联用多步骤虚拟筛选方法发现具有新母核的GABAA受体正性变构调节剂

GABAA受体主要介导哺乳动物中枢神经系统的抑制性信号传递,是镇静催眠药的关键靶点。在寻找具有新母核的镇静催眠药的过程中,计算机辅助药物设计(CADD)方法显示出巨大的优势。在这项研究中,首先,我们通过机器学习模型、分子对接模型和分子力学广义玻恩比表面积(MMGBSA)方法筛选了来自于商业数据库中的41112种化合物。经过筛选,我们得到了16个化合物,然后我们通过全细胞膜片钳电生理学实验验证了4个结构新颖的化合物确实为有效的GABAA受体正性变构调节剂。其中,化合物GPR120在细胞水平和动物水平都得到了实验验证。在重组表达α1β2γ2型受体的皮层神经元中,在10和50µmol∙L^(−1)浓度下,GPR120可将GABA EC3-10电流分别增强71.5%和163.8%。通过全分解贡献分析和点突变实验,我们发现GPR120与GABAA受体结合的关键位点是H102,与阳性药物地西泮相似。为了进一步验证GPR120在动物水平上的功能,我们进行了运动活动测试和翻正反射消失(LORR)实验。GPR120对小鼠的运动活动有抑制作用,6 h后可恢复,说明GPR120是一种中度镇静剂。在戊巴比妥钠(PB)诱导的翻正反射消失实验中,与生理盐水组相比,GPR120(20 mg∙kg^(−1))可显著缩短开始LORR的时间并延长LORR的持续时间。综上所述,通过联用多种虚拟筛选方法,我们发现了GPR120是一种具有新型母核的中度强度镇静剂。

异泽兰黄素通过改善腹侧海马GABAa受体传递缓解大鼠酒精戒断焦虑样行为

目的:研究异泽兰黄素(Eupatilin,Eptl)对大鼠酒精戒断(Ethanol withdrawal,EtOHWI)焦虑样行为的改善作用及其与腹侧海马(Ventral hippocampus,vHippo)相关机制。方法:将32只成年雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为4组,分别为生理盐水对照组、EtOHWI模型组、Eptl低剂量治疗组和Eptl高剂量治疗组,每组各8只。EtOHWI模型组、Eptl低、高剂量治疗组每天1次腹腔注射3 g/kg乙醇(Ethanol,EtOH),连续28 d,戒断3 d制备大鼠EtOHWI模型,生理盐水对照组腹腔注射等容积生理盐水。在3 d戒断期间,Eptl低、高剂量治疗组分别每天1次灌胃10和30 mg/kg Eptl,第3次给药30 min后,利用旷场(Open filed,OF)和高架十字迷宫(Elevatedplusmaze,EPM)实验对各组大鼠进行焦虑样行为学检测。利用ELISA检测血清皮质酮(Coritosterone,CORT)浓度、vHippo组织中GABA水平;利用实时荧光定量PCR检测vHippo组织中谷氨酸脱羧酶67(GAD 67)mRNA相对表达量;利用Western blot(WB)检测vHippo组织中GABAaRα1(GABAa receptorα1,GABAaRα1)、GABAaRα2、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)蛋白表达;利用试剂盒检测vHippo组织中MDA、T-SOD、CAT、GSH以及IL-6和TNF-α的含量。利用免疫荧光检测技术观察HT22细胞的核中Nrf2蛋白水平。结果:与EtOHWI模型组相比,Eptl低、高剂量治疗组大鼠在OF中央区活动距离极显著升高(P<0.01),分别为70.62%和124.21%,活动时间显著升高(P<0.05或P<0.01),分别为251.75%和371.62%,EPM的开放臂进入次数百分比显著升高(P<0.05或P<0.01),分别为110.33%和207.32%,滞留时间百分比显著升高(P<0.05或P<0.01),分别为99.56%和184.18%;血清CORT含量极显著降低(P<0.01);vHippo组织中GABA含量和GAD67mRNA表达显著升高(P<0.05或P<0.01);GABAaRα1、GABAaRα2、Nrf2和HO-1蛋白表达显著增多(P<0.05或P<0.01);MDA水平极显著降低(P<0.01),而T-SOD、CAT和GSH的活性或水平显著升高(P<0.05或P<0.01);IL-6、TNF-α含量显著降低(P<0.05或P<0.01)。体外实验结果显示,与空白对照组相比,200μmol/L H2O2刺激的HT22细胞核中Nrf2的水平极显著增多(P<0.01),但30μmol/L Eptl预处理显著抑制了Nrf2水平的增多(P<0.05)。结论:Eptl具有改善大鼠EtOHWI焦虑样行为的作用,其机制可能通过Eptl的抗氧化和抗炎作用而调节EtOHWI大鼠vHippo的GABAaR传递紊乱所介导。

