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Reinforcing Artificial Neural Networks through Traditional Machine Learning Algorithms for Robust Classification of Cancer
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作者 Muhammad Hammad Waseem Malik Sajjad Ahmed Nadeem +3 位作者 Ishtiaq Rasool Khan Seong-O-Shim Wajid Aziz Usman Habib 《Computers, Materials & Continua》 SCIE EI 2023年第5期4293-4315,共23页
Machine Learning(ML)-based prediction and classification systems employ data and learning algorithms to forecast target values.However,improving predictive accuracy is a crucial step for informed decision-making.In th... Machine Learning(ML)-based prediction and classification systems employ data and learning algorithms to forecast target values.However,improving predictive accuracy is a crucial step for informed decision-making.In the healthcare domain,data are available in the form of genetic profiles and clinical characteristics to build prediction models for complex tasks like cancer detection or diagnosis.Among ML algorithms,Artificial Neural Networks(ANNs)are considered the most suitable framework for many classification tasks.The network weights and the activation functions are the two crucial elements in the learning process of an ANN.These weights affect the prediction ability and the convergence efficiency of the network.In traditional settings,ANNs assign random weights to the inputs.This research aims to develop a learning system for reliable cancer prediction by initializing more realistic weights computed using a supervised setting instead of random weights.The proposed learning system uses hybrid and traditional machine learning techniques such as Support Vector Machine(SVM),Linear Discriminant Analysis(LDA),Random Forest(RF),k-Nearest Neighbour(kNN),and ANN to achieve better accuracy in colon and breast cancer classification.This system computes the confusion matrix-based metrics for traditional and proposed frameworks.The proposed framework attains the highest accuracy of 89.24 percent using the colon cancer dataset and 72.20 percent using the breast cancer dataset,which outperforms the other models.The results show that the proposed learning system has higher predictive accuracies than conventional classifiers for each dataset,overcoming previous research limitations.Moreover,the proposed framework is of use to predict and classify cancer patients accurately.Consequently,this will facilitate the effective management of cancer patients. 展开更多
