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GeM_(10)体外对PHA诱发的肿瘤病人外周血单个核细胞产生IL-2的影响 被引量:1
1
作者 陈静宏 陈高平 +2 位作者 苏敏 魏西秦 张健 《微量元素与健康研究》 CAS 1999年第1期13-15,共3页
GeM10是一种抗癌生物碱-金属配位药物,动物实验发现GeM10对实验肿瘤S180肉瘤有抑制作用,能明显延长艾氏腹水癌荷瘤小鼠的存活时间,封闭荷瘤鼠体单核巨噬细胞系统,GeM10的抑癌作用解除。观察了GeM10对PH... GeM10是一种抗癌生物碱-金属配位药物,动物实验发现GeM10对实验肿瘤S180肉瘤有抑制作用,能明显延长艾氏腹水癌荷瘤小鼠的存活时间,封闭荷瘤鼠体单核巨噬细胞系统,GeM10的抑癌作用解除。观察了GeM10对PHA诱发的肿瘤患者外周血单个核细胞(PBMC)产生白介素-2(IL-2)能力的影响。结果发现GeM10能提高肿瘤患者外周血单个核细胞产生白细胞介素-2的能力(对照组:1.792±0.823;GeM1060μg/ml2.965±1.183;P<0.05)。提示:GeM10的抗癌作用与其刺激机体免疫活性细胞。 展开更多
关键词 GeM10 IL-2 肿瘤 金属配位药物 单个核细胞
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含能黏合剂聚2,2-二硝基丁基丙烯酸酯的合成与性能 被引量:3
2
作者 张公正 李海华 +1 位作者 黄云霞 赵姗 《北京理工大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第6期737-740,共4页
以1-硝基丙烷为原料,经过氧化硝化和羟甲基化反应合成了2,2-二硝基-1-丁醇.2,2-二硝基丁醇与丙烯酸进行酯化反应得到2,2-二硝基丁基丙烯酸酯.以2,2-二硝基丁基丙烯酸酯为单体,偶氮二异丁腈为引发剂,甲苯为溶剂,按自由基聚合机理,合成了... 以1-硝基丙烷为原料,经过氧化硝化和羟甲基化反应合成了2,2-二硝基-1-丁醇.2,2-二硝基丁醇与丙烯酸进行酯化反应得到2,2-二硝基丁基丙烯酸酯.以2,2-二硝基丁基丙烯酸酯为单体,偶氮二异丁腈为引发剂,甲苯为溶剂,按自由基聚合机理,合成了含能黏合剂聚2,2-二硝基丁基丙烯酸酯,确定了2,2-二硝基丁基丙烯酸酯的均聚动力学.用FTIR,1 HNMR,TG,DSC等方法表征了聚2,2-二硝基丁基丙烯酸酯的结构和热性能.结果表明,2,2-二硝基丁基丙烯酸酯均聚速率方程为Rp=k[M1].27[I]0.63,说明链终止为单基终止和双基终止并存.聚2,2-二硝基丁基丙烯酸酯热分解峰温为260℃,质量损失21%. 展开更多
关键词 含能黏合剂 偕二硝基化合物 自由基聚合 2 2-二硝基丁基丙烯酸酯均聚物
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曲妥珠单抗联合GEM、CAP化疗对HER-2阳性晚期乳腺癌患者血清T细胞亚群、TPS水平及生存质量的影响 被引量:19
3
作者 沈春燕 金晓新 王淑玲 《中国医药导报》 CAS 2019年第19期93-97,共5页
目的探讨曲妥珠单抗联合吉西他滨(GEM)、卡培他滨(CAP)化疗在人类表皮生长因子受体2(HER-2)阳性晚期乳腺癌患者中的应用效果。方法选取武警后勤学院附属医院2010年8月~2015年4月收治的HER-2阳性晚期乳腺癌患者80例,按照随机数字表法分组... 目的探讨曲妥珠单抗联合吉西他滨(GEM)、卡培他滨(CAP)化疗在人类表皮生长因子受体2(HER-2)阳性晚期乳腺癌患者中的应用效果。方法选取武警后勤学院附属医院2010年8月~2015年4月收治的HER-2阳性晚期乳腺癌患者80例,按照随机数字表法分组,对照组40例采用GEM、CAP化疗治疗,观察组40例在对照组基础上加用曲妥珠单抗治疗。