青蒿琥酯通过调控GADD45A、NACC1的表达抑制肝癌细胞的作用

目的阐明青蒿琥酯(artesunate,ART)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)病理进程中对肿瘤细胞的作用及潜在的机制。方法用含不同浓度ART的培养基处理两种HCC细胞系MHCC-97H、HCC-LM3,以0 mg·L-1 ART处理的细胞作为对照组,对比ART对HCC的作用。采用MTT和克隆形成实验测定ART对HCC细胞生长能力的影响;划痕实验和Transwell实验分别检测ART对HCC细胞迁移和侵袭能力的影响;流式细胞术验证ART对HCC细胞凋亡和细胞周期变化的影响;通过转录组测序分析以及qRT-PCR验证关键基因的表达情况探究ART在HCC细胞中的可能作用机制。结果与对照组相比,ART处理后的肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭能力明显降低(P<0.01),而细胞凋亡率明显上升,且G_(2)/M期细胞比例明显增高,提示肿瘤细胞被阻滞于该期。使用RNA测序数据进行转录组学分析,确定生长停滞与DNA损伤诱导蛋白45A(growth arrest and DNA damage inducible alpha,GADD45A)是ART的潜在作用靶点,并且提示,ART可通过上调GADD45A的表达进而诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞。此外,生信分析结果提示,GADD45A与其上游转录因子伏隔核相关蛋白1(nucleus accumbens associated 1,NACC1)有蛋白互作现象,并且经ART处理后,GADD45A与NACC1的mRNA水平和蛋白水平均发生明显变化。结论ART可能通过影响GADD45A及其潜在上游NACC1基因的表达抑制HCC的发生发展。通过探究ART作用于HCC的功能影响及发生机制,为临床治疗肝癌提供新药物、新方向和新思路。

GADD45A通过端粒替代延长途径调控骨肉瘤细胞增殖

目的:探讨GADD45A对骨肉瘤细胞的增殖和端粒调控功能。方法:应用siRNA和shRNA处理骨肉瘤细胞U2OS,观察骨肉瘤细胞增殖、端粒功能和端粒延长替代途径的变化。qPCR检测GADD45A敲低后mRNA水平。CCK-8实验和克隆形成实验检测骨肉瘤细胞增殖情况。细胞中期分裂相-荧光原位杂交实验检测端粒功能变化。免疫荧光-荧光原位杂交实验和C-circle实验检测端粒损伤情况和端粒延长替代途径相关表型。结果:qPCR结果表明,siRNA敲低GADD45A后mRNA水平降低(t=25.96,P<0.0001);shGADD45A-1和shGADD45A-2 GADD45A的mRNA水平降低(t=21.12、18.37,均P<0.0001)。对应的CCK-8(t=5.051、6.192、3.775、14.86、22.93、3.013、14.61、20.93,均P<0.05)和克隆形成实验(t=46.68、23.73、24.98,均P<0.0001)结果表明,敲低GADD45A抑制了骨肉瘤细胞增殖。细胞中期分裂相-荧光原位杂交实验结果显示,GADD45A缺失会加重端粒多信号(t=24.04、7.243、27.93,均P<0.01)和端粒信号缺失现象(t=8.222、16.61、6.781,均P<0.01)。免疫荧光-荧光原位杂交实验结果表明,siRNA敲低GADD45A后H2AX组蛋白变体和早幼粒细胞白血病体与端粒的共定位增加(t=19.16、10.65,均P<0.0001);shGADD45A-1、shGADD45A-2也证实了H2AX组蛋白变体和早幼粒细胞白血病体与端粒共定位的比例升高(t=14.71、24.03、16.69、18.10,均P<0.0001)。C-circle实验结果表明,siRNA敲低GADD45A以及shGADD45A-1和shGADD45A-2两细胞系中染色体外端粒DNA环C-circle水平升高(t=41.27、14.06、4.539,均P<0.05)。结论:GADD45A调控端粒延长替代途径、保护端粒功能并促进骨肉瘤细胞增殖。