关键词 ANN decision support systems gene-expression data hybrid classification machine learning predictive analytics
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周围神经损伤后Tropic 1808基因表达蛋白的免疫组织化学研究 被引量:8
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作者 陈雪 张沛云 +1 位作者 王晓冬 吴坚 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期234-239,共6页
目的 研究Tropic 180 8基因表达蛋白在受损大鼠坐骨神经中的表达与分布。 方法 用酶联间接法和双重免疫荧光法进行免疫组织化学染色。并通过计算机图像处理技术 ,测量阳性区域的强度与面积。 结果 损伤神经的近侧端和远侧端中施万... 目的 研究Tropic 180 8基因表达蛋白在受损大鼠坐骨神经中的表达与分布。 方法 用酶联间接法和双重免疫荧光法进行免疫组织化学染色。并通过计算机图像处理技术 ,测量阳性区域的强度与面积。 结果 损伤神经的近侧端和远侧端中施万细胞均有Tropic 180 8基因表达蛋白的阳性免疫反应 ,阳性免疫反应物主要分布于施万细胞膜上 ,远侧端的阳性反应物强度和面积强于和大于近侧端。 结论 周围神经损伤后 ,Tropic180 8基因表达蛋白分布于损伤近侧端和远侧端的施万细胞膜上 ,并且远侧端中该蛋白的表达强于近侧端。 展开更多
关键词 TROPIC 1808基因表达蛋白 坐骨神经 免疫组织化学 大鼠
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云南阿昌族G6PD基因突变G487A在DF213中的表达 被引量:5
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作者 杨银峰 朱月春 +7 位作者 李鸿钧 李治纲 吕会茹 李丹怡 崔映波 冯维杨 余果宇 黄尤光 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期20-28,共9页
为获得阿昌族G6PDWT和G6PDG487A重组蛋白,研究G6PDG487A的结构和功能改变,从云南省德宏州梁河县杞木寨乡湾中村阿昌族聚集地的G6PD缺陷家系先证者和正常阿昌族个体全血提取RNA,经RT-巢式PCR得cDNA,将cDNA克隆至pMD18-Tsimple载体中并测... 为获得阿昌族G6PDWT和G6PDG487A重组蛋白,研究G6PDG487A的结构和功能改变,从云南省德宏州梁河县杞木寨乡湾中村阿昌族聚集地的G6PD缺陷家系先证者和正常阿昌族个体全血提取RNA,经RT-巢式PCR得cDNA,将cDNA克隆至pMD18-Tsimple载体中并测序;错配碱基经定点突变修复后,目的基因亚克隆至pThioHis(A)载体,构建了阿昌族G6PD基因野生型和G487A突变型原核表达载体:pThioHis(A)-AChang-G6PDWT和pThioHis(A)-AChang-G6PDG487A。用重组质粒转化E.coli Competent Cells DF213(G6PD defeciency),经IPTG诱导G6PD表达、10%SDS-PAGE电泳检测表达蛋白和紫外340nm定量测定G6PD活性的分析表明,pThioHis(A)-AChang-G6PDWT和pThioHis(A)-AChang-G6PDG487A在DF213中成功表达,分子量约为59kDa。IPTG诱导0、3、6、9、和12h后,G6PD活性逐渐增高,G6PD基因WT表达的酶活性约是G487A的20-25倍。表达载体的构建以及G6PDcDNA在DF213中成功表达,为重组酶G6PDG487A的进一步研究奠定了基础。 展开更多
关键词 阿昌族 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 基因 表达载体
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银鲫两个蛋白合成相关基因全长cDNA的克隆及其特征分析 被引量:6
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作者 刘军 石耀华 +1 位作者 尹隽 桂建芳 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期512-520,共9页
通过构建雌核发育银鲫心跳期SMARTcDNA质粒文库并从文库中随机挑选克隆测序 ,克隆得到银鲫翻译起始因子 3亚单位 2 (GTIF3 S2 )和翻译延伸因子 1亚单位α(GEF 1α)基因全长cDNA。银鲫翻译起始因子 3亚单位 2基因cDNA全长 12 80bp ,开放... 通过构建雌核发育银鲫心跳期SMARTcDNA质粒文库并从文库中随机挑选克隆测序 ,克隆得到银鲫翻译起始因子 3亚单位 2 (GTIF3 S2 )和翻译延伸因子 1亚单位α(GEF 1α)基因全长cDNA。银鲫翻译起始因子 3亚单位 2基因cDNA全长 12 80bp ,开放阅读框位于 117— 10 91bp之间 ,编码 32 5个氨基酸。其推断的氨基酸序列存在三个WD结构域。该基因在鱼类中为首次报道。银鲫翻译延伸因子 1亚单位alpha基因cDNA全长 1784bp ,开放阅读框位于82— 14 6 7bp之间 ,编码 4 6 2个氨基酸。RT PCR表明 ,这两个基因在成熟卵母细胞和胚胎发育早期可以检测到少量的转录产物 ,在胚胎发育期间从原肠期开始转录 ,并随着发育进程逐渐增强。成鱼组织中除精巢表达较弱外 ,其他组织都表达较强。同源分析比较表明 ,TIF3 S2和EF 1α在物种进化过程中具有高度的进化保守性 ,在物种间的同源性很高。因此 ,作者认为 ,这两个基因是研究物种间系统发育的优良对象。 展开更多
