黄芪莪术不同比例配伍后莪术4种挥发性成分的含量变化研究

目的:探究黄芪莪术不同配伍比例中,莪术挥发油中抗肿瘤活性成分含量的变化。方法:水蒸气蒸馏法对挥发油进行提取,运用气相色谱法,测定单味莪术及黄芪莪术配伍比例为1∶1、2∶1、3∶1、5∶1、1∶2中β-榄香烯、莪术醇、吉马酮、新莪术二酮的含量。采用HP-5气相色谱柱,程序升温法,进样口温度为250℃,FID检测器温度为280℃;内标物质是水杨酸甲酯。结果:β-榄香烯、莪术醇、吉马酮、新莪术二酮4种挥发油分别在0.0030~0.1920 mg·mL^(-1)(r=0.9969)、0.0233~2.9790 mg·mL^(-1)(r=0.9993)、0.0059~0.3760 mg·mL^(-1)(r=0.9994)、0.0175~1.1180 mg·mL^(-1)(r=0.9943)范围呈良好的线性关系,黄芪、莪术以2∶1的比例配伍时,各成分溶出量最高。结论:随着黄芪莪术配伍比例的不同,挥发油中抗肿瘤成分含量有所变化,以2∶1、3∶1的配伍比例为佳,为临床应用和药效学研究提供依据。

咽炎片挥发油质量评价

目的评价咽炎片挥发油质量。方法建立GC指纹图谱,进行化学计量学分析,测定薄荷脑含量。结果5个企业20批样品指纹图谱中有8个共有峰,相似度均在0.85以上。各批样品聚为2类,质量差异标志物有3个,其中2个为薄荷脑和异薄荷酮。薄荷脑在0.05105~1.021μg范围内线性关系良好(r=1.0000);平均加样回收率为103.6%,RSD为2.9%。结论色谱技术结合化学计量学可有效评价各企业咽炎片挥发油质量。

QuEChERS/气相色谱-质谱法同时测定砂仁中樟脑、龙脑、乙酸龙脑酯含量

目的建立同时测定砂仁中樟脑、龙脑、乙酸龙脑酯含量的QuEChERS/气相色谱-质谱(QuEChERS/GC-MS)法。方法样品用无水乙醇提取,经N-丙基乙二胺、十八烷基硅烷键合硅胶、石墨化炭黑和硫酸镁吸附净化处理。色谱柱为HP-5 MS型色谱柱(30 m×0.25 mm,0.25μm),程序升温,流速为1.0 mL/min,分流进样,分流比为20∶1,电子轰击离子源,选择性监测、全扫描模式,定量特征离子质荷比为95。比较QuEChERS/GC-MS法和气相色谱-氢火焰离子化检测器(GC-FID)法含量测定结果的相对相差值,考察方法的可靠性。结果樟脑、龙脑、乙酸龙脑酯的质量浓度分别在50~2000μg/mL、5~200μg/mL、100~5000μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(R2≥0.997,n=6);检测限均为0.005 mg/kg,定量限均为0.015 mg/kg;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均低于3.0%;50%,100%,200%水平的加样回收率为93.37%~105.37%,RSD为1.38%~2.85%(n=6)。QuEChERS/GC-MS法和GC-FID法测定樟脑、龙脑、乙酸龙脑酯含量的相对相差值分别为4.76%,4.64%,3.67%。结论该方法操作简便、灵敏度高、重复性好、结果准确,可用于砂仁中樟脑、龙脑、乙酸龙脑酯的含量测定。

基于柱前衍生GC-MS法比较不同工艺制备黄精的氨基酸含量

建立了柱前衍生GC-MS法测定黄精中15种氨基酸含量的方法。测定经不同工艺制备的黄精鲜品、干品及炮制品样品中氨基酸的含量,并运用多元数据统计对这3种不同黄精样品中的氨基酸进行综合分析。结果表明:三种黄精制品中的15种氨基酸在33min内有良好的分离效果,在线性范围内线性关系良好(r:0.9983〜0.9999),平均加样回收率为95.66%〜105.55%(n=6)。说明该方法能准确测定黄精中多种氨基酸的含量,且黄精鲜品氨基酸含量明显高于干品及炮制品。聚类及正交偏最小二乘法-判别分析结果表明,黄精鲜品、干品和炮制品可以明显聚为不同三类,说明上述三种黄精制品的氨基酸含量有明显差异性,并筛选出赖氨酸、组氨酸、甘氨酸和络氨酸作为区分黄精鲜品、干品和炮制品的标志物。

