应用Hoefer GE200 Gel Eluter纯化重组的LTB

目的 纯化基因重组表达的大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位 (LTB)。方法 采用HoeferGE 2 0 0GelEluter从聚丙烯酰胺凝胶中回收LTB蛋白 ,SDS PAGE ,HPLC分析其纯度 ,western blot分析其免疫学性质。结果 电洗脱 1次可获得 30 0 μg重组蛋白 ,纯化蛋白经Tricine SDS PAGE电泳表现为单一蛋白质带 ,HPLC检测纯度为 99.4 6 % ,免疫印迹证实其保持有免疫学活性。结论 该系统纯化LTB蛋白操作方便、快捷 ,所得蛋白纯度好。