人肺腺癌细胞系中小G蛋白Rho-GDP解离抑制因子α的克隆及序列分析

目的 :研究人肺腺癌细胞系中小G蛋白Rho解离抑制因子α基因结构的改变。方法 :应用RT PCR扩增Rho解离抑制因子αcDNA ,并进行测序。结果 :在人肺腺癌细胞系AGZY 83α 中 ,除Rho解离抑制因子基因α存在外 ,还存在缺失型的Rho解离抑制因子αcDNA ,即在第 5个外显子有 78bp的缺失。结论 :在人肺腺癌细胞系AGZY 83α

GDP解离抑制因子2对猪胚胎发育的影响

[目的]观察GDP解离抑制因子2(GDI2)对猪胚胎发育过程的影响.[方法]采用改良的退火对照引物(ACPs)差异表达技术检测人工授精及核移植猪胚胎中的差异表达基因,利用实时定量PCR法确认基因的表达情况.[结果]通过改良的ACP技术获得了若干个差异表达基因,采用实时定量PCR技术进行了进一步确认,结果显示GDI2基因在核移植猪胚胎中的表达水平明显低于人工授精猪胚胎(P<0.01).[结论]GDI2可能参与猪胚胎的发育过程.

两种水稻GDP解离抑制蛋白基因的分离及特征分析

以Rho家族成员OsRacD为诱饵 ,采用酵母双杂交体系 ,分离到两种与OsRacD互作的水稻RhoGDP解离抑制蛋白的基因 ,分别命名为OsRhoGDI1和OsRhoGDI2 .酵母体内结合和GSTpulldown分析结果显示 ,OsRhoGDI1和OsRhoGDI2与野生型和组成型激活的OsRacD都能结合 ,且不依赖GDI的N端部分序列 ;GDI和Rho的结合具有一定的特异性 .两种GDI在水稻根、地上组织和幼穗等多种组织和器官都有表达 ,但在表达特征上存在明显差异 .研究证实 ,在水稻中存在着调控RhoGTPases的GDP解离抑制蛋白基因家族 。

紫花苜蓿GDP解离抑制蛋白基因cDNA的克隆、分析及烟草转化

采用RT-PCR方法,克隆得到紫花苜蓿(Medicago sativa L.)GDP解离抑制蛋白基因cDNA核心区域序列,命名为MsGDI1。序列分析结果表明,该cDNA核心区域全长1575 bp,包含一个1332 bp的最大开放阅读框,编码444个氨基酸。半定量RT-PCR分析结果表明,在盐胁迫和铝胁迫条件下,MsGDI1基因的表达随着胁迫时间的增加而上升,该基因可能与紫花苜蓿抗盐耐铝机理有关。借助于新构建的该基因超表达载体,用农杆菌介导方法转化烟草(Nicotiana tabacum L.)。转基因烟草植株PCR检测的结果表明,MsGDI1基因已经成功插入到烟草基因组中,为进一步研究该基因的功能奠定了基础。

精浆免疫抑制因子与解脲支原体感染

目的 研究人精浆免疫抑制因子 (SPIF)、精液pH值及液化时间与解脲支原体 (ureaplasmaurealyticum ,UU )感染之间的相关性。方法 选取不孕门诊男性就诊者 ,检测精液常规指标及精浆中SPIF活性、精液pH值及精液液化时间 ,上述检测指标正常者作为对照组 ,有 1项异常者做为异常组 ,分别检测精液UU感染率。结果 不育男性中SPIF活性超强、低下 ,精液 pH值异常及液化时间异常的精液UU感染阳性率分别为 62 8% ,63 6% ,80 %及62 1% ,均显著高于对照组男性精液UU感染阳性率 (3 9% )。结论 SPIF活性异常、精液 pH值改变及液化时间延长与UU感染密切相关 ,UU感染可能影响精子质量 。

