肺癌组织和外周血中p53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5和MAGE A1蛋白水平检测及其临床价值探讨

背景与目的:肺癌发病机制具有多样性,但一经确认,往往已错过最佳治疗时机,本文通过探讨肺癌组织和外周血中抑癌基因(p53)、蛋白基因产物(PGP9.5)、转录因子(SOX2)、肿瘤相关基因编码蛋白(GAGE7)、解旋酶(GBU4-5)和黑色素瘤抗原(MAGE A1)蛋白水平的相关性,同时分析其在肺癌诊疗中的应用价值。方法:回顾并分析2018年5月—2020年5月在复旦大学附属肿瘤医院确诊的100例肺癌患者的病历资料,临床TNM分期Ⅰ期25例,Ⅱ期45例,Ⅲa期30例;非小细胞肺癌80例,小细胞肺癌20例;取手术切除的肿瘤组织和癌旁组织,采用免疫组织化学染色法检测上述6种蛋白的水平,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)法检测其基因表达,采用酶联免疫吸附实验(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)检测外周血中6种蛋白的抗体阳性情况。结果:肿瘤组织中p53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5和MAGE A1蛋白的阳性率和基因表达水平均明显高于癌旁组织(P<0.05);将其与肿瘤的临床病理学特征进行相关分析发现,肿瘤组织和外周血中的p53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5和MAGE A1蛋白的阳性率和基因表达水平与肿瘤TNM分期和分化级别有关(P<0.05),而与患者性别、年龄、肿瘤直径、病理学类型无关(P>0.05)。肿瘤组织中6种蛋白的表达水平与外周血清表达具有较好的一致性(P>0.05)。结论:肺癌肿瘤组织和外周血中p53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5和MAGE A1蛋白表达阳性与肿瘤TNM分期及分化级别密切相关。

胸腔镜肺段切除术对NSCLC患者肺功能、血栓因子、P-gp、GBU4-5的影响

目的研究胸腔镜肺段切除术(TS)对非小细胞肺癌(NSCLC)患者肺功能、血栓因子、P糖蛋白(P-gp)、解旋酶(GBU4-5)的影响。方法前瞻性选取2021年1月至2022年12月于宿迁市第一人民医院治疗的NSCLC患者92例为研究对象,按照随机数字表法将其分为TS组(n=46)、胸腔镜肺叶切除术(TL)组(n=46)。TS组行TS治疗,TL组行TL治疗。观察两组术中出血量、手术时间、淋巴结清扫数目、术后引流量、术后24 h疼痛情况、术后住院时间;手术前、术后90 d最大通气量(MVV)、第1秒用力呼气容积占预计值的百分比(FEV1%pred)及用力肺活量占预计值的百分比(FEV1/FVC);手术前、手术后7 d血浆血栓调节蛋白(TM)、纤溶酶-α2纤溶酶抑制剂复合物(PIC)、凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)等血栓因子水平;手术前、手术后7 d血清P-gp、GBU4-5水平;术后并发症等指标。结果TS组手术时间为(145.36±19.26)min,长于对照组[(120.85±14.48)min],术中出血量、术后引流量、术后3 d VAS评分分别为(81.65±8.42)mL、(307.67±33.05)mL、(3.25±0.35)分,均小于TL组[(123.54±15.09)mL、(331.96±35.86)mL、(4.30±0.36)分],术后住院时间为(7.57±0.78)d,短于对照组[(9.46±0.97)d],差异均有统计学意义(P<0.05)。手术后90 d,两组MVV、FEV1%pred、FEV1/FVC均升高,且TS组MVV、FEV1%pred、FEV1/FVC分别为(85.06±8.81)L/min、(86.74±8.93)%、(85.13±8.76)%,均高于TL组[(78.04±8.13)L/min、(79.06±8.21)%、(78.06±8.11)%],差异均有统计学意义(P<0.05)。术后7 d,两组血浆TM、PIC、TAT及血清P-gp、GBU4-5水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。TS组术后并发症发生率为2.17%,低于TL组(17.39%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论TS治疗NSCLC可减少手术创伤,减少术后并发症,保留更多的肺功能,降低血栓因子、P-gp、GBU4-5水平,可达到与TL一致的切除病灶的目的,有助于患者术后康复。

