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Loop B3对GH7内切纤维素酶功能的影响机制
1
作者
杨俊钊
张新蕊
+1 位作者
孙清扬
郑菲
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第10期281-291,共11页
糖苷水解酶第七家族(GH7)包含内切和外切两类纤维素酶,其中对外切纤维素酶的研究较为成熟,但对内切纤维素酶的研究相对较少。本研究从嗜热真菌Myceliophthora thermophila的基因组中鉴定出一个新型GH7内切纤维素酶Mt Cel7b,其在60℃,pH ...
糖苷水解酶第七家族(GH7)包含内切和外切两类纤维素酶,其中对外切纤维素酶的研究较为成熟,但对内切纤维素酶的研究相对较少。本研究从嗜热真菌Myceliophthora thermophila的基因组中鉴定出一个新型GH7内切纤维素酶Mt Cel7b,其在60℃,pH 5.0时表现出最佳酶活力。在90℃孵育1 h后,Mt Cel7b仍能保留40%以上的活性。经过序列统计分析发现,Mt Cel7b loop B3存在长链型和短链型的进化差异,为了探究loop B3对内切纤维素酶结构和功能的影响,将MtCel7b的长链型loop B3进行截短,构建了B3^(cut)突变体。结果显示,B3^(cut)突变体在高温下的稳定性较野生型提高了约9%-44%,而其对3种纤维素底物的比活性降低了34%-74%。借助分子动力学模拟进一步分析显示,在突变体B3^(cut)中,其loop B3的截短导致催化裂隙两端的loop A3和loop B1发生了显著位移,缩小了催化口袋的空间结构,加强了催化位点周围的氢键作用网络,从而导致酶在高温下更加稳定。本研究阐明了loop B3在GH7内切纤维素酶中的重要作用,为酶分子的改良工作提供了新的参考。
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关键词
gh7
内切纤维素酶
loop
B3
嗜热
分子动力学模拟
下载PDF
职称材料
玩尽君悦“Gh7”
2
作者
罗翰皋
《家庭影院技术》
2002年第3期16-18,共3页
纵观当今影音市场,产品琳琅满目。如何才能选择好自己心头所好?并搭配调校出好声音、好图象?这并非三言两语、轻而易举之事。笔者最近就为一位朋友的新音箱搭配之事大费周折。
关键词
君悦“
gh7
”
音箱
音响
原文传递
酵母双杂交随机环肽库的构建、鉴定与扩增
3
作者
徐祥
梁华平
+2 位作者
王付龙
罗艳
王正国
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第5期437-439,共3页
目的 :构建含 16个氨基酸的酵母双杂交随机环肽库。方法 :以PCR扩增人工合成的随机DNA模板 ,经BamHI和EcoRI酶切后 ,克隆入酵母表达质粒pGADT7GH ,构建酵母双杂交随机环肽库并检验其库容及随机性 ,扩增、抽提并纯化酵母双杂交环肽库质...
