马铃薯GDP-L-半乳糖磷酸化酶类1基因的生物信息学初步分析

本文根据马铃薯GDP-L-半乳糖磷酸化酶类1基因的EST序列,运用多种生物信息学方法,对其进行初步的生物信息学分析.电子克隆获得了该基因的全长,结果表明:该序列全长1742bp,共编码357个氨基酸,有多个限制性酶切位点,有多个磷酸化位点,属于亲水性氨基酸,无信号肽,有膜穿透性.通过蛋白质二级结构功能域的预测,发现该序列中含有11个功能位点.通过蛋白质同源序列比对,发现该基因与番茄GDP-L-半乳糖磷酸化酶基因相似度极高,暗示该基因与番茄GDP-L-半乳糖磷酸化酶基因具有相似的生物学功能.以上结果可以为进一步研究该基因在马铃薯中特别是在抗青枯病分子育种中的功能提供相关依据.

HBME-1、CD56、CK19、galectin-3蛋白在TI-RADS 4a类甲状腺结节中的表达及意义

目的探讨间皮瘤抗原-1(HBME-1)、分化抗原簇56(CD56)、细胞角蛋白19(CK19)、半乳糖凝集素3(galectin-3)蛋白在TI-RADS 4a类甲状腺结节中的表达及意义。方法选取收治的TI-RADS 4a类甲状腺结节患者100例,将穿刺活检证实为甲状腺良性乳头状增生的59例患者归为良性组,将穿刺活检证实为甲状腺乳头状癌的41例患者归为恶性组,比较HBME-1、CD56、CK19、galectin-3蛋白在两组中的表达。结果恶性组HBME-1、CK19、galectin-3蛋白阳性表达率高于良性组,CD56阳性表达率低于良性组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论HBME-1、CD56、CK19、galectin-3蛋白可以客观鉴别TI-RADS 4a类甲状腺结节中的良恶性病变,为早期甲状腺乳头状癌筛查提供客观的参考价值。

A型获得性类B抗原1例报告

Ａ型获得性类Ｂ抗原１例报告何永勋（第一教学医院中心血站大理６７１０００）获得性类Ｂ抗原就目前来说机理尚未明了，ＧｅｒｂｅＬ等１９７５年对９个相似病例进行研究，提示＂获得性Ｂ＂是由于细菌的脱乙酰基酶的作用所致。脱乙醚基酶把Ｎ－乙酰基半乳糖胺转变为ａ一半...

多用途基因捕获C3H/10T1/2细胞阳性克隆库的构建及鉴定

目的：以10T1／2细胞为间充质干细胞模型，构建用于间充质干细胞分化及恶性转化分子机制等研究的基因捕获阳性克隆库．方法：Dra I线性化逆转录病毒基因捕获载体ROSAFARY后，与pIRES2-EGFP用脂质体共转染phoenix细胞，LacZ染色证明转染成功后收集病毒上清感染10T1／2细胞．经潮霉素筛选获得阳性克隆，为排除假阳性克隆用LacZ部分片段PCR进行鉴定．结果：ROSAFARY脂质体转染phoenix细胞后48h，GFP指示的转染效率约为20％～30％，LacZ染色有大约10％的阳性率．150mg／L潮霉素筛选病毒感染的10T1／2细胞，挑取药物抗性克隆，PCR鉴定后获得43个阳性克隆，LacZ染色5个为捕获基因高表达细胞克隆．结论：基因捕获技术建立非胚胎干细胞的克隆是可行的，成功建立的基因捕获阳性克隆库为应用基因捕获技术揭示成体干细胞分化及恶性转化分子机制奠定了基础．

Galectin-1与胃癌细胞阿帕替尼敏感性的关系及调控机制研究

目的探讨半乳糖凝集素1(Galectin-1)与胃癌细胞株SGC-7901对阿帕替尼敏感性的关系,以及可能的调控机制。方法转染Gal1-siRNA至SGC-7901细胞,并采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blotting验证干扰效果。另外设置空白对照组和阴性siRNA组。采用MTT法检测细胞对阿帕替尼的敏感性;Annexin V/PI双染法和DAPI法检测阿帕替尼对细胞凋亡活力的影响;Western blotting检测各组细胞中上皮间质转化相关蛋白E-cadherin、Vimentin,以及相关转录因子Snail、Twist、ZEB的表达。结果不同浓度阿帕替尼作用48 h,或25μmol/L阿帕替尼分别作用不同时间,Gal1-siRNA1组细胞增殖抑制率均高于空白对照组(P <0.05)。25μmol/L阿帕替尼处理48 h后,Gal1-siRNA1组细胞凋亡率高于空白对照组(P <0.05)。同时与空白对照组和阴性siRNA组比较,Gal1-siRNA1组细胞E-cadherin蛋白表达升高,而Vimentin和Snail蛋白表达降低(P <0.05)。结论通过siRNA干扰SGC7901细胞Galectin-1 mRNA和蛋白的表达后,细胞对阿帕替尼的敏感性增强,其作用机制可能与抑制上皮间质转化进程有关。