中脑导水管周围灰质腹外侧区GABAAα3及GABAB受体在调节急性疼痛中的作用

目的观察大鼠足底注射甲醛复制急性疼痛模型后大鼠中脑导水管周围灰质腹外侧区(vLPAG)处GABAA_(α3)及GABAB受体的变化,探讨vLPAG处GABAA_(α3)、GABAB受体在疼痛信号传导中的作用。方法健康清洁级雄性SD大鼠12只,体重280~320g,采用完全随机方法将大鼠分为生理盐水组(NS组)和甲醛组(F组),每组6只。NS组足底注射无菌生理盐水50μl,F组足底注射2%甲醛50μl。每隔5分钟记录1次疼痛评分(PIS评分),每隔10分钟记录1次机械痛阈,每隔15分钟记录1次皮肤厚度、皮肤温度,总观察时间为60min。记录各项指标后处死大鼠,取中脑导水管周围灰质腹外侧区提取蛋白,采用Western blot法检测GABAA_(α3)及GABAB受体含量的变化。结果 F组大鼠注射甲醛后立即出现本模型的典型自发痛行为,各时点PIS评分明显高于NS组(P<0.05),且为典型的两相式。注射后10~60min F组机械痛阈明显低于NS组(P<0.05)。注射后15~60min F组皮肤温度和皮肤厚度明显高于NS组(P<0.05)。F组大鼠GABAA_(α3)及GABAB受体含量明显高于NS组(P<0.05)。结论中脑导水管周围灰质腹外侧区GABAA_(α3)及GABAB受体的表达上调与大鼠急性疼痛条件下痛阈降低有关。

黄芩茎叶黄酮作为GABA_A受体BZD结合部位配体(英文)

目的从黄芩地上部分中寻找活性成分。方法利用各种柱色谱 (硅胶、SephadexLH 2 0、D10 1大孔吸附树脂和聚酰胺 )分离黄芩地上部分的活性成分。结果从黄芩地上部分的水提取物中分离得到 7种黄酮类化合物。其中白杨素对GABAA 受体的BZD结合部位有较高的亲和力 ,其IC50 值为 0 6 7μmol/L。 7种黄酮类化合物亲和力的排列顺序为 :白杨素 >汉黄芩苷元 >红花素 >黄芩素 >5 ,6 ,7 三羟基 4′ 甲氧基黄酮 >异红花素 >白杨素 7 葡萄糖醛酸苷。

GABAA受体在尼可刹米引起的新生大鼠呼吸兴奋中的作用

目的探讨γ-氨基丁酸A(GABAA)受体在尼可刹米引起的新生大鼠呼吸兴奋中的作用。方法制作新生大鼠离体延髓脑片标本,包含面神经后核内侧区并保留舌下神经根,给予灌流改良Krebs液,记录舌下神经根的呼吸相关节律性放电活动(RRDA)。实验分为5组:第1组分别以浓度为0.5、1.0、3.0、5.0、7.0、10.0μg/ml尼可刹米灌流脑片,观察舌下神经根RRDA的变化,做出尼可刹米的量效曲线并选择最适浓度;第2组以浓度为10、20、40、60μmol/L的GABA灌流脑片,观察RRDA的变化做出量效曲线选择最适浓度;第3组以10μmol/L荷牡丹碱灌流脑片;第4组联合应用40μmol/LGABA和10μmol/L荷牡丹碱灌流脑片;第5组5μg/ml尼可刹米灌流脑片产生明显作用后冲洗至RRDA基本恢复,再联合灌流5μg/ml尼可刹米和10μmol/L荷牡丹碱。结果尼可刹米浓度在0.5￣7.0μg/ml对延髓脑片RRDA有兴奋作用,5μg/ml时对吸气时程(TI)、放电幅度积分(IA)、呼吸周期(RC)等呼吸指标综合效果最显著。GABA在40μmol/L对RRDA放电的TI、IA、RC抑制作用最显著。荷牡丹碱对TI、IA、RC均有兴奋作用。联合使用GABA和荷牡丹碱,RRDA与对照组相比无显著改变。联合使用尼可刹米和荷牡丹碱,与单独使用尼可刹米相比TI、IA显著增强,RC无显著改变。结论尼可刹米能够增强新生大鼠离体脑片舌下神经根RRDA,GABAA受体可能是尼可刹米作用途径之一。