油茶象甲Curculio chinensis基因组Survey测序分析

油茶象甲Curculio chinensis Chevrolat是危害中国特有木本油料树种——油茶的专性蛀果害虫,也是中国林业危险性有害生物之一,在中国不同油茶产区均有分布,对油茶的为害呈加重趋势。为了深入研究其遗传基础和寄主适应性,确定适合鞘翅目象甲科基因组测序研究策略,首先采取Survey测序,之后做深度基因组测序和大规模种群测序。研究采用二代高通量测序技术(MGISEQ-2000),测定了油茶象甲基因组大小,并估计该物种基因组的杂合度、重复率和GC含量。结果显示:油茶象甲基因组大小约为1356.82 Mb,测序深度达到50×;K-mer分析油茶象甲基因组虽然具有杂合峰,但杂合率较低,为1.20%;基因组重复序列含量约为77%。该研究结果对于揭示油茶象甲适应性进化具有重要意义,可为后续构建完整基因组和多种群基因组测序提供策略选择依据。

GC法同时测定藏药八味沉香散中挥发性指标成分含量

目的建立气相色谱(GC)法同时测定藏药八味沉香散中挥发性指标成分乙酸辛酯、苄基丙酮、肉豆蔻醚、去氢木香内酯含量的方法。方法采用GC法,以乙酸辛酯、苄基丙酮、肉豆蔻醚、去氢木香内酯作为指标成分,应用SH-WAX毛细管柱(30 m×0.25 mm,0.25μm),柱温程序升温,载气为氮气,进样口温度为220℃,检测器温度为240℃,分流进样,进样量为1μL。结果乙酸辛酯、苄基丙酮、肉豆蔻醚、去氢木香内酯质量浓度分别在12.44~124.43μg·mL^(-1)、2.90~29.01μg·mL^(-1)、15.95~159.45μg·mL^(-1)、15.62~156.15μg·mL^(-1)范围内与峰面积呈良好的线性关系(r≥0.9995);平均回收率分别为100.40%(RSD=1.55%)、97.80%(RSD=1.41%)、99.50%(RSD=0.77%)、99.50%(RSD=0.85%)(n=6)。结论该方法专属性、精密性、重复性、准确性好,可用于八味沉香散中挥发性指标成分的含量测定。

美洲大蠊不同发育阶段蛋白质、重金属含量测定及脂溶性成分的GC-MS分析

为促进药材资源的综合开发利用,对美洲大蠊1龄、3龄、6龄以及成虫中蛋白质和4种重金属元素含量、脂溶性成分组成进行了测试。采用凯氏定氮法测定粗蛋白含量、ICP-MS测定重金属元素含量、GC-MS测定脂溶性成分及相对含量。美洲大蠊在不同生长发育阶段的粗蛋白含量为56.61%~67.38%;砷含量≤0.2714 mg/kg;汞含量≤0.1972 mg/kg;铅含量≤0.5482 mg/kg;镉含量≤0.1222 mg/kg;从脂溶性成分中鉴定30种化合物,其中5种为4个生长发育阶段共有成分。美洲大蠊成虫体内蛋白质达63%,是优质的饲料蛋白来源。根据《饲料卫生标准》相关规定,其虫体中汞含量超标,需要对美洲大蠊养殖过程所用的饲料配方进行优化;美洲大蠊体内以棕榈酸为代表的饱和脂肪酸是其表现脂毒性的重要因素,油脂中富含抗氧化酚类物质。

