广东地区GBV-C/HGV5′NCR区序列变异的研究

目的 了解广东地区GBV -C/HGV 5′NCR区的序列变异情况。方法 以GBV -C和HGV的 5′NCR区完全同源的序列设计合成引物用于套式RT -PCR。从广东地区的 10例GBV -C/HGV感染者血中扩增了 10个序列 ,分别克隆至pUC19或pT -Adv载体。以 3 5S标记的双脱氧链末端终止法对这 10个序列分别进行正反两个方向的序列测定。结果 10株序列相互间同源性最大为 10 0 % ,最小为 84 4%。与Genbank所载 3个标准株的相应序列比较 ,其同源性最大为89 4% ,最小为 83 9%。与国内周育森报道的相应序列比较 ,两者之间的同源性最大为 96 1% ,最小为 85 0 %。比较还发现 ,这 10株序列的起始处有一段 3 8nt的区域与上述标准序列相比变异比较大 ,其与标准序列的同源性最高只有 79 0 % ,最低为 60 5 %。其中 9株相互间的这一 3 8nt序列的同源性则高达 92 %～ 10 0 %。结论 广东地区流行的庚型肝炎病毒大多带有HGV的特殊点。少数为GBV

HGV/GBV-C与HCV混合感染者肝组织中相关病毒表达的免疫组化研究

目的 了解HGV/GBV C与HCV混合感染者肝组织中HGV/GBV C相关抗原的分布状况 ,探讨HGV/GBV C对肝脏的损害机制。方法 以抗HGV/GBV CNS5单克隆抗体或抗HCVNS3单克隆抗体为试剂 ,采用免疫组织化学方法检测肝炎病人肝组织中HGV/GBV C、HCV相关抗原表达。结果 5 6例肝炎病人肝组织中HGV/GBV C相关抗原表达阳性率为 2 6 .79% (15 / 5 6 ) ;HCVNS3抗原表达阳性率为 39.2 9% (2 2 / 5 6 )。HGV/GBV CNS5抗原表达阳性信号主要位于肝细胞胞浆中 ,染色阳性细胞周围可见淋巴细胞浸润。结论 肝细胞中存在HGV/GBV C相关抗原表达 ,其编码产物可能作为一种靶抗原 ,诱发免疫病理反应 。

肝炎病人血清外周血单核细胞及肝脏中GBV-C/HGV负链RNA的检测

目的：研究27例肝炎病人血清、外周血单核细胞（PBMC）及肝脏中GBV－C／HGV正链及负链RNA（复制中间体）的存在状况。方法：应用逆转录-巢式多聚酶链反应技术检测GBV－C／HGV正、负链RNA。结果：27例病人中21例病人血清、7例PBMC、10例肝组织中检测到GBV－C／HGV正链RNA，其中2例单一GBV－C／HGV感染者肝组织中检测到负链RNA，在27例病人血清及PBMC中均未检测到负链RNA。结论：GBV－C／HGV是一种嗜肝病毒，肝脏可能是其复制的主要场所之一，但GBV－C／HGV与HCV混合感染对，在PBMC及肝脏中尚未发现该病毒复制的证据。

HGV/GBV-C感染在肝细胞损伤中的作用探讨

目的 研究单一HGV GBV C感染者肝组织中该病毒核酸定位及相关抗原表达 ,探讨HGV GBV C感染在肝细胞损伤中的作用。方法 12例单一HGV GBV C感染者经肝穿获取肝组织常规病理诊断 ,采用地高辛标记探针原位杂交法检测病毒RNA ,并用免疫组织化学法检测病毒相关抗原表达。结果 病理诊断急性肝炎 8例 ,慢性肝炎 4例。HGV GBV CNS5抗原检出阳性率为 66.67% ( 8 12 ) ,阳性信号主要位于肝细胞胞浆中 ;HGV GBV CRNA检出阳性率为 58.33% ( 7 12 ) ,阳性信号位于胞浆 ,分布无一定规律 ,阳性细胞与肝细胞变性、淤胆、炎性细胞浸润、细胞坏死程度等并无相关联系。单一HGV GBV C感染者临床表现轻 ,不易被发现。结论 HGV GBV CRNA并不直接损害肝细胞 ;肝细胞中存在HGV GBV C相关抗原表达 ,其编码产物可能作为一种靶抗原 ,诱发免疫病理反应。

抗HGV NS_5区重组抗原单克隆抗体的制备及鉴定

ＨＧＶ是１９９５年新报道的一种肝炎病毒，学者们在较短的时间内对ＨＧＶ的分子生物学、流行病学和临床特点有了一定的了解，但ＨＧＶ感染的致病机理还有待于更多的实验研究和探索，如ＨＧＶ在肝组织中的表达与分布等。本文报道了抗ＨＧＶＮＳ５区重组抗原ＭｃＡｂ的制备...

