川芎嗪对大鼠加速型抗GBM抗体肾炎肾皮质的线粒体膜流动性和ATP酶活性的影响

目的 观察川芎嗪对大鼠加速型抗肾小球基底膜 (GBM)抗体肾炎肾皮质线粒体膜流动性和ATP酶活性的影响。方法 采用 1,6 -二苯基 - 1,3,5 -己三烯 (DPH)荧光偏振法研究抗GBM肾炎肾皮质的线粒体膜流动性 ,利用定磷法测定线粒体膜ATP酶的活性。结果 川芎嗪能调节抗GBM抗体肾炎肾皮质的线粒体膜流动性 ,同时可以使Na+ -K+ -ATPase、Mg2 + -ATPase、Ca2 + -ATPase活力升高。结论 川芎嗪可能通过改善肾线粒体膜流动性 ,而保护线粒体膜结构及功能。

非GPS肾小球疾病患儿抗GBM抗体的检测及与临床表现相关性研究

用免疫荧光法检测了４５例非ＧＰＳ肾小球疾病患儿血清中ＩｇＧ型抗ＧＢＭ抗体，阳性１３例占２８％。两组在尿蛋白和血清ＢＵＮ定量等无明显差异。但对３０例（１０例阳性，２０例阴性）患儿随访３年表明，阳性组复发率和死亡率均高于阴性组（ｔ＝３．３８，χ２＝３．９，Ｐ均小于０．０５）。阳性组抗ＧＢＭ抗体滴度与肾受损程度和复发率呈正相关（ｒ分别为０．５６，０．８６）。提示部分非ＧＰＳ肾小球疾病与自身免疫有关。

血清抗GBM抗体对原发性肾小球疾病的意义

用间接免疫荧光法检测３３例原发性肾小球疾病和３０例健康人血清抗ＧＢＭ抗体。结果显示：肾小球肾炎和肾病综合征抗ＧＢＭ抗体阳性检出率分别为２８．５７％、２１．０６％，与对照组比较差异显著（Ｐ＜０．０１）。抗ＧＢＭ抗体阳性患者病情易复发（Ｐ＜０．０５）。早期适当应用免疫抑制剂可提高治愈率。

丹参提取物对大鼠加速型抗GBM抗体肾炎保护作用的研究

目的探讨灵芝提取物对大鼠加速型抗GBM抗体肾炎的保护作用。方法通过建立大鼠加速型抗GBM抗体肾炎模型,研究丹参提取物对大鼠加速型抗GBM抗体肾炎的保护作用。结果给药组第l、3、5、7、10、14d尿蛋白含量与模型组比显著升高(P<0.05,P<0.01);给药组第14d血清指标SCr、IgG、IgM、C3变化与模型组比较均显著升高(P<0.05,P<0.01),给药组第7d血清指标SCr、IgG、IgM、IgA、C3与模型组比较变化不显著,P>0.05,给药组第14d血清指IgA与模型组比较变化不显著,P>0.05;给药组第14d肾组织GSH、MDA、CAT、SOD含量与模型组比较变化显著,P>0.05,给药组第7d肾组织GSH含量与模型组比较变化具有显著性差异,P<0.05,给药组7d肾组织MDA、CAT、SOD含量与模型组比较无显著性变化,P>0.05。结论丹参提取物对大鼠加速型抗GBM抗体肾炎具有保护作用,可能通过增强机体的抗氧化能力、减少脂质过氧化产物对机体的损害来发挥作用。

