK,G-6-PASE,HMG CoA还原酶蛋白表达水平.[结果]与阴性对照组比较,桦褐孔菌水提取物中、大剂量组大鼠空腹血糖、糖化血红蛋白,TC,TG及LDL-C水平显著降低(P<0.05,P<0.01),HDL-C水平增高(P<0.05,P<0.01),PEPCK,G-6-PASE及HMG CoA还原酶表达水平显著降低,且呈剂量依赖性.[结论]桦褐孔菌水提取物对STZ诱导的糖尿病大鼠具有较好的降低血糖和血脂水平的作用,其机制可能与降低PEPCK,G-6-PASE,HMG CoA还原酶的表达及减少糖异生和胆固醇合成过程有关.