枸杞多糖促进小肠内分泌细胞分泌肠促胰液素

目的探讨枸杞多糖(LBP)通过Wnt/β-catenin信号通路对小鼠肠道内分泌细胞(STC-1)中GCG基因的影响以及调节胰高血糖素样肽-1(GLP-1)分泌的作用机制。方法(1)将STC-1细胞分为4组:空白对照组、25μg·mL^(-1) LBP干预组、50μg·mL^(-1) LBP干预组、100μg·mL^(-1) LBP干预组,用Western blot法分别检测4组中细胞质、细胞核以及全蛋白中β-catenin的表达;采用免疫荧光法检测每组细胞中β-catenin的原位表达。Western blot检测4组细胞全蛋白中cAMP、Epac蛋白的表达水平。(2)将STC-1细胞分为4组:空白对照组、重组蛋白Wnt3a组(加入50 ng·mL^(-1)重组蛋白Wnt3a)、LBP组(加入100μg·mL^(-1) LBP)、LBP联合重组蛋白Wnt3a组(50 ng·mL^(-1)重组Wnt3a蛋白与100μg·mL^(-1) LBP联合),通过免疫共沉淀法检测转录因子FOXO4和TCF7L2分别与β-catenin结合。(3)将STC-1细胞分为4组:空白对照、25μg·mL^(-1) LBP干预组、50μg·mL^(-1) LBP干预组、100μg·mL^(-1) LBP干预组,ELISA试剂盒检测4组GLP-1浓度;从每组细胞中提取总RNA,反转录后利用RT-PCR法检测细胞中GCG基因的表达水平。结果50μg·mL^(-1)和100μg·mL^(-1) LBP干预可上调细胞核和细胞质中β-catenin的表达。随着LBP干预浓度的增加,核转位愈发明显。在LBP刺激下,转录因子TCF7L2与β-catenin的结合能力增强。随着LBP干预浓度的增加,GCG基因和GLP-1的表达增加。结论LBP可通过激活调节Wnt/β-catenin信号通路促进GCG基因的表达,从而上调GLP-1的浓度。