草鱼呼肠孤病毒GCRV-GD108株VP5蛋白功能及免疫原性分析

在前期研究中分离到一株草鱼呼肠孤病毒,GCRV-GD108,并获得其全基因组序列。该病毒株的M5基因编码VP5蛋白,该蛋白与哺乳动物正呼肠孤病毒μ2蛋白具有较高的同源性及相似的NTPase结合保守区域,推测VP5蛋白也同样具有NTPase活性。为检测VP5蛋白是否具有NTPase活性及其是否具有免疫保护作用,采用已构建的原核表达载体表达VP5重组蛋白,通过孔雀绿钼酸铵法检测纯化后的重组蛋白的NTPase活性。采用DNAstar软件预测M5基因编码蛋白的抗原性,综合蛋白亲水性、表面可及性与表面抗原性三项指标,预测编码蛋白可形成抗原表位的氨基酸区域数多达86个,提示VP5蛋白具有较强的免疫原性。用重组蛋白VP5免疫健康草鱼,通过人工攻毒实验检测VP5蛋白的免疫保护作用。结果显示,VP5重组蛋白具有NTPase活性,且其NTPase活性依赖于Mg2+或Na+/K+,而Ca2+的存在可能抑制其活性;VP5蛋白可诱导草鱼产生高水平的抗体滴度,并显著提高IgM mRNA的表达水平,但未能为草鱼提供抗GCRV感染的保护。研究首次证实GCRV-GD108株VP5蛋白具有NTPase活性,但不能为草鱼提供免疫保护作用。

草鱼呼肠孤病毒GCRV-GD108株VP5蛋白的原核表达

根据草鱼呼肠孤病毒广东株GCRV-GD108编码VP5的M5基因的cDNA序列,分别设计合成带特定酶切位点的特异引物,进行PCR扩增;通过酶切与连接,构建2种重组表达载体pET30c-M5和pColdⅡ-M5,分别转化于大肠杆菌并进行诱导表达;对培养基、诱导时间、诱导剂浓度和温度等条件进行优化,确定最适表达体系。通过SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行鉴定。结果显示,所构建的2种VP5蛋白原核表达载体,均在大肠杆菌中成功表达了分子质量大小(约80ku)与预期相符的重组蛋白,表达产物主要存在于包涵体中。诱导表达后的菌体经离心、洗涤与超声破碎,离心收集包涵体。包涵体通过变性、透析与复性,获得纯化的重组蛋白,其中pET30c-M5/BL21(DE3)工程菌的目的蛋白占全菌蛋白的22.5%,纯化后获得了高纯度的重组蛋白(>95%)。比较2种表达载体的表达结果,pET30c-M5具有诱导表达耗时少、获得重组蛋白量大的优势,可为下一步的研究提供足量的蛋白。

川南长宁气田上罗区块宁201-YS108井区页岩气储量评价

四川盆地南部的长宁-威远地区页岩气资源丰富、储层较好,但此前针对上罗区块宁201-YS108井区页岩气储层系统的储量计算和评价较少。以长宁页岩气田上罗区块宁201-YS108井区为研究对象,研究其地层特征、构造特征、沉积相特征和储层特征。经储量参数确定及有效储层划分,并经体积法计算吸附气储量、容积法计算游离气储量,确定了宁201井区新增探明含气面积为91.17 km^(2),YS108井区新增探明含气面积为68.47 km^(2),两井区合计新增页岩气探明储量为1361.80×10^(8)m^(3)。最后,宁201-YS108井区页岩气储量的评价结果显示,宁201-YS108井区五峰组-龙马溪组一段页岩气藏脆性矿物含量高、镜质体含量高、有机碳含量高、渗透率特低、埋藏深度为中深层、可采储量为大型。该区域储量条件除渗透率和孔隙度较低外,矿物和有机碳含量、埋藏条件和可采储量总体较好,页岩气勘探开发潜力较大。

高含油量油菜新品种赣油杂108的选育及栽培技术

利用油菜与蔊菜远缘杂交创制出不育系和恢复系,并配制杂交组合,经过多年鉴定筛选育成油菜新品种赣油杂108。该品种平均产量为2091.90 kg/hm^(2),含油量为46.46%,芥酸含量为0.46%,硫苷含量为27.72μmol/g;2022年通过农业农村部品种登记,登记编号为GPD(2018)360064,适宜江西省及长江中游油菜产区种植。介绍了赣油杂108的选育经过、产量表现、特征特性及配套栽培技术。