比较两组疾病控制情况及治疗前后血清肿瘤标志物各指标[血清组织多肽特异性抗原(TPS)、癌相关糖蛋白抗原153(CA153)]水平、血清T细胞亚群(血清CD^3+、CD^4+、CD^8+)水平及生存质量各维度(角色功能、情绪功能、认知功能、躯体功能、社会功能)评分,并统计两组毒副作用发生情况及生存率。结果观察组临床疗效优于对照组,且观察组临床控制率高于对照组(P <0.05)。治疗2个月后,两组血清TPS、CA153水平均较治疗前降低,且观察组较对照组降低更明显(P <0.05)。两组治疗2个月后血清CD^3+、CD^4+水平均较治疗前降低,但观察组高于对照组(P <0.05);两组治疗前后血清CD^8+水平比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。两组白细胞下降、恶心呕吐、血小板下降发生率比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。治疗2个月后,两组认知功能、躯体功能、角色功能、情绪功能及社会功能评分均高于治疗前,且观察组高于对照组(P <0.05)。两组1、2、3年生存率比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论曲妥珠单抗联合GEM、CAP化疗可降低HER-2阳性晚期乳腺癌患者血清肿瘤标志物水平,提高疾病临床控制率,对患者机体免疫功能损伤小,预后生存率高,毒副作用小,可提高患者生存质量。 展开更多
关键词 晚期乳腺癌 HER-2阳性 曲妥珠单抗 GEM CAP 血清T细胞亚群 TPS水平 生存质量
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2-叠氮基-1,1-二硝基乙基取代苯衍生物的合成 被引量:1
4
作者 阎红 管晓培 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1998年第2期114-118,共5页
详细研究了2-叠氮基-1,1-二硝基乙基取代苯衍生物的合成方法。由苯基二硝基甲烷钾盐经羟甲基化,磺酰酯化和叠氮化得到目标化合物:3-硝基-(2-叠氮基-1,1-二硝基乙基)苯(4b),4-硝基-(2-叠氮基-1,1-二硝基乙基)苯(4c),m-二(2-叠氮基-1,1-... 详细研究了2-叠氮基-1,1-二硝基乙基取代苯衍生物的合成方法。由苯基二硝基甲烷钾盐经羟甲基化,磺酰酯化和叠氮化得到目标化合物:3-硝基-(2-叠氮基-1,1-二硝基乙基)苯(4b),4-硝基-(2-叠氮基-1,1-二硝基乙基)苯(4c),m-二(2-叠氮基-1,1-二硝基乙基)苯(10)和p-二(2-叠氮基-1,1-二硝基乙基)苯(15)。 展开更多
关键词 叠氮化合物 叠氮基 二硝基 乙基 苯衍生物 合成
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Ni-ZrO_(2)金属陶瓷电极材料的导电性能研究 被引量:4
5
作者 李建朝 齐素慈 许继芳 《中国陶瓷》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期9-14,共6页
为研究Ni-ZrO_(2)金属陶瓷电极材料导电性能,基于通用有效介质(GEM)方程建立Ni-ZrO_(2)金属陶瓷的电导率计算模型,通过实验研究和模型计算相结合,分析金属陶瓷两相组分、温度和相对密度对电导率的影响。结果表明,基于GEM方程的Ni-ZrO_(2... 为研究Ni-ZrO_(2)金属陶瓷电极材料导电性能,基于通用有效介质(GEM)方程建立Ni-ZrO_(2)金属陶瓷的电导率计算模型,通过实验研究和模型计算相结合,分析金属陶瓷两相组分、温度和相对密度对电导率的影响。结果表明,基于GEM方程的Ni-ZrO_(2)金属陶瓷1000℃时电导率模型中Ni金属相的逾渗阈值f_(c)为0.689,临界指数t为1.388。模型计算的电导率值与实验测量结果基本吻合。当Ni金属相的体积分数>40%时,金属陶瓷电导率随着温度的升高而,显著下降,呈现电子导电的温阻特性;当Ni金属相的体积分数<30%时,金属陶瓷电导率随着温度的升高而显著升高,呈现离子导电的温阻特性;随着烧结试样相对密度的增加和孔隙率的下降,金属陶瓷相对电导率逐渐增大。 展开更多