棉花不同GbU6启动子截短克隆及功能鉴定

U6启动子是CRISPR/Cas9基因组编辑载体系统中驱动sgRNA转录的重要元件,而使用较短序列的启动子也是构建CRISPR/Cas9基因组编辑载体的基本要求之一。将已经克隆的海岛棉GbU6-5P启动子(长度为1166 bp),采用Transfer PCR方法成功地截出6个长度不同的U6启动子,其长度分别为672、468、358、280、202和105 bp,并分别构建了6个启动子驱动的GUS融合植物表达载体。将构建好的6个GbU6-5Ps::GUS-pCAMBIA1300与初始克隆的GbU6-5P::GUS-pCAMBIA1300植物表达载体一起利用农杆菌真空渗透转化法分别转染棉花花粉。GUS组织化学染色显示,克隆到的7个不同截短大小的GbU6-5P启动子均能驱动GUS基因在棉花花粉中转录,棉花花粉被染成蓝色但颜色深浅存在显著差异。结果显示启动子长度越短,其转录活性越高。而且另外两种棉花U6启动子GbU6-1P和GbU6-7P也表现出类似的结果。本研究克隆了3个短小的、在棉花花粉细胞中具有转录功能的GbU6启动子。结果显示更短的U6启动子具有更高的转录活性,而且这一特点在不同U6启动子上具有共性。这预示着使用更短U6启动子不仅符合构建CRISPR/Cas9基因组编辑载体的要求,而且会提高sgRNA的转录水平,进而可能提高基因组编辑效率。

奥格布(Ogbu)对教育人类学的贡献及影响--教育人类学学者访谈录

在此次访谈中,中央民族大学著名教育人类学学者滕星教授阐述了美国教育人类学家奥格布(Ogbu)对教育人类学的贡献及影响,并对中国教育人类学的发展前景进行了展望。

GBU—15(V)/B滑翔弹族

GBU—15(V)/B 滑翔弹族是1973年斋月战争之后美国空军搞的“密布轰炸(PaveStrike)计划”的产物。当时的主要目的是想改善飞机轰炸严密设防目标的突防能力和飞机自身的生存能力。由于采用模块式设计,各种结构的GBU—15(V)/B 可以以最适宜的配合攻击方式并可以攻击任何形式的目标。在每套装置近20万美元估计成本的基础上,美空军提出要求,要5,000余枚两种基本结构的滑翔炸弹。购买十字型翼

GBU－53／B小直径炸弹II完成有控测试弹首次飞行试验

雷锡恩公司完成了首枚作为有控测试弹的GBU-53／B小直径炸弹II的试射。试验中，一架F-15E战机在飞行中投放了一枚GBU－53／B小直径炸弹。在炸弹与载机安全分离之后，该武器展开弹翼，按照预编程指令进行了一系列的机动，然后飞向预定位置。试射达到了所有的测试目标。

7种肿瘤自身抗体联合检测在肺结节中的诊断价值

目的:探究7种肿瘤自身抗体联合检测在肺结节中的诊断价值。方法:选取2021年8月~2022年7月在莆田市第一医院因咳嗽、胸闷、咯血等症状或因体格检查行多排螺旋CT提示肺结节,同时对肺内病灶行肺叶切除术+纵隔淋巴结清扫术手术切除行组织病理确诊的患者80例为研究对象,在手术前抽取患者血清检测7种肿瘤自身抗体(P53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5、MAGEA1及CAGE)表达,同时根据病理结果将患者分为良性肺结节组与恶性肺结节组,进一步对其在肺结节诊断中的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、诊断符合率进行评估。结果:恶性肺结节患者5种肿瘤自身抗体(P53、SOX2、GAGE7、GBU4-5及CAGE)表达显著高于良性肺结节患者,差异有统计学意义(P<0.05)。在良、恶性肺结节患者中7种肿瘤自身抗体的阳性率显著高于4项肿瘤标志物(CEA、CYFRA21-1、NSE、SCCA4)阳性率,差异有统计学意义(P<0.05)。7种肿瘤自身抗体联合检测在肺结节诊断中的敏感度为50.33%,特异度为97.55%,阳性预测值91.24%,阴性预测值56.23%,诊断符合率51.26%。结论:血清7种肿瘤自身抗体联合检测在肺癌早期诊断具有较高特异度和敏感度,未来可利用不同的肺癌自身抗体谱以及检测技术,不断寻求最优诊断方法,将会有效提高肺癌早诊水平。