关键词 银鲫 起始因子 延伸因子 基因克隆 表达特征 CDNA
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HXKs基因在香蕉果实后熟过程中功能初探 被引量:3
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作者 李成梁 冯仁军 +4 位作者 卢利方 云天艳 张恒 张银东 张锡炎 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期659-666,共8页
香蕉是世界主要水果之一,对乙烯非常敏感,属于呼吸跃变型果实。目前,香蕉果实后熟机理还未完全探明,后熟过程中己糖激酶(HXK)与乙烯的关系还不清楚。通过BLAST比对从香蕉基因组数据库中发现HXK基因家族的11个成员,经克隆获得这些基因的... 香蕉是世界主要水果之一,对乙烯非常敏感,属于呼吸跃变型果实。目前,香蕉果实后熟机理还未完全探明,后熟过程中己糖激酶(HXK)与乙烯的关系还不清楚。通过BLAST比对从香蕉基因组数据库中发现HXK基因家族的11个成员,经克隆获得这些基因的序列,并研究HXKs基因在香蕉果实自然后熟过程中的转录表达谱,重点研究乙烯利、甘露糖、NAG和1-MCP对HXKs基因表达、HXK酶活和内源乙烯生物合成的影响。结果表明:在香蕉果实后熟过程中HXKs基因呈现差异性表达,乙烯利上调大多数HXKs基因的表达和HXK酶活,1-MCP的作用正好相反,这表明外源乙烯正作用于HXK。另一方面,甘露糖加快内源乙烯生物合成,NAG却推迟内源乙烯生物合成,这说明HXK正作用于内源乙烯生物合成。所以,在香蕉果实后熟过程中乙烯和HXK之间存在相互促进的关系。这将为进一步阐明香蕉果实后熟机制提供理论依据,也将为香蕉果实保鲜新技术的挖掘提供新思路。 展开更多
关键词 香蕉果实后熟 HXKs基因 表达分析 酶活 乙烯生物合成
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玉米苗期SR蛋白基因家族的干旱胁迫应答 被引量:2
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作者 李娇 郭予琦 +2 位作者 崔伟玲 许爱华 田曾元 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期697-706,共10页
基因表达的选择性剪接(Alternative splicing,AS)调控与植物对逆境胁迫应答密切相关,SR蛋白(Serine/arginine-rich proteins)是其中关键的调节因子。文章对玉米B73参考基因组进行分析显示:多数SR蛋白家族基因成员启动子区域含有3~8种... 基因表达的选择性剪接(Alternative splicing,AS)调控与植物对逆境胁迫应答密切相关,SR蛋白(Serine/arginine-rich proteins)是其中关键的调节因子。文章对玉米B73参考基因组进行分析显示:多数SR蛋白家族基因成员启动子区域含有3~8种与发育或胁迫相关的顺式调控元件;27个基因成员编码碱性蛋白,其中23个成员的编码蛋白依照其N′端的首个RRM(RNA recognition motif)结构域特征大体上可划分为5个亚组。利用双向分级聚类方法,对三叶期干旱胁迫下玉米杂交种郑单958及其亲本郑58和昌7-2的SR蛋白基因家族的分析显示,该基因家族的表达模式具有明显的组织表达特异性和基因型依赖性特征;其中在干旱胁迫下地下组织以下调表达模式为主,而地上组织中以上调表达模式为主。在重度干旱胁迫后的3个不同时段复水过程中,地上和地下组织中SR蛋白基因家族的表达皆以下调表达模式为主。另外,尽管不同基因成员的表达模式在干旱胁迫及其后的复水过程中存在明显差异,但普遍存在自身选择性剪接现象。SR蛋白基因家族在玉米干旱胁迫的应答规律,为从AS-network视角解析玉米的抗逆分子机制提供了新思路。 展开更多
关键词 玉米干旱胁迫 SR蛋白基因 表达模式 选择性剪接
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赤眼鳟myostatin基因的克隆与组织表达分析 被引量:4
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作者 邵芳 郁建锋 +4 位作者 张燕萍 卢祥云 徐建荣 朱斌 顾志良 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期108-114,共7页
