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基于GINS家族成员在胶质瘤组织中的表达水平对其进行分型及其临床意义
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作者 廖永珍 梁禄 +1 位作者 李意 丛丽 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期261-270,共10页
目的:基于GINS家族成员在胶质瘤组织中表达水平对其分型,探究此分型预测胶质瘤患者的预后、免疫治疗疗效的有效性,采用TCMOI数据库虚拟筛选可靶向GINS的中药小分子。方法:数据库分析GINS基因组学、胶质瘤组织中差异表达基因与患者预后... 目的:基于GINS家族成员在胶质瘤组织中表达水平对其分型,探究此分型预测胶质瘤患者的预后、免疫治疗疗效的有效性,采用TCMOI数据库虚拟筛选可靶向GINS的中药小分子。方法:数据库分析GINS基因组学、胶质瘤组织中差异表达基因与患者预后的关系,基于GINS家族成员基因表达对胶质瘤进行分型并分析各亚型的预后情况,数据库数据分析各亚型中的基因突变、基因富集、肿瘤纯度和免疫细胞浸润评分,以及与GINS2可能相互作用的中药小分子,最后用qPCR法检测中国人胶质瘤组织中GINS1~4 mRNA的表达水平以验证其与数据库数据的一致性。结果:GINS家族各成员间的基因、蛋白结构和功能相似,胶质瘤组织中GINS家族成员呈高表达且与患者不良预后密切相关(P<0.05),基于GINS家族成员在胶质瘤组织中表达水平的S1、S2亚型分类能较好地预测胶质瘤患者的预后,S1亚型主要突变基因为CDKN2A/B、EGFR、PTEN而S2亚型的突变基因为IDH1、TP53和ATRX,GINS家族可能通过调控免疫微环境影响胶质瘤患者预后,CD276和CX3CL1可能是S1亚型胶质瘤患者实施免疫治疗的潜在靶点,CHEMBL66033、266935、293914、436859、1594881可能是潜在的靶向GINS2的中药小分子。结论:基于GINS家族构建的胶质瘤分子分型有助于识别更适合免疫治疗的高风险患者,筛选出的中药小分子可为胶质瘤患者分子靶向治疗和免疫治疗提供参考。 展开更多
关键词 胶质瘤 gins家族 分子分型 预后 分子对接 中药
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GINS1通过激活Notch/PI3K/AKT/mTORC1信号通路增强肺腺癌细胞糖酵解、增殖和转移
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作者 霍怡杉 徐晓慧 +1 位作者 马秀敏 冯阳春 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期735-744,共10页
背景与目的肺癌是所有癌症类型中占比最大的一种,其中肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)占肺癌患者的一半以上。目前,转移性LUAD患者5年生存率仍然较低,迫切需要新型生物标志物作为靶向治疗的靶点。Go-Ichi-Ni-San1(GINS1)是GINS家族的... 背景与目的肺癌是所有癌症类型中占比最大的一种,其中肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)占肺癌患者的一半以上。目前,转移性LUAD患者5年生存率仍然较低,迫切需要新型生物标志物作为靶向治疗的靶点。Go-Ichi-Ni-San1(GINS1)是GINS家族的重要成员,与人类恶性肿瘤的发生和发展密切相关。本研究旨在探究GINS1在LUAD细胞糖酵解、增殖和转移过程中的作用及相关分子机制。方法通过生物信息学分析GINS1在LUAD患者和健康人群中的表达差异。通过免疫组织化学染色和Western blot检测GINS1在LUAD组织和癌旁组织中的表达水平,采用Western blot和实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测GINS1在LUAD细胞系A549、SK-LU-1、Calu-3、H1299和人正常支气管上皮细胞系BEAS-2B中的表达水平。通过慢病毒转染细胞的方法构建稳定敲低GINS1的A549细胞株(shGINS1-A549)及其阴性对照细胞株(shGINS1-NC-A549)、稳定过表达GINS1的H1299细胞株(GINS1-OE-H1299)及其阴性对照细胞株(GINS1-OENC-H1299)。通过集落形成试验检测细胞增殖能力,划痕试验检测细胞迁移能力,Transwell试验检测细胞侵袭能力,试剂盒检测细胞对葡萄糖的消耗量以及乳酸的产量,Western blot检测糖酵解相关蛋白、Notch信号通路蛋白和磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)和哺乳动物雷帕霉素蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路蛋白表达水平。