生长激素受体(GHR)mRNA在绵羊皮肤组织切片定位

以地高辛标记的GHR cDNA为探针,利用原位杂交的方法对GHR mRNA在绵羊皮肤组织切片进行定位。结果显示绵羊毛囊中存在生长激素受体基因。因此,可以确定GH对羊毛生长的作用是通过直接作用其位于毛囊上的受体而实现的。

不同营养水平限制饲养对妊娠期蒙古绵羊生长激素受体(GHR)mRNA表达水平的影响

为了阐明不同营养水平限制饲养妊娠期母羊后,在不同生长阶段对蒙古绵羊生长激素受体(GHR)mRNA表达水平的影响,研究根据GenBank中绵羊的GHR序列,设计1对预计扩增产物为395 bp的引物,采用RT-PCR技术检测了蒙古绵羊在不同营养水平条件下肝脏和背最长肌中GHR mRNA表达量的变化。结果表明:在限制采食阶段,低营养水平组即营养限制组(RG1组)和阈值组(RG2组)肝脏的GHR mRNA表达水平低于正常营养的对照组(CG组),而背最长肌的GHR mRNA表达水平高于对照组,说明限制营养对绵羊GHR水平的影响具有组织特异性。在补偿生长结束阶段,RG1组和RG2组绵羊的肝脏和背最长肌中GHR mRNA表达水平均恢复到对照组水平。

GM-CSF与生长抑素融合表达质粒对小鼠肌肉组织GHR和IGF-I mRNA表达的影响

选择70只小白鼠,随机分为7组,每组10只,雌雄各半。其中第1组为对照组,第2-4组分别肌肉注射pcS/2SS、pGM-CSF/SS和pGM-CSF+pcS/2SS DNA疫苗;第5～7组分别口服以减毒沙门氏菌为载体的pcS/2SS、pGM-CSF/SS和pGM-CSF+pcS/2SS DNA疫苗,以β-actin作为内参,利用相对半定量RT-PCR,检测小鼠肌肉组织GHR和IGF-I mRNA的表达。结果表明:第3、5和6组的GHR mRNA表达显著高于1组和7组(P<0.05),第5和6组的IGF-I mRNA表达显著高于1组、2组、4组和7组(P<0.05),GM-CSF与SS的融合表达质粒(pGM-CSF/SS)的GHR和IGF-I mRNA表达高于pGM-CSF+pcS/2SS共同免疫,同种DNA疫苗,口服免疫组的GHR和IGF-I mRNA表达总体上比肌肉注射组要高。这些结果证明,GM-CSF可促进SS DNA疫苗的免疫效果,提高肌肉组织中GHR和IGF-I mRNA的表达;pGM-CSF/SS效果优于pGM-CSF+pcS/2SS,口服免疫组要优于肌肉注射免疫组。

河川沙塘鳢GHR和IGF-2基因克隆及mRNA的时序表达

生长激素/胰岛素样生长因子-轴(growth hormone/insulin-like growth-axis,GH/IGF-轴)是调控鱼类生长的主要内分泌轴线。为探讨生长相关基因GHR、IGF-2对河川沙塘鳢(Odontobutis potamophila)生长发育的调控机制,采用cDNA末端快速扩增(RACE)和实时荧光定量PCR等技术,对河川沙塘鳢的GHR、IGF-2基因进行了克隆和表达模式分析。研究结果显示:河川沙塘鳢GHR基因的cDNA全长序列为2 179 bp,开放阅读框为1 830 bp,共编码609个氨基酸,IGF-2基因的cDNA全长序列为1 586 bp,开放阅读框642 bp,共编码213个氨基酸。采用qRT-PCR方法检测了GHR、IGF-2基因在9个不同组织(脑、肝、心、肌肉、脾、肠、性腺、鳃、肾)和8个胚胎不同发育时期(受精卵期、桑椹胚期、原肠胚期、神经胚期、体节期、口裂期、出膜后1 d、出膜后3 d)的表达情况。结果表明:IGF-2和GHR基因在所检测的9种组织中均有表达,其中以肝脏、肌肉、性腺、脑中的表达量较高,在胚胎发育阶段GHR和IGF-2基因表达呈先上升后下降的趋势,在原肠胚期表达量较高,表明其在胚胎发育过程中发挥重要作用。qRT-PCR进一步比较了雌、雄河川沙塘鳢GHR和IGF-2基因在不同生长发育阶段(90、150、210、270、330 d)脑、肝、肌肉mRNA的表达量,结果表明:各时期雄鱼GHR和IGF-2基因在肝组织中表达量均显著高于雌鱼,肌肉和脑GHR基因mRNA的表达量则无显著差异。而IGF-2基因则仅在雌、雄鱼210 d的脑和150、210 d的肌肉存在显著性差异,推测肝GHR和IGF-2基因mRNA表达的雌雄差异是河川沙塘鳢雌雄生长差异的主要原因之一。