卡马西平对青霉素点燃惊厥大鼠脑内GABAA受体mRNA表达的作用

目的研究两种剂量卡马西平对青霉素慢性点燃大鼠的抗惊厥作用及对脑内GABAA受体mRNA表达的影响,从基因水平探讨卡马西平抗惊厥的作用机制。方法采用腹腔注射(ip)青霉素(3×106U.kg-1.d-1)慢性点燃大鼠惊厥模型,两种剂量卡马西平(50,100mg.kg-1×13d)ig给药,以痫性发作潜伏期和Racine惊厥行为分级标准为判定药效指标,观察卡马西平的抗惊厥作用。运用RT-PCR技术测定大鼠脑内GABAA受体mRNA表达量,分析卡马西平抗惊厥作用的新机制。结果两种剂量卡马西平ig给药后,均可使青霉素慢性点燃大鼠痫性发作的潜伏期延长,与模型对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),同时使惊厥大鼠的发作程度均较模型对照组减轻。青霉素慢性点燃大鼠脑内GABAA受体mRNA表达减少,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);两种剂量卡马西平预防性干预组的GABAA受体mRNA表达量分别与模型对照组相比,差异均无显著性。结论两种剂量卡马西平对青霉素慢性点燃的惊厥发作均有明显的对抗作用,但抗惊厥机制与GABAA受体的基因表达无关。

针药结合对脑卒中肢体痉挛大鼠大脑皮质BDNF、TrkB、GABAa受体表达的影响

目的:观察针药结合对脑卒中肢体痉挛大鼠大脑皮质脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)、酪氨酸蛋白激酶受体B(tyrosine kinase receptor b,trkB)、γ-氨基丁酸a型(gamma-aminobutyric acid type a,GABAa)受体表达水平的影响。方法:63只实验大鼠通过2次随机分为空白组(不做任何处理)、假手术组(干预同模型组只分离不结扎不插线)、模型组(采用大脑中动脉线栓结合内囊注射N-methyl-D-aspartate,NMDA受体制作脑卒中肢体痉挛大鼠模型)、电针组(电针阳陵泉、曲池)、中药组(加味芍药甘草汤水煎剂灌胃)、针药组(电针阳陵泉、曲池+加味芍药甘草汤水煎剂灌胃)和西药组(巴氯芬溶液灌胃)7组各9只。各治疗组大鼠成模后第1天开始干预连续5 d,观察各组大鼠的神经功能和肌张力评分,检测大脑皮质中BDNF、TrkB、GABAa受体基因和蛋白的表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠神经功能和肌张力评分上升明显(P<0.01),BDNF、TrkB和GABAa受体基因和蛋白表达水平均出现明显下降(P<0.01);经治疗后各组大鼠上述指标均有明显改善(P<0.05,P<0.01),其中针药组效果优于电针组和中药组(P<0.05,P<0.01)。结论:各治疗方法均可改善模型大鼠神经功能,缓解卒中后肢体痉挛,针药结合方案优于单纯电针和中药疗法,其机制可能与上调大脑皮质中BDNF、TrkB、GABAa受体基因和蛋白表达水平有关。

光学方法分析GABA及GABAA受体在脑干听觉传入通路的作用

目的：旨在探讨脑干听觉传入通路中GABA能神经递质及GABAA受体对电刺激位听神经传入冲动的影响。方法：使用出生后0-5 d的ddy/ddy小鼠制备脑干切片。脑片经电压敏感染料NK3041染色,电刺激与脑片相连的位听神经残端。使用16×16像素的硅光电二极管阵列测量光学信号。所采集的数据使用ARGUS-50/PDA软件分析。结果：多部位的光学记录方法显示了从位听神经到耳蜗核和前庭核的兴奋性传导的时间-空间分布。其中每一个光学成分由快峰电位样反应和慢反应组成。抑制性神经递质GABA可降低诱发的光学信号的快反应和慢反应,GABAA受体拮抗剂荷包牡丹碱可增强这些反应。结论：16×16像素的硅光电二极管阵列可记录位听神经刺激诱发的多部位光学信号,每一个光学信号含有突触前及突触后电位成分。抑制性神经递质GABA和GABAA受体拮抗剂可调节光学信号的兴奋性传导。

