柴胡皂苷D通过诱导C_2-M期阻滞抑制结直肠癌SW480细胞的增殖

目的:观察柴胡皂苷D(SSD)对于结直肠癌肿瘤细胞增殖的影响并初步探索其潜在的分子机制。方法:运用MTT、细胞计数试验及克隆形成试验观察SSD对细胞增殖的影响。流式细胞仪检测SSD对细胞凋亡及周期分布情况的影响。RT-PCR和Western-blot技术检测G_2-M周期阻滞关键调控因子在SW480细胞中的表达。结果:MTT试验发现SSD能够显著抑制结直肠癌肿瘤细胞SW480的增殖,而对正常结直肠细胞FHC的增殖无明显影响。细胞计数试验和克隆形成试验进一步验证了SSD对于SW480细胞增殖的影响(P<0.05)。流式细胞术检测发现SSD不影响细胞的凋亡(P>0.05),但却显著诱导G_2-M周期阻滞(P<0.05)。SSD在mRNA水平下调了G_2-M周期调控因子CCNA1、CCNA2、CCNB1和CCNB2的表达(P<0.05);在蛋白水平,CCNA2、CCNB1和p34/cdc2明显被下调,p-H3S10上调,p21^(WAF1/CIP1)被明显上调。结论:SSD可以通过上调p21^(WAF1/CIP1)的表达诱导G_2-M周期阻滞来抑制结直肠肿瘤细胞SW480的增殖。