向shGINS1-A549组细胞加入Notch受体激动剂Jagged1,向GINS1-OE-H1299组细胞加入Notch受体抑制剂LY3039478,进行回复试验。结果GINS1在LUAD患者、组织和细胞系中均表达上调,并与患者总生存期有关(P<0.05)。敲低GINS1后,A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力均受到显著抑制(P<0.05);过表达GINS1则显著增强了H1299细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05)。此外,敲低GINS1导致A549细胞对葡萄糖的消耗量减少,乳酸产量减少,糖酵解相关蛋白表达水平降低(P<0.05);过表达GINS1则增强了H1299细胞糖酵解水平(P<0.05)。GINS1敲低导致A549细胞Notch1、Notch3、p-PI3K、p-AKT和p-mTORC1(Ser2448)蛋白表达水平显著降低(P<0.05),而PI3K、AKT、m TOR、p-mTORC2(Ser2481)蛋白表达水平无显著变化(P>0.05);GINS1过表达则升高了H1299细胞Notch1、Notch3、PI3K/AKT/mTORC1通路磷酸化蛋白水平(P<0.05)。Jagged1显著逆转了由于GINS1敲低导致的A549细胞糖酵解、增殖和转移活性抑制(P<0.05);LY3039478显著抑制了由于GINS1过表达诱导的H1299细胞糖酵解、增殖和转移活性增强(P<0.05)。结论GINS1的表达通过促进Notch1、Notch3受体表达水平升高,进而磷酸化激活下游PI3K/AKT/mTORC1信号通路,增强LUAD细胞糖酵解、增殖和转移。 展开更多
关键词 肺腺癌 gins1 NOTCH 糖酵解 增殖 转移
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GINS1基因在恶性肿瘤中的研究进展 被引量:1
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作者 刘振华 李月宏 +3 位作者 蔡艳 陈敏 方兴保 刘培万 《现代临床医学》 2024年第3期227-229,237,共4页
GINS1基因是GINS复合体的一个重要成员,发挥着许多重要的生物学功能,包括调控多功能蛋白、生长因子信号、受体分子等,参与DNA复制和细胞周期进展的启动。GINS1基因在大多数人体肿瘤中呈现异常表达,通过不同的分子机制及信号转导通路影... GINS1基因是GINS复合体的一个重要成员,发挥着许多重要的生物学功能,包括调控多功能蛋白、生长因子信号、受体分子等,参与DNA复制和细胞周期进展的启动。GINS1基因在大多数人体肿瘤中呈现异常表达,通过不同的分子机制及信号转导通路影响肿瘤进展和预后。近年来,GINS1基因作为恶性肿瘤潜在的治疗和预后生物标志物被广泛研究。本文就GINS1基因在恶性肿瘤中的研究进展进行综述,旨在为GINS1基因在恶性肿瘤靶向治疗中的应用提供理论依据。 展开更多
关键词 gins1基因 恶性肿瘤 靶向治疗
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基于生物信息技术分析GINS1基因在肺癌中的表达及意义
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作者 余国雄 伍丹丹 +1 位作者 王有娜 黄毅 《癌症》 CAS 2024年第3期118-130,共13页
背景与目的 肺癌是全球最常见的恶性肿瘤,大多数患者初次诊断时已发生转移,因此寻找肺癌新的诊断标志物并探索其在肺癌发生中的作用具有重要价值。基于生物信息数据探讨分析肺癌中GINS1基因与肺癌预后的相关性具有重要意义。方法 检索On... 背景与目的 肺癌是全球最常见的恶性肿瘤,大多数患者初次诊断时已发生转移,因此寻找肺癌新的诊断标志物并探索其在肺癌发生中的作用具有重要价值。基于生物信息数据探讨分析肺癌中GINS1基因与肺癌预后的相关性具有重要意义。方法 检索Oncomine、EGPIA、TCGA、Human protein atlas等基因数据库,分析GINS1基因在肺癌中的表达差异。应用蛋白质免疫印记法检测肺癌及癌旁组织中GINS1蛋白的表达水平,应用Kaplan-Meier进行患者生存分析,并利用String-DB数据库分析GINS1蛋白相互作用网络。结果 对Oncomine、GEPIA和The Human Protein Atlas数据库中肺癌与癌旁组织蛋白表达数据进行差异性分析,发现GINS1蛋白在肺癌组织中显著高表达,特别以肺腺癌、肺鳞癌中表达明显增加;通过生存分析发现高表达GINS1肺腺癌患者生存期明显低于低表达者,高表达患者预后更差;利用String-DB数据库发现与GINS1蛋白关联最为密切的为GINS蛋白家族(GINS2、GINS3、GINS4),其次为CDC45、MCM蛋白家族(MCM2、MCM3、MCM4、MCM5、MCM6、MCM7),富集分析发现互作蛋白主要参与DNA复制和细胞周期。结论GINS1基因在肺癌组织中显著高表达,与患者预后相关,其有可能成为肺癌诊断及药物治疗的新靶点。 展开更多
