巨轴索神经病临床、神经病理和GAN基因变异特点(附1家系报告)

目的探讨巨轴索神经病的临床、神经病理和GAN基因变异特点。方法回顾性分析1例巨轴索神经病患者及其家系的临床资料。结果先证者7年前因双下肢进行性力弱,EMG示重度周围神经轴索病变。3年前双下肢无力加重,并出现双上肢无力,6个月前先证者出现肢体感觉异常,头颅MRI示双侧额、顶叶多发白质病变。腓肠神经活检拟诊巨轴索周围神经病。患者弟弟有类似临床症状,5岁时出现渐进性四肢无力,智力反应较同龄人差。先证者及其弟弟均检测到GAN基因复合杂合突变,家系遗传分析提示c.323C>T来自父亲,c.407_410del来源于母亲。结论巨轴索神经病临床表型具有多样性,常伴CNS受累。腓肠神经活检和基因检测是确诊的重要依据,c.323C>T和c.407_410del为GAN基因新发的突变位点。

一例巨轴索神经病患者中发现GAN基因两种新型致病突变

目的寻找1例疑似巨轴索神经病患者的致病突变位点，为疾病诊断提供科学资料。方法应用目标序列捕获测序技术对患者进行遗传筛查，找到巨轴突蛋白基因（Gigaxonin，GAIN）的可疑致病突变位点，并提取患者父母的外周血DNA，进行Sanger测序验证。同时对200名正常人的400个GAN基因进行Sanger测序。此外，应用生物信息学软件Polyphen对突变巨轴突蛋白进行了功能预测。结果在患者GAN基因中鉴定出2种新型突变：c．778G〉T（p．Glu260Ter）和c．277G〉A（p．Gly93Arg），为复合杂合突变；Sanger测序证实c．778G〉T（p．Glu260Ter）突变源于父方，c．277G〉A（P．Gly93Arg）突变则与母亲相同。在200名正常人GAN基因中未检测到同样的突变，排除其为多态性。生物信息学分析预测这两种新型GAN突变均可引发巨轴突蛋白功能异常。结论研究鉴定出了患者GAN的两种新型突变，它们均可能引起巨轴突蛋白结构和功能的异常，从而导致疾病的发生，为日后类似疾病的诊断提供了依据。

巨轴索神经病1例临床表现及基因突变分析并文献复习

回顾性分析2022-11-05昆明市儿童医院癫痫中心收治的1例染色体16q23.2区域部分纯合缺失巨轴索神经病(GAN)患者的临床资料及其他辅助检查资料,对患儿及其父母进行基因检测,总结已报道的中国GAN患者的临床表型及基因突变特征,为巨轴索神经病的疾病诊断以及遗传咨询提供参考依据结果发现患儿男性,7岁6月龄,步态异常呈“鸭步”,曾有癫痫发作等情况。基因检测发现患儿16q23.2区域发生>115.8kb的纯合性片段缺失,基因片段检测提示该缺失分别来自患儿父亲和母亲,该患儿诊断为巨轴索神经病。结合12例已报道具有GAN致病基因突变中国患儿的文献复习发现,患儿的临床表现均以儿童早期下肢无力,步态异常,行走障碍为首发症状,发现平均发病年龄为3岁,除本研究患者为基因片段缺失致病外,其余患者均为点突变,广泛分布于GAN基因的3个结构域。由此得出,GAN基因片段缺失为患儿巨轴索神经病的致病原因,研究进一步丰富了GAN的基因突变谱,并归纳分析了国内GAN患者的临床表型与基因突变特征,为GAN的临床诊断和遗传咨询提供参考依据。

产氨基葡萄糖工程菌的构建与发酵培养基优化

本研究将源自大肠杆菌Escherichia coli BL21的氨基葡萄糖合成酶基因glm S和源自酿酒酵母的Saccharomyces cerevisiae S288C的氨基葡萄糖乙酰化酶基因gan1克隆至表达载体p ET24(a)上,构建了重组质粒p ET24(a)-glm S-gan1,并将表达载体转化入大肠杆菌,获得了可以共表达氨基葡萄糖合成酶和氨基葡萄糖乙酰化酶的重组工程菌E.coli-glm S-gna1。本研究采用乳糖诱导剂诱导工程菌表达外源蛋白,确立了乳糖最佳诱导浓度为5 g/L,培养基未经优化时,工程菌发酵氨基葡萄糖产量为6.2 g/L,比出发菌提高了比出发菌提高了2.88倍。通过对工程菌发酵培养基优化,确立了培养基各成分的最佳用量,即葡萄糖150 g/L,蛋白胨15 g/L,酵母粉20 g/L,甘油4 g/L,Mn Cl220 mg/L。在最佳培养基条件下,工程菌发酵氨基葡萄糖的产量达到31.2 g/L,比优化前提高了4.03倍。