雷公藤内酯醇LLDT-8在抗GBM抗体诱导小鼠肾炎中的疗效作用及对Fc受体介导淋巴细胞活化的调控机制

目的研究(5R)-5-羟基雷公藤内酯醇(LLDT-8)对小鼠抗肾小球基底膜(GBM)肾炎的疗效作用,探讨LLDT-8对Fcγ受体介导的淋巴细胞活化的调控机制。方法 (1)运用兔抗小鼠GBM血清诱导的雄性NZW小鼠肾炎模型,以LLDT-8口服治疗4周。观察药物对肾炎小鼠的体重、蛋白尿、肾病理变化等指标的影响作用;(2)采用流式细胞术对LLDT-8治疗干预肾炎小鼠肾浸润细胞亚群比例及表型进行分析;(3)采用免疫荧光法观察小鼠肾小球中补体沉积及炎性单核细胞浸润;(4)采用PCR法检测肾组织中Fcγ受体及炎性因子表达;(5)采用肾炎小鼠疾病高峰脾淋巴细胞,考察LLDT-8对抗血清诱导记忆性细胞应答的影响。结果 (1)LLDT-8能缓解抗GBM抗体诱导肾炎小鼠的疾病进程,改善肾病变,减少肾补体沉积及免疫细胞浸润。(2)LLDT-8治疗能降低疾病高峰血清中IFN-γ及IL-6水平。(3)LLDT-8降低疾病发展各阶段的外周及肾CD11b+单核细胞Fcγ受体表达水平。(4)LLDT-8体外抑制肾炎小鼠淋巴细胞抗原特异性增殖,降低Ig G及IL-6的分泌水平。结论证实了LLDT-8对于抗GBM抗体诱导的小鼠肾炎具有显著的治疗作用,阐明了LLDT-8影响单核/淋巴细胞的Fcγ受体的表达,调控抗原特异性记忆淋巴细胞应答效应并抑制肾病灶中免疫细胞浸润,从而缓解肾小球肾炎进程的疗效机制。

抗GBM抗体特异性单链抗体scFv3原核表达载体的构建及表达

目的:构建单链抗体scFv3的原核表达载体pET28a-scFv3并诱导表达,纯化并检测表达产物的免疫抗原性。方法:用PCR扩增抗肾小球基底膜(GBM)抗体单链抗体scFv3基因,构建pGEM-scFv3重组质粒并测序。将重组基因亚克隆于原核表达载体pET28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,亲和层析法纯化,用间接ELISA检测纯化的单链抗体scFv3的免疫抗原性。结果:酶切和测序证实得到的scFv3基因序列正确。间接ELISA检测表明,纯化获得的scFv3能与抗GBM抗体结合。结论:成功构建了pET28a-scFv3原核表达系统并获得纯化的scFv3蛋白。表达产物具有良好的抗原性,为进一步研究该单链抗体在抗GBM抗体病中的治疗作用奠定了基础。

ANCA、抗GBM抗体双阳性患者1例及文献分析

ANCA相关性血管炎、抗肾小球基底膜(抗GBM)肾炎均是可累及全身多系统的自身免疫性疾病,肾脏是最常受累的靶器官之一,因此二者常导致急进性肾炎的发生。该病发病时病情复杂,病势凶险,再加之易漏诊误诊而延误病情。ANCA、抗GBM抗体不属同源性抗体,二者在发病机制中的作用尚不明确,目前部分学者认为该病发病机制可能与ANCA所引起小血管壁的损害,暴露了GBM抗原,进而导致Anti-GBM的产生有关[1]。既往已有研究者提出根据抗GBM抗体及ANCA将急进性肾炎分为5型,其中将双阳性的患者定义为Ⅳ型[2]。现汇报本院收治的1例ANCA、抗GBM抗体双阳性患者的临床资料,旨在总结诊断及治疗经验,为临床诊治该类疾病提供参考。

血清抗GBM抗体对狼疮性肾炎早期诊断的意义

目的：探索狼疮性肾炎的早期诊断。方法：应用间接免疫荧光法测定４３例ＳＬＥ及２３例健康人（对照组）血清抗ＧＢＭ抗体。结果：ＳＬＥ组血清抗ＧＢＭ抗体阳性率显著高于对照组（Ｐ＜００１），在ＳＬＥ抗ＧＢＭ抗体阳性患者中８０％发展成狼疮性肾炎（Ｐ＜００５）。结论：血清抗ＧＢＭ抗体与狼疮性肾炎密切相关。

抗肾小球基底膜抗体相关疾病的临床及病理探讨——附6例报告

目的:探讨抗肾小球基底膜(glomerularbasementmembrane,GBM)抗体相关疾病的临床、病理特点。方法:回顾性分析6例抗GBM抗体相关疾病的临床、病理资料。结果:全组6例有血尿及蛋白尿,3例少尿或无尿,5例血清肌酐升高[(683～1251)μmol/L],1例肺出血,4例贫血;6例抗GBM抗体阳性,其中2例合并抗中性粒细胞胞浆抗体(antineutrophilcytoplasmantibody,ANCA)阳性;6例行肾活组织检查(肾活检),5例有细胞新月体形成,另1例无新月体仅为系膜增生;5例免疫荧光表现为IgG或IgA和补体(C3)沿肾小球毛细血管基底膜呈颗粒沉积;治疗后4例临床缓解。结论:并非所有抗GBM抗体相关疾病患者病理表现为典型的沿肾小球毛细血管基底膜呈线形沉积,一些患者表现为颗粒沉积,这类患者预后较好,并不排除存在地区分布差异性。