108国道灵石段绿化技术探讨

108国道灵石段的成功绿化建设对发展灵石经济、美化县城容貌、保障行车安全和改善沿线环境质量等具有重要意义。通过详细分析108国道灵石段绿化建设中的经验技术,为如何搞好道路绿化建设提供参考。

连续上市5个月,亚非白雪108松花惹人爱

两湖地区松花菜的优势茬口主要集中在冬季、冬春季。花菜种植农友急需抗逆性好、高产、品质好、能满足两湖地区优势茬口的松花品种。本文介绍了亚非品质型松花白雪108的特征特性,并摸索出了一套多茬口采收栽培技术。亚非白雪108,日益成为两湖地区助农致富的好帮手。

抗病高产优质马铃薯新品种—‘云薯108’

抗病高产优质马铃薯新品种‘云薯108’系云南省农业科学院经济作物研究所和昭通市农业科学院、昆明云薯农业科技有限公司于2008年用‘滇薯6号’作母本、‘S04-827’作父本,经有性杂交选育而成,2021年通过国家非主要农作物品种登记,登记号:GPD马铃薯(2021)530114。该品种晚熟,大春生育期107~118 d;块茎圆形、薯皮光滑、黄皮黄肉、芽眼浅、蒸煮口感好。干物质含量19.60%~23.20%,淀粉含量12.32%~14.82%,蛋白质含量2.20%~2.62%,维生素C含量8.70~15.20 mg/100 g鲜薯,还原糖含量0.10%~0.28%。‘云薯108’植株抗晚疫病、抗Y病毒病。2019~2021年极量攻关中产量最高97196 kg/hm^(2),3次打破云南大春马铃薯最高单产纪录,同时创西南地区马铃薯最高单产纪录。该品种适宜在云南、贵州、四川等省份马铃薯大春作区推广种植,可用于鲜食、饲料和淀粉加工。

茶树品种中茶108和陕茶1号无性系在汉中地区的引种试验

开展无性系茶树品种中茶108和陕茶1号在汉中地区的抗性、适应性、生长表现和绿茶品质试验研究,旨在为汉中茶产业发展提供适宜的无性系良种。结果表明,中茶108和陕茶1号茶树的适应性好,抗寒性、抗旱性和抗病性均强,栽植成活率达95%以上,育芽能力强。中茶108茶树品种的一芽一叶期在3月下旬,比福鼎大白茶早5~8 d,陕茶1号物候期与福鼎大白茶相当。中茶108和陕茶1号所制绿茶品质优良,宜在汉中地区栽培及推广。并且总结了中茶108和陕茶1号无性系在汉中地区的快繁技术要点。

具有免疫调节功能的鼠李糖乳杆菌LV108对大鼠粪便菌群及其代谢物的影响

利用鼠李糖乳杆菌LV108干预由环磷酰胺建立的免疫低下模型大鼠,研究其对免疫低下大鼠的免疫调节作用,并探究其对大鼠粪便菌群及其代谢物的影响。结果表明,环磷酰胺建立的免疫低下模型大鼠血清中白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、免疫球蛋白A(Immunoglobulin A,IgA)、免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)及溶血素的水平以及吞噬指数和廓清指数显著低于对照组(P<0.05),脾淋巴细胞的增殖也显著降低(P<0.05);鼠李糖乳杆菌LV108的干预显著提高了免疫低下大鼠血清中TNF-α、总IgG及溶血素的水平和廓清指数(P<0.05),并显著促进了脾淋巴细胞的增殖(P<0.05);环磷酰胺显著降低了大鼠粪便中乳杆菌和双歧杆菌的数量(P<0.05),并显著提高了肠杆菌和肠球菌的数量(P<0.05),粪便中的丙氨酸、异亮氨酸、丁酸、琥珀酸、肌酸、β-葡萄糖和α-葡萄糖的含量均低于对照组;而鼠李糖乳杆菌LV108的干预使得大鼠粪便中乳杆菌和双歧杆菌的数量显著升高(P<0.05),并显著降低了肠杆菌和肠球菌的数量(P<0.05);同时,增加了大鼠粪便中丙氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、N-乙酰糖蛋白和β-葡萄糖的含量。具有免疫调节功能的鼠李糖乳杆菌LV108能够改善大鼠肠道中的乳杆菌和双歧杆菌数量及氨基酸和糖类等代谢物。