胃癌中鸟嘌呤核苷酸解离抑制因子2表达与临床病理的关系及罗格列酮对其表达的影响

目的探讨胃癌组织中鸟嘌呤核苷酸解离抑制因子(Rho GDI)2的表达与临床病理的关系及可能机制。方法 60例胃癌患者,取相邻的胃癌癌旁组织为对照组。检测两组Rho GDI2的表达,并对Rho GDI2的表达与胃癌临床病理进行统计学分析。结果胃癌组织中Rho GDI2的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05);胃癌组织中Rho GDI2表达的阳性率(76.67%)显著高于癌旁组织(45.00%)(χ2=2.491 8,P=0.012 7);胃癌组织中Rho GDI2的表达与病理分期、分化程度、淋巴结转移、肿瘤大小有显著相关性(P<0.05);胃癌组织中Rho GDI2及MMP2表达水平明显高于癌旁组织(P<0.01);罗格列酮作用后胃癌组织中Rho GDI2 mRNA、MMP2 mRNA的表达水平明显低于作用前(P<0.01);罗格列酮作用前和作用后胃癌组织中Rho GDI2与MMP2的表达之间呈正相关(rs=0.595,P=0.000;rs=0.612,P=0.000)。结果 Rho GDI2在胃癌中呈高表达;胃癌中Rho GDI2的表达参与了胃癌的发病、转移和进展;罗格列酮可以抑制Rho GDI2的表达;Rho GDI2可能通过调控MMP2的表达参与胃癌的发病、转移及进展。

Rho蛋白解离抑制因子α在高血压大鼠胸主动脉的表达

目的研究高血压大鼠胸主动脉以及周期性张应变刺激下血管平滑肌细胞（VSMCs）的Rho蛋白解离抑制因子（RhoGDIα）的表达变化,探讨血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）信号通路对其表达的调控影响。方法应用实时PCR和Western blotting技术分别检测4周、12周和18周自发性高血压大鼠（SHR,n=4）和正常血压京都种鼠（WKY,n=4）胸主动脉RhoGDIαmRNA和蛋白的表达;免疫组织化学检测RhoGDIα在SHR和WKY胸主动脉的定位;Westernblotting技术检测腹主动脉缩窄性高血压大鼠（ACR,n=6）胸主动脉RhoGDIα蛋白的表达;应用细胞应变加载系统对大鼠胸主动脉VSMCs施加1Hz、10%的周期性张应变,在有或无血管紧张素亚型Ⅰ（AT1）受体拮抗剂L-158809的条件下观察周期性张应变刺激对VSMCs RhoGDIα蛋白表达的影响。结果4周与12周SHR和WKY胸主动脉RhoGDIα表达无显著性差异,而在18周组,SHR胸主动脉RhoGDIα表达显著高于WKY。RhoGDIα主要存在于血管中膜VSMCs。2周和4周ACR胸主动脉RhoGDIα表达较正常对照组显著上调,提示在高血压状...

鸟苷酸解离抑制因子-2真核表达载体构建及稳定转染A549细胞株的建立

目的构建Rab蛋白鸟苷酸解离抑制因子-2(GDI2)真核表达载体并建立稳定转染A549细胞株。方法聚合酶链反应(PCR)扩增GDI2基因片段,构建pcDNA3.1-GDI2真核表达载体,经酶切、PCR、测序验证其正确性,脂质体法转染真核细胞A549,G418筛选建立稳定转染的细胞株。免疫印迹法检测稳定转染的细胞株。结果构建了真核表达载体并建立了稳定转染的A549细胞株,成功表达GDI2蛋白。结论 GDI2真核表达载体成功构建及稳定转染A549细胞株的建立,为研究GDI2过度表达对肿瘤侵袭和转移的影响奠定了实验基础。

