免疫印迹技术分析树舌多糖GF对H22肝癌移植瘤PTEN蛋白表达的影响

目的探明树舌多糖(GAPS)GF对H22肝癌移植瘤PTEN蛋白表达的影响。方法昆明种小鼠随机分为两组:肿瘤组和树舌多糖组,接种后各组肌肉注射给药,分别给与生理盐水和树舌多糖GF。连续10 d,于末次给药24 h,处死小鼠,剥离肿瘤组织。Western blot技术检测各组样品PTEN蛋白的表达量。结果肿瘤组检测结果为阴性,树舌多糖组检测结果为阳性。结论树舌多糖GF抗肿瘤的作用靶点之一可能为抑癌基因PTEN。

树舌多糖GF对HepA瘤细胞N-ras、C-myc基因表达的影响

目的为探明树舌多糖GF对HepA瘤组织N-ras、C-myc基因表达的影响。方法运用原位杂交法、SP免疫组化染色技术及多媒体彩色病理图文分析系统测定HepA瘤细胞中N-ras、C-myc mRNA及蛋白的表达量。结果树舌多糖组、猪苓多糖组中N-ras、C-myc mRNA及蛋白的表达量均显著低于荷瘤组(P<0.01),树舌多糖组与猪苓多糖组无显著性差异。结论树舌多糖GF可通过降低N-ras、C-myc mRNA及蛋白的表达,而抑制HepA瘤细胞的增殖。

苦参总碱贴片抗心律失常作用的实验研究

目的:研究苦参总碱贴片对实验性快速心律失常的作用。方法:分别以乌头碱、西地兰和肾上腺素等药物制造快速心律失常的动物模型,并进行试验研究。结果:对药物所致的豚鼠、大鼠及家兔快速性心律不齐均具有抑制作用。结论:苦参总碱贴片能良好的预防快速性心律不齐,且有长效作用。

树舌多糖GF对HepA瘤细胞N-ras基因表达的影响

目的探明树舌多糖GF对HepA瘤组织N-ras基因表达的影响。方法运用原位杂交法、SP免疫组化染色技术及多媒体彩色病理图文分析系统测定HepA瘤细包中N-rasmRNA量及N-Ras蛋白的表达量。结果树舌多糖组、猪苓多糖组中N-rasmRNA量及Ras蛋白的表达量均显著低于荷瘤组(P<0.01),树舌多糖组与猪苓多糖组无显著性差异。结论初步认为树舌多糖GF可通过降低N-rasmRNA量及Ras蛋白的表达,而抑制HepA瘤细胞的增殖。

小鼠HepA癌细胞PTEN蛋白表达及树舌多糖GF的影响

目的:探明小鼠HepA癌细胞PTEN蛋白表达及树舌多糖GF的影响。方法:昆明种小鼠随机分为三组:肿瘤组、树舌多糖组和阴性对照组。肿瘤组、树舌多糖组接种后各组肌肉注射给药,正常组和肿瘤组给与生理盐水,树舌多糖组给与树舌多糖GF;采用超速离心技术制备、SDS-PAGE分离细胞可溶性蛋白;Western blot和Dot blot技术检测各组样品PTEN蛋白的表达量。结果:树舌多糖组检测PTEN结果为阳性,肿瘤组检测PTEN结果为阴性。结论:树舌多糖GF抗肿瘤的作用靶点之一可能为抑癌基因PTEN。

HepA瘤可溶性蛋白质组分析及树舌多糖GF注射液对其影响的研究

目的:分析HepA瘤细胞可溶性蛋白质组的变化并探讨树舌多糖GF注射液(GAPSGF)对其影响。方法:以超速离心制备HepA瘤可溶性蛋白,双向电泳分离瘤组织可溶性蛋白,银染显色,扫描仪获取凝胶图像并应用PDQuest软件对其进行分析。结果:肿瘤组分离得到101个蛋白质点,树舌多糖组分离得到85个蛋白质点。仅在肿瘤组出现的蛋白质点有54个,仅在树舌多糖组出现的蛋白质点有38个,肿瘤组和树舌多糖组共有的蛋白质点中表达量相差两倍以上的点有14个。结论:树舌多糖GF对HepA瘤细胞可溶性蛋白质组表达具有显著影响。