两种方法建立小鼠抗GBM肾炎模型的比较

目的探讨建立小鼠抗肾小球基底膜（GBM）肾炎模型的方法。方法72只昆明小鼠随机分为3组，肾炎模型A组、B组和正常对照组。肾炎模型A、B组小鼠一次性尾静脉注射兔抗小鼠GBM血清（16ml／kg），正常对照组小鼠注射等量正常兔血清。肾炎模型A组小鼠尾静脉注射兔抗小鼠GBM血清前1周，背部皮内注射正常兔血清进行预免疫；肾炎模型B组小鼠尾静脉注射兔抗小鼠GBM血清后24h，尾静脉注射脂多糖（1mg／kg）。于实验第7、14、21、28天取尿液和血清标本，分别检测尿蛋白、血肌酐、血尿素氮含量。并于上述时间点分别取。肾组织观察病理变化。结果。肾炎模型组小鼠注射兔抗小鼠GBM血清后，第7天尿蛋白、血肌酐和血尿素氮含量均明显升高，均高于正常对照组，且A组升高更明显（P〈0．05）。肾组织病理表现为：。肾炎模型A组肾小球基底膜明显增厚，系膜区大量电子致密物沉积，足突融合；壁层上皮细胞增生，大量新月体形成，肾小球囊腔变窄，并可见肾小球纤维化形成，其病变程度均高于肾炎模型B组。正常对照组小鼠肾组织无明显病理变化。结论免疫球蛋白预免疫法可以更好地建立小鼠抗GBM肾炎模型。

血清抗髓过氧化物酶抗体、抗蛋白酶3抗体和抗肾小球基底膜抗体联合检测在自身免疫性血管炎中的临床意义

目的探讨检测血清抗髓过氧化物酶抗体(MPO抗体)、抗蛋白酶3抗体(PR3抗体)和抗肾小球基底膜抗体(GBM抗体)对自身免疫性血管炎(AAV)的临床意义。方法符合诊断标准的AAV患者分为3组:微型多血管炎组(microscopic polyangiitis,MPA)11例、肉芽肿性多血管炎组(granulomatosis with polyangiitis,GPA)11例和嗜酸性肉芽肿性血管炎组(eosinophilic granulomatosis with polyangiitis EGPA)11例,体检健康者50例作为对照组,采用间接免疫荧光法测定血清MPO抗体,PR3抗体,GBM抗体。结果 AAV各组与对照组比较,血清MPO抗体水平显著升高(P<0.05);MPA组和GPA组与对照组比较,血清PR3抗体水平显著升高(P<0.05);MPA和EGPA与对照组比较,血清GBM抗体水平显著升高(P<0.05)。结论 MPO抗体、PR3抗体、GBM抗体的联合检测对AAV的类型诊断有参考价值。

人源化抗肾小球基底膜抗体的单链抗体scFv3的原核表达及鉴定

目的:在原核细胞中构建并表达抗肾小球基底膜(GBM)抗体单链抗体scFv3,并鉴定其活性。方法:用PCR扩增抗GBM抗体单链抗体scFv3基因,将scFv3 DNA与pGEM-T Easy质粒连接,构建克隆载体pGEM-scFv3。用酶切后电泳鉴定构建载体的正确性;测序检测质粒重组后序列有无改变。再将scFv3亚克隆入表达载体pQE-80L,构建pQE80L-scFv3重组质粒,转化大肠杆菌Rosetta2,酶切鉴定。IPTG诱导表达蛋白后,通过SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物的抗体活性。结果:PCR扩增scFv3 DNA片段约为750 bp,与预期结果相同;克隆载体pGEM-scFv3酶切后显示scFv3成功的克隆入pGEM-T Easy质粒;测序验证插入片段全序列无改变;表达载体pQE80L-scFv3酶切图谱与预期相同;SDS-PAGE显示,在分子量约为27 kD处可见目的蛋白带,Western blot证实scFv3能与抗GBM抗体结合。结论:成功构建并表达了抗GBM抗体的单链抗体scFv3蛋白,为进一步研究scFv3的生物学特性和基因工程抗体的制备奠定了基础。

抗肾小球基底膜抗体疾病的临床表现及诊断

抗肾小球基底膜（glomerular basement membrane, GBM）抗体相关疾病是指在循环或脏器中沉积了抗GBM抗体的一组临床疾病。最早是南Emest Goodpasture于1919年发现，他报道了1例18岁的患者表现为咯血、坏死及增生性肾炎，直到1967年抗GBM抗体方被识别。这类疾病的根本特征是组织基膜和血清内存在抗基膜抗体并伴有。肾、肺、中枢神经、眼底、皮肤及血液等系统性损伤。因此，统称这类疾病为抗GBM抗体疾病，其肾脏损伤为抗GBM肾炎。