肝癌组织中鸟嘌呤核苷酸解离抑制因子2的表达及临床意义

目的：探讨肝细胞肝癌组织中鸟嘌呤核苷酸解离抑制因子2（RhoGDI2）的表达与临床病理的关系及临床意义。方法：选择2011年7月至2015年1月期间70例肝细胞肝癌患者为研究对象，检测患者肝癌组织和癌旁组织RhoGDI2的表达，并对其表达与肝癌临床病理进行统计学分析。结果：RhoGDI2在肝细胞肝癌组织中的表达高于癌旁组织，差异有统计学意义（P〈0．05）；肝细胞肝癌组织中RhoGDI2的阳性率（77．14％）高于癌旁组织（47．14％），差异有统计学意义（χ2=13．39，P=0．000）；不同病理分期、分化程度、肿瘤体积以及是否出现淋巴结转移与RhoGDI2的表达有显著相关性（P〈0．05）；肝细胞肝癌组织申RhoGDI2、MMP2（基质金属蛋白酶2）mRNA均高于癌旁组织，差异有统计学意义（P〈0．05）；siRNA干扰前肝细胞肝癌组织中RhoGDI2与MMP2的表达之间呈正相关（rs=0．581，P=0．000）；siRNA干扰后肝癌中RhoGDI2与MMP2亦呈正相关（rs=0．592，P=0．000）。结论：RhoG-D／2在肝细胞肝癌组织中呈高表达；RhoGDI2在肝细胞肝癌的发病、转移和进展中起重要作用；RhoGDI2与MMP2在肝细胞肝癌的发病、转移及进展中可能共同起作用。

小分子干扰RNA沉默鸟嘌呤核苷酸解离抑制因子2基因表达对胰腺癌细胞迁移侵袭的影响

目的探讨小分子干扰RNA(siRNA)沉默鸟嘌呤核苷酸解离抑制因子2(RhoGDI2)基因表达对胰腺癌细胞迁移侵袭的影响。方法选取2016年1月至2019年12月于张家港市第一人民医院进行手术的60例患者的胰腺癌肿瘤组织标本作为研究对象。应用Western blot检测RhoGDI2在人胰腺癌细胞株CFPAC-1、HPAF-Ⅱ、MIA PaCa-2、PANC-1、SW1990中的表达,利用siRNA沉默CFPAC-1细胞中RhoGDI2的表达,细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞体外迁移能力和侵袭能力,Western blot检测P21蛋白激活激酶1(Pak1)表达情况,免疫组织化学染色检测胰腺癌组织标本中RhoGDI2和Pak1的表达情况。结果Western blot检测结果显示,RhoGDI2蛋白在胰腺癌细胞株中呈不同程度的表达水平,表达水平由高到低的细胞顺序依次为CFPAC-1、SW1990、PANC-1、HPAF-Ⅱ、MIA PaCa-2。WT、si-NC及si-RhoGDI2组细胞的RhoGDI2蛋白表达量分别为(1.25±0.09)、(1.19±0.11)、(0.38±0.07);转染si-RhoGDI2后RhoGDI2蛋白的表达显著下降,3组蛋白表达比较差异有统计学意义(P<0.05)。WT、si-NC及si-RhoGDI2组胰腺癌细胞的48 h划痕迁移率分别为(62.33±5.29)%、(62.27±3.37)%、(17.60±6.16)%,3组比较差异有统计学意义(P<0.05)。WT、si-NC及si-RhoGDI2组胰腺癌细胞的48 h划痕迁移率分别为(62.33±5.29)%、(62.27±3.37)%、(17.60±6.16)%,3组比较差异有统计学意义(P<0.05)。WT、si-NC及si-RhoGDI2组胰腺癌细胞穿膜细胞数分别为(132.3±10.3)、(120.7±16.5)、(24.3±9.5)个,3组比较差异有统计学意义(P<0.05)。WT、si-NC及si-RhoGDI2组细胞的Pak1蛋白表达量分别为(0.82±0.06)、(0.73±0.07)、(0.23±0.03),3组蛋白表达量比较差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学染色检测结果显示,RhoGDI2阳性47例,阳性率为78.3%,Pak1阳性45例,阳性率为75.0%。Spearman等级相关分析结果显示,RhoGDI2与Pak1的表达水平呈正相关(r>0,P<0.05)。结论沉默RhoGDI2基因表达能够抑制胰腺癌细胞的迁移和侵袭,RhoGDI2可能在胰腺癌发生发展过程中具有重要作用。