关键词 肺癌 gins1 Oncomine数据库 TCGA数据库 Human Protein Atlas数据库 String-DB数据库
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Analysis of the Effect of GINS4 Regarding the Proliferation and Invasion of Breast Cancer Cells
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作者 Yaxuan Liu Fen Yun +2 位作者 Yongfeng Jia Lin Shi Xia Liu 《Journal of Clinical and Nursing Research》 2024年第4期61-68,共8页
Objective: To analyze the role and influence of the GINS4 gene in breast cancer progression and to explore its expression in triple-negative and non-triple-negative breast cancer cell lines. Methods: Single-gene analy... Objective: To analyze the role and influence of the GINS4 gene in breast cancer progression and to explore its expression in triple-negative and non-triple-negative breast cancer cell lines. Methods: Single-gene analysis of GINS4 was performed by breast cancer RNA transcriptome data from The Cancer Genome Atlas (TCGA). Real-time quantitative polymerase chain reaction (PCR) was used to detect the expression of GINS4 in triple-negative and non-triple-negative breast cancer cell lines. The knockdown effects of GINS4 in MDA-MB-231 and MCF-7 cell lines on the proliferation and invasion of breast cancer cells were examined by cell counting kit 8 (CCK8) and Transwell assays. Results: Bioinformatics analysis showed that the expression of GINS4 in breast cancer was significantly higher than that in normal breast tissues (P > 0.05). At the same time, cell experiments confirmed that GINS4 was highly expressed in human breast cancer cell lines with normal breast cells as reference and in MDA-MB-231 and MCF-7 cell lines as reference, where the ability of proliferation and invasion of MDA-MB-231 and MCF-7 cells decreased after GINS4 knockdown. Conclusion: GINS4 is a gene associated with breast cancer malignancy, which can act as a novel tumor marker and has the potential as a new therapeutic target for breast cancer. 展开更多
关键词 Breast Cancer gins4 PROLIFERATION Tumor marker INVASION
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卵巢癌预后不良基因ATP6V1F、GINS1、GINS4的筛选 被引量:1
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作者 饶玉梅 王欣欣 《河南医学研究》 CAS 2023年第9期1586-1593,共8页