关键词 Ni-ZrO_(2)金属陶瓷 电导率 温阻特性 GEM方程 相对密度
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2-取代-5,5-二硝基嘧啶-4,6-二酮的合成和反应 被引量:6
6
作者 蔡华强 舒远杰 +1 位作者 黄辉 程碧波 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第6期705-711,共7页
研究了2-取代嘧啶-4,6-二酮的硝化反应,产物为2-取代-5,5-二硝基嘧啶-4,6-二酮(3),收率>80%,3与亲核试剂反应形成开环产物.2-位取代基为烷基时,嘧啶环5-位和侧链的α-位都发生反应,当取代基为甲基时,硝化产物为2-(二硝基亚甲基)-5,5... 研究了2-取代嘧啶-4,6-二酮的硝化反应,产物为2-取代-5,5-二硝基嘧啶-4,6-二酮(3),收率>80%,3与亲核试剂反应形成开环产物.2-位取代基为烷基时,嘧啶环5-位和侧链的α-位都发生反应,当取代基为甲基时,硝化产物为2-(二硝基亚甲基)-5,5-二硝基嘧啶-4,6-二酮(1),1的水解产物为1,1-二氨基-2,2-硝基乙烯(FOX-7)和二硝基甲烷(2).2-位取代基为羟基时,硝化产物为5,5-二硝基巴比妥酸(7b),7b水解可制得偕二硝基乙酰基脲(9b),9b与KOH作用生成偕二硝基乙酰基脲钾盐(10b)和二硝基甲烷钾盐(11).2-位取代基为氨基时,硝化开环生成偕二硝基乙酰基胍(9a),9a与KOH作用生成偕二硝基乙酰基胍钾盐(10a)和11.当2-位无取代基时,硝化产物无法分离,结构推测为7c.考察了亲核试剂对FOX-7收率的影响并对FOX-7的三种合成方法进行了评价,对反应机理进行了探讨. 展开更多
关键词 硝基嘧啶 二酮 FOX-7 亲核试剂 硝基甲烷 二硝基 取代基 取代嘧啶 硝化反应 水解产物 硝基乙烯 巴比妥酸 合成方法 反应机理 酰基脲 KOH 乙酰基 嘧啶环 亚甲基 二氨基 钾盐 收率 开环 烷基 侧链
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GEM多频电磁在吉林市牤牛河泥砂分布测量的初步应用 被引量:1
7
作者 丁志强 李飞 +2 位作者 王浩 刘裕 黄威 《工程地球物理学报》 2023年第2期143-152,共10页
通过对GEM-2多频电磁仪方法技术介绍和测试分析,首次使用多频电磁仪进行泥砂分布研究。采用425~63 025 Hz按指数增加的5个频率,以平均线距60 m完成吉林市境内牤牛河棋盘村-江密峰镇一带垂直河道测线477条测量,涉及河道长约28.11 km,覆... 通过对GEM-2多频电磁仪方法技术介绍和测试分析,首次使用多频电磁仪进行泥砂分布研究。采用425~63 025 Hz按指数增加的5个频率,以平均线距60 m完成吉林市境内牤牛河棋盘村-江密峰镇一带垂直河道测线477条测量,涉及河道长约28.11 km,覆盖面积约1.17 km2。通过不同频率同相、正交、视电导率、视电阻率等值线平面图分析,不同频率反应不同的深度,能有效识别泥砂之间的电阻率差异。根据测量的多频数据进行了深度换算,结合一维反演推断含砂层在2 m、6 m和10 m左右,分别对应高频63 025 Hz、中频5 175 Hz和低频425 Hz探测的深度;再结合收集的资料和实地勘查,进行了区域地质及电性特征分析,推测河道沉积模型或第四系覆盖层模型,从而对牤牛河流域泥砂分布的位置及深度进行了初步划分,可为流域内土壤侵蚀防治、防洪除涝、泥沙治理、生态环境保护等提供相关的基础资料和参考。 展开更多
关键词 gem-2多频电磁测量 牤牛河 泥砂分布
