GICA法检测HBsAg的探讨

目的对3种胶体金免疫层析测定(GICA)试条检测HBsAg的性能、结果等技术参数进行初步探讨,为各实验室的选用提供参考.方法采用GICA法和酶联免疫吸附法(ELISA)对定值的HBsAg质控品和1 322份血清标本同时测定,并结合有关实验,对3种GICA试条的敏感性、特异性、渗透性、固相膜均匀性等结果进行初步评价.结果 3种GICA试条对HBsAg的最小检出量为1～5ng/ml;与ELISA法比较,检出率为97.37%～99.57%,一般不出现假阳性,未发现前带反应.结论 GICA适用于急诊检验,其敏感性低于ELISA法,成本高;特殊情况下,还必须与ELISA法并用,实行双检.

GICA法检测乙肝病毒标志物“两对半”的结果分析

目的 用ELISA法作参照，对胶体金免疫层析测定(GICA)试纸条检测乙肝标志物表面抗原(HBsAg)、表面抗体(HBsAb)、e抗原(HBeAg)、e抗体(HBeAb)、核心抗体(HBcAb)俗称“两对半”的性能、结果等技术参数进行了分析比较，为GICA法的临床应用提供参考。方法 从ELISA法测定“两对半”的血清标本中选出40例不同反应模式的标本及卫生部临介值血清，用GICA试纸条进行测定，对其反应的特异性，敏感性，符合度及试纸的反应阳性强度进行观察比较分析。结果 与ELISA法比较，GICA法测定血清标本的总特异性为93．8％；总灵敏度为94．4％：总符合率为94％。用GIcA法对卫生部临介值血清HBsAg2ng／ml、HBsAb30mlu／ml、HBcAb2ncu／m检出结果均为弱阳性，HBeAg2ncu／ml为阳性，HBeAb4ncu／ml为阴性，HBsAglng／ml为阴性．而将五项的原有浓度稀释一倍时均为阴性。两种方法检测各种模式符合率为80％。结论 GICA法用于两对半检测其特异性、敏感度、及符合率均达到90％以上，但灵敏度总体低于ELISA法，对于献血员的筛选有漏检的可能。在检测下限的标本有假阴性和假阳性出现，其试剂质量还有待于进一步提高和规范。但GICA法具有快速、简便、特异、不需特殊设备、适用于急诊病人检测的要求及可以单份测定等优点，其应用前景十分广阔。

胶体金免疫层析法高通量测定动物肌肉组织中多兽药残留

[目的]本文旨在建立一种胶体金免疫层析技术高通量测定猪肉、鸡肉组织中8种磺胺类、3种四环素类、2种喹诺酮类和甲氧苄啶药物残留的方法。[方法]动物肌肉组织中磺胺类、四环素类、喹诺酮类和甲氧苄啶经磷酸缓冲液提取,并经含Tween 20的磷酸缓冲液稀释后,与胶体金标记的单克隆抗体结合,抑制抗体与硝酸纤维素膜检测线(T线)上的抗原结合,从而导致T线颜色变化。通过比较T线和质控线(C线)颜色深浅,对试样中多兽药残留进行定性判定。[结果]本试验优化了pH值、抗体添加量、抗原包被量、Tween 20添加量和冻干保护剂种类等关键因素,磺胺类、四环素类、喹诺酮类和甲氧苄啶等药物的检出限分别为50、100、50、35μg·kg^(-1),灵敏度≥97%,假阳性率≤2%,假阴性率≤3%,且与现有标准方法检测结果一致。[结论]该方法操作简便,灵敏度和准确度高,检测时间短且稳定性好,可用于动物肌肉组织中多兽药残留的高通量快速检测。