耐密植玉米品种天育108在吉林省产量潜力研究

天育108在2017年3月通过吉林省农作物品种审定委员会审定,并先后通过辽宁省、河北省、山西省、黑龙江省及内蒙古自治区引种备案,该品种具有较广泛的适应性。通过对天育108多年多点测试及耐密性分析表明,天育108在吉林省玉米推广种植区域具有较好的丰产性和稳定性表现,推荐生产种植密度为60000~67500株/hm^(2),在吉林省松原市耐密植(大垄双行、水肥一体化)试验表明,该试验条件下,种植密度在70600~81500株/hm^(2)之间具有较好的产量表现,可依据种植实践的投入产出比、自然条件和栽培方式等合理确定种植密度,以期达到高产和较高的收益。天育108综合表现优良,具有较高的增产潜力,对保障粮食安全,推动农业产业升级,促进农民增收,推动科技创新与应用等方面有重要的意义。

基于CRISPR/Cas9系统建立GPR108缺失的THP-1细胞株及其功能初步研究

目的建立稳定敲除G蛋白偶联受体108(GPR108)基因的人单核细胞白血病细胞系(THP-1),并初步研究其功能。方法根据人GPR108基因序列设计,合成可应用于成簇有规律的间隔短回文重复序列及其相关蛋白9(CRISPR/Cas9)的单链引导RNA(sgRNA1和sgRNA2)对应的DNA,利用分子克隆技术在pL-CRISPR.EFS.GFP慢病毒载体中插入sgRNA1和sgRNA2序列,构建重组载体(pL-CRISPR.EFS.GFP-sgRNA1和pL-CRISPR.EFS.GFP-sgRNA2)。将测序正确的重组体与包装质粒(pMD2.G和psPAX2)共转染293T细胞进行病毒包装,收集病毒液并感染THP-1细胞。利用流式细胞分选技术分离GFP+细胞于96孔培养板中,培养获得单细胞克隆。利用聚合酶链式反应(PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测THP-1细胞中GPR108是否敲除成功。应用脂多糖(LPS)刺激GPR108-/-和GPR108+/+的THP-1细胞,Western blot法检测细胞内白细胞介素-8(IL-8)的表达,流式微球技术(CBA)检测细胞培养上清液中的IL-8浓度。结果成功构建重组慢病毒载体pL-CRISPR.EFS.GFP-sgRNA,转染THP-1细胞后通过流式细胞仪分选获得单细胞克隆F9。PCR和Western blot法均证实F9是GPR108-/-THP-1单细胞克隆。LPS刺激GPR108-/-和GPR108+/+THP-1细胞,Western blot和CBA的结果均显示敲除GPR108的THP-1细胞中IL-8的合成和分泌明显减少。结论成功建立GPR108缺失的THP-1细胞株;缺失GPR108的THP-1细胞在受到LPS刺激时产生的趋化因子IL-8显著降低。为后续研究GPR108在免疫炎症中的作用奠定了基础。

国审高产稳产夏大豆新品种柳豆108

柳豆108是由安徽柳丰种业科技有限责任公司以中黄13×中黄40有性杂交、南繁北育、连续多年系谱法定向选择而成的中熟普通大豆新品种,多荚多粒,中粒型,具有高产稳产、广适、抗病、抗倒、适应机械化的特点,于2023年通过国家审定(国审豆20230037),适宜于黄淮南片夏播种植。

高产优质杂交稻新品种川农优108的选育与应用

川农优108是绵阳市农业科学研究院利用四川农业大学选育的不育系川农6A与自育恢复系绵恢108配组选育而成的中籼迟熟三系杂交稻新组合,具有株叶形态好、高产稳产、米质优、适应性广等特点,2021年通过四川省农作物品种审定委员会审定。本文作者介绍了川农优108的选育经过、农艺特性、产量表现、高产栽培及制种技术要点。