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1,2-丙二烯型化合物的合成 被引量:2
8
作者 吴阳锋 郑卫新 +1 位作者 郑芬芬 严微微 《杭州师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2010年第2期113-117,共5页
1,2-丙二烯衍生物因含有累积双键在过渡金属参与的反应中显示出独具魅力的反应活性.文章以烯烃为原料,采取改进的偕二溴环丙烷脱溴-卡宾重排的方法合成系列1,2-丙二烯.该方法具有产率高、操作简便、反应条件温和、副反应少等优点.化合物... 1,2-丙二烯衍生物因含有累积双键在过渡金属参与的反应中显示出独具魅力的反应活性.文章以烯烃为原料,采取改进的偕二溴环丙烷脱溴-卡宾重排的方法合成系列1,2-丙二烯.该方法具有产率高、操作简便、反应条件温和、副反应少等优点.化合物(3)经IR、1HNMR、13CNMR及MS确证. 展开更多
关键词 1 2-丙二烯 偕二溴环丙烷 卡宾重排 合成
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西夏陵陪葬墓的地球物理考古勘探研究 被引量:8
9
作者 林金鑫 田钢 石战结 《工程勘察》 2014年第7期87-93,共7页
为了解西夏陵地下陪葬墓的空间分布信息,需要进行相应的考古调查研究。考虑对遗址的保护,采用了无损的地球物理方法进行研究。单种地球物理方法具有多解性等因素的限制,故使用了多种地球物理方法,包括磁法、电磁法(GEM-2)、探地雷达。... 为了解西夏陵地下陪葬墓的空间分布信息,需要进行相应的考古调查研究。考虑对遗址的保护,采用了无损的地球物理方法进行研究。单种地球物理方法具有多解性等因素的限制,故使用了多种地球物理方法,包括磁法、电磁法(GEM-2)、探地雷达。首先分别对每种方法展开独立研究,而后通过综合分析以获取最终的探测结果。利用磁法和GEM-2,可以快速获取地下介质的平面分布信息,但是深度信息有限。探地雷达则不仅可以提供平面分布信息,还可以提供较为准确的深度信息。上述三种地球物理方法的探测结果表明所测位置地下存在着陪葬墓,且其在空间上由不同部分组成如墓室、墓塚、墓道等。研究结果表明在西夏王陵进行无损的地球物理考古调查是可行且具有较好效果的。 展开更多
关键词 西夏王陵 地球物理考古 磁法 gem-2 探地雷达
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三氧化二砷联合吉西他滨和地塞米松治疗难治及复发性非霍奇金淋巴瘤的观察
10
作者 郭子文 许晓军 +3 位作者 叶永斌 邱大发 何慧清 黄贵年 《黑龙江医药》 CAS 2019年第4期779-782,共4页
目的:观察三氧化二砷(As2 O3)联合吉西他滨(GEM)和地塞米松治疗难治性和复发性非霍金淋巴瘤(non-hodgkin's lymphoma,NHL)的疗效.方法:收集15例难治性和复发性非霍金淋巴瘤患者,给予As2 O3、吉西他滨、地塞米松、Vit C等治疗,4周为... 目的:观察三氧化二砷(As2 O3)联合吉西他滨(GEM)和地塞米松治疗难治性和复发性非霍金淋巴瘤(non-hodgkin's lymphoma,NHL)的疗效.方法:收集15例难治性和复发性非霍金淋巴瘤患者,给予As2 O3、吉西他滨、地塞米松、Vit C等治疗,4周为一个周期.结果:15例接受化疗的患者,完全缓解(CR)2例,部分缓解(PR)11例,总有效率(CR+PR)为86.67%,肿瘤中位进展时间15.7个月,1、2和3年生存率分别为73.33%、46.67%和20.00%.治疗过程中最常见的不良反应为骨髓抑制,其他常见的非血液学不良反应包括消化道反应、感染和肝肾功能异常,对症处理后均可缓解.结论:As2 O3联合GEM和地塞米松方案治疗难治性和复发性NHL有效率较高,有较长的生存期,不良反应轻微,患者耐受性较好,可能为一较好的低毒高效的桥接方案. 展开更多