α1,3-半乳糖转移酶及其相关糖基转移酶的研究进展

糖基化作用是最重要的翻译后修饰之一。多种多样的半乳糖化反应使得生物体可以表达极其多样的寡糖结构。α1,3-半乳糖转移酶(GGTA1)、ABO血型抗原合成酶及异红细胞糖苷酯合成酶(iGb3 s)均催化半乳糖在α1,3糖苷键之间的转移。前两者合成的抗原在异种移植(Galα1,3-Gal抗原,简称αGal)和同种异基因移植(ABO抗原)的免疫排斥反应中发挥重要的作用。本综述主要讨论这些转移酶的特性、其合成的抗原及其在移植中的意义。

GM1神经节苷脂贮积症患儿临床与遗传学特点及文献复习

目的分析3例GM1神经节苷脂贮积症Ⅰ型患儿的临床、遗传学及生物信息学特征,并进行文献复习。方法对2020年1月至2022年12月于西安市儿童医院就诊的3例分别以“反复抽搐发作”“发育落后”“肢体松软”入院的患儿进行全外显子测序、β-半乳糖苷酶活性检测,利用MutaBind2、PyMOL模拟突变对蛋白理化性质、三维结构的影响。结果3例患儿均在婴儿期出现严重发育迟滞或倒退,继发癫痫,血碱性磷酸酶、谷氨酸氨基转移酶明显增高,β-半乳糖苷酶活性分别为1.59%、3.47%、1.96%,骨骼X线示腰椎前缘鸟嘴样改变,头颅磁共振成像示髓鞘形成不良。全外显子测序结果显示3例患儿均携带GLB1基因复合杂合变异,其中c.148T>C变异未见报道及收录,c.785G>T和c.1438A>G、c.304C>G变异仅收录1例。生信分析结果显示突变后蛋白的结合亲和力降低,分子间氢键破坏或与周围残基形成较强空间位阻,结合文献证据,推测突变可能影响蛋白的整体结构和稳定性,使酶活性下降。结论GM1神经节苷脂贮积症的诊断及分型需综合临床特征、外显子组测序及β-半乳糖苷酶活性检测,生信分析有助于预测突变对蛋白结构和功能的影响。

三七花中1个新的多烯炔型大环内酯

目的研究三七Panax notoginseng花的化学成分。方法采用65%乙醇水热回流提取,石油醚、醋酸乙酯与正丁醇萃取,运用大孔吸附树脂Diaion HP-20、硅胶、MCI gel CHP 20P、Sephadex LH-20等柱色谱及半制备液相色谱等方法进行分离纯化,根据化合物的理化性质和波谱数据进行结构鉴定,并对部分化合物进行肿瘤细胞毒和抗氧化活性评价。结果从三七花正丁醇部位分离得到11个化合物,包括大环内酯类1个、酚酸类2个、木脂素类3个、黄酮类5个,分别鉴定为(11Z,10R,17R)-17-乙烯基-10-羟基氧杂环十七烷-11-烯-13,15-二炔-2-酮(1)、反式对羟基肉桂酸(2)、3-O-对香豆酰基奎宁酸(3)、(-)-芝麻素(4)、2-甲氧基芝麻素(5)、ecbolin B(6)、槲皮素(7)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃木糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖苷(9)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖苷(10)、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖苷(11)。结论化合物1为新的多烯炔型大环内酯,命名为三七花大环内酯。化合物2~6、8为首次从人参属植物中分离得到,化合物2~9为首次从三七花中分离得到。化合物4对白血病HL-60细胞的体外肿瘤生长具有弱的抑制作用。化合物7~10表现出较强的清除DPPH自由基活性。