GABAA受体基因多态性与癫痫易感性的关系

目的探究γ-氨基丁酸A型(GABAA)受体的亚基基因GABRG2和GABRB2单核苷酸多态性(SNP)与癫痫(EP)易感性的关系。方法应用限制性片段长度多态性(RFLP)技术对GABAA受体亚基基因GABRB2(rs12653921、rs2964773)、GABRG2(rs2268581)3个标签单核苷酸多态性(Tag SNP)的等位基因和基因型测定分析。结果 EP组和对照组等位基因频率和基因型分布比较,SNP(rs12653921)位点(基因型χ2=8.651,等位基因χ2=8.649)有统计学意义;SNP(rs2268581)、SNP(rs2964773)位点(rs2268581:基因型χ2=0.354,等位基因χ2=0.294;rs2964773:基因型χ2=1.397,等位基因χ2=0.643)无显著差异(P>0.05)。结论 SNP(rs12653921)可能与EP易感性相关,SNP(rs2268581)、SNP(rs2964773)可能与EP易感性不相关。

美国王鸽脑组织中GABAA受体α1、β2和γ2亚基基因编码区的克隆与分析

目的:进行美国王鸽脑组织中GABAA受体α1亚基、β2亚基和γ2亚基的基因序列的克隆与分析。方法:从美国王鸽大脑中提取总RNA,应用通用引物逆转录获得基因组cDNA。设计GABAA受体三种亚基的特异引物,通过RT-PCR分别扩增出GABAA受体α1亚基、β2亚基和γ2亚基的基因序列,并对三段基因序列进行克隆、质粒鉴定及分析。结果:成功地测出GABAA受体α1亚基、β2亚基和γ2亚基的基因序列,长度依次为899bp、597bp和564bp,并得出其与Gallusgallus参考序列的同源率分别为94.99%、94.64%和96.28%。结论:鸽子脑组织中GABAA受体α1亚基、β2亚基和γ2亚基基因序列与已知原红鸡相应基因序列同源性较高,但也显示出一定的种属差别。

GABA_A五种亚型受体与BZ配基的3D-QSAR研究

GABAA受体是中枢神经系统内重要的抑制性受体,有广泛的神经生理活性.由于镇静/抗惊厥药物在临床上的广泛应用,使得其中苯并二氮杂作用位点尤为重要.我们用比较分子场法(CoMFA)对一系列咪唑苯并二氮杂类化合物(BZ)与五种重组受体亚型的亲和力进行了结构活性关系研究,得到的一组模型都有较高的交叉验证系数.并在此基础上,建立了非交叉验证的一组PLS模型.用该组模型对随机选择的6个化合物组成的测试集进行了预测,都得到了相当满意的结果,表明所建立的一组模型具有良好的预测能力.本研究对于设计高亲和力的BZ受体的配基和研究GABAA受体的模型有指导意义.

乙醇对小鼠不同脑区^3H—GABA与GABAA受体结合的影响

采用放射配体受体结合分析法，研究急性注射乙醇对小鼠不同脑区ＧＡＢＡＡ受体饱和曲线以及与＾３Ｈ－ＧＡＢＡ结合的影响。结果表明，急性注射乙醇３０ｍｉｎ后，ＧＡＢＡＡ受体饱和曲线出现大幅度上移，乙醇能明显提高＾３Ｈ－ＧＡＢＡ与ＧＡＢＡＡ受体的结合，对小脑、下丘脑、海马及大脑皮层分别提高２０％、１６％、３０％和２８％。乙醇能逆转ＧＡＢＡＡ受体拮抗剂如印防己毒素（Ｐｉｃｒｏ－ｔｏｘｉｎ）。