关键词 非霍奇金淋巴瘤 三氧化二砷 吉西他滨 地塞米松
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gem-Dimethyl-bearing C-Glucosides as Sodium-glucose Co-transporter 2 (SGLT2) Inhibitors 被引量:2
11
作者 Shi, Yongheng Zhao, Guilong +5 位作者 Lou, Yuanyuan Wang, Yuli Shao, Hua Liu, Wei Xu, Weiren Tang, Lida 《Chinese Journal of Chemistry》 SCIE CAS CSCD 2011年第6期1192-1198,共7页
Three novel gem-dimethyl C-glucosides were designed as sodium-glucose co-transporter 2 (SGLT2) inhibitors, and their syntheses started from D-glucose and three 2-substituted-5-bromobenzoic acids were achieved via a ... Three novel gem-dimethyl C-glucosides were designed as sodium-glucose co-transporter 2 (SGLT2) inhibitors, and their syntheses started from D-glucose and three 2-substituted-5-bromobenzoic acids were achieved via a facile 8-step protocol, with the key step being anhydrous aluminum chloride-catalyzed Friedel-Crafts alkylation of tertiary alcohols and phenetol. These three SGLT2 inhibitors were evaluated in vivo with a mice oral glucose tolerance test (OGTT), and the anti-hyperglycemic activities of all these three compounds were comparable with that of the positive control Dapagliflozin. 展开更多
关键词 sodium-glucose co-transporter 2 (SGLT2 gem-dimethyl synthesis Friedel-Crafts alkylation oral glucose tolerance test (OGTT)
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Synthesis of Novel gem-Difluoromethylene-containing 1,2,3-Triazoles via Click Reaction
12
作者 赵雯雯 李慧 +1 位作者 张建 曹松 《Chinese Journal of Chemistry》 SCIE CAS CSCD 2011年第12期2763-2768,共6页
Seventeen novel gem-difluoromethylene-containing 1,2,3-triazoles were synthesized by the click reaction of ethyl 2-azido-2,2-difluoroacetate and terminal alkynes in the presence of 10 mol% CuI.
