LncRNA GALNT5 uaRNA在TRAIL诱导的肺癌A549和HCC827细胞耐药中的作用

目的:探究LncRNA GALNT5 uaRNA在肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导的肺癌A549和HCC827细胞耐药中的作用。方法:采用实时荧光定量PCR法分别检测正常培养及TRAIL耐药的A549和HCC827细胞中GALNT5 uaRNA的表达。A549或HCC827细胞分为4组,空载体组、GALNT5 uaRNA组、siNC组和siGALNT5 uaRNA组,转染并以TRAIL(终浓度为100g/L)处理24 h,采用双染法检测细胞凋亡,Western blot检测凋亡通路蛋白及乙酰化组蛋白H3的表达。采用RNA pull down实验验证GALNT5 uaRNA与组蛋白脱乙酰酶1(HDAC1)之间的相互作用。结果:与正常培养的细胞相比,对TRAIL耐药的A549和HCC827细胞中GALNT5 uaRNA的表达均升高(P<0.001)。与空载体组相比,过表达GALNT5 uaRNA并经TRAIL处理的A549和HCC827细胞凋亡率降低,凋亡通路蛋白Cleaved Caspase-8、Cleaved Caspase-3蛋白及乙酰化组蛋白H3的表达水平降低(P<0.001);与siNC组相比,敲低GALNT5 uaRNA并经TRAIL处理的A549和HCC827细胞凋亡率升高,Cleaved Caspase-8、Cleaved Caspase-3蛋白及乙酰化组蛋白H3的表达水平升高(P<0.001)。GALNT5 uaRNA可以与HDAC1相互作用并抑制乙酰化组蛋白H3蛋白的表达(P<0.05)。结论:GALNT5 uaRNA可能通过与HDAC1相互作用抑制组蛋白的乙酰化,从而减少Caspase-8的表达,促进肺癌细胞对TRAIL的耐药性。

数据挖掘分析GALNT5在胰腺癌中的表达及意义

目的:数据挖掘分析GALNT5在胰腺癌中的表达水平,并评价其与病理分期的关系及对预后的影响。方法:利用Oncomine和THPA等肿瘤生物信息学在线分析网站,挖掘大型癌症公共数据库TCGA中胰腺癌患者GALNT5基因的mRNA及蛋白质表达信息。基于Kaplan-Meier方法和Log-rank检验,利用GEPIA数据库分析GALNT5基因的表达水平与胰腺癌病理分期和预后之间的关系。String-DB数据库用于构建GALNT5基因的蛋白质-蛋白质相互作用网络。结果:与正常胰腺组织相比,胰腺癌组织中GALNT5基因的mRNA和蛋白表达明显升高。GALNT5基因表达水平越高,肿瘤病理分期越高。生存分析表明,与低表达组相比,GALNT5高表达组胰腺癌患者的总生存期和无病生存期明显降低。蛋白质相互作用网络结果表明,GALNT5蛋白表达与黏蛋白家族成员密切相关。结论:胰腺癌组织中GALNT5基因的高表达表明胰腺癌患者预后较差,并且与肿瘤病理分期呈正相关。GALNT5基因可能是将来治疗胰腺癌的潜在新靶标。