同时测定复方阿胶浆中间体中17种化学成分的定量核磁方法

目的建立定量核磁方法,同时测定复方阿胶浆(Compound E’jiao Jiang,CEJ)的药材提取液中多类成分的含量,为中间体的质量评价提供可靠的分析手段。方法采用水信号预饱和脉冲序列Noesygppr1d采集样品的1H-NMR图谱。通过文献调研、数据库检索以及加标实验的方式进行核磁谱峰归属。进一步确定各化合物的定量峰,采用内标法定量。开展方法学考察,考察项包括线性、精密度、稳定性、重复性、耐用性、准确度。另基于核磁共振氢谱的信噪比确定方法的检测限和定量限,并对3批中间体样本进行分析。结果共指认22种化合物,其中17种可同时定量分析,包括缬氨酸、丙氨酸、异亮氨酸、焦谷氨酸、γ-氨基丁酸5种氨基酸,乙酸根、富马酸根、丙酮酸根、琥珀酸根、甲酸根、乳酸6种小分子有机酸根,葡萄糖、果糖、半乳糖、蔗糖4种糖类以及尿苷、胆碱。线性考察结果得出相关系数均不小于0.9995,精密度考察结果显示,RSD均小于2.7%,重复性考察RSD均小于2.5%,耐用性及稳定性考察RSD均小于2.6%,加样回收实验得出平均回收率为90.0%~105.0%、RSD小于2.2%,分析值与参考值平均相对偏差小于4.0%。对3批样品进行定量分析,17种成分的测定结果均高于定量限,且满足线性范围。3批样品可定量部分占总固体含量的质量分数分别为71.09%、84.44%、70.09%。结论各方法学考察均满足要求;研究开发的定量核磁方法检测时间短、制样方式简单,能有效提高分析效率,为CEJ的生产过程物质转移规律研究打下基础。

外源性硫化氢减轻D-半乳糖诱导的亚急性衰老大鼠血管老化

本文旨在观察亚急性衰老大鼠血管壁结构和功能的改变,探讨硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对血管老化的影响。雄性SD大鼠40只,随机分为溶剂组、D-半乳糖组、NaHS(H2S的供体)低、中、高剂量组,每组8只。D-半乳糖组每日背部皮下注射125 mg/kg D-半乳糖,连续8周;溶剂组每日背部皮下注射等体积生理盐水;NaHS低、中、高剂量组每日背部皮下注射125 mg/kg D-半乳糖,同时分别按1、10、100μmol/kg腹腔注射NaHS,连续8周。HE和Masson染色法观察各组大鼠主动脉形态学改变;硫代巴比妥酸(TBA)法和黄嘌呤氧化酶法检测大鼠主动脉超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量以及抗超氧阴离子含量;生化方法测定大鼠血清H2S浓度的变化;酶联免疫法(ELISA)检测血浆血管紧张素II(AngII)浓度变化;免疫印迹法测定大鼠主动脉血管紧张素II型1类受体(AT1R)蛋白的表达。结果显示,与溶剂组相比,D-半乳糖组大鼠血清H2S的浓度降低(P<0.05);而给予NaHS处理后,NaHS各剂量组大鼠血清H2S的浓度较D-半乳糖组明显升高(P<0.05)。血清H2S浓度的增高能够改善D-半乳糖引起的亚急性衰老大鼠主动脉形态学的变化。HE染色结果中,溶剂组主动脉内膜较薄,结构完整,中膜平滑肌排列规则;D-半乳糖组主动脉内膜增厚、隆起,内皮细胞部分脱落,中膜明显增厚,平滑肌增生、紊乱;与D-半乳糖组相比,NaHS各剂量组内皮细胞脱落减少,平滑肌细胞增生减少。Masson染色结果表明:与溶剂组相比,D-半乳糖组胶原纤维增多,平滑肌细胞增生(P<0.05);与D-半乳糖组相比,NaHS各剂量组胶原纤维减少,平滑肌细胞增生减少(P<0.05)。ELISA检测结果显示:与溶剂组相比,D-半乳糖组大鼠血浆AngII浓度明显升高(P<0.05);而给予NaHS处理后,NaHS各剂量组大鼠血浆AngII浓度较D-半乳糖组明显降低(P<0.05)。与溶剂组相比,D-半乳糖组大鼠主动脉SOD活性下降、MDA含量升高、抗超氧阴离子含量降低(P<0.05);而给予NaHS处理后,血管组织氧化应激水平得到明显改善:与D-半乳糖组相比,NaHS各剂量组主动脉SOD活性升高、MDA含量降低、抗超氧阴离子含量升高(P<0.05)。免疫印迹法测定显示,与溶剂组相比,D-半乳糖组大鼠主动脉血管AT1R蛋白表达上调(P<0.05),给予NaHS处理能下调主动脉AT1R蛋白的表达。以上结果提示,外源性H2S能够改善亚急性衰老大鼠主动脉形态学变化,降低血浆AngII的浓度、下调主动脉AT1R蛋白的表达,提高血管组织抗氧化应激的能力,延缓血管老化的发生。