树舌多糖GF对小鼠H_(22)瘤CDK2基因表达的影响

目的:探明树舌多糖GF对H22瘤细胞CDK2基因表达的影响。方法:运用Elisa法测定H22瘤细胞中CDK2蛋白的表达量。结果:树舌多糖组中CDK2蛋白的表达量均显著低于荷瘤对照组(P<0.01),树舌多糖组与环磷酰胺组无显著性差异(P>0.05)。结论:树舌多糖GF可通过降低CDK2蛋白的表达,抑制H22瘤细胞的增殖。

树舌多糖GF对小鼠HepA瘤基因组DNA甲基化影响的实验研究

目的 初步探讨树舌多糖GF对小鼠HepA瘤基因组甲基化的影响。方法 提取基因组DNA ,采用限制性酶切片段长度多态性分析的方法进行甲基化检测。结果 HpaII酶切结果 :树舌多糖组可见 3个条带 ,猪苓对照组可见 3个条带 ,阴性对照组可见 4个条带 ,正常对照组可见 2个条带。MspI酶切结果 :树舌多糖组可见 6个条带 ,猪苓对照组可见 5个条带 ,阴性对照组可见 5个条带 ,正常对照组可见 6个条带。结论 小鼠HepA瘤基因组DNA是低甲基化的 ,树舌多糖GF有阻碍小鼠HepA瘤基因组DNA低甲基化发生的趋势 ,可能还具有抗 5mC的突变的作用。

树舌多糖GF对肝癌细胞的增殖抑制作用及对RB基因mRNA表达的影响

目的:研究树舌多糖GF对肝癌细胞的增殖抑制作用以及对RB基因mRNA表达的影响。方法:利用CCK-8法观察树舌多糖GF对肝癌细胞增殖抑制作用,并筛选出有效剂量;以SMMC7721为研究对象,在mRNA水平探究其对RB基因表达的影响。结果:CCK-8法表明,树舌多糖GF各剂量组和对照组比较,OD490nm均明显降低,有显著性差异(P<0.01),其中树舌多糖GF2.5μg/mL、5μg/mL、10μg/mL剂量组对SMMC7721细胞增殖的抑制效果最强,抑制率分别是20.01%、20.47%、24.44%。结论:树舌多糖GF可明显上调RB基因的mRNA表达水平,从而实现对肝癌细胞的增殖抑制作用。

树舌多糖GF对HepA癌细胞c-MycmRNA丰度的影响

目的:探明树舌多糖(GAPS)GF对HepA瘤细胞c-MycmRNA丰度的影响。方法:接种HepA瘤后的小鼠随机分为3组:模型组、树舌多糖组和猪苓多糖组,树舌多糖组和猪苓多糖组小鼠分别注射树舌多糖GF和猪苓多糖。应用原位杂交技术检测各组小鼠HepA癌细胞中c-MycmRNA的丰度。结果:树舌多糖组、猪苓多糖组中c-Myc表达量均显著低于模型组(P<0.01),树舌多糖组与猪苓多糖组间无显著性差异。结论:树舌多糖GF抑制c-Myc基因的转录可能是其抗肿瘤的作用机制之一。

树舌多糖GF对HepA瘤细胞C-myc基因表达的影响

目的:探明树舌多糖GF对HepA瘤组织C-myc基因表达的影响。方法:应用免疫组化和原位杂交方法检测小鼠HepA瘤细胞中C-myc基因的mRNA与蛋白的表达情况。结果:与荷瘤组比较,树舌多糖组、猪苓多糖组中C-myc基因的mRNA与蛋白的表达量均明显降低(P﹤0.01),其中树舌多糖组与猪苓多糖组无显著性差异。结论:树舌多糖GF可通过降低C-myc mRNA量及C-myc蛋白的表达,而抑制HepA瘤细胞的增殖。