活血消痛酊挥发性成分的鉴定及含量测定

目的建立鉴定活血消痛酊中挥发性成分及测定其中5种指标性成分含量的气相色谱-质谱联用(GC-MS)法。方法色谱柱为Agilent PEG20M毛细管柱(30 m×0.32 mm,0.25µm),程序升温,进样口温度为230℃,载气为高纯氦气,流速为1.0 mL/min,分流比为5∶1(V/V),进样量为1µL;采用电子轰击离子源(成分鉴定)或选择性离子监测模式(含量测定),质量扫描范围为m/z 40~500。结果共鉴定出37种挥发性成分。3-蒈烯、桉油精、β-石竹烯、丁香酚、对甲氧基肉桂酸乙酯的质量浓度分别在0.2002~40.04µg/mL、0.2026~40.52µg/mL、0.2992~59.84µg/mL、0.6010~120.20µg/mL、0.3022~60.44µg/mL范围内与待测成分离子强度线性关系良好(R2>0.9990,n=7);检测限分别为3.11,2.94,3.29,7.58,4.35 ng/mL,定量限分别为10.31,9.75,10.90,25.03,14.49 ng/mL;精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于5%(n=6);平均加样回收率分别为93.01%,91.90%,94.69%,93.42%,92.70%,RSD分别为4.98%,5.53%,5.04%,4.29%,4.83%(n=9)。20批样品中,上述5种成分的平均含量分别为1.48,2.07,3.26,8.80,3.59µg/mL。结论该方法操作简便,结果准确,重复性好,可用于活血消痛酊挥发性成分的鉴定及含量测定。

通过量效关系评价CO_(2)超临界提取肉豆蔻挥发油质量

目的:气相色谱-三重四极杆质谱(GC-MS/MS)法定量分析16批次肉豆蔻挥发油中4-萜烯醇、α-蒎烯、甲基丁香酚、榄香素、黄樟素和肉豆蔻醚,结合抗炎活性量效分析,对肉豆蔻的药效成分进行质量评价。方法:采用CO_(2)超临界萃取法提取肉豆蔻挥发油,建立GC-MS/MS法分析肉豆蔻中6个成分的检测方法,进行方法学考察并对16批次挥发油样品中6个成分进行含量测定。气相色谱条件:J&W DB-17ms气相色谱柱(30 m×0.25 mm,0.25μm);升温程序:50℃,保持1 min,以10℃·min^(-1)的速率升高到150℃,保持3 min;再以20℃·min^(-1)的速率升高到250℃,保持3 min。进样口温度280℃;载气为氮气,流速为1 mL·min^(-1),分流比为10∶1,进样量为1μL;建立16批次挥发油处理脂多糖(LPS)诱导的Raw264.7巨噬细胞炎症模型,并进行药效分析;对挥发油中6个成分进行主成分分析(PCA-X)、Pearson相关性分析及药效分析,并将变量重要性投影(VIP)值>1及Pearson系数为正的化合物作为贡献性成分。结果:4-萜烯醇、α-蒎烯、甲基丁香酚、榄香素、黄樟素、肉豆蔻醚在相应的浓度范围内呈现良好的线性关系;6个成分精密度试验的RSD在0.18%~0.90%,重复性试验的RSD在1.53%~2.90%,稳定性试验的RSD在2.11%~2.94%;平均加样回收率(n=9)分别为98.32%、99.41%、94.79%、98.82%、96.14%、97.81%,RSD分别为1.51%、1.62%、1.87%、0.71%、1.82%、1.31%。16批次挥发油样品中4-萜烯醇、α-蒎烯、甲基丁香酚、榄香素、黄樟素、肉豆蔻醚的含量范围分别为4.674~12.432、2.316~11.121、0.201~4.653、1.047~10.488、201.776~402.163、7.888~39.570 mg·g-1。量效关系分析显示,抗炎活性与6个成分含量具有一定的相关性,甲基丁香酚、榄香素、肉豆蔻醚对抗炎活性有贡献,其中榄香素贡献最大。结论:建立了肉豆蔻16批次挥发油中6个成分的抗炎活性量效关系分析方法,本法简便快速,为肉豆蔻的质量控制及安全、有效的应用提供依据。