Rho鸟苷酸解离抑制因子-2过表达载体的构建与慢病毒包装

目的:为研究β2肾上腺素能受体减敏的机制,构建Rho鸟苷酸解离抑制因子-2(Rho GDI2)过表达慢病毒载体。方法:GenBank搜索Rho-GDI2基因序列(Gene ID:14570,序列号:NM_008113),设计PCR引物扩增目的基因,双酶切后凝胶电泳回收酶切产物。质粒双酶切获得线性载体,将目的基因和线性载体进行琼脂糖凝胶电泳分离回收目的条带。再行目的基因和载体的连接,连接产物转化感受态细胞;菌液PCR阳性克隆鉴定并抽提质粒并测序。最后293T细胞内包装慢病毒质粒并测其病毒活力与滴度。结果:通过DNAStar SeqMan软件对测序结果进行分析,测序结果与目标序列一致。病毒质粒转染细胞效率较高,病毒活力较高,通过标准曲线测得病毒滴度pLenti-GDI慢病毒液:1.22×108vp/mL。结论:成功构建了Rho GDI2过表达慢病毒载体。

护肝解纤汤对肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶-1及其抑制因子表达的影响

目的观察自拟护肝解纤汤对肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响,探讨其抗肝纤维化的机制。方法 100只雄性SD大鼠随机分7组后,其中6组以四氯化碳(CCl4)腹腔注射方法制作大鼠肝纤维化模型,造模后除模型组外分别施以低、中、高剂量姜黄组成的护肝解纤汤灌胃,小柴胡汤及复方鳖甲软肝片为阳性对照,12周后同时处死大鼠,检测血清MMP-1及TIMP-1含量及肝组织MMP-1及TIMP-1表达的变化。结果与模型组比较,护肝解纤汤可使肝纤维化大鼠血清MMP-1含量增加,血清TIMP-1水平下降,其中均以低剂量姜黄组效果明显,差异有显著性;与模型组比较,各组肝组织中MMP-1阳性表达明显增加,TIMP-1阳性表达明显减少,差异均有显著性(P<0.01)。结论护肝解纤汤具有促进MMP-1表达、抑制TIMP-1表达的作用,其抗肝纤维化作用可能与促进MMP-1表达、抑制TIMP-1表达等机制有关。

胱硫醚γ-裂解酶抑制剂逆转TNF-α引起的脂肪细胞胰岛素抵抗研究

目的观察胱硫醚γ-裂解酶(CSE)抑制剂对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的脂肪细胞胰岛素抵抗的影响。方法用TNF-α培养3T3-L1脂肪细胞,建立胰岛素抵抗脂肪细胞模型。经或未经CSE抑制剂炔丙基甘氨酸(PPG)和二辛可宁酸(BCA)预处理的脂肪细胞与TNF-α作用24 h后,观察脂肪细胞胰岛素刺激的葡萄糖消耗和摄取及硫化氢(H2S)含量的变化。结果 TNF-α可增加内源性H2S生成并减少3T3-L1脂肪细胞胰岛素刺激的葡萄糖消耗和摄取。BCA和PPG预处理可逆转TNF-α导致的脂肪细胞胰岛素抵抗。结论内源性CSE/H2S系统在胰岛抵抗的发生发展中发挥着重要作用,可能是治疗胰岛素抵抗的一个新方向。

水稻Rho GDP解离抑制因子OsRhoGDI1基因的特征分析

水稻Rho GDP解离抑制因子1(Rho GDP dissociation inhibitor 1,RhoGDI1)是本课题组前期通过酵母双杂交筛选从幼穗中分离的一个与小G蛋白Rho/Rop家族成员OsRac5相互作用蛋白的编码基因,对该基因特征及其功能的研究报道较少。本研究在对OsRhoGDI1开展生物信息学分析的基础上,利用表达谱芯片挖掘和实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real time polymerase chain reaction,RT-qPCR)对OsRhoGDI1基因的表达模式进行分析,发现该基因在水稻多种组织中广泛表达,尤其在幼穗发育过程中高表达,且该基因的表达受脱落酸(abscisic acid,ABA)、油菜素内酯(brassinolide,BL)、水杨酸(salicylic acid,SA)、吲哚-3-乙酸(indole-3-acetic acid,IAA)、赤霉素(gibberellin,GA)及盐胁迫的调控。亚细胞定位鉴定显示,OsRhoGDI1分布在细胞膜、细胞质以及细胞核中。双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation,BiFC)技术检测发现OsRhoGDI1与OsRac5在细胞膜、细胞质和细胞核均能发生互作,OsRhoGDI1还可与OsRacl在细胞膜上相互作用。本研究表明,OsRhoGDI1与水稻穗发育等过程密切相关,并且OsRhoGDI1可能通过与不同Rho/Rop蛋白结合并调节其活性,参与调控水稻生长发育、激素应答以及非生物胁迫等多种生物学过程。

缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑神经细胞凋亡及脑组织中Rho GDP解离抑制因子和Bcl-2表达的变化

目的研究RhoGDP解离抑制因子（Rho GDP dissociation inhibitor 2，RhoGDI2）mRNA及Bcl-2mRNA的表达在缺氧缺血性脑损伤（hypoxic-ischemic brain damage，HIBD）中的作用和机制。方法30只新生7日龄SD大鼠按照完全随机化方法分为假手术组及HIBD6h和48h组，每组10只。采用流式细胞仪检测脑细胞凋亡情况，并用Real—timeRT—PCR方法测定脑组织中RhoGDI2和Bcl-2mRNA表达水平。结果（1）新生大鼠HIBD后48h结扎侧大脑半球脑水肿明显。（2）HIBD6h出现典型的凋亡细胞峰，细胞凋亡率为（1．40±0．12）％。HIBD48h凋亡峰更为明显，细胞凋亡率达到（15．86±0．98）％。缺氧缺血后与假手术组相比，差异有统计学意义（P〈0．01）。（3）假手术组大鼠RhoGDI2和Bcl-2mRNA表达水平较高（4．12±0．74、2．55±0．65），在HIBD6h后二者表达开始下降（3．19±0．77、1．96±0．36），48h降低更加明显（1．04±0．18、1．06±0．17），与假手术组比较，HIBD各时间点RhoGDI2和Bcl-2mRNA的表达均明显降低，差异有统计学意义（P〈0．01）。（4）缺氧缺血后各时间点RhoGDI2mRNA的表达和Bcl-2mRNA的表达呈正相关（r=0．831，P〈0．05）。结论脑缺氧缺血后，随着凋亡的出现，RhoGDI2和Bcl-2mRNA表达水平降低，提示RhoGDI2表达失衡可能通过Bcl-2参与新生大鼠HIBD中凋亡的发生。

RhoGDI2基因抑制膀胱癌转移涉及基因和信号通路的生物信息学分析

目的利用生物信息学方法探讨Rho GTP酶GDP解离抑制因子2(rho GDP dissociation inhibitor 2,Rho GDI2)基因抑制膀胱癌转移涉及的基因和信号通路。方法从GEO datasets数据库搜索膀胱癌转移相关的全基因组表达谱芯片数据,使用GEO2R在线工具分析膀胱癌组织中Rho GDI2基因高表达组与低表达组之间的差异表达基因,再筛选出多组表达谱芯片数据中一致性上调或下调的基因,最后使用DAVID在线工具进行差异表达基因信号通路富集。结果得到Rho GDI2基因在膀胱癌组织中高表达组和低表达组一致性高的差异表达基因,其中A2M、CORO1A、ENC1、FGD3为上调基因中一致性高的差异表达基因。通过基因信号通路富集分析得到膀胱癌组织中Rho GDI2基因调控的主要信号通路为Vav-Rho A-ROCK-MLC和Ras-Raf-MEK。结论 Rho GDI2基因可能通过Vav-Rho A-ROCK-MLC和Ras-Raf-MEK信号通路调节肌丝蛋白、细胞骨架以及细胞的增殖、分化等,进而抑制膀胱癌转移。