目的 筛选卵巢癌预后不良的分子生物学标志。方法 从GEO数据库获得卵巢癌GSE14001、GSE14407数据集,用在线分析工具GEO2R、Venn筛选得到卵巢癌和正常卵巢组织差异表达基因(DEGs),对DEGs进行富集分析,构建蛋白互作网络(PPI),以及构建网... 目的 筛选卵巢癌预后不良的分子生物学标志。方法 从GEO数据库获得卵巢癌GSE14001、GSE14407数据集,用在线分析工具GEO2R、Venn筛选得到卵巢癌和正常卵巢组织差异表达基因(DEGs),对DEGs进行富集分析,构建蛋白互作网络(PPI),以及构建网络模块得到关键基因,利用Kaplan Meier plotter网站分析关键基因与卵巢癌患者总生存期之间关系,应用GEPIA数据库分析DEGs在卵巢和卵巢癌组织中表达,应用The Human Protein Atlas数据库获取筛选基因的免疫组化结果,对比它们在卵巢和卵巢癌组织间的表达差异。结果 得到211个DEGs,92个上调和119个下调。差异基因生物学过程主要涉及侧枝发芽的正向调控、乏氧反应、间充质-上皮细胞信号传导;细胞组分主要集中在质膜顶、细胞表面、细胞外外泌体等部位;分子功能主要涉及丝氨酸型内肽酶活性、金属内肽酶活性、受体活性等;信号通路富集于白细胞跨内皮细胞迁移、细胞黏附通路、癌症通路等信号通路。得到35个候选基因,其中14个基因高表达、8个基因低表达与患者总生存期相关(P<0.05)。其中ATP6V1F、GINS1、GINS4基因在卵巢癌组织中在RNA水平和蛋白质水平表达均高于正常组织(P<0.05)。GNB3在卵巢癌组织中RNA水平表达低于正常组织,而在蛋白质水平恰好相反(P<0.05)。结论 ATP6V1F、GINS1、GINS4有可能是卵巢癌预后不良的新分子标志物。 展开更多
关键词 卵巢癌 ATP6V1F gins1 gins4 生物信息学
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雷公藤红素通过调控GINS2 表达对瘢痕疙瘩成纤维细胞活力和凋亡的影响 被引量:6
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作者 黄芳 石志军 +1 位作者 雷燕 杨擎宇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期2043-2049,共7页
目的:探讨雷公藤红素对瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFB)活力和凋亡的影响及其分子机制。方法:采用低、中、高剂量的雷公藤红素处理KFB。采用CCK-8实验和流式细胞术分别检测细胞活力和凋亡。RT-qPCR和Western blot检测GINS复合物亚基2(GINS2)的... 目的:探讨雷公藤红素对瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFB)活力和凋亡的影响及其分子机制。方法:采用低、中、高剂量的雷公藤红素处理KFB。采用CCK-8实验和流式细胞术分别检测细胞活力和凋亡。RT-qPCR和Western blot检测GINS复合物亚基2(GINS2)的表达。将KFB分为si-NC组、si-GINS2组、Exp+pcDNA组和Exp+pcDNA-GINS2组,按照上述方法检测细胞活力和凋亡的变化。结果:雷公藤红素处理后KFB活力降低,细胞凋亡率升高,GINS2表达降低,并呈显著的剂量依赖关系(P<0.05)。敲减GINS2表达后,KFB活力降低,细胞凋亡率升高(P<0.05);过表达GINS2可部分逆转雷公藤红素对KFB活力和凋亡的影响(P<0.05)。结论:雷公藤红素通过下调GINS2可抑制KFB活力,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 雷公藤红素 gins复合物亚基2 瘢痕疙瘩 成纤维细胞 细胞活力 细胞凋亡
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下调GINS2表达抑制HL60细胞周期调控因子 被引量:6
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作者 张曦 钟梁 +4 位作者 高远梅 胡秀秀 王慧 朱新瑜 刘北忠 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第9期1085-1090,共6页
目的观察下调GINS2的表达后对人白血病细胞系HL60周期调控因子的变化并探讨其机制。方法脂质体介导并稳定转染干扰质粒的细胞为干扰组,转染阴性对照质粒的细胞为阴性对照组,只加入脂质体的细胞为空白对照组,未转染的HL60细胞为未处理组... 目的观察下调GINS2的表达后对人白血病细胞系HL60周期调控因子的变化并探讨其机制。方法脂质体介导并稳定转染干扰质粒的细胞为干扰组,转染阴性对照质粒的细胞为阴性对照组,只加入脂质体的细胞为空白对照组,未转染的HL60细胞为未处理组。集落形成实验测定细胞增殖;流式细胞术分析细胞周期;3H-TdR掺入实验检测细胞DNA合成;Western blot检测CDK1、cyclinB1等蛋白;RT-PCR检测ATM,CHK2,P53等mRNA水平;Western blot检测其蛋白水平。结果和其他3组相比,干扰组细胞G2期细胞数明显增加、DNA合成受阻、增殖减慢。与G2期相关周期调控蛋白CDK1,cyclinB1的表达随时间变化而明显降低。和其他3组相比,干扰组细胞ATM,CHK2,P53转录水平和翻译水平显著上调。结论下调GINS2表达后可抑制HL60细胞DNA复制并影响其G期进程,机制可能与ATM,CHK2,P53等基因相关。 展开更多