重组蛋白及合成肽抗原在GBV-C/HGV感染诊断中的应用

GBV C是近几年刚发现的新病毒 ,对其致病性等方面的研究还不是很清楚。其诊断主要依赖于RT PCR检测病毒RNA ,但不适于临床常规检测及大面积筛查。以重组蛋白和合成肽作抗原检测血清中抗GBV C抗体更适合于GBV C感染的诊断和流行病学调查 ,有望得到广泛的应用。本文从GBV C/HGV抗原表位研究及重组蛋白、合成肽在GBV C感染诊断学和流行病学中的应用及其意义作一综述。

庚型肝炎病毒NS5区蛋白鼠单克隆抗体的制备

庚型病毒性肝炎是近年来世界上才确认的一种新型肝炎［１～３］。庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）呈世界性分布，经血液传播为主，也可母婴传播。ＨＧＶ容易形成持续性感染，类似ＨＩＶ和ＨＣＶ。据粗略估计，我国大约有１００万～１０００万ＨＧＶ携带者。因此，ＨＧＶ已成为继乙...

庚型肝炎病毒NS5非结构蛋白在昆虫细胞中的表达

目的： 研制特异的抗ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ抗体诊断试剂。方法： ＰＣＲ扩增ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ ＮＳ５ 基因片段并定向克隆至转座载体ｐＦａｓｔＢａｃＨＴａ，转化ＤＨ１０Ｂａｃ感受态细胞，３７℃振荡培养４ ｈ 使发生转座，于三抗选择平皿筛选重组ｂａｃｍ ｉｄ。脂质体介导转染ｓｆ９ 细胞，将转染上清再次感染ｓｆ９ 细胞，以批量表达ＮＳ５重组蛋白。利用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ方法分析、检测重组蛋白。结果： 序列测定证实克隆的基因片段是ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ 的ＮＳ５ 基因片段，且阅读框架正确。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析显示在相对分子质量４．１５×１０４ 处有重组蛋白的表达条带，薄层扫描占总蛋白量的１１．７％ 。Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 发现重组蛋白可与ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ ＲＮＡ阳性患者混合血清发生较强的免疫反应。结论： ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ ＮＳ５ 重组蛋白可以用于ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ感染的检测。

西安地区急性GBV.C/HGV感染者的分子流行病学及临床特征

目的:为了了解西安地区急性GBV-C/HGV感染者的分子流行病学及临床特征。 方法:连续收集急性病毒性肝炎病例458例,诊断符合上海会议标准。经EHSA检测的67例非甲-戊型肝炎患者经套式PCR方法检测HGVRNA,采用统一《急性病毒性肝炎调查表》,由专人负责进行临床和流行病学调查。所有数据用EPI软件处理。 结果:经ELISA检测的67例非甲-戊型肝炎患者经套式PCR方法检测有17例呈HGVRNA阳性,50为诊断不明患者。通过对17例HGVRNA阳性患者的流行病学分布所进行的分析表明HGV极易感染抵抗力较弱的儿童和老年人,26岁以下占88.23％,与同一人群同年龄乙肝、丙肝和丁肝患者相比,明显增多,经x^2检验有统计学意义(P<0.05)。而当HGV与HCV或HBV同时感染时,致病力增强,可以使各年龄段人群感染。同时我们可以看到HGVRNA阳性患者于冬春季有一明显的发病高峰,尤以冬季为明显。 结论:GBV-C/HGV并不是临床急性肝炎的主要致病因子。HGVRNA阳性患者在暴露因素、流行病学及临床特征等方面具有与其他各型肝炎相同或相似的特点。

庚型肝炎病毒NS3蛋白在昆虫细胞中的表达

The recombinant GBV-C/HGV NS3 protein was expressed in Sf9 insect cells and analyzed by SDS-PAGE. A protein band about Mr 43810 was demonstrated on polyacrylamide gel electrophoresis and this protein amounted to more than 30% of the total cell proteins. Recombinant NS3 protein was purified by Ni-NTA column. Western blot showed that this recombinant protein could react with GBV-C/HGV RNA positive mixed sera. The recombinant GBV-C/HGV NS3 protein could be used to detect GBV-C/HGV infection and will supply material for study of structure and function of this protein.