杂交玉米农大108及其亲本种子内生细菌群落的多样性

【目的】研究不同基因型玉米对其种子内生细菌群落结构的影响。【方法】通过构建16S rDNA文库的非培养方法,对杂交玉米组合农大108正、反交及其亲本种子内生细菌群落多样性进行研究。【结果】两后代种子内生细菌分别含46和42个OTU,第一优势菌属均为Pseudomonas,丰度分别为34.29%和34.00%;亲本玉米黄C和178种子内生细菌分别含17和11个OTU,第一优势菌属分别为Enterobacter及Burkholderia,丰度分别为49.13%和89.72%。母本玉米黄C种子内生细菌群落中Roseateles、Enterobacter、Pseudomonas及Sphingomonas4个菌属与父本178种子内生细菌群落中Pseudomonas、Ralstonia、Paenibacillus及Bacillus 4个菌属存在其正交后代种子中。母本178种子内生细菌群落中Acinetobacter、Pseudomonas、Ralstonia、Paenibacillus及Bacillus 5个菌属与父本黄C种子内生细菌群落中Roseateles、Citrobacter、Pantoea、Pseudomonas、Stenotrophomonas及Escherichia 6个菌属存在其反交后代种子中。【结论】遗传相关的杂交玉米农大108正、反交后代其亲本在内生细菌群落结构具有一定的关联性。

国道108线某段缓倾角顺层边坡变形破坏机制物理模拟研究

在对国道 1 0 8线某段缓倾角顺层边坡的形态及变形特征、结构及物质组成特征、以及滑床特征等实际情况认真调查的基础上 ,选取贯穿滑坡体的 - ' 主剖面 ,利用物理模拟研究方法中的底摩擦试验 ,再现了该边坡变形破坏的全过程 ,并对不同阶段的变形及最终破坏机制进行了深入分析 ,确定该滑坡属滑移 -压制拉裂型 ;同时 ,通过与 2 D-σ有限元程序模拟研究及边坡稳定性计算分析成果、以及该边坡变形破坏的实际情况之对比分析 。

茶树品种中茶108在宜宾的栽植表现

为探索中茶108在宜宾地区栽植表现,以巴渝特早为CK,在宜宾市引种茶树品种中茶108,对其植物学性状、农艺性状、鲜叶产量、生化成分等进行观测。结果表明:中茶108移栽成活率高(约95%);发芽期早,萌动期在2月上旬,1芽1叶期为2月中下旬,生长势旺盛;1芽1叶和1芽2叶的重量和长度均优于CK;耐寒性、耐旱性及抗病虫性均较强;具有高产优势,内含物质丰富,氨基酸含量高、酚氨比值低;烘青样滋味甘醇、鲜爽,感官评分在90分以上。中茶108适宜在宜宾地区推广种植,适宜采摘1芽1叶或1芽2叶制作优质绿茶。

优质籼粳交水稻恢复系Q恢108的选育与应用

Q恢108是用粳稻材料IR17494-32-1-1-3-2与籼型恢复系蜀恢527杂交后再与绵恢725复交选育的籼粳交恢复系。该恢复系生长势旺,茎秆粗壮,株叶型好,生育期长,米质优,恢复力和配合力强,所配杂交组合庆优108(Q3A/Q恢108)和Q优108(Q1A/Q恢108)于2006年分别通过重庆市和国家品种审定。

108国道秦岭隧道区域大熊猫栖息地现状及保护策略

108国道秦岭隧道区域是秦岭大熊猫重要的栖息地,也是连接秦岭最大的大熊猫局域种群兴隆岭-太白山局域种群和天华山局域种群的唯一纽带.本文对该区域大熊猫栖息地现状、社区状况、面临的威胁因素和限制因素及其成因进行了分析,有针对性地提出保护策略,即从加强管理、恢复栖息地、扶持当地社区发展经济等多个方面促进秦岭大熊猫两大局域种群的交流融合.

耐低温弱光番茄新品种唐粉108的选育

唐粉108是以自交系YT-01-12-04-12-10为母本,自交系LT-05-06-12-14-08为父本配制而成的番茄一代杂种。属于无限生长型,早熟,耐低温弱光,坐果率高,果实高圆形,粉红色,平均单果质量281.2 g,前期产量高,占总产量的40%~45%,冬季日光温室每667 m^2产量7 500 kg,适宜的栽培密度为3 000~3 500株·(667 m^2)^(-1),高抗烟草花叶病毒病(TMV)和枯萎病,适合华北地区冬季日光温室、早春保护地栽培。

108国道泸沽段花岗岩高边坡稳定性评价及整治措施

通过边坡坡体结构及变形破裂特征的分析 ,总结泸沽花岗岩高边坡的变形破坏方式及破坏机理 ,结合平面有限元法和Bishop极限平衡法边坡稳定性定量计算 ,评价花岗岩高边坡的稳定性 ;建立本区花岗岩高边坡整治原则 ,并根据各段花岗岩高边坡坡体结构、稳定性状况及变形破坏方式等差异 。