关键词 gem-difluoromethylene-containing 1 2 3-triazoles click reaction ethyl 2-azido-2 2-difluoroacetate CuI
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基于微观结构分形表征的钼-氧化锆导电导热性能
13
作者 刘爽爽 齐素慈 +2 位作者 曹学文 武笑宇 王红光 《有色金属工程》 CAS 北大核心 2022年第11期15-22,共8页
金属陶瓷物理性能与材料组分和空间组织结构密切相关,其组成相的形态分布具有分形特征。基于渗流理论和分形理论,通过对材料微观结构图像的二值化处理进行导通相分形维数计算,建立分形维数与导通相微观形貌、渗流临界指数之间的定量表征... 金属陶瓷物理性能与材料组分和空间组织结构密切相关,其组成相的形态分布具有分形特征。基于渗流理论和分形理论,通过对材料微观结构图像的二值化处理进行导通相分形维数计算,建立分形维数与导通相微观形貌、渗流临界指数之间的定量表征,研究Mo-ZrO_(2)金属陶瓷全组分范围内材料微观结构与电导率和热导率之间的关系。结果表明:导通相面积分形维数随着Mo体积分数的增加而增加,电导率与分形维数遵循渗流转变特征。采用通用有效介质(GEM)方程建立基于导通相分形维数的金属陶瓷电导率和热导率模型,实现材料微观组织定量分析结果与金属陶瓷的渗流模型相结合,有效预测材料宏观物理性质的梯度变化。 展开更多
关键词 Mo-ZrO_(2)金属陶瓷 分形维数 电导率 热导率 GEM方程
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6-溴代呋喃[2,3-d]嘧啶双环核苷的合成新方法研究 被引量:1
14
作者 范学森 李培源 +2 位作者 李坤 张新迎 赵婉 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2014年第5期999-1005,共7页
6-溴代呋喃[2,3-d]嘧啶双环核苷是合成具有显著抗病毒活性的呋喃并嘧啶双环核苷衍生物的重要中间体.该类化合物的文献制备方法合成步骤多,并需使用钯配合物作催化剂.以易得的5-甲酰基嘧啶核苷为原料,先经与四溴化碳缩合得5-(2,2-二溴乙... 6-溴代呋喃[2,3-d]嘧啶双环核苷是合成具有显著抗病毒活性的呋喃并嘧啶双环核苷衍生物的重要中间体.该类化合物的文献制备方法合成步骤多,并需使用钯配合物作催化剂.以易得的5-甲酰基嘧啶核苷为原料,先经与四溴化碳缩合得5-(2,2-二溴乙烯基)嘧啶核苷类似物,然后在碘化亚铜催化下发生环化反应生成目标产物,不仅缩短了合成路线,而且避免了贵金属试剂的使用,是一种经济实用的新方法. 展开更多
关键词 6-溴代呋喃[2 3-d]嘧啶双环核苷 偕二溴烯烃 碘化亚铜
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SGLT2抑制剂偕二甲基化Canagliflozin的设计、合成与活性研究
15
作者 尹玲 王玉丽 +2 位作者 魏群超 王影影 赵桂龙 《化学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期730-734,共5页
由1-(5-溴-2-甲基苯基)-1-甲基乙醇(1)通过6步反应,制得了钠-葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT2)抑制剂偕二甲基化canagliflozin,总产率38.1%,其中关键的一步是叔醇和噻吩发生的傅-克烷基化反应。利用1H NMR、13C NMR和HR-MS表征了最终产物的... 由1-(5-溴-2-甲基苯基)-1-甲基乙醇(1)通过6步反应,制得了钠-葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT2)抑制剂偕二甲基化canagliflozin,总产率38.1%,其中关键的一步是叔醇和噻吩发生的傅-克烷基化反应。利用1H NMR、13C NMR和HR-MS表征了最终产物的结构。最终产物利用大鼠尿糖排泄试验(UGE)进行了活性评价,结果显示合成的化合物具有一定的尿糖诱导能力,但不如母体化合物canagliflozin活性高。 展开更多
关键词 SGLT2抑制剂 偕二甲基 合成 傅-克烷基化反应 尿糖排泄试验