关键词 gins2基因 HL60细胞 G2期阻滞 白血病
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GINS2蛋白在宫颈癌组织中的表达情况及其与患者临床特征和预后的关系 被引量:3
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作者 王媛 惠双 +3 位作者 张成辉 郭宏强 贺海发 杨如玉 《癌症进展》 2019年第8期965-967,985,共4页
目的分析宫颈癌组织中GINS2蛋白的表达情况及其与患者临床特征和预后的关系。方法选取98例宫颈癌患者和同期24例健康体检者分别作为观察组和对照组,采用酶联免疫吸附法和免疫组织化学染色法检测GINS2蛋白的表达情况,比较不同临床特征宫... 目的分析宫颈癌组织中GINS2蛋白的表达情况及其与患者临床特征和预后的关系。方法选取98例宫颈癌患者和同期24例健康体检者分别作为观察组和对照组,采用酶联免疫吸附法和免疫组织化学染色法检测GINS2蛋白的表达情况,比较不同临床特征宫颈癌患者宫颈癌组织中GINS2蛋白的阳性表达情况,并探讨GINS2蛋白表达与患者预后的关系。结果宫颈癌组织中GINS2蛋白的相对表达量和阳性表达率均明显高于正常宫颈组织(P<0.01)。不同年龄宫颈癌患者宫颈癌组织中GINS2蛋白的阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同病理类型、组织分化程度、TMN分期、浸润深度、淋巴血管间隙浸润情况、淋巴结转移情况比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。GINS2蛋白阴性表达患者的3年生存率高于GINS2蛋白阳性表达患者(P<0.05),生存期长于GINS2蛋白阳性患者(P<0.05)。结论 GINS2蛋白在宫颈癌组织中的相对表达量和阳性表达率较高,其在宫颈癌的发生、发展过程中起促进作用,并且其表达与宫颈癌患者的病理类型、组织分化程度、TMN分期、浸润深度、淋巴血管间隙浸润情况、淋巴结转移情况及患者的预后均有一定的关系。 展开更多
关键词 宫颈癌 gins2 预后 临床特征
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GINS2的生物学特性及与肿瘤关系的研究进展 被引量:1
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作者 张坤 刘侠 +2 位作者 康淑霞 刘可微 郝玉琴 《医学综述》 2018年第4期687-692,共6页
GINS复合物是一个环状核酸复制因子,其本质是一种复制解螺旋酶。近年来国内外研究发现GINS复合物在乳腺癌、黑色素瘤、肝癌等多种肿瘤中高表达,并促进肿瘤细胞的发生和发展。GINS2基因(又称PSF2基因)是GINS复合体的家族成员之一,在DNA... GINS复合物是一个环状核酸复制因子,其本质是一种复制解螺旋酶。近年来国内外研究发现GINS复合物在乳腺癌、黑色素瘤、肝癌等多种肿瘤中高表达,并促进肿瘤细胞的发生和发展。GINS2基因(又称PSF2基因)是GINS复合体的家族成员之一,在DNA复制和交叉链修复、维持染色体缩合及胚胎组织中特异性表达等生物学事件中发挥重要作用。GINS2基因在癌细胞中高表达,且与肿瘤的严重程度相关,越来越多的研究者将GINS2基因作为肿瘤基因治疗的理想靶点。 展开更多
关键词 gins2基因 肿瘤 基因表达
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GINS家族基因在肾透明细胞癌中的表达特点及预后价值
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作者 钟方炎 邓剑雄 +3 位作者 赖军明 沈若妍 林红 罗辉 《实用临床医学(江西)》 CAS 2021年第3期1-6,共6页
目的探讨GINS家族基因作为肾透明细胞癌的潜在预后标志物。方法通过Oncomine数据库、UALCAN、Kaplan-Meier plotter网站分析GINS家族基因在肾透明细胞癌癌中的mRNA表达,研究其表达量与临床病理特征和生存预后之间的关系。通过Metascape... 目的探讨GINS家族基因作为肾透明细胞癌的潜在预后标志物。方法通过Oncomine数据库、UALCAN、Kaplan-Meier plotter网站分析GINS家族基因在肾透明细胞癌癌中的mRNA表达,研究其表达量与临床病理特征和生存预后之间的关系。通过Metascape、String网站及Cytoscape软件对GINS家族基因突变的改变组中差异表达基因进行分析并进行可视化处理。结果与正常肾组织比较,GINS家族基因在肾透明细胞癌患者中均呈现过表达(P<0.05),且表达量与癌症分期和肿瘤分级之间有统计学差异,其中GINS2基因的高表达提示较差的总体生存率(logrank P=0.00038)。这些GINS家族基因在细胞周期过程的调控、DNA复制涉及的DNA链延长、纺锤体微管与着丝点连接的调节、DNA构象变化、mRNA转运、减数分裂细胞周期的调控、p53类介质对信号转导的调控等方面起作用。结论GINS家族基因均在肾透明细胞癌组织中高表达,其中GINS2基因的高表达可提示较差的预后,故其可作为肾透明细胞癌的预后标志物。 展开更多