气相色谱-质谱法测定食用植物油中多种植物甾醇含量

[目的]建立气相色谱-质谱法(GC-MS)同时测定食用油中β-谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇、菜籽甾醇含量的方法。[方法]样品选用氢氧化钾-乙醇皂化、正己烷萃取、浓缩、衍生化后以正己烷定容,采用GC-MS选择离子扫描模式(SIM),外标法定量。[结果]β-谷甾醇、豆甾醇、菜籽甾醇的线性范围为5~500μg/mL,菜油甾醇的线性范围为2.5~250.0μg/mL,线性相关系数(R^(2))均大于0.999,检出限为0.05~0.10 mg/kg,定量限为0.1~0.3 mg/kg,加标回收率为80.5%~107.8%,相对标准偏差(RSD)为2.3%~9.8%。[结论]该方法操作简单、高效、灵敏度高、重复性好,适用于食用植物油样品中β-谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇、菜籽甾醇含量的测定。

气相色谱法测定对乙酰氨基酚片中的残留溶剂乙醇的含量

建立气相色谱法检测对乙酰氨基酚片中残留溶剂乙醇的含量。采用5%苯基甲基聚硅氧烷(DB-5)色谱柱,氢火焰离子化(FID)检测器,程序升温。方法的线性范围为0.0008~1.0020 mg/mL(R^(2)=0.9999);回收率为92.55%~102.01%,RSD为2.93%;精密度RSD为3.87%;检测限为0.2386μg;定量限为0.7952μg。该方法简单快速、专属性好,结果准确可靠、重现性好、灵敏度高,可用于对乙酰氨基酚片中残留溶剂乙醇的含量测定。

GC-MS法测定不同地区生鲜牛乳中的脂肪酸组成及含量

[目的]比较分析不同地区生鲜牛乳中的脂肪酸种类和含量。[方法]于2019年5月—2020年3月,从河南省、河北省、山西省各选取1个规模化奶牛养殖场,按照四个季节分别采集健康奶牛生鲜乳样,每个地区采集12份,3个地区共36份。使用GC-MS法进行脂肪酸的提取和甲酯化,利用CP-WAX 52 CB毛细管色谱柱和质谱联用分析仪进行脂肪酸种类和含量分析。通过与37种脂肪酸甲酯混合标准品的保留时间比对和NIST05谱库检索对脂肪酸进行定性分析,脂肪酸含量通过面积归一化法进行计算。[结果]从河南省采集的生鲜牛乳中共检出28种脂肪酸,其中,饱和脂肪酸15种,癸酸甲酯、月桂酸甲酯、肉豆蔻酸甲酯、硬脂酸甲酯、棕榈酸甲酯5种饱和脂肪酸的含量较高,占检出脂肪酸总含量的57.03%;检测到不饱和脂肪酸13种,多数含量较低,只有油酸/反油酸甲酯含量较高,占检出脂肪酸总含量的32.26%。从河北省以及山西省采集的生鲜牛乳中均检出30种脂肪酸,但其组成略有不同;2个省份生鲜牛乳的脂肪酸含量检测结果与河南省生鲜牛乳的检测结果相似,饱和脂肪酸含量占检出脂肪酸总含量的比例均在60%左右。河北省生鲜牛乳中的油酸/反油酸含量为39.80%,在3个地区中最高。3个地区的生鲜牛乳中均未检测到反亚油酸甲酯、γ-亚麻酸甲酯、顺-15-碳烯酸甲酯、芥酸甲酯、顺-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸甲酯。[结论]3个地区生鲜牛乳中的脂肪酸含量都比较丰富,以饱和脂肪酸为主,所有脂肪酸中以油酸/反油酸含量最高,但脂肪酸组成及含量也存在一定的地区差异。

姬松茸新品种“中菌姬松茸1号”的基因组Survey分析

为了深入开展姬松茸子实体发育、重金属富集等遗传机制的研究,为姬松茸基因组的遗传精细图谱、分子育种等研究奠定基础,采用第二代高通量测序技术对姬松茸新品种“中菌姬松茸1号”开展全基因组Survey分析。结果表明,姬松茸新品种“中菌姬松茸1号”的基因组大小约为46.59 Mb,测序深度为69×,杂合率为1.37%,(G+C)含量为46.87%,重复序列比例为24.46%;基因组初步组装后,得到20342条重叠序列(Scaffold),Scaffold N50为4.29 Kb。