异丙酚通过miR-133a-3p/FTL轴调控GADD45A/JNK通路影响胃癌细胞增殖、迁移及凋亡

目的:探讨异丙酚是否通过miR-133a-3p/FTL轴调控GADD45A/JNK通路影响胃癌细胞的增殖、迁移及凋亡。方法:将胃癌MKN-28细胞系分为磷酸盐缓冲液(PBS)组、异丙酚组、miR-NC组、miR-133a-3p mimics组、anti-miR-NC组、anti-miR-133a-3p组、si-NC组、si-FTL组、异丙酚+anti-miR-NC+si-NC组、PBS+anti-miR-NC+si-NC组、异丙酚+anti-miR-133a-3p+si-NC组、异丙酚+anti-miR-133a-3p+si-FTL组。应用RT-qPCR检测miR-133a-3p和铁蛋白轻链(FTL)mRNA的表达水平;应用MTT法与克隆形成实验测细胞增殖;应用流式细胞术、蛋白质印迹法分别检测细胞凋亡及蛋白表达水平;应用双荧光素酶报告实验检测miR-133a-3p与FTL的靶向关系;应用划痕实验与Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭。结果:与PBS组比较,异丙酚组细胞活性、划痕愈合率、细胞克隆形成数、迁移、侵袭细胞数均减少(P<0.05);细胞凋亡率、p53、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、miR-133a-3p、GADD45A及p-JNK蛋白表达水平均升高(P<0.05),FTL表达水平降低(P<0.05)。双荧光素酶实验结果显示,miR-133a-3p靶向调控FTL。敲低FTL或过表达miR-133a-3p后,细胞凋亡率升高,细胞活性、划痕愈合率、细胞克隆形成数、迁移和侵袭细胞数降低;细胞中GADD45A、p-JNK、p53、Bax表达水平升高(P<0.05)。敲低FTL逆转了使用异丙酚及抑制miR-133a-3p表达对GADD45A/JNK信号通路以及MKN-28细胞恶性生物学行为的影响。结论:异丙酚可能通过miR-133a-3p/FTL轴调控GADD45A/JNK通路继而抑制胃癌细胞增殖、迁移,并促进细胞凋亡。

Gadd45a在抑制细胞转化和肿瘤恶性进展中的作用

Gadd45a,一个受p53和BRCA1调节的生长阻滞和DNA损伤基因,在抑制细胞转化和肿瘤恶性进展中扮演重要的角色.Gadd45a可以通过抑制细胞生长以及促进DNA损伤修复等间接或者直接方式维持基因组稳定性,从而抑制细胞转化和肿瘤的恶性进展.此外,Gadd45a还可通过对一些信号传导通路的调节,参与肿瘤发生发展的抑制.

p53和Gadd45a蛋白在胰腺癌组织中的表达及临床病理学意义

目的探讨胰腺浸润性导管癌(IDC)组织中p53和Gadd45a蛋白表达及临床病理学意义。方法采用免疫组织化学方法检测59例胰腺IDC标本中p53和Gadd45a蛋白的表达情况,分析其与临床病理学参数之间的关系。结果p53蛋白表达阳性率为67.8%(40/59),Gadd45a蛋白为42.4%(25/59)。<65岁胰腺IDC患者的p53蛋白表达阳性率明显高于≥65岁者(χ2=4.711,P=0.030),Gadd45a蛋白表达则与患者年龄无关。不同组织学分化程度和不同TNM分期癌组织中p53蛋白表达差异无显著性;不同TNM分期癌组织中Gadd45a蛋白表达差异无显著性,但不同组织学分化程度癌组织中则差异有显著性(χ2=10.052,P=0.007)。p53(+)组和Gadd45a(+)组中位生存时间分别短于p53(-)组和Gadd45a(-)组(χ2=0.09,P=0.764;χ2=0.14,P=0.704)。结论p53和Gadd45a在胰腺癌组织中均有较高表达。p53和Gadd45a蛋白的过表达可能与胰腺癌的恶性生物学行为有关。两者单独或联合表达与胰腺癌患者的预后无关。

p53与Gadd45a蛋白在胃癌组织中的表达及临床病理学意义

目的近年来研究表明,p53与Gadd45a蛋白在胃癌的发生、发展过程中发挥重要作用。文中将探讨胃癌组织中p53与Gadd45a蛋白表达及临床病理学意义。方法采用免疫组织化学方法检测101例胃癌及其癌旁组织中p53与Gadd45a蛋白的表达情况,分析其与临床病理学参数之间的关系。结果胃癌及癌旁组织中p53蛋白表达的阳性率分别为67.33%、12.97%,Gadd45a蛋白表达的阳性率分别为33.79%、79.18%。与癌旁组织中的表达相比,p53蛋白在癌组织中的表达增强,而Gadd45a蛋白的表达却减弱,差异有统计学意义(P<0.05)。不同组织学分化程度、淋巴结转移转移情况及不同TNM分期癌组织中p53与Gadd45a蛋白的表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论 p53与Gadd45a蛋白表达的变化在胃癌的发生发展中起到重要作用。两者的过表达可能与胃癌的恶性生物学行为有关。

