信阳水牛GHRH基因第二外显子的SNPs检测

[目的]检测信阳水牛群体GHRH基因的SNP多态性。[方法]以56头信阳水牛为材料,采集血样,提取基因组DNA,以GenBank公布的牛GHRH基因(gi:194719389)序列作为参照序列,设计PCR引物,采用PCR-SSCP和DNA测序方法对该基因第二外显子的进行突变检测。[结果]经SSCP分析发现,这些个体总共出现六种不同的带型。测序结果表明:位于GHRH基因的4 461bp、4 529bp、4 845bp、5 053bp和5 058bp处分别存在C→T、T→G、G→A、G→A和G→T五个单核苷酸突变。[结论]表明该基因在信阳水牛群体中单核苷酸多态较为丰富。

长江刀鲚GHRH基因克隆及序列分析

通过克隆长江刀鲚的GHRH基因片段并进行序列分析,旨在为长江刀鲚分子生物育种方面的进一步研究奠定基础。提取长江刀鲚组织中的总RNA,根据已知鱼类GHRH基因保守片段设计兼并引物,使用RT-PCR方法克隆长江刀鲚GHRH基因片段,对所得序列进行生物信息学分析。试验结果:克隆得到的基因片段长度为492 bp,推导出氨基酸残基为164个,其氨基酸序列与大西洋鲱鱼、斑马鱼和大西洋鳕的相似度分别为92%、79%和77%。系统进化树分析进一步表明,长江刀鲚与大西洋鲱的亲缘关系最近。

萨×哈杂交母羊GHRH基因与生长性状关联分析

为探讨GHRH基因作为绵羊生长性状候选基因的可能性,寻找与绵羊生长性状相关的分子标记,对萨福克羊与哈萨克羊杂交成年母羊GHRH基因rs400079090和rs419322328位点的多态性及其与生长性状的关联性进行了研究。结果表明:rs400079090位点检测到3个基因型,rs419322328位点TT基因型缺失;rs419322328位点GG基因型个体胸宽显著大于GT基因型个体(P<0.05),体斜长极显著小于GT基因型个体(P<0.01)。说明GHRH基因2个SNP位点多态性对萨福克羊与哈萨克羊杂交成年母羊生长性状有一定的影响,可以作为进行绵羊生长性状分子标记辅助选择的候选基因。

小尾寒羊GHRH基因的多态性与生长性状的关联分析

为了分析小尾寒羊群体中GHRH基因的多态性,以及GHRH基因多态性与生长性状的关联性,试验利用PCR-SSCP技术检测GHRH基因在小尾寒羊群体的多态性,利用SPSS统计学软件分析GHRH基因的多态性与生长性状和肉质性状之间的关联性。结果表明:在小尾寒羊群体中检测到GHRH基因的2种基因型即DD基因型和Ⅱ基因型,DD基因型频率为0.4375,Ⅱ基因型频率为0.5625。GHRH不同基因型对胸围、尻高、前肢高、颈长和腹围等5个生长性状有显著影响(P<0.05),具体表现为Ⅱ基因型小尾寒羊胸围、腹围的影响显著大于DD基因型(P<0.05);DD基因型对小尾寒羊前肢高、尻高和颈长的影响显著大于Ⅱ基因型(P<0.05)。文章证实了GHRH基因与小尾寒羊生长发育的相关性,其可以作为本土小尾寒羊遗传杂交改良的重要功能候选基因,对于研究小尾寒羊的遗传多样性具有重要意义。

大白猪及巴马香猪GHRH基因的SNPs筛选及其与体尺的相关性分析

为了解影响猪生长和体尺的重要候选基因(GHRH基因)多态性与猪体尺的相关性,选取大白猪为大型猪的代表,巴马香猪为小型猪的代表,利用测序法筛查了两猪种间GHRH基因上存在的SNPs,统计了各个SNP在2个猪种的基因型频率及等位基因频率,然后基于基因型频率对每个SNP与猪体型的相关性进行分析,并将筛选到的与猪体型相关的SNPs进行连锁不平衡及单倍型分析。结果表明:共有7个SNPs存在于两猪种间,分别为g.1874A>C、g.2276A>G、g.4165C>-、g.4238T>C、g.8079I>-(GTGCTGGCGTGAG缺失)、g.8114A>G及g.8178A>G,且这些SNPs均与猪体尺性状显著相关,其中g.2276A>G和g.4165C>-存在连锁效应,并且大白猪形成的优势单倍型为AC,而巴马香猪为G-型,单倍型频率在两猪种间存在极显著差异(P<0.001);位于基因内含子4的3个位点(g.8079I>-、g.8114A>G及g.8178A>G)在大白猪中形成的单倍型为-GA,而巴马香猪为IAG,单倍型频率在两猪种间存在极显著差异(P<0.001)。这说明猪GHRH基因上存在的SNPs与猪体尺相关,可作为猪种遗传性状及育种的筛选标记,将为提高养猪经济效益及猪育种提供理论依据。