阜阳市薄荷品种精油成分分析

[目的]筛选出地区适应性强、产量高、活性成分含量高的亚洲薄荷优良种质,推动阜阳市薄荷产业的高质量发展。[方法]以阜阳市薄荷主要种植区的30份薄荷品种资源为研究对象,对精油含量、精油成分及相对含量进行检测分析。[结果]30份薄荷品种精油含量平均值为2.14%,其中M-23品种最高,达3.50%。精油化学型主要为薄荷醇型和氧化胡椒酮型等化学型。薄荷醇型中M-1品种的薄荷醇含量最高,达77.91%。氧化胡椒酮型中M-26品种的氧化胡椒酮含量最高,达56.19%。在30份薄荷品种资源中,有25种达到了2020版《中国药典》的标准,24种达到了当地采购商的采购要求。[结论]M-1、M-3、M-19、M-27这4个薄荷品种精油含量高、薄荷醇含量高,精油品质好,适合在阜阳地区推广应用。

石龙清血颗粒的GC指纹图谱及含量测定

目的 建立石龙清血颗粒的GC指纹图谱,同时对其中4种挥发性成分进行含量测定。方法 采用DB-5毛细管色谱柱(30 mm×0.32 mm, 0.5μm),程序升温,流量为1 mL·min^(-1),载气为高纯氮气,FID检测器温度为280℃,气化室温度为270℃,分流比为1∶10,以龙脑为参照物峰,对其进行方法学验证,建立10批药品的GC指纹图谱,并采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)进行相似度评价,同时测定药品中4种成分的含量。结果 建立了石龙清血颗粒的GC指纹图谱,10批药品的相似度在0.979~0.999,共标定出22个共有峰,并指认出其中4个色谱峰,定量分析条件方法学考察结果良好,10批药品中α-蒎烯、龙脑、阿魏酸、莪术醇的平均含量分别为0.013 1、0.018 4、0.087 0、0.133 5 mg·g^(-1)。结论 建立的石龙清血颗粒GC指纹图谱及4种挥发性成分的含量测定方法,操作简便、准确可靠,可为石龙清血颗粒的质量控制提供参考。

气相色谱法测定清肠栓中樟脑残留量和冰片含量

目的建立清肠栓中樟脑残留物和冰片含量的气相测定方法。方法采用气相色谱法,色谱柱为Agilent毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25µm),柱温为140℃,进样口温度250℃,检测器(FID)温度为250℃。结果樟脑、龙脑和异龙脑在0.0299~1.497µg(r=1.000)、0.0205~1.025µg(r=1.000)、0.0097~0.4830µg(r=1.000)范围内呈现良好的线性关系。精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于2%,平均加样回收率分别为99.7%、101.0%、102.5%。结论该方法准确、可靠、简便快速,可用于清肠栓中龙脑含量的测定。

工作场所空气中甲醛含量快速检测方法

为反映工人在工作场所空气中甲醛的真实暴露水平,解决现有甲醛测定方法耗时长、瞬时浓度难捕捉、共存物干扰强等难题,建立一种基于便携式气相色谱-质谱(GC-MS)联用仪的工作场所空气中甲醛的快速检测方法。在作业现场采用便携式GC-MS的取样手柄采集工作场所空气,经仪器内Tri-bed吸附管富集后,直接进行热解吸分析,采用保留时间和特征离子定性,特征离子峰面积内标法进行现场定量。评估该方法的各项技术参数,通过干扰试验和比对试验确定方法的稳定性和准确性,并进行实际应用研究。结果表明:GC-MS联用仪检测甲醛的线性范围为0.10~12.3 mg/m 3,相关系数为0.999,检出限为0.05 mg/m 3,定量下限为0.10 mg/m 3,加标回收率为88.0%~97.6%,批内相对标准偏差(RSD)为4.2%~9.1%。该方法能够实现工作场所空气中甲醛浓度的现场快速测定,与理论值偏差在5%~12%范围内,可准确反映工作人员的真实甲醛暴露。