Gadd45a和p53在乳腺癌中的表达及临床病理意义

目的:探讨Gadd45a和p53在乳腺癌中的表达情况及其与临床病理参数和预后的关系。方法:采用免疫组化法检测78例乳腺癌组织及其癌旁正常组织中Gadd45a和p53的表达。结果:Gadd45a在乳腺癌组织中的阳性表达率为38.4%,明显低于正常乳腺组织,p53在乳腺癌组织中的阳性表达率为65.4%,明显高于正常乳腺组织,差异均具有统计意义(P<0.05);Gadd45a在乳腺癌组织学Ⅰ级组、Ⅱ级组、Ⅲ级组的阳性表达率依次下降,差异均有统计学意义(P<0.05);p53在伴有淋巴结转移组中的阳性表达率高于无淋巴结转移组,差异均有统计意义(P<0.05);p53表达与Gadd45a表达呈负相关(P<0.05);Gadd45a阳性组的生存期长于阴性组,生存率高于阴性组,存在统计学差异;p53阳性组的生存期短于阴性组,生存率低于阴性组,存在统计学差异(P<0.05);p53(+)Gadd45a(-)组(即阳性组)中位生存时间短于阴性组,生存率低于阴性组。结论:Gadd45a和p53蛋白的检测可作为乳腺癌恶性程度的检测指标;p53的表达与乳腺癌的转移相关,Gadd45a的表达与乳腺癌的分化分级相关;p53高表达及Gadd45a低表达与乳腺癌的不良预后相关;p53(+)Gadd45a(-)表型与乳腺癌的不良预后相关;Gadd45a蛋白有望成为乳腺癌治疗的新的靶点。

Gadd45a基因在寻常型银屑病皮损中的表达及意义

目的:检测寻常型银屑病皮损中生长阻滞和DNA损伤基因(Gadd45a)mRNA的表达水平及Gadd45a蛋白在皮损中的表达部位,探讨其在寻常型银屑病角质形成细胞异常增殖中的作用。方法:收集20例寻常型银屑病患者的皮损及20例健康对照皮肤组织,RT-PCR法检测Gadd45a mRNA的表达水平,采用免疫组化法检测Gadd45a蛋白的表达部位,并进行比较。结果:RT-PCR结果显示,与健康对照皮肤比较,寻常型银屑病皮损中Gadd45a mRNA的相对表达量为4.51±1.57,差异有统计学意义(P<0.05);免疫组化结果显示Gadd45a蛋白主要表达于表皮角质形成细胞的胞浆中,在寻常型银屑病病皮损的角质形成细胞中为棕黄色颗粒,在健康对照皮肤角质形成细胞中为阴性或者偶见。结论:Gadd45a的高表达可能在寻常型银屑病皮损角质形成细胞的良性异常增殖中发挥了重要作用。

Gadd45a基因真核表达载体及其RNA干扰载体的构建

采用反转录PCR的方法,从人类肝组织细胞系L02中扩增Gadd45a基因的全长读码框,并将其克隆到pCDNA3.0上,该重组质粒命名为pC/Gadd45a。同时,采用化学方法合成Gadd45a基因的干扰序列,经退火后克隆至pCDNA3.0,命名为pC/shRNA。实验结果证实重组质粒pC/Gadd45a和pC/shRNA构建成功。然后,将pC/Gadd45a和pC/shRNA转染L02细胞后发现,Gadd45a基因在mRNA水平和蛋白水平上分别提高表达和降低表达。Gadd45a真核表达载体及其干扰载体的成功构建,为深入研究Gadd45a蛋白对肿瘤发生发展的作用以及该蛋白在细胞信号网络中的作用提供参考。

Gadd45a表达质粒的构建及在人类T细胞中的表达(英文)