关键词 肾透明细胞癌 生物信息学 预后标志物 gins家族基因 gins2基因
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GINS表达水平与肿瘤患者预后关系的meta分析
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作者 王世博 柳晓金 +1 位作者 郑立恒 高艳军 《河北医学》 CAS 2020年第1期80-83,共4页
目的: 应用meta分析评价DNA复制复合体(GINS)表达水平与肿瘤患者预后的关系。 方法: 检索万方医学网,维普数据库,PubMed数据库中关于GINS表达水平与肿瘤患者预后关系的相关文章,检索时间截止到2019年4月30日,采用revman5.3软件进行meta... 目的: 应用meta分析评价DNA复制复合体(GINS)表达水平与肿瘤患者预后的关系。 方法: 检索万方医学网,维普数据库,PubMed数据库中关于GINS表达水平与肿瘤患者预后关系的相关文章,检索时间截止到2019年4月30日,采用revman5.3软件进行meta分析。 结果: 纳入的7篇报道了GINS基因表达水平与总生存期(OS)的关系,病例数为854例,结果显示高表达GINS基因的肿瘤患者OS显著缩短(HR=2.11,95%CI为1.43~3.10,P=0.0002);纳入3篇报道了GINS基因表达水平与无病生存期(DFS)的关系,病例数为991例,结果显示高表达GINS基因的肿瘤患者DFS显著缩短(HR=1.60,95%CI为1.38~1.86,P=0.00001)。 结论: GINS基因高表达与肿瘤患者的不良预后有一定的关系,提示GINS可能成为肿瘤预后潜在靶标。 展开更多
关键词 gins 肿瘤 META分析 预后
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人GINS2基因RNA干扰慢病毒载体的构建及其在上皮性卵巢癌中的表达
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作者 严婷 叶艾竹 +1 位作者 江恩利 王玉娟 《贵州医药》 CAS 2019年第5期679-682,I0001,共5页
目的构建人GINS2基因RNA干扰慢病毒表达载体,并建立稳定干扰GINS2基因表达的上皮性卵巢癌细胞系,为研究GINS2蛋白在上皮性卵巢癌发生发展中的作用奠定基础。方法针对GINS2基因序列,按照RNAi序列的设计原则,设计、合成GINS2基因特异性小... 目的构建人GINS2基因RNA干扰慢病毒表达载体,并建立稳定干扰GINS2基因表达的上皮性卵巢癌细胞系,为研究GINS2蛋白在上皮性卵巢癌发生发展中的作用奠定基础。方法针对GINS2基因序列,按照RNAi序列的设计原则,设计、合成GINS2基因特异性小分子干扰siRNA(small interference RNA,siRNA)靶点,与慢病毒构建重组形成shRNA表达载体,利用PCR和测序鉴定获取正确克隆。将筛选出的最有效重组载体与慢病毒包装质粒共转染293T细胞并测定病毒滴度。随后将其感染上皮性卵巢癌SKOV3细胞株细胞,采用Real-time PCR 检测靶基因的沉默效率。结果慢病毒RNA干扰载体经酶切和测序鉴定证实准确连接测序正确,且包装出来的病毒纯化后滴度达5×10^8TU/mL。RT-qPCR、Western blot结果显示感染后GINS2 mRNA及蛋白水平显著下降。结论成功构建了人GINS2基因特异性的慢病毒干扰载体,并获得了GINS2基因稳定干扰的上皮性卵巢癌SKOV3细胞系。 展开更多
关键词 上皮性卵巢癌 gins2 RNA干扰 慢病毒
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GINS2蛋白对三阴性乳腺癌细胞的作用及机制分析 被引量:2
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作者 王淦平 方平 +3 位作者 令狐锐霞 张勇 王英哲 彭亮 《解放军医学院学报》 CAS 2019年第3期260-265,F0003,共7页