牛黄益金片GC特征图谱研究及4种挥发性成分的含量测定

目的建立牛黄益金片的气相色谱(GC)特征图谱,并同时测定柠檬烯、桉油精、(-)-薄荷酮、薄荷脑4种成分的含量。方法采用GC分析方法,Agilent DB-FFAP毛细管色谱柱(30 m×0.25 mm,0.25μm),火焰离子化检测器(FID),进样口温度250℃,检测器温度250℃。载气为氮气,流速为1.0 mL·min^(-1)。柱温为程序升温:初始温度60℃,保持4min,以1.5℃·min^(-1)的速率升温至130℃1,再以20℃·min^(-1)的速率升温至200℃;进样量为2μL,分流比为2∶1。应用中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2012版)对3家企业的15批次牛黄益金片特征图谱的相似度进行分析,同时对4种成分的含量进行测定和分析。结果15批样品色谱图与对照特征图谱相似度均在0.99以上,特征图谱共有7个特征峰,指认了其中4个共有峰。15批样品中柠檬烯、桉油精、(-)-薄荷酮、薄荷脑的质量浓度分别在0.1246~6.232μg·mL^(-1)(R^(2)=0.9994)、0.1893~1.893μg·mL^(-1)(R^(2)=0.9994)、1.384~276.8μg·mL^(-1)(R^(2)=0.9999)、67.76~677.6μg·mL^(-1)(R^(2)=0.9999)与峰面积线性关系良好,平均回收率(n=6)及RSD分别为91.61%(1.5%)、91.25%(1.5%)、96.05%(1.5%)、99.21%(1.1%)。结论建立的GC特征图谱结合4种成分的含量测定方法,能较全面地反映牛黄益金片中挥发性成分的质量,可用于牛黄益金片中挥发性成分的质量控制。

SARS-CoV-2与SARS病毒基因组中密码子使用的比较

目的:分析冠状病毒基因中密码子的进化和变异。方法:运用生物信息学方法和生物统计学方法,对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)和非典病毒(SARS)基因中密码子使用的偏好性和密码子的上下文关系进行比较分析。结果:两种病毒密码子的使用都存在显著的偏好性(RSCU值的变化为0.10~2.67),且偏好使用的密码子(偏爱密码子)和避免使用的密码子(稀有密码子)基本是一致的;通过相关性分析发现在两种病毒中密码子适应性指数(CAI)与密码子第三位点的GC含量(GC3)呈显著的负相关性,但SARS-CoV-2的负相关性更强(SARS-CoV-2:R^(2)=0.76,P<0.001;SARS:R^(2)=0.48,P<0.001),随着CAI的增大,GC3降低由于CAI是反映基因表达水平的参数,即高表达基因偏好低GC3的同义密码子。比较偏爱密码子和稀有密码子的上下文关系,发现偏爱密码子与稀有密码子各位点的核苷酸组分存在显著差异,这种差异性表现为在密码子不同位点GC和AT的显著区别,反映了GC含量对同义密码子使用偏爱性的约束。结论:SARSCoV-2和SARS病毒基因组GC含量、密码子的上下文关系、密码子各位点核苷酸的组分、基因的表达水平是影响密码子偏爱性的重要因素,研究结果对SARS-CoV-2和SARS病毒基因组的进化和变异的研究具有参考意义。

欧李果实香气成分与内含物相关性研究

以8个欧李品系为试材,采用顶空-固相微萃取和气质联用技术测定欧李鲜果中的挥发性物质、果实内含物含量,探讨香气成分与内含物质的关系。结果表明,8个欧李品系共检出芳香物质55种,主要为酯类、醇类、醛酮类、酸类、烃类、酚类、杂环类等,以乙酸丁酯(C_(7)H_(11)NO_(2))、乙苯(C_(8)H_(10))、3-甲基-2-丁烯醇(C_(5)H_(10O))、对二甲苯(C_(8)H_(10))和三氯乙烯(C_(2)HCl_(3))为主。香气成分与内含物质相关性分析表明,酯类相对含量与Vc含量呈显著正相关,与硬脂酸含量呈显著负相关。香气物质的构成在品系间具有差异性,每个品系都有自身特有的香气物质,且部分香气成分与内含物有显著关系。