DBS对海人酸癫痫大鼠突触外GABAA受体亚基的影响

目的研究DBS治疗对海人酸癫痫大鼠大脑中突触外GABAA受体δ亚基分布与表达的影响,为癫痫的发病机制与DBS的治疗机制的研究提供参考。方法雄性SD大鼠24只,随机分为正常对照组、癫痫组、DBS治疗组。通过免疫组织化学方法检测突触外GABAA受体δ亚基在大鼠大脑中的分布与表达量的变化。结合大鼠脑电信号的采集分析以及病理形态学观察,分析DBS在癫痫治疗中的作用以及对突触外GABAA受体δ亚基的影响。结果 DBS治疗组大鼠癫痫发作次数(6.01±4.87,n=8)明显低于癫痫对照(17.31±4.59,n=8),P<0.05;DBS治疗可有效抑制癫痫大鼠海马异常放电;DBS治疗组(463.62±38.41,n=8)大鼠海马神经元坏死及胶质细胞增生程度较癫痫组轻(357.12±20.50,n=8)(P<0.05);正常对照组大鼠脑组织突触外GABA受体δ亚基主要分布在海马(IOD=30.96±2.73,n=8)与丘脑腹外侧核(IOD=32.85±2.35,n=8)。癫痫组大鼠脑组织海马(IOD=12.31±1.72,n=8)及丘脑腹外侧核(IOD=22.39±1.94,n=8)突触外GABA受体δ亚基表达下降。DBS治疗组的丘脑腹外侧核(IOD=35.91±3.97,n=8),海马区(IOD=22.74±2.08,n=8)突触外GABA受体δ亚基表达比癫痫组表达增高(P<0.05)。结论丘脑底核DBS治疗可以通过改变大脑突触外GABA受体δ亚基的表达,抑制癫痫大鼠海马的异常放电,减轻癫痫大鼠海马神经元病理变化,起到对癫痫的治疗作用。

GABAA受体激活BDNF—TrkB—ERK信号通路在脑缺血中的作用

目的探讨γ-氨基丁酸（GABA）A受体激活后在大鼠脑缺血模型中是否能通过激活BDNF—TrkB—ERK信号通路而延缓海马神经元的死亡。方法制备sD大鼠大脑四动脉结扎全脑缺血模型，采用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）介导的d—UTP缺口末端标记（TUNEL）技术观察GABA。受体激动剂蝇蕈醇对缺血后海马神经元凋亡的影响；采用免疫印迹法检测蝇蕈醇和GABA受体的拮抗剂荷包牡丹碱对缺血后海马神经元脑源性神经营养因子（BDNF）表达和下游蛋白ERKI／2磷酸化水平的影响；采用免疫沉淀检测蝇蕈醇和荷包牡丹碱对BD—NF的受体TrkB磷酸化水平的影响。结果蝇蕈醇对缺血后海马CA1区神经元具有保护作用（P〈0．05）；而且，在缺血15min复灌1天蝇蕈醇提高了BDNF表达水平、TrkB和ERK1／2磷酸化水平（P〈0．05），而荷包牡丹碱可以降低三者升高的水平（P〈0．05）。结论蝇蕈醇对缺血后神经元有保护作用，可能的分子机制是激活了BDNF—TrkB—ERK信号通路。

GABAA受体γ2亚单位在海人酸颞叶癫痫大鼠海马内的表达

目的:探讨癫痫发作后GABAA受体γ2亚单位在海马各区的动态表达以及氯硝西泮干预对其表达的影响。方法:健康成年雄性SD大鼠40只,随机分为对照组5只,致痫组15只,干预组15只,干预对照组5只。大鼠海马CA3区注射海人酸建立颞叶癫痫模型,干预组大鼠在致痫前予以氯硝西泮灌胃。于致痫后6 h、12 h和1 d采用免疫组化法检测各组大鼠海马CA1及CA3区γ-氨基丁酸A受体γ2亚单位(GABAARγ2)的动态表达水平。结果:致痫组在海人酸给药后6 h、12 h及1 d,海马CA3区GABAARγ2蛋白表达均显著低于对照组(P<0.01);CA1区GABAARγ2蛋白表达也下降,注射后1 d显著低于对照组(P<0.01)。干预组在海人酸注射后1 d CA1和CA3区GABAARγ2蛋白表达低于对照组(P<0.05);海人酸注射后6 h、12 h及1 d,CA3区GABAARγ2蛋白表达均高于同时间点致痫组(P<0.05),CA1区于海人酸注射后1 d,GABAARγ2蛋白表达显著高于同时间点致痫组(P<0.01)。结论:海人酸诱导的颞叶癫痫模型中,海马GABAARγ2蛋白表达减少,氯硝西泮可缓解颞叶癫痫导致的GABAARγ2蛋白表达减少。