子宫内膜异位症诊断标志物的研究进展

子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)是一种好发于育龄期女性,具有恶性潜能的良性疾病,发病率约为10%。因该疾病起病隐匿,且只能通过腹腔镜和组织病理学等有创操作进行确诊,目前临床诊断上缺少敏感而特异的生物学指标,导致疾病的诊断及治疗延迟,严重影响女性的生活质量。因此,寻找无创的生物标志物对EMs的临床的诊断和治疗具有重大意义。研究发现患有EMs女性的血清、尿液及月经血等体液中存在一些诊断标志物,使用这些标志物诊断具有简便、快速且无创等优势,成为该病诊断的一个重要方向。

分析Gal-3、BRAFV600E基因突变及hTERT检测在PTC诊疗中的应用价值

目的分析半乳糖凝集素-3(Gal-3),鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体Bl(BRAF)V600E基因突变及端粒酶反转录酶(hTERT)检测在甲状腺乳头状癌(PTC)诊疗中的应用价值。方法收集86例手术治疗的PTC患者手术病理标本和临床资料,比较癌组织与癌旁组织Gal-3,hTERT表达及BRAFV600E突变情况,分析其与患者临床病理特征的关系,并分析癌组织Gal-3,hTERT表达及BRAFV600E突变阳性者与阴性者术后3年生存情况。结果癌组织Gal-3.hTERT阳性率及BRAFV600E突变率均高于癌旁组织(P<0.05)。癌组织Gal-3阳性率在不同临床病理特征患者间无显著差异(P〉0.05);癌组织hTERT阳性率及BRAFV600E突变率在不同性别、年龄、肿瘤大小间无显著差异(P〉0.05),但伴侵犯包膜、高肿瘤分期、伴淋巴结转移者癌组织hTERT阳性率及BRAFV600E突变率较高(P<0.05)。癌组织Gal-3.hTERT表达及BRAFV600E突变阳性者与阴性者间生存率无显著差异(P〉0.05)。结论检测Gal-3.hTERT阳性及BRAFV600E突变情况对PTC诊疗具有重要作用,可辅助评估PTC患者临床病理特征,预测肿瘤的发生发展,但对预后的影响仍需进一步探讨。

系统性红斑狼疮初发患者外周血T细胞免疫球蛋白及黏蛋白域蛋白－3及其配体半乳糖凝集素－9表达水平和意义

目的通过检测T细胞免疫球蛋白及黏蛋白域蛋白（TIM）-3及其配体半乳糖凝集素-9在系统性红斑狼疮（SLE）初发患者外周血的表达水平，探讨其在SLE发病中的可能作用。方法选取SLE初发患者33例，健康对照组26名，采用流式细胞术检测2组CD4＋TIM-3＋、CD8＋TIM-3＋细胞表达水平；实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）技术比较2组外周血单个核细胞（PBMCs）半乳糖凝集素-9mRNA表达水平；同时记录SLE组SLE疾病活动指数（SLEDAI）、补体c3水平和外周血淋巴细胞计数。两独立样本比较采用Mann—WhitnevU检验；相关关系采用Spearman等级相关分析。结果SLE组CD4CFIM-3＋、CD8＋TIM-3＋细胞比率显著高于对照组（P〈0．01）；其中CD4＋TIM-3＋、CD8q＇IM-3＋细胞数目与SLEDAI呈正相关（r=0．517，P〈0．01；r=0．400，P〈0．05）；与补体C3水平呈负相关（r-0．487，P〈0．05；r=-0．395，P〈0．05）。SLE组PBMCs半乳糖凝集素-9mRNA表达较对照组显著上调（P〈0．05）。结论TIM-3-半乳糖凝集素-9通路可能参与了SLET细胞免疫调节，并与疾病活动眭相关。