胶体金免疫层析法同步快速测定畜禽肉中3种兽药残留

该文旨在建立一种胶体金免疫层析技术同步测定猪肉和鸡肉组织中呋喃唑酮代谢物、呋喃西林代谢物、氯霉素药物残留的方法。动物肌肉组织中呋喃唑酮代谢物、呋喃西林代谢物、氯霉素经酸化、衍生化及乙酸乙酯提取,并经含吐温-20的Tris-HCl缓冲液稀释后,与胶体金标记的单克隆抗体结合,抑制抗体和硝酸纤维素膜检测线(T线)上的抗原结合,从而导致T线颜色变化。通过比较T线和质控线(C线)颜色深浅,对试样中多兽药残留进行定性判定。试验优化了pH值、抗体添加量、抗原包被量、吐温-20添加量、衍生化试剂浓度和冻干保护剂种类等关键因素,并对检测卡的灵敏度、特异性和稳定性进行检测。结果显示,所建立的免疫层析方法可在35 min内检出猪肉和鸡肉中呋喃西林代谢物、呋喃唑酮代谢物和氯霉素药物,检出限分别为0.5、0.5、0.1μg/kg,灵敏度≥98%,假阳性率≤2%,假阴性率≤2%,稳定性可达到1年,且与现有标准方法检测结果一致。该方法操作简便、特异性强、灵敏度和准确度高,检测时间短且稳定性好,可用于动物肌肉组织中多兽药残留的高通量快速检测。

GICA与EIA法检测血清HBsAg结果比较

目的胶体金免疫层析(GICA)与酶联免疫(EIA)法检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)结果的分析。方法采用GICA和EIA法,对铁路系统体检人群3116份血清标本同时进行检测并分析。结果GICAA试条法检出111例阳性者,用EIA法检测全部为阳性;而用EIA法检出113例阳性同时用GICA法检测有2例阴性。结论GICA法与EIA法检测HBsAg比较,GICA法方法简便,速度快,准确率高,特别适用于大批量体检及献血员的HBsAg筛选实验。

乙肝表面抗原检测中ELISA法和胶体金试纸条法应用分析

目的分析比较ELISA法和胶体金试纸条法(GICA法)检测乙肝表面抗原(HBs Ag)的效果,为临床工作提供指导。方法取本院采集的血液标本380份,分别使用ELISA法和GICA法对HBs Ag进行检测,比较两组检测结果的阳性率,灵敏度和特异性。结果 ELISA法的阳性率为7.37%,GICA法的阳性率为6.58%,差异无统计学意义;ELISA法灵敏度高于GICA法,差异具有统计学意义(P<0.05);在特异度方面ELISA法和GICA法差别无统计学意义。结论 ELISA法和GICA法均是检测HBs Ag的可靠方法,ELISA法检测较为灵敏,适用于常规检测。GICA法检测方便,适用于急诊或健康人群筛查,但灵敏度有待提高。

不同检测方法在无偿献血者乙肝表面抗原弱阳性标本中的应用

目的:探讨不同检测方法-胶体金免疫层析方法(GICA)、酶联免疫吸附方法(ELISA)、核酸检测方法(NAT)以及电化学发光免疫检测方法(ECLIA)在乙肝表面抗原(HBsAg)表达为弱阳性的无偿献血者的标本诊断中的临床应用价值。方法:选取2016年1月至2018年12月在本院进行无偿献血的132份血液标本,HBsAg表达均呈弱阳性。采取ECLIA、ELISA、GICA以及NAT给予定量检测。以ECLIA法的检测结果作为标准,比较ELISA法、GICA法以及NAT法的特异度、敏感度。结果:GICA法的特异度以及灵敏度均明显低于ELISA法以及NAT法(P<0.05),ELISA法以及NAT法的特异度以及灵敏度比较接近。结论:ECLIA法、ELISA法、GICA法以及NAT法在HBsAg表达为弱阳性的无偿献血者标本的诊断中各有优缺点,相比较而言,ELISA法检测的特异度、敏感度更高。

胶体金免疫层析法快速检测水产品中呋喃妥因代谢物残留

采用胶体金免疫层析技术(GICA)测定水产品中的呋喃妥因代谢物残留,并用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)对实验结果进行确证。结果显示,胶体金免疫层析法的检测限为1.0μg/kg,假阳性率不大于5%,假阴性率为0;对实际样本的检测结果与LC-MS/MS法一致。研究表明,胶体金试纸条法操作简便、快速,成本低,为水产品中呋喃妥因代谢物的残留检测提供了快速筛选方法,而LC-MS/MS法灵敏度高,结果准确,适用于阳性样本的确证和精确定量。