目的:构建Gadd45a表达质粒,并诱导该质粒在人类T细胞中的表达。方法:采用反转录PCR法从人胚胎干细胞中扩增Gadd45a的蛋白质编码框,将之克隆至pcDNA3.1载体后,利用电穿孔方法将构建好的表达质粒pcDNA3.1-Gadd45a和空白质粒pcDNA3.1分别转染至Jurkat细胞或正常人CD4+T细胞,分别用荧光定量RT-PCR和Western blot的方法检测转染后细胞Gadd45a mRNA和蛋白的表达。结果:成功构建Gadd45a表达质粒pcDNA3.1-Gadd45a,转染该质粒的Jurkat和正常人CD4+T细胞均显示Gadd45a过表达。结论:Gadd45a表达质粒的构建及诱导其在人T细胞中的过表达为进一步研究Gadd45a在表观遗传学机制中的作用提供了研究基础。

Gadd45a在人脑胶质瘤细胞中的表达及其与细胞凋亡及增殖的关系

目的探讨Gadd45a在人脑胶质瘤细胞中的表达及其与细胞凋亡及增殖的关系。方法采用RT-PCR方法检测正常人脑组织和胶质瘤细胞系U251中的Gadd45a mRNA的表达水平。流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期。MTT法检测细胞增殖率。结果正常人脑组织Gadd45a mRNA表达水平明显高于U251细胞(P<0.05)。U251细胞在S期比例明显高于正常人脑神经细胞,G2-M期比率明显降低(P<0.05)。U251细胞凋亡率明显低于正常人脑细胞(P<0.05),增殖率明显高于正常人脑神经细胞(P<0.05)。结论 Gadd45a基因低表达导致细胞多处于S期,降低细胞凋亡率从而促进人脑胶质瘤的发生发展。

GADD45A与肿瘤治疗

生长阻滞和DNA损伤基因45A(growth arrest and DNA damage-inducible 45A,GADD45A)是第1个被发现的由P53激活的应激诱导基因,同时也是P63、P73、BRCA1及MYC的靶标基因。GADD45A作为DNA损伤修复基因,受P53依赖(电离辐射诱导)和独立于P53(紫外线诱导)的途径调节,参与DNA损伤修复、细胞周期阻滞、凋亡、自噬、血管形成等生物学功能,与肿瘤发生发展密切相关。在大多数肿瘤的治疗中,化疗药物直接或者间接(如脱甲基化、乙酰化)上调其表达水平,提高癌细胞药物敏感性;同时,在放射治疗过程,过表达GADD45A可干预放射抵抗。然而,在少数肿瘤的治疗中,GADD45A的表达反而能够提高癌细胞的存活率。本文主要对GADD45A在肿瘤治疗中所发挥的作用及机制进行综述。

GADD45A在肿瘤中的研究进展

GADD45A是细胞生长阻滞和DNA损伤修复基因,在基因组稳定性维持、细胞周期阻滞和细胞凋亡中起着重要的作用,与肿瘤的发生有密切的关系,其表达高低与肿瘤预后有关。本文对GADD45A的结构和功能以及其在肿瘤中的作用进行综述。

Gadd45a基因对小鼠造血干细胞功能的影响

目的 Gadd45a基因对小鼠造血干细胞功能的影响。方法流式细胞仪分选小鼠骨髓造血干细胞、体外单克隆培养,竞争性骨髓移植,放射线照射观察生存曲线。结果 Gadd45a基因缺失的小鼠造血干细胞克隆形成能力增强,短期造血重建能力无差异,8.5Gy放射线照射后生存情况无差异。结论 Gadd45a基因对小鼠造血干细胞功能起重要作用。

GADD45a、PI3K和p-p38在结直肠癌中的表达及临床意义

目的探讨结直肠癌组织中GADD45a、PI3K和p-p38蛋白表达的相关性及其临床病理意义。方法应用免疫组化检测123例结直肠癌组织和60例正常结直肠黏膜组织中的GADD45a、PI3K和p-p38蛋白表达,分析三者之间的相关性及其与临床病理特征、预后的关系。结果⑴结直肠癌组织中GADD45a的表达水平低于正常结直肠黏膜组织,PI3K和p-p38的表达水平高于正常结直肠黏膜组织,差异有显著性统计学意义(P<0.01);⑵PI3K的表达水平与淋巴结转移有无、肿瘤TNM分期有相关性(P<0.05);⑶Spearman相关分析显示,GADD45a与p-p38表达呈负相关(P<0.05);⑷Cox回归模型分析显示GADD45a阴性表达、TNM分期、肿瘤大小是结直肠癌预后的独立危险因素。结论GADD45a阴性表达是结直肠癌预后的危险因素,其表达与p-p38负相关,是结直肠癌预后潜在分子标志物。

