库拉索芦荟凝集素的分离与纯化

目的:对库拉索芦荟凝集素进行分离、纯化与初步鉴定。方法:库拉索芦荟经捣碎匀浆、盐析、透析后得到库拉索芦荟凝集素的粗提液;兔血凝集反应测试初步检测粗提液成分;将粗提液进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和葡聚糖G-75凝胶柱层析,对分离组分进行分析;将洗脱液浓缩,再用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和葡聚糖G-200凝胶柱层析对组分进行分析。结果:发现库拉索芦荟粗提液可以凝集兔血,证明在粗提液中具有芦荟凝集素成分。对粗提液检测、分离,获得三种蛋白质组分;经凝血活性检测,只有第一个蛋白峰具有凝集活性且凝集效果较粗提液进一步提高。再次分离纯化洗脱液,可知其由两个组分组成。结论:库拉索芦荟凝集素由两种组分组成。

微生物谷氨酰胺转胺酶(MTG)的分离纯化

利用产谷氨酰胺转胺酶的H-197菌株发酵产生MTG,发酵液通过高速离心、冷冻浓缩、乙醇沉淀、冷冻干燥,制得粗酶粉,粗酶粉溶解后经过Sephadex G-75柱得到较纯酶样.结果表明:经冷冻浓缩、乙醇沉淀后其活力回收率为44.6%,酶的比活为0.83 U/mg,较浓缩前增加了2.43倍;粗酶经Sephadex G-75凝胶过滤层析后得到较纯的酶,酶的比活力为1.44 U/mg,最终纯化倍数达7.08.

根霉12~#发酵产纤溶酶及分离纯化的探索

以根霉12#为出发菌株,对其固体发酵产生的溶栓特性进行研究,通过SephadexG-75凝胶过滤对根霉12#纤溶酶进行分离纯化。利用聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳得到验证。