赖氨酸铜对仔猪血清IGF-I、肝细胞膜GHR水平及肝脏、肌肉基因表达的影响

为研究赖氨酸铜对仔猪生长的影响及其机理,选用21日龄断奶仔猪220头,均分为5组.A、B、C、D、E组分别在基础日粮(含铜15 mg/kg)中添加0、50、100、200 mg/kg赖氨酸铜来源的铜和200 mg/kg硫酸铜来源的铜.42、63日龄时称仔猪个体质量,并于63日龄每组屠宰4头,测定血清IGF-I、肝细胞膜GHR水平及肝脏、肌肉GHR mR-NA、IGF-I mRNA含量.结果显示B、C、D、E组全期日增质量分别比A组提高8%、13.8%(P<0.05)、16.7%(P<0.05)、14.1%(P<0.05);日粮中添加铜可显著提高血清IGF-I浓度、肝脏GHR mRNA水平(P<0.05)及肝细胞膜GHR特异结合活性(P<0.05),肝脏IGF-I mRNA水平有上升趋势但差异不显著(P>0.05).结果提示:较低剂量赖氨酸铜来源的铜(100 mg/kg)可起到较高剂量硫酸铜来源的铜(200 mg/kg)的促生长作用;赖氨酸铜促进仔猪生长可能与其上调肝脏GHR、IGF-I的基因表达,提高生长轴GHR及血液中IGF-I水平有关.

猪胃组织中生长激素受体基因表达的发育性变化及品种特点

用相对定量RT PCR的方法研究二花脸猪 (Erhualian)和大白猪 (1argeWhite)胃组织中生长激素受体 (GHr)mR NA发育性变化并进行品种间比较。分别于出生当天、3、2 0、30、4 5、90、12 0和 180日龄随机选取纯种大白猪公猪和二花脸公猪各 4头宰杀并采样 ,同时记录胃重和体重。研究结果表明 :出生时胃组织中GHrmRNA水平较高 ,3日龄时显著下调 (P <0 0 5 ) ;二花脸猪胃组织中GHrmRNA水平在断奶时 (45日龄 )达到高峰 ,随后显著下降 (P <0 0 5 ) ,至 90日龄后维持相对稳定。大白猪公猪在 90日龄时胃组织中GHrmRNA水平达到高峰 ,并维持在较高水平 ;从出生到断奶 ,二花脸猪胃组织GHrmRNA水平高于大白猪 ,2 0日龄时差异显著 (P <0 0 5 ) ;90日龄至 180日龄期间二花脸猪胃组织GHrmRNA水平低于大白猪 ,90日龄时差异显著 (P <0 0 5 )。胃重相对于体重的变化模式和胃组织GHrmRNA水平的发育变化呈中等强度正直线相关 ,相关系数为r=0 5 4 (P <0 0 5 )。以上结果提示 :(1)猪胃组织中GHr基因表达有特定的发育模式 ,并且呈现显著的品种间差异 ;(2 )GH直接作用于胃组织并调节胃的生长 ,GH是否直接参与胃的功能性发育调节 。

北京鸭×番鸭杂种优势差异表达基因GHR的克隆

以北京鸭、法国番鸭及其正反杂交1代为试验材料,采用mRNA差异显示(DDRT-PCR)方法分析不同试验组肌肉组织基因表达差异,结合抑制性消减杂交(SSH)加以验证,发现生长激素受体(GHR)基因在杂种中上调表达。鸭GHR基因3′端578bp片段测序及比对结果表明,该基因与鸡GHR基因核苷酸序列同源性为90%,氨基酸序列同源性为93%。