Gadd45a基因对细胞调控作用的研究进展

细胞周期及生长的调控是细胞存活必不可少的,在细胞增殖及细胞周期控制有许多复杂的机制。Gadd45a基因为生长阻滞和DNA损伤修复基因,是重要的抑癌基因,是p53、BRCI基因调控的下游基因,调控细胞周期阻滞,细胞纺锤体检查点调控,DNA修复和诱导细胞凋亡。在细胞对外界损伤反应调控网络中扮有重要角色,在维持基因组稳定性和抑制肿瘤发生发展的过程中发挥重要的作用。Gadd45a作为控制癌细胞增殖代谢途径的重要组成部分,成为一个值得新兴的药物进一步研究靶点。

GADD45A靶向抑制p38 MAPK通路逆转宫颈癌细胞获得性耐药的实验研究

目的探究生长阻滞和DNA损伤诱导45A(GADD45A)对宫颈癌细胞顺铂(DDP)获得性耐药的影响及可能的分子机制。方法体外培养HeLa细胞,通过DDP诱导建立HeLa耐药细胞HeLa/DDP,实时荧光定量PCR(qPCR)检测GADD45A表达。将HeLa/DDP细胞分为空白对照组(细胞不做任何处理)、阴性对照组(转染阴性对照病毒空载体)、GADD45A转染组(转染GADD45A过表达慢病毒载体)、GADD45A+Anisomycin组(细胞转染GADD45A过表达慢病毒载体后加入JNK/p38激活剂Anisomycin)。CCK-8法和细胞集落形成法检测HeLa/DDP细胞耐药性。彗星实验和流式细胞术检测DDP对各组HeLa/DDP细胞DNA损伤、细胞周期和凋亡的影响。Western blotting法检测各组细胞p38蛋白表达。结果HeLa细胞中美好中GADD45A mRNA表达量低于正常宫颈鳞状上皮细胞H8(0.70±0.09 vs.1.00±0.04,P<0.05)。HeLa/DDP细胞中GADD45A mRNA表达量低于HeLa细胞(0.48±0.05 vs.0.70±0.09,P<0.05)。GADD45A转染组HeLa/DDP细胞对DDP的耐药指数低于空白对照组(23.57±1.26 vs.76.55±5.79),且细胞集落数量减少(119±26 vs.415±33),同时DNA损伤率增加[尾长(75.26±19.83)μm vs.(21.47±6.41)μm],S期细胞比例升高[(34.22±1.49)%vs.(15.40±2.98)%],细胞凋亡率增加[(40.98±4.59)%vs.(5.56±0.77)%],差异具有统计学意义P<0.05)。与空白对照组比较,GADD45A转染组HeLa/DDP细胞GADD45A蛋白表达增强,但p-p38/p38蛋白比值降低(P<0.05)。GADD45A+Anisomycin组上述指标较GADD45A组被逆转。结论在DDP耐药宫颈癌细胞中GADD45A表达普遍下调,上调GADD45A表达可以降低HeLa/DDP细胞活性,增加DDP诱导细胞凋亡和DNA损伤,且与抑制p38磷酸化激活有关。

HMGB1/GADD45A介导急性移植物抗宿主病患者CD4^+T细胞STAT3启动子的去甲基化

目的:研究急性移植物抗宿主病(acute graft-versus-host disease,a GVHD)患者CD4+T细胞中STAT3基因启动子DNA病理性低甲基化的分子调控机制。方法:收集行同胞全相合异基因造血干细胞移植的42例患者的血液样本。采用实时定量PCR和Western印迹检测各组患者生长阻滞与DNA损伤诱导蛋白45A(growth arrest and DNA damage-inducible protein 45 alpha,GADD45A)的表达水平,免疫共沉淀检测各组患者高迁移率族蛋白1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)与GADD45A的结合水平,染色质免疫共沉淀检测各组患者HMGB1和GADD45A与STAT3启动子的结合水平;正常CD4+T细胞中过表达HMGB1及干扰GADD45A表达后用Western印迹检测STAT3表达水平,亚硫酸盐测序检测STAT3启动子区DNA甲基化水平。结果:与未发生a GVHD患者比较,a GVHD患者外周血CD4+T细胞中GADD45A表达水平明显升高;HMGB1与GADD45A的结合显著增加;HMGB1,GADD45A与STAT3启动子的结合水平均明显升高,且STAT3启动子区HMGB1,GADD45A结合水平与其DNA甲基化水平呈高度负相关(分别r=0.719,r=0.840;P<0.01)。与单纯过表达HMGB1相比,正常CD4+T细胞中过表达HMGB1叠加干扰GADD45A表达后STAT3表达明显降低,STAT3启动子DNA甲基化水平明显升高。结论:CD4+T细胞中HMGB1和GADD45A表达升高是异基因造血干细胞移植后患者STAT3启动子DNA低甲基化,STAT3高表达,进而诱发a GVHD的重要因素。