抗肾小球基底膜肾炎病理改变

抗肾小球基底膜（GBM）抗体介导的疾病是指循环中抗GBM抗体在脏器中沉积的一组自身免疫性疾病，单有肾脏损伤时称为抗GBM肾炎，同时合并肺出血时称为Goodpasture病。

抗肾小球基底膜肾炎的发病机制

抗肾小球基底膜（glomerular basement mem brane,GBM）病是循环中的抗GBM抗体在组织中沉积所引起的一组自身免疫性疾病。肺、肾为主要受累的器官，如病变局限在肾脏称为抗GBM肾小球肾炎；当肺肾同时受累时称为Goodpasture综合征。临床可表现为肺出血和／或急进性新月体肾炎。多数患者起病急、病情进展快、预后差，急性肾衰竭是本病的主要死亡原因。

1例新月体性肾炎感染超级细菌的护理

“超级病菌”指一些毒性很强、对绝大多数抗菌药物都耐药的细菌的统称，它对普通杀菌药物具有超强的抵抗力。抗GBM抗体性肾炎（新月体肾炎）合并“超级细菌”溶血葡萄球菌（MRSCON）感染，临床非常少见且病情危重。护理工作非常重要，要求做好专科护理工作的同时做好消毒隔离工作。

感染性心内膜炎后急进性肾炎一例报道并文献复习

目的:探讨感染性心内膜炎后急进性肾炎的临床特点及预后。方法:报道1例感染性心内膜炎后I型急进性肾炎的患者,以'感染性'和'心内膜炎'以及'急进性肾炎'或'新月体肾炎'或'急性肾损害'为检索词在中外文主要数据库检索,筛选出感染性心内膜炎后急进性肾炎(肾脏病理确诊)患者的临床资料进行总结。结果:青年女性患者,RPGN出现在感染性心内膜炎、心脏术后半年,以进行性肾功能减退、抗GBM抗体阳性为特征,病理示新月体肾炎,予激素、免疫抑制剂等治疗,仍需肾脏替代治疗。检索文献,复习12例感染性心内膜炎后急进性肾炎病例,结果显示以中老年多见,肾脏病理示新月体肾炎,积极抗感染、激素等治疗,大多患者可恢复正常肾功能,部分患者仍需肾脏替代治疗甚至死亡。结论:感染性心内膜炎后I型急进性肾炎罕见,但若患者合并肾小球病变,建议肾活检以明确,早期干预、治疗,有利于改善预后。

抗肾小球基底膜抗体的亲和力与肾脏病理表现密切相关

目的研究抗肾小球基底膜(GBM)抗体的亲合力及其与临床病理表现的关系。方法以纯化的牛IV型胶原α链非胶原区1[α(IV)NC1]为靶抗原,采用抗原抑制性酶联免疫吸附法对我科近11年来确诊的52例抗GBM抗体相关疾病患者的血清抗体亲合力进行检测,并分析其与临床和病理表现的关系。结果使52例患者血清抗体百分结合率从相同水平下降50%所需的α(IV)NC1从0·02μg^20μg不等,平均为0·625μg。不同患者血清抗体亲合力与肾脏病理中新月体所占比例相关(P=0·001),且为独立决定因素(R2=0·58,P=0·000)。即抗体亲合力越高,肾小球中新月体的比例越高。发病年龄、性别、临床表现不同的患者,抗体亲合力之间差异无统计学意义(P>0·05)。起病后不同时间检测血清抗体亲合力基本稳定,未见增加。结论起病时抗GBM抗体的亲合力成熟过程已经完成。不同患者之间抗GBM抗体的亲合力存在差异,该亲合力与病理肾脏损伤的程度高度相关,提示抗GBM抗体的亲合力在抗GBM抗体相关疾病的发病机制中起了重要作用。

抗肾小球基底膜抗体自动转阴且伴急性肾损伤一例

报道1例以急性肾损伤伴抗GBM抗体阳性为主要表现的病例,经肾活检示IgA肾病(Lee分级:Ⅰ~Ⅱ级),未使用免疫抑制治疗的情况下,抗GBM抗体自动转阴,且肾功能及尿量恢复正常,分析了相关原因.为提高临床医生对此类疾病诊断思路、相关机制的认识提供参考.