以赤眼鳟(Squaliobarbus crriculus)肌肉总RNA为模板,采用RT-PCR结合RACE方法,获得其myostatin(肌肉生长抑制素)基因全长为2 214 bp的cDNA序列,其包含了1个含有1 128个核苷酸的开放性阅读框(ORF),共编码375个氨基酸。赤眼鳟与其他物种my... 以赤眼鳟(Squaliobarbus crriculus)肌肉总RNA为模板,采用RT-PCR结合RACE方法,获得其myostatin(肌肉生长抑制素)基因全长为2 214 bp的cDNA序列,其包含了1个含有1 128个核苷酸的开放性阅读框(ORF),共编码375个氨基酸。赤眼鳟与其他物种myostatin的特征性一致。其编码区序列与鲤鱼同源性最高,为96.99%,与其他鱼类的同源性为76%~81%,与哺乳类和鸟类的同源性较低,为63%左右。赤眼鳟Myostatin蛋白的氨基酸序列与其他物种同源性较高,尤其在C端生物活性区,高度的保守性反映了该基因受到了高度的进化限制以及功能的重要性。半定量RT-PCR分析表明,myostatin基因在除肝脏外的其他组织都有表达,在肌肉和脑中的表达量较高,此结果表明赤眼鳟myostatin基因除了对肌肉生长发育有调控作用以外,还可能在机体中发挥其他功能。 展开更多
关键词 赤眼鳟 MYOSTATIN基因 RACE 组织表达分析
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RFDD-PCR技术用于构建证的相关基因表达谱初探 被引量:2
8
作者 胡岳山 李杰芬 +2 位作者 王剑 高丽 谭宇蕙 《现代中西医结合杂志》 CAS 2004年第8期981-984,共4页
目的 运用限制性酶切片段差异显示 (RFDD -PCR)技术初步筛选支气管哮喘肾虚证的相关基因 ,以冀探讨构建中医证的相关基因表达谱的一种研究方法。方法 应用RFDD -PCR技术 ,收集支气管哮喘肾虚证患者治疗前后外周血 ,分离其总RNA ,进行D... 目的 运用限制性酶切片段差异显示 (RFDD -PCR)技术初步筛选支气管哮喘肾虚证的相关基因 ,以冀探讨构建中医证的相关基因表达谱的一种研究方法。方法 应用RFDD -PCR技术 ,收集支气管哮喘肾虚证患者治疗前后外周血 ,分离其总RNA ,进行DNaseI处理、合成双链cDNA、TaqI限切酶酶切、在其两端连上接头、特异配对于接头的引物来降落PCR扩增、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、AgNO3 染色、回收差异条带并重新PCR扩增、反向斑点杂交、测序、生物信息学分析。结果 共找到 36条差异条带 ,其中 2 5条能用斑点杂交验证 ,选取 3条测序 ,结果与基因库比较未发现同源序列。结论  3条基因片段可能是与支气管哮喘肾虚证相关的新基因 ;RFDD -PCR技术不失为构建中医证的相关基因表达谱的一种好方法。 展开更多
关键词 RFDD-PCR 基因表达谱 肾虚证 支气管哮喘
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传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白的干酪乳杆菌表达系统构建 被引量:3
9
作者 刘敏 赵丽丽 +5 位作者 葛俊伟 欧笛 王相清 刘弈 张伟 李一经 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2008年第5期30-34,共5页
根据传染性胰腺坏死病毒(IPNV)VP3蛋白的全基因序列,设计并合成引物,以IPNV(ATCC VR-1318)细胞培养毒提取的核酸为模板,对传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白的干酪乳杆菌表达系统进行了构建研究。结果显示:进行RT-PCR扩增得到截短的VP3基因约61... 根据传染性胰腺坏死病毒(IPNV)VP3蛋白的全基因序列,设计并合成引物,以IPNV(ATCC VR-1318)细胞培养毒提取的核酸为模板,对传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白的干酪乳杆菌表达系统进行了构建研究。结果显示:进行RT-PCR扩增得到截短的VP3基因约615 bp目的片段,将其克隆到pMD18-T Simple载体,经酶切、PCR扩增和序列测定后显示目的片段正确;将目的片段分别亚克隆到乳酸菌细胞表面表达型载体和分泌表达型载体,电转化于干酪乳杆菌,获得了阳性重组菌株。结果表明,通过本实验方法可构建表达传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白的干酪乳杆菌表达系统,为实现IPNV VP3蛋白在乳酸菌中的表达及免疫原性研究奠定了基础。 展开更多
关键词 传染性胰腺坏死病毒 VP3基因 干酪乳杆菌(Lactobacillus casei) 表达载体系统
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橡胶树α-维管蛋白基因HbTUA1的克隆及表达分析 被引量:2
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作者 唐朝荣 戚继艳 +1 位作者 方永军 龙翔宇 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2013年第11期2158-2163,共6页
利用橡胶树胶乳EST文库克隆到一个TUA基因,命名为HbTUA1(GenBank登录号:KC333454)。该基因cDNA全长1 580 bp,其中5′UTR长45 bp,3′UTR长167 bp,编码区长1 368 bp,编码449个氨基酸。HbTUA1蛋白具有TUA类蛋白保守的GTP结合域。荧光定量PC... 利用橡胶树胶乳EST文库克隆到一个TUA基因,命名为HbTUA1(GenBank登录号:KC333454)。该基因cDNA全长1 580 bp,其中5′UTR长45 bp,3′UTR长167 bp,编码区长1 368 bp,编码449个氨基酸。HbTUA1蛋白具有TUA类蛋白保守的GTP结合域。荧光定量PCR分析显示,HbTUA1基因在橡胶树胶乳中的表达量最高,其次是树皮和芽,而在种子和叶片中的表达量最低;在胶乳中,HbTUA1基因的表达显著受割胶和伤害诱导,在不同死皮程度的橡胶树中也存在明显差异。初步表明HbTUA1基因可能参与橡胶树胶乳再生与胁迫应答调控。 展开更多