目的分析GINS2蛋白对三阴性乳腺癌细胞及肿瘤干细胞的作用,并初步探索其作用机制。方法选取三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)细胞系MDA-MB-436和MDA-MB-157细胞,构建正常对照组及GINS2敲低组。通过集落形成和细胞增殖... 目的分析GINS2蛋白对三阴性乳腺癌细胞及肿瘤干细胞的作用,并初步探索其作用机制。方法选取三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)细胞系MDA-MB-436和MDA-MB-157细胞,构建正常对照组及GINS2敲低组。通过集落形成和细胞增殖测定比较细胞生长能力,细胞侵袭试验比较侵袭能力,Aldhhi细胞分选及成球分析比较两组细胞"干性"的差异,流式细胞仪分析细胞周期变化。通过蛋白质印迹法和免疫共沉淀实验研究GINS2在乳腺癌细胞中相互作用的蛋白。结果 TNBC细胞中转染siRNA后,GINS2降低导致TNBC细胞的生长能力、侵袭能力、肿瘤干细胞"干性"均明显下降,GINS2下降导致细胞在G2期持续积累,在G1期数量减少。另外,GINS2与JUN蛋白在细胞内相互结合。结论敲低GINS2可抑制TNBC生长和转移,是未来的特异性治疗靶点。 展开更多
关键词 三阴性乳腺癌 gins2蛋白 肿瘤干细胞
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GINS2与肿瘤相关性研究最新进展
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作者 熊楚晖 周瀛 《临床医学进展》 2023年第3期3144-3149,共6页
随着我国肿瘤发生率的持续增高,我们需要一个对于肿瘤更加有效的治疗方式和更为敏感的诊断方法,同时我们也要加深了解肿瘤的发生及发展过程,从中发现相关规律并找到予以防治的方法。GINS2又称psf2与psf1,psf3,sld5共同组成GINS复合体的... 随着我国肿瘤发生率的持续增高,我们需要一个对于肿瘤更加有效的治疗方式和更为敏感的诊断方法,同时我们也要加深了解肿瘤的发生及发展过程,从中发现相关规律并找到予以防治的方法。GINS2又称psf2与psf1,psf3,sld5共同组成GINS复合体的组成部分,并在细胞复制修复及周期调控中发挥着重要作用。近来相关研究表明GISN2与多种肿瘤的预后及发展密切相关,本文就GISN2目前相关研究进展探讨其与肿瘤之间的相关关系。 展开更多
关键词 肿瘤 gins复合体 gins2 psf2
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敲低GINS1基因抑制鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭能力 被引量:1
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作者 梁盼 杨艳平 +2 位作者 冯国飞 温文胜 张哲 《广西医科大学学报》 CAS 2022年第7期1031-1038,共8页
目的:探索GINS1基因在鼻咽癌(NPC)中的表达情况,并研究沉默GINS1基因是否影响NPC细胞的恶性生物学行为。方法:使用公共数据库GEO,比较GINS1基因在NPC组织和正常鼻咽上皮组织(NNE)中转录水平的表达差异。通过实时荧光定量聚合酶链式反应(... 目的:探索GINS1基因在鼻咽癌(NPC)中的表达情况,并研究沉默GINS1基因是否影响NPC细胞的恶性生物学行为。方法:使用公共数据库GEO,比较GINS1基因在NPC组织和正常鼻咽上皮组织(NNE)中转录水平的表达差异。通过实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测GINS1在转录水平的表达差异。通过蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测GINS1在蛋白水平的表达。使用siRNA干扰技术敲低NPC细胞中GINS1基因的表达。分别通过细胞计数试剂盒(CCK-8)法、划痕实验、Transwell侵袭实验检测细胞的增殖、迁移及侵袭能力。结果:基于GEO数据库的生物信息学分析,发现GINS1在NPC中呈高转录水平(SMD=2.23;P<0.05)。GINS1的mRNA表达在NPC细胞系和组织中上调(P<0.05),其表达在患者的年龄、性别、T分期、N分期及临床分期中差异无统计学意义(均P>0.05)。敲低GINS1,显著抑制细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.05)。结论:GINS1是NPC潜在的肿瘤致癌基因,可能作为NPC的有效诊断标志物。 展开更多
关键词 鼻咽癌 gins1 增殖 迁移 侵袭
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shRNA干扰GINS2基因对甲状腺癌细胞增殖的影响 被引量:2
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作者 朴民采 何赛飞 +2 位作者 宋雅楠 张苗 赵滨 《肿瘤药学》 CAS 2019年第1期45-50,共6页