牛奶中泰乐菌素和替米考星的胶体金免疫层析法测定

建立一种快速、简便、同时针对牛奶中泰乐菌素和替米考星残留的检测方法。应用竞争抑制免疫层析原理,研制出泰乐菌素和替米考星胶体金试纸条,并对其性能进行了鉴定。结果表明,该试纸条对牛奶中泰乐菌素和替米考星的检测限分别为25μg/L和50μg/L。假阳性率低于5%,假阴性率为0,检测时间10 min,与其他大环内酯类抗生素无交叉反应。该方法操作简便、灵敏度高、特异性强,适用于乳品流通环节中泰乐菌素和替米考星残留的快速检测。

金标法检测术前三项指标的评价分析

目的探讨分析金标法(GICA)检测术前三项血液指标的临床应用价值。方法分别用金标法试纸条与酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测1142份血清标本中的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab)、艾滋病病毒抗体(抗-HIV-1/2),并对两种方法检测的术前三项结果进行比较分析。结果金标法与酶联免疫吸附试验法术前三项指标检测阴性率之间差异差异无统计学意义(P>0.05)。结论金标法(GICA)检测术前三项血液指标结果相对准确且操作简便、快速,更适合急诊、门诊胃肠镜前及手术前的筛查。

乙肝表面抗原免疫学检测的质量控制

乙型肝炎是流传广泛的传染性疾病,提高乙肝表面抗原免疫学检测的准确度,对检测的结果进行质量控制,是本研究的目的。通过实验研究,提出方法控制、程序控制、仪器和设备控制以及人员控制四项质量控制措施。

ELISA法和胶体金免疫层析法在乙肝表面抗原检测中的对比研究

目的探讨ELISA法和胶体金免疫层析法(GICA法)在乙肝表面抗原检测中的优缺点和应用价值。方法随机选取进行血清检测的600例血清标本,同时采用ELISA法和胶体金免疫层析法检测乙肝表面抗原,比较两种检测方法的灵敏度及差异性。结果 ELISA法检测阳性率为5.33%,灵敏度为96.97%,特异度为100%;胶体金免疫层析法检测阳性率为5.0%,灵敏度为90.90%,特异度为99.82%;两种方法检测阳性结果符合率为90.63%。结论胶体金免疫层析法灵敏度低,特异性基本一致,ELISA法检测的阳性率准确、灵敏度高为突出优点,是目前各级实验室应用最广泛的HBsAg检测方法。

谷物中玉米赤霉烯酮残留的胶体金免疫层析法测定

建立一种快速、简便、针对谷物中玉米赤霉烯酮残留的检测方法。应用竞争抑制免疫层析原理,研制出玉米赤霉烯酮胶体金试纸条,并对其性能进行了鉴定。结果表明,该试纸条对谷物中玉米赤霉烯酮的检测限为100μg/kg,灵敏度为99%,特异性为94%,假阴性率为1%,假阳性率为6%,检测时间为10 min。该方法操作简便、灵敏度高、特异性强,适用于现场快速检测谷物中的玉米赤霉烯酮。

利用重组表位蛋白map0862-2154c检测牛副结核血清抗体胶体金免疫层析方法的建立（英文）

筛选牛副结核分枝杆菌的2个主要抗原map0862、map2154c中抗原指数高的抗原表位基因，将多表位基因序列合成，与原核表达栽体pET28a（＋）连接，构建重组质粒pET28a—map0862—2154c。重组质粒转化至大肠杆菌感受态细胞BL21（DE3）中诱导表达，以表达的重组表位蛋白为抗原建立检测牛副结核分枝杆菌抗体的胶体金免疫层析方法（GIcA，map0862—2154c-GICA），同时对河北省部分牛场采集的242份副结核病奶牛血样进行血清抗体检测。结果表明，牛副结核分枝杆菌表位蛋白map0862—2154c成功表达，表达产、物能与牛副结核分枝杆菌阳性血清反应。临床血清样本检测结果表明，其敏感性、特异性和符合率分别为91．86％（79／86），94．23％（147／156）和93．38％（226／242），该方法可用于牛副结核病的血清抗体检测。