关键词 橡胶树 α-维管蛋白 基因克隆 表达分析
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盐桦BhNHX的克隆及其与CaM在胁迫下的协同表达(英文) 被引量:6
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作者 曾幼玲 张海波 +1 位作者 兰海燕 张富春 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期2408-2415,共8页
以盐桦组培苗为材料,通过RACE技术克隆了液泡膜Na+/H+反向运输体基因BhNHX,采用DNAman软件和BLASTN对cDNA序列进行分析并与其他植物的NHX基因进行同源性比较,最后对BhNHX和钙调蛋白基因(CaM)在各种胁迫条件下的协同表达进行半定量的RT-... 以盐桦组培苗为材料,通过RACE技术克隆了液泡膜Na+/H+反向运输体基因BhNHX,采用DNAman软件和BLASTN对cDNA序列进行分析并与其他植物的NHX基因进行同源性比较,最后对BhNHX和钙调蛋白基因(CaM)在各种胁迫条件下的协同表达进行半定量的RT-PCR分析.结果显示:(1)获得了BhNHX的全长cDNA序列,包含1 623 bp的开放阅读框架,编码一个540个氨基酸的多肽,有11个推测跨膜区,与已报道的液泡膜Na+/H+反向运输载体蛋白跨膜区数目一致;(2)BhNHX的核酸序列与其他植物NHX具有较高同源性,与葡萄NHX序列一致性达到76%;(3)BhNHX和钙调蛋白基因CaM可同时被盐、低温、干旱所诱导;但ABA只能较明显诱导BhNHX的表达,而对CaM的诱导表达不明显.研究表明,在盐桦受到盐、低温及干旱胁迫时BhNHX和CaM可能协同表达,而在ABA诱导时两者可能具有不同的表达调控模式. 展开更多
关键词 Na^+/H^+反向运输体基因 盐桦 钙调蛋白 表达调控
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柞蚕免疫相关基因Apdorsal的克隆鉴定与表达分析 被引量:1
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作者 李文利 刘媛 +1 位作者 李凤娟 李亚洁 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期32-37,共6页
ReL/NF—κB蛋白家族是一种重要的转录因子,在机体免疫应答、炎症反应、细胞凋亡与生长发育过程中起着重要调控作用。采用RACE技术克隆了2个柞蚕Rel/NF—κB相关蛋白基因彻dorsalA和Af)dorsalB的全长cDNA序列(GenBank登录号:JF488... ReL/NF—κB蛋白家族是一种重要的转录因子,在机体免疫应答、炎症反应、细胞凋亡与生长发育过程中起着重要调控作用。采用RACE技术克隆了2个柞蚕Rel/NF—κB相关蛋白基因彻dorsalA和Af)dorsalB的全长cDNA序列(GenBank登录号:JF488068,JF488069)。经BLAST比对表明2紊序列编码的蛋白质都含有Rel/NF—κB家族的典型氨基酸序列RHD;系统进化分析显示ApdorsalA蛋白与其它物种的ReL/NF—κB蛋白的序列相似度在32%-78%之间,与家蚕的RelA、烟草天蛾的Dorsal有较近的亲缘关系,说明Apdorsal属于Rel/NF—κB家族的Dorsal类。利用real—timePCR技术检测Apdorsal基因mRNA的组织分布以及经不同微生物诱导处理后的转录变化,结果表明Apdorsal基因mRNA在柞蚕蛹各组织中均有转录;柞蚕蛹脂肪体中的apdorsal基因mRNA经ApNPV诱导处理后的转录水平最高,经毕赤酵母和枯草芽孢杆菌诱导处理后的转录水平次之,经E.coli诱导处理后的转录水平最低,说明柞蚕蛹脂肪体中的Apdorsal可能与对病毒、革兰阳性菌和真菌的免疫有关。 展开更多
关键词 柞蚕 先天免疫 REL NF—κB蛋白家族 基因克隆 表达分析
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转人乳铁蛋白基因山羊乳腺上皮细胞的研究 被引量:7
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作者 郑月茂 刘凤军 +1 位作者 何小宁 张涌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1282-1286,共5页
利用脂质体包裹含人乳铁蛋白基因的重组质粒,并导入到山羊乳腺上皮细胞,经G418及PCR筛选获得阳性细胞;转染细胞增殖后经激素诱导,培养液上清通过Western blot检测证明,转染细胞表达并分泌出人乳铁蛋白,其分子质量为58 ku。
关键词 人乳铁蛋白基因乳腺特异性表达载体 绿色荧光蛋白 转基因山羊乳腺上皮细胞
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决明异分支酸合酶基因的克隆及表达分析 被引量:2