目的 :构建含 16个氨基酸的酵母双杂交随机环肽库。方法 :以PCR扩增人工合成的随机DNA模板 ,经BamHI和EcoRI酶切后 ,克隆入酵母表达质粒pGADT7GH ,构建酵母双杂交随机环肽库并检验其库容及随机性 ,扩增、抽提并纯化酵母双杂交环肽库质粒。结果 :构建了酵母双杂交随机环肽库 ,库容为 1.2 8× 10 7,氨基酸分布与理论频数无显著差异 ,并扩增获得大量高纯度的环肽库质粒。结论 :成功地构建酵母双杂交随机环肽库 ,并获得大量高纯度的环肽库质粒。
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关键词
随机环肽库
酵母双杂交
pGADT7GH
构建
鉴定
扩增
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职称材料
题名
Loop B3对GH7内切纤维素酶功能的影响机制
1
作者
杨俊钊
张新蕊
孙清扬
郑菲
机构
北京林业大学生物科学与技术学院
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第10期281-291,共11页
基金
国家自然科学基金项目(32171869,31770110)。
文摘
糖苷水解酶第七家族(GH7)包含内切和外切两类纤维素酶,其中对外切纤维素酶的研究较为成熟,但对内切纤维素酶的研究相对较少。本研究从嗜热真菌Myceliophthora thermophila的基因组中鉴定出一个新型GH7内切纤维素酶Mt Cel7b,其在60℃,pH 5.0时表现出最佳酶活力。在90℃孵育1 h后,Mt Cel7b仍能保留40%以上的活性。经过序列统计分析发现,Mt Cel7b loop B3存在长链型和短链型的进化差异,为了探究loop B3对内切纤维素酶结构和功能的影响,将MtCel7b的长链型loop B3进行截短,构建了B3^(cut)突变体。结果显示,B3^(cut)突变体在高温下的稳定性较野生型提高了约9%-44%,而其对3种纤维素底物的比活性降低了34%-74%。借助分子动力学模拟进一步分析显示,在突变体B3^(cut)中,其loop B3的截短导致催化裂隙两端的loop A3和loop B1发生了显著位移,缩小了催化口袋的空间结构,加强了催化位点周围的氢键作用网络,从而导致酶在高温下更加稳定。本研究阐明了loop B3在GH7内切纤维素酶中的重要作用,为酶分子的改良工作提供了新的参考。
关键词
gh7
内切纤维素酶
loop
B3
嗜热
分子动力学模拟
Keywords
gh7
endoglucanase
loop B3
thermostability
molecular dynamics simulation
分类号
TQ426.97 [化学工程]
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职称材料
题名
玩尽君悦“Gh7”
2
作者
罗翰皋
出处
《家庭影院技术》
2002年第3期16-18,共3页
文摘
纵观当今影音市场,产品琳琅满目。如何才能选择好自己心头所好?并搭配调校出好声音、好图象?这并非三言两语、轻而易举之事。笔者最近就为一位朋友的新音箱搭配之事大费周折。
关键词
君悦“
gh7
”
音箱
音响
分类号
TN912.26 [电子电信—通信与信息系统]
原文传递
题名
酵母双杂交随机环肽库的构建、鉴定与扩增
3
作者
徐祥
梁华平
王付龙
罗艳
王正国
机构
第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所一室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第5期437-439,共3页
基金
国家重点基础研究规划 (973)资助(No .G1 9990 542 0 3)
国家自然科学基金资助项目(No .30 0 80 0 0 9)
重庆市科委基金资助项目(No.2 0 0 0 631 9)
文摘
目的 :构建含 16个氨基酸的酵母双杂交随机环肽库。方法 :以PCR扩增人工合成的随机DNA模板 ,经BamHI和EcoRI酶切后 ,克隆入酵母表达质粒pGADT7GH ,构建酵母双杂交随机环肽库并检验其库容及随机性 ,扩增、抽提并纯化酵母双杂交环肽库质粒。结果 :构建了酵母双杂交随机环肽库 ,库容为 1.2 8× 10 7,氨基酸分布与理论频数无显著差异 ,并扩增获得大量高纯度的环肽库质粒。结论 :成功地构建酵母双杂交随机环肽库 ,并获得大量高纯度的环肽库质粒。
关键词
随机环肽库
酵母双杂交
pGADT7GH
构建
鉴定
扩增
Keywords
random cycle peptide library
yeast two hybrid system
pGADT 7 GH
分类号
R373.9 [医药卫生—病原生物学]
R341.43 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Loop B3对GH7内切纤维素酶功能的影响机制
杨俊钊
张新蕊
孙清扬
郑菲
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
下载PDF
职称材料
2
玩尽君悦“Gh7”
罗翰皋
《家庭影院技术》
2002
0
原文传递
3
酵母双杂交随机环肽库的构建、鉴定与扩增
徐祥
梁华平
王付龙
罗艳
王正国
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003
0
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
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