二苯乙烯苷可抑制中波紫外线诱导的人皮肤成纤维细胞光老化

目的:研究二苯乙烯苷(TSG)对紫外线B(UVB)诱导的人皮肤成纤维细胞(HSF)应激性提早衰老的作用及可能的机制。方法:UVB小剂量、多次照射HSF,每次照射完毕后分别用0.02、0.10、0.50 mmol/L浓度的TSG处理。实验分为6组:空白对照组、模型对照组、UVB+0.02 mmol/L TSG组、UVB+0.10 mmol/L TSG组、UVB+0.50 mmol/L TSG组、TSG对照组。采用细胞计数法(CCK-8)检测细胞增殖活性;细胞化学染色法检测衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)表达;TBA法、WST-1法测定细胞丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;ELISA法测定细胞上清液中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)的含量变化。结果:与空白对照组比较,模型对照组细胞增殖活性减弱(P<0.05),SA-β-gal染色呈强阳性,细胞裂解液中SOD活性减弱、MDA含量增加,MMP-1浓度升高(P<0.05或P<0.01)。与模型对照组比较,UVB+各浓度TSG组细胞增殖活性改善(均P<0.05),SA-β-gal染色阳性率下降,细胞裂解液中SOD活性增强、MDA含量减少,MMP-1浓度减小(P<0.05或P<0.01)。结论:TSG可以在一定程度上抑制UVB诱导的HSF应激性提早衰老,该作用可能与改善氧化应激、抑制MMP-1高表达有关。

常吃四种蔬菜 让你保持年轻

1．苦瓜 首先，苦瓜含有较多的维生素C、维生素B1以及生物碱；其次，苦瓜含有的半乳糖醛酸和果胶也较多。苦瓜中的苦味来源于生物碱中的奎宁。这些营养物质具有促进食欲、利尿、活血、消炎、退热和提神醒脑等作用。现代科学研究发现，苦瓜中的“多肽-P”物质是一种类胰岛素，有降低血糖的作用。西安医科大学已从苦瓜中提取出口服类胰岛素。

食后让你年轻的蔬菜

苦瓜 苦瓜以其苦味而博得人们的特别喜爱。苦瓜富含维生素C、维生素B1以及生物碱，还含有半乳糖醛酸和果胶。苦瓜中的苦味来源于生物碱中的奎宁。这些营养物质具有促进食欲、利尿、活血、消炎、退热和提神醒脑等作用。现代科学研究发现，苦瓜中的多肽-P是一种类胰岛素物质，有降低血糖的作用，西安医科大学已从苦瓜中提取出口服类胰岛素。美国科学家还发现，苦瓜中含有一种蛋白脂类物质，具有刺激和增强动物体内免疫细胞吞噬癌细胞的能力，

GM1神经节苷脂贮积症一例临床特点及GLB1基因突变分析

目的探讨GM1神经节苷脂贮积症的临床表现及β-半乳糖苷酶基因(GLB1)突变特点。方法回顾分析1例2018年3月于郑州大学附属儿童医院神经内科就诊的,经酶学及基因检测诊断的GM1神经节苷脂贮积症患儿的临床资料,并复习相关文献。结果男性患儿,4岁1个月,主要临床表现为精神运动发育倒退;β-半乳糖苷酶活力低(8.0 nmol·g^-1·min^-1)。目标序列捕获和二代测序检测发现患儿GLB1基因内含子区域存在两处杂合突变:c.458-2A(IVS4)>G和c.1068+5G(IVS10)>A,均为剪切位点突变;Sanger测序验证结果显示c.1068+5G(IVS10)>A突变来源于患儿母亲,c.458-2A(IVS4)>G为新发变异,患儿该基因为复合杂合突变。结论GM1神经节苷脂贮积症是一种罕见的神经退行性疾病,酶活性检测及基因检测有助明确诊断。

IgA肾病患者C1GALT1C1基因的体细胞突变筛查

目的 探讨IgA肾病（IgAN）患者β1,3半乳糖转移酶的分子伴侣Cosme编码基因C1GALT1C1基因体细胞突变情况。方法 27例IgA肾病患者及19例正常健康对照作为研究对象。提取研究对象外周血基因组DNA,扩增C1GALT1C1基因的编码区,采用PCR产物直接测序的方法进行突变筛查。然后,分离其中15例IgA肾病患者及7例健康男性对照的外周血B淋巴细胞,提取DNA。对C1GALT1C1基因编码区进行扩增,PCR产物进行克隆,各挑选平均8～10个克隆进行体细胞突变筛查。结果 46例个体全血基因组DNA的PCR扩增产物测序发现,2例患者及1例健康对照存在外显子T393A变异,次等位基因频率（MAF）为6．9%[SNP数据库（dbSNP）报告为9．5%]。B淋巴细胞DNA序列分析显示,在22例个体（15例IgA肾病患者,7例健康对照）送检的总共202个克隆中,未发现新的突变和多态性位点。结论 C1GALT1C1基因编码区T393A多态位点在本研究人群中为唯一发现的多态性位点,其次等位基因频率（MAF）较既往报道略低。本研究尚未发现IgA肾病患者B淋巴细胞存在体细胞突变。