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作者 李关荣 艾义 +4 位作者 谭燕 米瑶 朱林蕙 李培江 齐红艺 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1-8,共8页
异分支酸合酶(Isochorismate synthase,ICS)控制着分支酸到异分支酸衍生的各种产物的分配,据报道它是植物体内蒽醌类物质合成的限速酶.该文采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆其基因全长(SoICS);以荧光定量PCR(FQ-PCR)测定其在植株各... 异分支酸合酶(Isochorismate synthase,ICS)控制着分支酸到异分支酸衍生的各种产物的分配,据报道它是植物体内蒽醌类物质合成的限速酶.该文采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆其基因全长(SoICS);以荧光定量PCR(FQ-PCR)测定其在植株各部位的表达谱并考察其与蒽醌质量分数的关系.结果表明,SoICScDNA全长为2 103bp(GenBank Accession KF547925);有多个非典型的加尾信号;含一个总长为1 713bp的完整阅读框,编码570个氨基酸;SoICS含有AtICS1和AtICS2中与ICS催化活性相关的5个保守关键氨基酸残基;其N-端有48个氨基酸残基的推定前导序列;具有典型的保守分支酸结合结构域;有多个显著磷酸化位点;其蛋白质三维结构是一个紧凑型球状结构;系统分析显示,决明ICS与蓖麻、毛果杨和山杨的ICS关系较近.FQ-PCR分析表明,ICS基因在叶中表达水平最高,其次为茎、荚果皮、幼果和种子,在根和花中的表达量最低;总蒽醌、游离蒽醌和结合蒽醌质量分数的相关性达到极显著水平,但SoICS转录本表达量和蒽醌质量分数之间没有达到显著相关水平. 展开更多
关键词 钝叶决明 异分支酸合酶 基因克隆 生物信息学分析 表达分析
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阴道毛滴虫黏附蛋白33基因原核表达载体的构建及表达 被引量:1
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作者 杨树国 王雅静 +2 位作者 朱晓燕 帖超男 廖琳 《四川动物》 CSCD 北大核心 2008年第6期1021-1023,共3页
目的构建阴道毛滴虫黏附蛋白33基因原核表达载体并诱导其体外表达。方法pMD-18T-ap33重组质粒和pUC18空质粒经BamH Ⅰ和XbaⅠ限制性内切酶双酶切,将ap33基因亚克隆入pUC18载体并进行筛选和鉴定。重组质粒经IPTG诱导,SDS-PAGE电泳及Weste... 目的构建阴道毛滴虫黏附蛋白33基因原核表达载体并诱导其体外表达。方法pMD-18T-ap33重组质粒和pUC18空质粒经BamH Ⅰ和XbaⅠ限制性内切酶双酶切,将ap33基因亚克隆入pUC18载体并进行筛选和鉴定。重组质粒经IPTG诱导,SDS-PAGE电泳及Western-blot杂交鉴定重组蛋白。结果经双酶切及PCR鉴定,构建的重组质粒为阳性重组子,诱导出的重组蛋白大小约为Mr36000,与理论值基本相符。结论成功构建重组质粒并获得体外表达。 展开更多
关键词 阴道毛滴虫 黏附蛋白33 原核表达载体 基因表达
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Gene Expression Profile Differences in Gastric Cancer and Normal Gastric Mucosa by Oligonucleotide Microarrays 被引量:1
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作者 Chuanding Yu Shenhua Xu HangZhou Mou Zhiming Jiang Chihong Zhu Xianglin Liu 《Chinese Journal of Clinical Oncology》 CSCD 2006年第1期41-48,共8页
OBJECTIVE To study the difference of gene expression in gastric cancer (T) and normal tissue of gastric mucosa (C), and to screen for associated novel genes in gastric cancers by oligonucleotide microarrays. METHODS U... OBJECTIVE To study the difference of gene expression in gastric cancer (T) and normal tissue of gastric mucosa (C), and to screen for associated novel genes in gastric cancers by oligonucleotide microarrays. METHODS U133A (Affymetrix, Santa Clara, CA) gene chip was used to detect the gene expression profile difference in T and C. Bioinformatics was used to