沉默Rho GDIα抑制矽肺上皮间质转化及其作用机制

目的探讨沉默Rho GDP解离抑制因子α(Rho GDP dissociation inhibitorα,Rho GDIα)对矽肺上皮间质转化的作用及机制。方法转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导人肺泡Ⅱ型上皮细胞株A549,分为空载体慢病毒组(LEV)、沉默Rho GDIα慢病毒感染组(Lv-Rho GDIα-inhibition)、TGF-β1诱导LEV组(LEV+TGF-β1)、TGF-β1诱导Lv-Rho GDIα-inhibition组(Lv-Rho GDIα-inhibition+TGF-β1)。采用Western blot法、免疫细胞化学染色检测Rho GDIα、RhoA、Rho激酶(Rho kinase,ROCK)、E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和I型胶原(collagen-I)蛋白表达,采用Western blot法及CCK-8检测细胞增殖能力。结果Western blot法及免疫细胞化学染色结果显示,与LEV对照组相比,Lv-Rho GDIα-inhibition组Rho GDIα、RhoA、ROCK蛋白表达下降,E-cad蛋白表达上调,α-SMA和collagen-I蛋白表达下降;LEV+TGF-β1组Rho GDIα、RhoA、ROCK蛋白表达上升,E-cad蛋白表达下调,α-SMA和collagen-I蛋白表达上升。与LEV+TGF-β1组相比,Lv-Rho GDIα-inhibition+TGF-β1组Rho GDIα、RhoA、ROCK蛋白表达下降,E-cad蛋白表达上调,α-SMA和collagen-I蛋白表达下降。CCK-8及cyclin D1蛋白检测结果显示,与LEV对照组相比,Lv-Rho GDIα-inhibition组细胞增殖受到抑制,LEV+TGF-β1组细胞增殖增强,与LEV+TGF-β1组相比,Lv-Rho GDIα-inhibition+TGF-β1组细胞增殖受到抑制。结论沉默Rho GDIα可通过调控RhoA/ROCK信号通路抑制上皮间质转化发挥抗矽肺纤维化作用。

植物雌激素α-玉米赤霉醇对HUVEC组织因子基因表达的转录调控作用

目的探讨植物雌激素α玉米赤霉醇(ZAL)影响血管内皮细胞组织因子(TF)基因表达的转录调控机制,并与内源性动物类雌激素17β联雌二醇(17β联estradiol,E2)进行比较分析。方法进行人脐静脉内皮细胞(HUVECs)原代培养,利用基因重组技术构建4个含人TF基因5′上游不同长度序列的荧光素酶报告基因质粒,用脂质体转染法分别转入以下6组细胞:①正常对照组;②10-7molLE2刺激组;③10-7molLZAL刺激组;④10-6molLAngⅡ刺激组;⑤10-7molLE2+10-6molLAngⅡ刺激组;⑥10-7molLZAL+10-6molLAngⅡ刺激组;测定细胞裂解液中荧光素酶比活性(relativeluciferaseactivity,RLA)的变化。结果转染pGL3TF171+71的各组细胞RLA均较低,不同刺激组之间无显著差异;AngⅡ可使质粒pGL3TF593+71,pGL3TF316+71,pGL3TF236+71荧光素酶表达大量增加,E2、ZAL均可不同程度地抑制AngⅡ的上述效应,2者间无显著差异。结论含有1个NFκB位点和2个AP1位点的-236bp～-171bp区域在E2或ZAL影响TF基因转录中有重要作用。

30例儿童中毒性表皮松解症临床分析

Stevens-Johnson syndrome (SJS)和中毒性表皮坏死松解症(toxic epidermal necrolysis, TEN)是较为严重的以典型皮肤靶形损害及严重表皮剥脱为特征的皮肤黏膜综合征,可导致严重的眼、肝及肺损害,继发感染导致脓毒血症死亡的严重皮肤疾病。目前SJS及TEN被认为是同一疾病的不同阶段,对于表皮剥脱面积≤10%者临床诊断为SJS,10~30%者为SJS/TEN交界,≥30%者为TEN。

伴食道大疱的获得性大疱性表皮松解症合并获得性血友病1例国内首报

目的报告1例伴食道大疱的获得性大疱性表皮松解症合并获得性血友病。方法对其临床、胃镜、血液病学检查、皮肤组织病理和直接免疫荧光进行研究。结果胃镜检查示食道内多发大小不等水疱。血液病学检查示活化部分凝血活酶时间（APTF）88．7s（正常值：20.90-34.60s）；第Ⅷ因子活性6．9％（正常值：50．0％～150．0％）；第Ⅷ因子抑制物滴度312B．U．／ml（正常：0）。组织病理检查：表皮下水疱。1M氯化钠裂解皮肤直接免疫荧光检查示基底膜带真皮侧IgG呈线状沉积。结论此为一罕见的病例。