双硫仑通过上调GADD45A抑制胰腺癌细胞增殖的机制研究

目的:通过体外实验评估双硫仑(disulfiram,DSF)对人胰腺癌细胞增殖、细胞周期的影响并初步探讨可能作用机制。方法:不同浓度梯度的DSF联合Cu(DSF/Cu)处理人胰腺癌PANC-1和PATU8988T细胞,CCK-8法检测细胞增殖活性及药物对细胞的增殖抑制率;选取IC50浓度的DSF/Cu处理细胞,流式细胞术检测细胞周期分布情况,并采用荧光定量PCR和Western blot法检测各组细胞中生长阻滞和DNA损伤诱生基因45A(growth arrest and DNA damage inducible 45A,GADD45A),G2/M周期特异性蛋白CCNB1、CDC25C、CDK1的转录和翻译水平,同时检测MAPK通路相关蛋白P38和JNK蛋白磷酸化水平;siRNA干扰试验检测抑制GADD45A基因后细胞相对活力、细胞周期及MAPK通路相关蛋白磷酸化水平的变化。结果:DSF联合Cu对人胰腺癌细胞增殖具有明显抑制作用,且抑制率随DSF浓度增加而增加。DSF/Cu可明显上调GADD45A基因的表达,诱导细胞周期G2/M期阻滞,抑制G2/M周期特异性基因及蛋白的表达;Real-time PCR结果表明DSF/Cu处理PANC-1细胞和PATU8988T细胞24 h后GADD45A表达量升高,分别为对照组的11.4和7.99倍(P均<0.001);相应地,PANC-1细胞和PATU8988T细胞CCNB1、CDC25C、CDK1表达量下降,分别为对照组的31%、35%和37%(P均<0.05)及48%、24%和29%(P均<0.05),差异有统计学意义。Western blot结果与RNA表达结果相对应,且呈浓度和时间依赖趋势。同时,MAPK信号通路相关蛋白磷酸化水平增高。siRNA-GADD45A干扰后细胞活力增加,G2/M细胞比例降低,MAPK信号通路磷酸化水平降低。结论:DSF/Cu可通过上调GADD45A并激活JNK/P38-MAPK信号通路诱导细胞周期G2/M阻滞,进而引起细胞增殖抑制,发挥抗肿瘤作用。

PML/RARα抑制GADD45A的转录表达

目的研究异常转录因子PML/RARα对GADD45A的转录调控机制,为进一步阐释PML/RARα在急性早幼粒细胞白血病(APL)发病中的作用机制提供线索。方法运用ChIP-PCR技术研究PML/RARα与GADD45A的结合情况;采用Real-TimePCR技术检测PR9细胞中GADD45A mRNA的表达水平,并分析其与PML/RARα融合蛋白表达的相关性;利用真核细胞表达载体在H1299细胞中过表达PML/RARα和p53蛋白,研究PML/RARα与p53对GADD45A的共调控关系。结果 PML/RARαChIP-qPCR结果显示:PML/RARα特异性抗体能够富集GADD45A基因功能区第3个内含子区的DNA片段,而非特异性IgG不能够富集;在PR9细胞中发现GADD45A mRNA表达水平与PML/RARα蛋白的表达呈负相关,说明在PR9细胞中PML/RARα融合蛋白能够抑制GADD45A的表达;在H1299细胞中单独转染野生型p53表达质粒后,GADD45A在mRNA水平显著上调,而共转染PML/RARα和野生型p53表达质粒后,PML/RARα能够显著抑制p53对GADD45A在mRNA水平的上调作用(P<0.01)。结论 PML/RARα能够结合在GADD45A第3个内含子区域并抑制其转录表达。GADD45A同时也是p53的靶基因,PML/RARα与p53对GADD45A有共调控关系。PML/RARα能够抑制p53对GADD45A的转录激活效应。