analyze the detected results. RESULTS When gastric cancers were compared with normal gastric mucosa, a total of 270 genes were found with a difference of more than 9 times in expression levels. Of the 270 genes, 157 were up-regulated (Signal Log Ratio [SLR] ≥3), and 113 were down-regulated (SLR ≤-3). Using a classification of function, the highest number of gene expression differences related to enzymes and their regulatory genes (67, 24.8%), followed by signal-transduction genes (43,15.9%). The third were nucleic acid binding genes (17, 6.3%), fourth were transporter genes (15, 5.5%) and fifth were protein binding genes (12, 4.4%). In addition there were 50 genes of unknown function, accounting for 18.5%. The five above mentioned groups made up 56.9% of the total gene number. CONCLUSION The 5 gene groups (enzymes and their regulatory proteins, signal transduction proteins, nucleic acid binding proteins, transporter and protein binding) were abnormally expressed and are important genes for further study in gastric cancers. 展开更多
关键词 gastric cancer normal gastric mucosa gene-expression profile.
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转基因番茄防龋疫苗的基础研究 Ⅰ.变形链球菌pac基因唾液粘附区植物表达质粒的构建 被引量:11
17
作者 蒋少云 凌均启 《口腔医学纵横》 CSCD 2000年第2期94-96,共3页
目的 :构建变形链球菌表面蛋白基因 (pac)唾液粘附区的植物表达质粒pROP1和pRPB1。方法 :用PCR扩增的含变形链球菌表面蛋白唾液粘附区P1片段 (184- 1946bp)与植物的高效表达质粒pROKCP结合 ,构建pROP1表达质粒 ;且将此质粒与Bar基因 (... 目的 :构建变形链球菌表面蛋白基因 (pac)唾液粘附区的植物表达质粒pROP1和pRPB1。方法 :用PCR扩增的含变形链球菌表面蛋白唾液粘附区P1片段 (184- 1946bp)与植物的高效表达质粒pROKCP结合 ,构建pROP1表达质粒 ;且将此质粒与Bar基因 (抗除草剂基因 )连接 ,构建表达质粒pRPB1,酶切电泳检测。结果 :从pPC41中扩增的P1片段整合到pROKCP的适当部位 ,构成重组质粒pROP1,从pPBar分离出的Bar基因整合到pROP1,构成重组质粒pRPB1。结论 :本实验成功地构建了携带变形链球菌表面蛋白唾液粘附区的植物表达质粒pROP1和pRPB1。 展开更多
关键词 植物表达质粒 唾液粘附区 龋齿 pac蛋白
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芹菜热激转录因子基因AgHSFB2的克隆及不同温度处理下的表达响应 被引量:8
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作者 李岩 徐志胜 +3 位作者 谭国飞 贾晓玲 王枫 熊爱生 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期360-368,共9页
[目的]热激转录因子HSF(heat shock transcription factor)在植物遭遇高温胁迫时起关键的调节作用,研究芹菜热激转录因子基因及相关蛋白的结构、功能对探究芹菜耐热机制、培育耐热新品种有重要作用。[方法]以‘六合黄心芹’‘津南实芹... [目的]热激转录因子HSF(heat shock transcription factor)在植物遭遇高温胁迫时起关键的调节作用,研究芹菜热激转录因子基因及相关蛋白的结构、功能对探究芹菜耐热机制、培育耐热新品种有重要作用。[方法]以‘六合黄心芹’‘津南实芹’和美国西芹‘文图拉’为试验材料,分离并克隆出Ag HSFB2基因,分析相关序列并采用实时定量荧光PCR技术检测该基因在不同温度(4、38和42℃)下的表达响应情况。[结果]研究发现该基因含有1个918 bp的开放阅读框,编码305个氨基酸。推测其蛋白质相对分子质量为34 048,理论等电点p I值为5.09。芹菜Ag HSFB2与拟南芥中HSF蛋白进行比对构建进化树,发现Ag HSFB2与拟南芥HSFB2a和HSFB2b进化距离最近,该基因属于HSFB2亚族。芹菜Ag HSFB2与茄科的番茄、马铃薯相应蛋白的亲缘关系较近。Ag HSFB2蛋白的高级结构主要由3个α螺旋和4个β折叠组成。Ag HSFB2基因主要在芹菜的叶中表达,具有组织、品种特异性,同时对4、38和42℃等多种温度信号有明显响应。该基因对温度胁迫的响应时间和强度有品种的差异:4和38℃处理下‘文图拉’均在2 h有明显上调表达;42℃处理下‘津南实芹’和‘文图拉’均在1 h有明显上调表达。[结论]高温胁迫下Ag HSFB2基因可诱导下游热激蛋白大量表达,帮助植物抵御高温胁迫所带来的伤害。 展开更多