树舌多糖GF对小鼠HepA瘤Rb基因表达的影响

为探明树舌多糖GF对小鼠HepA瘤Rb基因表达的影响。本实验用链霉菌抗生素蛋白 -过氧化酶免疫组化法来测定瘤组织中Rb蛋白含量 ,通过多媒体图像分析系统分析实验结果。结果表明 :树舌多糖GF组、猪苓多糖组与荷瘤对照组比较 ,差异均非常显著 (P <0 .0 1) ,即树舌多糖GF、猪苓多糖明显增强HepA瘤组织中Rb基因的表达 ;树舌多糖组与猪苓多糖组比较 ,差异非常显著 (P <0 .0 1) ,即树舌多糖GF更能显著增强Rb基因表达 ,优于猪苓多糖。因此可初步认为 ,作用于抑癌基因Rb并使之表达增强 ,是树舌多糖GF抗瘤作用机制之一。

双向电泳法分析树舌多糖GF对小鼠HepA癌细胞可溶性蛋白质组表达的影响

目的:探明树舌多糖(GAPS)GF对小鼠HepA癌细胞可溶性蛋白质组表达的影响。方法:昆明种小鼠随机分为2组:肿瘤组和树舌多糖组,接种后各组肌肉注射给药,分别给与生理盐水和树舌多糖GF。连续10天,于末次给药24 h,处死小鼠,剥离肿瘤组织。应用2-DE技术检测各组小鼠HepA癌细胞可溶性蛋白的表达。应用PDQuest软件分析电泳结果,找出差异表达的蛋白质点。根据近似等电点和分子量的数值进行数据库和文献综合检索,推测差异点的蛋白质身份。结果:肿瘤组共获得蛋白质点101个,树舌多糖组85个;其中54个蛋白点为肿瘤组特异表达,38个蛋白点为树舌多糖组特异表达;肿瘤组与树舌多糖组共表达的蛋白质点中,有14个点表达量相差两倍以上。第1098号斑点认为可能是抑癌基因PTEN的产物。结论:树舌多糖GF可以影响小鼠HepA瘤细胞多种可溶性蛋白的表达,这种影响很可能与树舌多糖GF的抗肿瘤机制有关;其抗肿瘤的作用靶点之一可能为抑癌基因PTEN。

原位杂交法检测树舌多糖GF对HepA瘤细胞N-ras、C-myc基因mRNA表达的影响

目的:探明树舌多糖GF对HepA瘤细胞癌基因N-ras、C-myc mRNA水平的影响。方法:应用地高辛标记探针原位杂交技术,检测树舌多糖GF对HepA瘤细胞中癌基因N-ras、C-myc mRNA丰度的影响。结果:树舌多糖组、猪苓多糖组中mRNA表达量均显著低于模型组(P(0.01),树舌多糖组与猪苓多糖组无显著性差异。结论:树舌多糖GF可通过调节N-ras、C-myc基因mRNA的表达,而抑制HepA瘤细胞的增殖。

树舌多糖GF对HepA瘤细胞Rb基因表达的影响

目的 探讨树舌多糖GF对小鼠HepA瘤细胞Rb基因表达的影响。方法 本实验用链霉菌抗生素蛋白 -过氧化酶免疫组化法来测定细胞中Rb蛋白含量 ,通过多媒体图像分析系统分析实验结果。结果 树舌多糖GF组、猪苓多糖组与荷瘤对照组比较 ,差异均非常显著 (P <0 .0 1) ,即树舌多糖GF、猪苓多糖能促使HepA瘤细胞中Rb基因表达明显增强 ;树舌多糖组与猪苓多糖组比较 ,差异非常显著 (P <0 .0 1) ,即树舌多糖GF更能明显增强Rb基因表达 ,优于猪苓多糖。结论 树舌多糖GF抗瘤作用机理之一是作用于抑癌基因Rb并使之表达增强。

树舌多糖GF对siRNA干扰沉默CDK2基因表达的辅助作用

目的:探讨树舌多糖GF辅助siRNA干扰沉默CDK2基因表达的作用。方法:本实验采用人肝癌细胞SMMC7721为研究对象,将中药树舌多糖GF2.5μg·mL-1与siRNA干扰序列191联合应用,采用Real-time PCR方法检测CDK2基因mRNA水平表达情况。结果:树舌多糖GF2.5μg·mL-1与191序列合用比单纯应用191序列抑制率提高3%。结论:树舌多糖GF2.5μg·mL-1与191序列合用比单纯应用191序列抑制率提高3%,表明树舌多糖GF对RNAi技术沉寂肝癌CDK2基因有一定的辅助作用。