GATAD1通过调控TGF-β信号通路促进胶质瘤细胞侵袭

目的:探究GATA锌指结构域包含体1(GATAD1)影响胶质瘤细胞侵袭的分子机制。方法:对中国脑胶质瘤基因组图谱(CGGA)数据库进行GSEA分析,初步筛选GATAD1下游信号通路;在胶质瘤细胞系U87 MG中构建稳定敲低GATAD1的细胞株;通过qPCR检测GATAD1敲低后,其下游信号通路相关基因mRNA水平。结果:对CGGA数据库分析发现,GATAD1高表达与转化生长因子(TGF)-β信号通路显著相关(P<0.05)。划痕实验结果显示,使用TGF-β1处理的对照组胶质瘤细胞愈合面积为(2.464±0.261)mm^(2),与未使用TGF-β1处理的对照组(1.456±0.542)mm^(2)相比,其迁移能力明显增强(F=30.59,P<0.01);使用TGF-β1处理的敲低组细胞愈合面积分别为(0.541±0.058)mm^(2)、(0.604±0.012)mm^(2),与未使用TGF-β1处理的敲低组[(0.492±0.063)mm^(2)、(0.465±0.039)mm^(2)]相比,其迁移能力无显著变化(F=30.59,P=0.9999、0.9816);与TGF-β1处理的对照组相比,TGF-β1处理的敲低组细胞迁移能力显著下降(F=30.59,P<0.0001)。Transwell实验结果表明,使用TGF-β1处理的对照组胶质瘤细胞,穿过小室细胞数为(167.80±22.65)个,与未使用TGF-β1处理的对照组[(121.8±9.55)个]相比,其侵袭能力明显增强(F=186.6,P<0.001);使用TGF-β1处理的敲低组细胞穿过小室细胞数分别为(18.20±5.54)个、(16.60±7.54)个,与未使用TGF-β1处理的敲低组[(12.80±4.66)个、(14.00±6.25)个]相比,其侵袭能力无显著变化(F=186.6,P=0.9713、0.9990);与TGF-β1处理的对照组相比,TGF-β1处理的敲低组细胞侵袭能力显著下降(F=186.6,P<0.0001)。Q-PCR结果发现,敲低GATAD1后,TGF-β信号通路相关基因Smad2、Smad3、TGFBR1、TGFBR2、N-cadherin的mRNA水平均下降(t=18.80、12.46、73.44、54.75、44.21,均P<0.001)。结论:GATAD1通过调控TGF-β信号通路,促进胶质瘤细胞的侵袭。

GATAD1在子痫前期中的表达及其意义

目的 :研究GATAD1在子痫前期患者胎盘组织中的表达及其意义。方法 :29例由美国Mayo Clinic妇产科临床医师收集的胎盘组织,其中早孕正常胎盘8例(分娩孕周为7~12周,平均为10.2周),晚孕正常胎盘14例(分娩孕周为35~41周,平均为39.5周),晚孕子痫前期胎盘7例(分娩孕周为31~41周,平均为34.6周)。采用RT-PCR技术、蛋白印迹(Western blot)法和免疫组化检测3组孕妇胎盘组织中GATAD1的m RNA与蛋白表达水平差异。结果:晚孕正常胎盘组织中GATAD1的m RNA与蛋白表达水平均显著高于早孕正常胎盘组织。子痫前期组患者胎盘组织中GATAD1的m RNA与蛋白表达水平均显著低于相应孕周正常妊娠组。结论:GATAD1表达的下降与子痫前期的发病相关。