布氏鲳鲹GHRH基因克隆、组织和胚胎表达模式

促生长激素释放激素(growth hormone releasing hormone, GHRH)主要生物学功能是刺激垂体细胞分泌生长激素,已被证实是动物体生长轴的重要调控因子之一,布氏鲳鲹是一种生长快速的海洋鱼类,为了揭示其代谢旺盛的调节机制,本研究从GHRH入手,利用RACE技术和qPCR方法对布氏鲳鲹GHRH基因进行了克隆、组织和胚胎表达模式研究。实验结果显示,布氏鲳鲹GHRH基因cDNA序列全长1019bp,5’UTR、3’UTR长度分别为327 bp和164 bp,开放阅读框528 bp,共编码175个氨基酸;同源性分析结果表明,布氏鲳鲹GHRH基因与其它鲈形目鱼类的同源性在91%以上。布氏鲳鲹GHRH基因的表达区域大多都集中在中枢系统,其中下丘脑表达量最高;GHRH在受精卵期到后续发育过程中均检测到表达,其表达水平在仔鱼期达到最高。序列分析、组织及胚胎表达的结果表明,布氏鲳鲹GHRH的调节模式仍然可能通过下丘脑调节垂体释放GH,GHRH在个体发育的较早阶段即开始发挥作用。本研究掌握了布氏鲳鲹GHRH基因的基本规律,为进一步研究生长轴的调控提供了理论参考。

黔北麻羊GHRH-R基因多态性与生长性状的关联分析

为研究黔北麻羊GHRH-R基因多态性及其与生长性状的关系,以相同条件下饲养的30只36～48月龄母羊为研究对象,利用克隆测序技术,对GHRH-R基因的第2、第3外显子及部分内含子进行SNPs位点的检测,并将发现的SNPs位点与黔北麻羊生长性状进行关联分析。结果表明:在第3内含子6 bp处C→A碱基突变AA型基因型个体的体重显著高于AC型个体(P<0.05),该位点可作为黔北麻羊体重选择的分子标记。

黔北麻羊GHRH—R基因多态性与生长性状的关联分析

目的：旨在研究GHRH—R基因的第二，第三外显子及部分内含子与黔北麻羊生长性状的关系。在相同的饲养条件下36～48月龄的30头母羊为研究对象，利用克隆测序技术，对GHRH—R基因的第二，第三外显子及部分内含子进行SNPs位点的检测，并将发现的SNPs位点与黔北麻羊生长性状进行关联分析。结果：在第三内含子6bp处C→A碱基突变AA型基因型个体的体重显著高于AC型个体（P〈0．05），该位点可作为黔北麻羊体重的分子标记。

滋阴泻火中药对大鼠中枢生长相关基因的影响

目的 :研究滋阴泻火中药对青春期大鼠中枢生长相关基因的影响。方法 :设立对照组 ,采用荧光定量PCR法 ,检测小、中、大 3组不同剂量中药对于青春期大鼠下丘脑及垂体部分生长相关基因的影响。结果 :与空白组比较 ,用药 4周、 8周和停药 4周 ,3组中药治疗组下丘脑GHRH基因及垂体GHRH受体基因表达变化无显著统计学意义 (P >0 0 5 ) ;而对于下丘脑SRIH基因表达 ,中、大剂量治疗组显著增高 (P <0 0 5 )。结论 :滋阴泻火中药可能通过上调SRIH基因表达调节生长激素分泌。

信阳水牛促生长激素释放激素基因第4外显子的PCR扩增及变异检测

本研究以52头中国信阳水牛血样为材料,提取基因组DNA,采用聚合酶链反应-单链构象多态性技术(PCR-SSCP),对信阳水牛的生长素释放激素(GHRH)基因中第4外显子的突变情况进行检测。经SSCP检测发现,不同个体的PCR反应产物银染后有两种不同的带型,分别命名为AA型和AB型。针对不同带型所对应的个体PCR产物进行测序,结果表明,在该基因(GI:194719389)的第4外显子70bp处发现A→G突变,A→G导致Thr转化为Ala,在该基因的第4内含子6bp处发现A→C突变。