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岩溶碳汇对气候和土地利用变化的响应研究--以湖北省恩施州为例
16
作者 李万阳 宋鄂平 +3 位作者 潘炳臣 梁小龙 李陈 王钰鑫 《湖北民族大学学报(自然科学版)》 CAS 2024年第3期419-425,434,共8页
为研究气候和土地利用变化情况下岩溶碳汇通量的演变趋势及响应,基于CO_(2)通量全球侵蚀模型(global erosion model for CO_(2)fluxes,GEM-CO_(2))计算2000—2020年恩施州岩溶碳汇通量的时空动态变化,并分析气候和土地利用变化对岩溶碳... 为研究气候和土地利用变化情况下岩溶碳汇通量的演变趋势及响应,基于CO_(2)通量全球侵蚀模型(global erosion model for CO_(2)fluxes,GEM-CO_(2))计算2000—2020年恩施州岩溶碳汇通量的时空动态变化,并分析气候和土地利用变化对岩溶碳汇通量的影响。结果表明:2000—2020年恩施州岩溶碳汇通量时空变化差异明显,在时间上呈现稳步上升的趋势,在空间上呈现“南高北低”的分布格局,岩溶碳汇通量多年平均值为3.87×10^(5) t/a;降水量与岩溶碳汇通量的变化为正相关,蒸发量与岩溶碳汇通量的变化为负相关;岩溶碳汇通量对不同时期土地利用变化的响应有所不同。该研究证实了碳酸盐岩风化作用所消耗的CO_(2)参与了全球碳循环,同时可为土地合理利用和固碳增汇措施的实施提供科学依据。 展开更多
关键词 岩溶作用 碳汇 gem-CO 2 土地利用 碳酸盐岩 时空演变 恩施州
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SARS-CoV-2细菌样颗粒的构建与鉴定
17
作者 魏世萌 毕津豪 +8 位作者 李恩涛 焦翠翠 闫飞虎 王振山 陈祥 杨松涛 彭帅 赵永坤 夏咸柱 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2022年第3期254-259,265,共7页
目的 表达新型冠状病毒(SARS-CoV-2)RBD与乳酸乳球菌锚钩(protein anchor,PA)基因编码的融合蛋白,使其高密度展示在GEM颗粒表面,制备SARS-CoV-2细菌样颗粒并进行鉴定。方法 选取SARS-CoV-2武汉分离株刺突蛋白(S)基因序列,利用昆虫细胞-... 目的 表达新型冠状病毒(SARS-CoV-2)RBD与乳酸乳球菌锚钩(protein anchor,PA)基因编码的融合蛋白,使其高密度展示在GEM颗粒表面,制备SARS-CoV-2细菌样颗粒并进行鉴定。方法 选取SARS-CoV-2武汉分离株刺突蛋白(S)基因序列,利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统构建带有SARS-CoV-2 S蛋白受体结合域(Receptor Binding Domain,RBD)的重组杆状病毒rBV-RBD-linker-PA3,通过感染昆虫细胞Sf9制备融合蛋白RBD-linker-PA3,使其与GEM(Gram Positive Enhancer Matrix)技术颗粒化的乳酸乳球菌MG136结合形成细菌样颗粒(Bacterium-like particies,BLPs) GEM-RLP3。结果 成功合成Linker-PA3(720 bp)和RBD-linker(687 bp)基因片段,并获得转移杆粒DNA,基因组PCR鉴定显示重组杆状病毒构建成功,通过细菌样颗粒间接免疫荧光试验可观察到RBD-GEM的颗粒状绿色荧光信号,表明融合蛋白成功展示在GEM颗粒的表面,SDS-PAGE及Western blot结果表明,成功表达可溶性融合蛋白RBD-linker-PA3并被展示在GEM颗粒表面。结论 成功制备SARS-CoV-2细菌样颗粒,利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统制备SARS-CoV-2 RBD真核蛋白,配合锚钩蛋白利用柔性Linker将RBD高密度的展示在GEM颗粒表面,为新型疫苗的开发提供了新思路。 展开更多
关键词 新型冠状病毒 细菌样颗粒 细菌表面展示系统 GEM
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