棉花花粉中高效转录U6启动子的克隆及功能分析

【目的】以棉花品种新海16基因组DNA为模板,克隆海岛棉(Gossypium barbadense L.)Gb U6启动子,筛选出能在棉花生殖细胞中(花粉)高效转录的Gb U6启动子,为利用基因组编辑技术进行棉花分子育种奠定重要基础。【方法】采用两轮PCR方法克隆完整的Gb U6启动子。根据网上公布的棉花基因组数据库序列,利用Primer5.0软件设计5对引物,进行第一轮能覆盖完整Gb U6启动子的PCR扩增,产物克隆测序正确后,再利用transfer PCR法将Gb U6启动子精确亚克隆到CRISPR/Cas9基因组编辑载体中;第二轮扩增产物测序正确后,运用DNAMAN软件对克隆成功的5个Gb U6启动子序列中具有转录功能的必要元件进行分析;然后以p BI101质粒DNA为模板,PCR扩增并克隆GUS报告基因,经酶切鉴定、测序正确后,用BbsⅠ酶切GUS,连入经同样酶切后的5个Gb U6启动子对应的CRISPR/Cas9基因组编辑载体中,转化、酶切鉴定,获得对应的5种Gb U6::GUS的表达载体。将含有Ca MV35S启动子驱动的GUS表达载体作为棉花花粉瞬时转化的阳性对照,以上述6种表达载体DNA为模板,采用高保真酶的PCR扩增法获得高浓度DNA片段,利用基因枪轰击法将5种Gb U6::GUS和阳性对照的DNA片段分别转化棉花花粉,并进行GUS染色,最后用体式显微镜观察染色情况。每个启动子的基因枪转化重复3次,最后根据染色深浅筛选出在棉花生殖细胞中高效转录的Gb U6启动子。【结果】经两轮PCR扩增后获得5种Gb U6启动子,启动子长度分别为1 166、1 119、1 134、1 214和1 176 bp,并构建获得了相应的5种CRISPR/Cas9基因组编辑载体;对拟南芥和克隆的5个Gb U6启动子序列进行序列比对,结果表明,Gb U6启动子区与拟南芥U6启动子一样,也含有比较保守的-60 bp位置的USE元件和-30 bp位置的TATA框,而且这两个元件之间的距离也非常固定;用Gb U6::GUS的DNA片段瞬时转化棉花花粉,发现基因枪瞬时转化的3次重复结果显示克隆得到的5个Gb U6启动子有4个能驱动GUS在棉花花粉中表达,棉花花粉被染成蓝色。其中Gb U6-5P::GUS的染色相对较深,接近于Ca MV35S启动子。【结论】成功克隆了棉花生殖细胞中高效转录的Gb U6启动子,为构建棉花CRISPR/Cas9基因组编辑载体系统提供了有效的启动子。

不同截短U3启动子在棉花中的功能分析

从海岛棉中克隆了2种GbU3-2P、GbU3-3P启动子,对它们进行2种长度截短,长度分别为436、245 bp和384、233 bp,同时构建了4个相应启动子驱动GUS的融合植物表达载体。利用农杆菌真空渗透转化法将4个GbU3Ps∷GUS-sg RNA-P1300植物表达载体分别转染棉花胚性愈伤组织。经GUS组织化学染色显示:克隆得到的2种截短大小的GbU3-2P和GbU3-3P启动子均能驱动GUS基因在棉花愈伤组织中表达,棉花愈伤组织被染成蓝色,但颜色深浅没有显著差异。本研究表明,同一GbU3启动子截短后,较短的启动子和较长的启动子具有相同的转录活性。这为构建棉花CRISPR/Cas9基因组编辑载体系统提供了更多理想的启动子。

中国第一女拳王澳门大战菲拳手中国姑娘加油!

10月28日，玲珑SUV轮胎形象代言人——世界拳王蔡宗菊，在澳门迎来个人酋场IBF世界拳王卫冕战，对阵菲律宾WIBA／GBU双料世界冠军“女版帕奎奥”阿班尼尔。这位曾赢得泰森、戈洛夫金等顶级攀王称赞的拳手，面临新的挑战。

编读信箱

BLU系列炸弹的中英文名称 读者@遗落梦境问，由MK80改进而来的BLU系列炸弹，中英文名称都是什么？美国的航空炸弹分为GB、JB、VB、BLU、CBU、GBU六大类。其中GB表示滑翔炸弹，JB表示火箭助推炸弹、VB表示垂直下落炸弹，CBU表示集柬炸弹，GBU表示制导炸弹。