关键词 芹菜 AgHSFB2基因 克隆 实时荧光定量PCR 温度处理 表达响应
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家鸽Caveolin-1基因全长cDNA的克隆、序列和组织表达分析 被引量:2
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作者 张营 郁建锋 +2 位作者 杨丽 王星果 顾志良 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期476-482,共7页
窖蛋白(Caveolin)是一类构成细胞膜上胞膜窖主要结构的标志蛋白,由Caveolin基因家族编码而成。Caveolin-1基因是Caveolin基因家族的成员之一。该实验采用RT-PCR与RACE(rapid amplification of cDNA ends)技术成功地克隆了家鸽Caveolin-... 窖蛋白(Caveolin)是一类构成细胞膜上胞膜窖主要结构的标志蛋白,由Caveolin基因家族编码而成。Caveolin-1基因是Caveolin基因家族的成员之一。该实验采用RT-PCR与RACE(rapid amplification of cDNA ends)技术成功地克隆了家鸽Caveolin-1基因的全长cDNA。该cDNA全长2605bp,包含537bp的完整编码区,编码178个氨基酸;分析发现家鸽Caveolin-1基因编码区与牛、家犬、鸡、褐家鼠等核苷酸同源性为80.1%~93.4%,氨基酸同源性高达85.4%~97.2%;半定量RT-PCR分析表明该基因在家鸽各种组织广泛表达,脂肪中表达量最高,各种肌肉中表达量次之,肝脏中表达量最低。此结果说明家鸽Caveolin-1基因可能与脂肪、肌肉中的某些代谢途径有关。 展开更多
关键词 家鸽 窖蛋白基因 RACE 组织表达分析
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A Coarse Estimation of Cell Size Region from a Mesoscopic Stochastic Cell Cycle Model
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作者 易鸣 贾亚 +2 位作者 刘泉 朱春莲 杨利建 《Chinese Physics Letters》 SCIE CAS CSCD 2007年第7期1829-1832,共4页
Based on a deterministic cell cycle model of fission yeast, the effects of the finite cell size on the cell cycle regulation in wee1- cdc25△ double mutant type are numerically studied by using of the chemical Langevi... Based on a deterministic cell cycle model of fission yeast, the effects of the finite cell size on the cell cycle regulation in wee1- cdc25△ double mutant type are numerically studied by using of the chemical Langevin equations. It is found that at a certain region of cell size, our numerical results from the chemical Langevin equations are in good qualitative agreement with the experimental observations. The two resettings to the G2 phase from early stages of mitosis can be induced under the moderate cell size. The quantized cycle times can be observed during such a cell size region. Therefore, a coarse estimation of cell size is obtained from the mesoscopic stochastic cell cycle model. 展开更多
关键词 FISSION YEAST gene-expression DIVISION CYCLE SYSTEM-SIZE NOISE RHYTHMS TIME CDC2
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