四物汤补血有效部位及对红系特异性转录因子GATA-1 mRNA表达的影响

目的探讨四物汤补血有效部位及对红系特异性转录因子GATA-1mRNA表达的影响。方法采用极性由小到大的三种溶剂石油醚、醋酸乙酯及水分别提取四物汤组分,用半定量RT-PCR分析红系转录因子GATA-1mRNA表达水平。结果与血虚小鼠模型组及石油醚提取物给药组比较,"四物汤"水提物能明显增强血虚小鼠模型红系造血,亦能显著上调红系转录因子GATA-1mRNA的表达(P<0.01)。结论“四物汤”水提物系补血有效部位,GATA-1mRNA过表达可能在介导"四物汤"促红系造血中起重要作用。

转录因子GATA-1与人巨细胞病毒UL111A基因5＇上游序列结合的实验研究

目的:利用人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)潜伏及再激活感染THP-1细胞模型,研究细胞核内转录因子GATA-1与HCMV UL111A基因5'上游DNA序列的相互作用。方法:采用免疫印迹(Western blotting)技术定量分析HCMV潜伏及再激活感染时细胞核内转录因子GATA-1的表达;通过MATCH工具软件分析UL111A基因5'上游DNA序列,发现存在着11个GATA-1的结合位点,针对这11个GATA-1结合位点DNA序列设计9对引物,采用染色质免疫沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)及实时荧光定量PCR技术分析转录因子GATA-1与UL111A基因5'上游DNA序列的结合情况。结果:HCMV潜伏感染时UL111A基因未表达cmvIL-10,激活感染时表达cmvIL-10,潜伏感染时转录因子GATA-1的相对表达量高于激活感染;以GATA-1抗体特异性结合的DNA片段为模板,9对引物中共有5对扩增出目的条带;HCMV潜伏感染组和激活感染组5个位点转录因子GATA-1结合率分别为:-4.00±0.26、-4.50±0.33、-4.41±0.21、-3.61±0.20、-3.47±0.11和-1.13±0.07、-0.63±0.05、-1.10±0.07、-0.24±0.03和-0.14±0.01,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:HCMV感染时转录因子GATA-1可能通过与UL111A基因5’上游序列1119(-3760)位点、107(-4772)位点、609(-4270)位点、849(-4030)位点和2047(-2832)位点结合,调节UL111A基因的转录,参与HCMV潜伏与再激活感染的过程。

转录因子GATA-1在造血系统中的作用(综述)

转录因子GATA-1为正常红细胞发育和分化成熟所必需。GATA-1的表达严格限制于造血细胞系,主要调控红系的增殖和分化,对巨核系、肥大细胞系及嗜酸性粒细胞系也起一定的作用。GATA-1参与自身启动子的正调节,而且GATA-1和PU.1可以通过交互作用抑制各自的功能;GATA-1与红系Kr櫣ppel样因子(EKLF)、FKLF-2、SCL、生长因子骨形态生成蛋白(BMP-4)及其他GATA转录因子之间存在相互调控作用。GATA-1可在急性非淋巴细胞性白血病等多种类型白血病中表达,它的表达还可影响急性髓性白血病的预后。GATA-1还与遗传性球形红细胞增多症、伴有严重贫血的多发性骨髓瘤的发病机制有关。

人参皂甙对红系、粒单系、巨核系细胞株的增殖及转录因子的诱导作用

目的 :通过观察人参皂甙 (GS)对c fos、GATA 1转录因子的诱导作用 ,探讨GS在造血细胞内的作用机理。方法 :选用粒系细胞株HL 60、单核细胞株U937、红系细胞株K562和巨核系细胞株Meg 0 1作靶细胞 ,MTT法和祖细胞集落培养法观察GS的增殖效应 ;用WesternBlot来分析核蛋白抗原与c fos、GATA 1抗体的结合反应。结果 :( 1)MTT法和祖细胞集落培养法均显示GS( 10 μg/ml)能够明显地刺激三系细胞增殖 ,与对照组比较差异有显著性 (P <0 0 5)。 ( 2 )WesternBlot分析表明HL 60、K562和Meg 0 1细胞经GS处理后核内c fos转录调控蛋白量分别是未经处理细胞的 1 5、2 0和 2 5倍 ,但U937细胞不表达c fos蛋白。 ( 3)除了U937细胞不表达GATA 1蛋白外 ,其他细胞株经GS刺激后GATA 1转录调控蛋白量分别是处理前的 1 5、2 1和 1 3倍。结论 :GS能够明显地刺激 3种系列的细胞株增殖 ,并能有效地通过诱导c fos或GATA 1转录因子而调控造血细胞与增殖或分化有关基因的表达。

六味地黄汤、补中益气汤、复方丹参饮对骨髓抑制小鼠保护的作用机制

目的:进一步研究补肾阴、补气、活血中药方对骨髓抑制小鼠保护的作用机制。方法:使用实时荧光定量RT-PCR检测小鼠脾脏促血小板生成素(thrombopoietin,TPO)mRNA、促血小板生成素受体(c-Mpl)mRNA及转录因子GATA-1mRNA表达水平。结果:六味地黄汤、补中益气汤均能明显升高骨髓抑制小鼠TPO,c-Mpl及GATA-1mRNA的表达。复方丹参饮对小鼠脾脏TPO,c-Mpl及GATA-1mRNA表达影响不明显。结论:六味地黄汤、补中益气汤均能通过升高骨髓抑制小鼠TPO,c-Mpl及GATA-1mRNA的表达水平从而促进骨髓抑制小鼠的外周血恢复。