癫痫持续状态大鼠模型的GABAA受体亚单位α1的mRNA表达及[^3H]Flunitrazepam受体配体结合的变化

目的 :本实验研究大鼠癫痫持续状态动物模型的海马等部位 GABAA受体α1亚单位基因表达和受体一配体结合的变化。方法 :成年雄性大鼠经腹腔内注射 32 0～ 34 0± 5 .87毫克 /公斤毛果芸香碱 (Pilocarpine)以制成癫痫持续状态动物模型 ,能在癫痫持续状态 (定义为在皮质脑电图上显示痫性放电的至少 40分钟的持续性痫性发作 )下存活的大鼠在 1小时和 2小时后处于死 ,分别研究 GABA受体基因表达和放射结合位点 ,用原位杂交方法来测定脑部 m RNA水平 ,用 [3H]flunirazepam标记 GABAA 受体 benzodiazepam结合位点。结果 :动物痫性发作 2小时后海马的 CA1和CA3区域 GABAA受体 α1亚单位 m RNA显著下降 ,但是齿状回的 α1m RNA没有变化。 [3H]flunirazepam标记受体 -配体放射结合在持续 2小时持续痫性发作后可见海马的 CA1及 CA3和齿状回中均见下降 ,1小时的持续痫性发作尚未引起海马区域的任何α1m RNA或 [3H]flunirazepam受体 -配体放射结合的任何改变 ,并用结晶染色 1及 2小时后的大脑海马部位。结论 :本研究结果提示大鼠的癫痫持续状态可诱发海马区 GABAA 受体 α1基因表达的改变和 [3H]flinirazepam受体 -配体结合的下降 。

爪蟾视觉发育过程中抑制性GABAa受体功能的变化(英文)

目的 :阐明从幼年 (变态脱尾后 2～ 12周 )到成年 (变态脱尾后 5～ 10月 )爪蟾的视顶盖神经元突触受体变化。 方法 :盲法脑片全细胞电压钳技术。结果 :成年视顶盖神经元的微抑制性突触后电流 (mIPSCs)的发放频率 (Hz)和平均振幅 (pA)分别为 2 .6 5± 0 .6 9和 9.82± 1.30 ,而幼年的分别为 0 .6 8± 0 .2 3和 15 .36± 2 .4 0 ,其中成年动物的mIPSCs的频率是幼年频率的 3.90倍 ;乙酰胆碱受体 (nAChR)激动剂carbachol均可使幼年及成年的mIPSCs频率增加 ,增强效率有所不同 ,幼年增加至对照组的 192 .0 % ,而成年组仅为 14 6 .2 %。 结论 :随着视顶盖神经元的成熟 ,其突触GABAa受体功能也相应增强。

脑源性神经营养因子对大鼠海马神经元GABAA受体效应的影响

目的:观察不同浓度脑源性神经营养因子(BDNF)对大鼠海马神经元γ-氨基丁酸(GABA)A受体效应的影响。方法:原代培养海马神经元,应用BDNF(100、300及1000 ng/L)处理20 min后,施加GABA(终浓度为100μmol/L),5 min后应用流式细胞仪测定细胞内钙离子浓度。采用全细胞膜片钳记录模式,向锥体细胞施加BDNF(100、300及1000 ng/L)2 min,再施加GABA 100μmol/L并持续5 s,记录钳制电位为-60 mV时的GABAA受体电流。将神经元钳制电位从-100 mV至0 mV以10 mV递增,记录BDNF作用下GABAA受体电流的幅度和方向,并绘制电流电压曲线,计算GABAA受体电流的反转电位。结果:BDNF 100 ng/L和300 ng/L对GABA诱发的细胞内钙浓度、GABAA受体电流及反转电位均无影响,但在BDNF 1000 ng/L作用下,GABA诱发的细胞内钙浓度显著增加(P<0.05),GABAA受体电流在钳制电位-60 mV时变为外向电流,并且反转电位由对照的0 mV左移至-93 mV。结论:高浓度BDNF可使GABAA受体电流反转电位左移,导致GABA诱发锥体细胞内钙浓度增高而发挥兴奋效应。

GABAA受体失敏的研究进展

GABAA受体属于配体门控性离子通道超家族成员之一。当持续施加激动剂时,GABAA受体进入失敏状态,并且许多因素参与调节GABAA受体的失敏,如受体亚基构成、配体与受体的亲合力、磷酸化作用、膜电压的变化等都会影响受体的失敏过程。进入失敏状态的GABAA受体并非处于无功能状态,它们在调节抑制性突触后电流(IPSC)和快速抑制性突触传递中起到关键作用,并且可能参与调节突触的可塑性等过程。