单纯GBV-C/HGV感染人体血清学和病理学追踪研究

目的 从临床和病理学方面探讨庚型肝炎病毒 (GBV C/HGV)的致病性。方法 收集2 4例单纯血清GBV C/HGVRNA阳性人体的穿刺活检肝组织及血清标本 ,其中 8例作间隔 2年以上的二次肝穿 ,进行血清和肝组织GBV C/HGVRNA、血清抗E2抗体及ALT水平、肝组织NS3和NS5抗原检测 ,并作肝组织光、电镜观察。结果 2 4例血清GBV C/HGVRNA阳性者首次肝穿前 3d内平均ALT水平为 6 0 .17IU/ml(4 2～ 87IU/ml) ,抗E2抗体阳性率 4 17% ,首次肝组织GBV C/HGVRNA阳性率为 75 0 0 % ,NS3和 (或 )NS5抗原阳性率为 5 4 17%。GBV C/HGVRNA及NS3和NS5抗原主要于肝细胞胞质内检出 ,阳性细胞呈散在分布 ,少数浸润的单个核细胞内有病毒RNA检出。肝细胞呈极轻度急、慢性炎症病变者占 79 17%。与 2年前比较 ,2年后 2 4例观测对象血清GBV C/HGVRNA自然转阴率 6 6 6 7% (P <0 0 0 1) ,血清ALT复常率 75 0 0 % (P <0 0 0 1) ,E2抗体阳性率为 41 6 7% (P <0 0 0 1) ,8例二次穿刺肝组织除 2例有灶状肝细胞水样变性外 ,余均复常。结论 庚型肝炎病毒可引起极轻度自限性肝炎 ,提示其致肝损伤作用微弱且具自限性 ;血清E2抗体是GBV C/HGV感染恢复性标志 。

合肥地区献血员庚型肝炎病毒的分子生物学研究

目的 了解合肥地区献血员的庚型肝炎病毒(GBV-C/HGV)感染情况。方法 应用酶免疫测定法(EIA)和逆转录一套式多聚酶链反应法(RT-PCR)分别检测献血员中的抗-GBV-C/HGV和GBV-C/HGV RNA。结果 献血员中抗-GBV-C/HGV检出率为1.7％(18/1050),抗-GBV-C/HGV阳性血清中GBV-C/HGV RNA占66.7％(12/18);男性和低年龄组献血员抗-GBV-C/HGV阳性率分别低于女性和高年龄组,两者差异有显著性(P<0.05);抗-GBV-C/HGV阴性的献血员有6名转为阳性,2名抗-GBV-C/HGV和GBV-C/HGV RNA阳性的献血员有1名转为阴性。结论 GBV-C/HGV在合肥地区献血员中有较高的感染率;献血员中存在着GBV-C/HGV阳性但ALT正常的献血员,应尽快对献血员进行GBV-C/HGV感染指标的检测。

中国南京庚型肝炎病毒部分基因的克隆及cDNA序列分析

采用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)从南京地区某输血后丙型肝炎患者血清中克隆出庚型肝炎病毒(HGV)非结构区部分基因。序列分析结果表明，该序列与国外发表的庚型肝炎病毒HGU 44402，HGU 45966和HGU 36380(GBV-C)对应位置核苷酸序列同源性分别为89．09%，92．12%和87．27%，与已报道的HGV河北株序列同源性为93．94%。对40份输血后丙型肝炎血清和30份非甲非乙非丙非丁非戊型肝炎血清进行了检测，HGV RNA阳性率分别为10．00％和6.67%。

GB病毒C与庚型肝炎病毒的研究热点

新肝炎病毒的发现及基因克隆成功后，进展迅速。随着研究的深入，带来了许多问题，本文就克隆成功的庚型肝炎病毒(HGV)及GB病毒(GBV-C)研究热点综述如下。

GB病毒A与GB病毒B的研究概况

近两年来GB病毒成为国内外病毒学界的研究热点，GB病毒分GBV-A、GBV-B、GBV-C三种。目前对GBV-C／HGV的研究已较探入，而对另外两种GBV病毒的研究报道甚少。本文对GBV-A、GBV-B病毒的研究状况作一综述。

献血员庚型肝炎病毒感染的研究进展

自1989年确认丙型肝炎病毒(HCV)与戊型肝炎病毒(HEV)以来，仍有少部分肝炎患者不能用现有实验室诊断方法分型，提示可能存在着新型肝炎病毒。1995年，美国的Simmons和Linnen等学者率先应用分子生物学技术发现一种新型肝炎病毒—庚型肝炎病毒(GBV-C／HGV)。各国学者也相继建立了多种GBV-C／HGV血清标本的实验室检测方法．并运用到病毒性肝炎的临床诊断和流行病学研究中去，并取得重要进展。