目的探讨GINS2在甲状腺癌中的表达及其对甲状腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法通过基因干扰技术抑制甲状腺癌K1和SW579细胞中的GINS2的表达。采用Real-time PCR、Western blot检测细胞中GINS2 mRNA和蛋白的表达水平。采用MTT法和流式细... 目的探讨GINS2在甲状腺癌中的表达及其对甲状腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法通过基因干扰技术抑制甲状腺癌K1和SW579细胞中的GINS2的表达。采用Real-time PCR、Western blot检测细胞中GINS2 mRNA和蛋白的表达水平。采用MTT法和流式细胞仪检测细胞增殖、凋亡及细胞周期。结果干扰GINS2后,K1和SW579细胞GINS2mRNA和蛋白表达水平均显著低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01);实验组K1和SW579细胞的增殖受到显著抑制(P<0.01),凋亡率显著升高(P<0.01)。K1细胞的细胞周期发生显著改变,但SW579细胞的细胞周期未发生显著改变。结论 GINS2在甲状腺癌细胞中高表达,下调GINS2表达可抑制甲状腺癌细胞增殖并促进其凋亡。GINS2可能是甲状腺癌诊断或预后的潜在生物标志物及治疗靶点。 展开更多
关键词 甲状腺癌 gins2 RNA干扰 SHRNA
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人早幼粒细胞cDNA文库中与GINS2发生相互作用靶蛋白的筛选和鉴定
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作者 张曦 潘玉卿 +6 位作者 余鑫 郑亚婷 郭成斌 徐娜 王良晓 何亮 杨丽 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期66-72,共7页
目的:采用酵母双杂交系统筛选与人GINS2编码蛋白发生相互作用的靶蛋白,阐明其在急性早幼粒细胞白血病(APL)中的致病信号及相关机制。方法:采用热激法将诱饵质粒pGBKT7-GINS2与人早幼粒细胞cDNA文库质粒共同转化至酵母AH109感受态细胞中... 目的:采用酵母双杂交系统筛选与人GINS2编码蛋白发生相互作用的靶蛋白,阐明其在急性早幼粒细胞白血病(APL)中的致病信号及相关机制。方法:采用热激法将诱饵质粒pGBKT7-GINS2与人早幼粒细胞cDNA文库质粒共同转化至酵母AH109感受态细胞中,筛选与GINS2编码蛋白相互作用的文库蛋白。利用多重报告基因检测和DNA测序对编码互作蛋白的阳性克隆进行生物信息学分析。结果:成功从文库中筛选到15个初始阳性克隆,其中10个能激活腺苷酸琥珀酸合成酶2(ADE2)和组氨醇氨基盐转移酶3(HIS3)报告基因,13个能激活β-半乳糖苷酶(LacZ)报告基因。对10个能在SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade培养基中生长的阳性克隆行DNA测序和基本局部比对搜索工具(BLAST)比对分析后,除8和9号测序失败,其余8个阳性克隆分属8种不同的蛋白编码基因,分别是RNA结合基序蛋白39(RBM39)、泛素样修饰因子激活酶1(UBA1)、金属硫蛋白2(MT2A)、线粒体钙离子摄入蛋白1(MICU1)、N-乙基马来酰亚胺敏感性融合蛋白辅因子(NSFL1C)、脂肪酰基辅酶a还原酶1(FAR1)、双特异性磷酸酶1(DUSP1)和细胞表面抗原14(CD14)。结论:成功筛选到与GINS2发生相互作用的8个功能蛋白,推测目的蛋白可能在细胞损伤、转录调控和增殖代谢等方面发挥重要作用。 展开更多
关键词 白血病 人早幼粒细胞cDNA文库 酵母双杂交 gins2
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GINS2基因与肿瘤的相关性及研究进展
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作者 欧圆圆 张曦 杨丽 《检验医学与临床》 CAS 2019年第11期1604-1607,共4页
GINS2基因是GINS基因复合物家族的一个亚基,由PSF1、PSF2、PSF3和SLD5组成的GINS复合物,其本质是一种复制解螺旋酶,是TAKAYAMA等[1]用遗传筛选方法从酵母蛋白中提纯分离开来,并首次发现的核酸复制因子。GINS基因复合物家族是细胞生长和... GINS2基因是GINS基因复合物家族的一个亚基,由PSF1、PSF2、PSF3和SLD5组成的GINS复合物,其本质是一种复制解螺旋酶,是TAKAYAMA等[1]用遗传筛选方法从酵母蛋白中提纯分离开来,并首次发现的核酸复制因子。GINS基因复合物家族是细胞生长和染色体复制所必需的调控基因。GINS2基因也称为PSF2,位于人染色体16q24上,该基因mRNA长度为1196bp,编码相对分子质量为21×10^3的蛋白质,在DNA复制开始时,GINS基因复合物启动环状结构,并通过调控真核细胞的多功能蛋白、生长因子信号、受体分子等,参与DNA复制和细胞周期进程的启动。GINS2基因在许多恶性实体瘤(包括乳腺癌、黑色素瘤和肝细胞癌)中大量表达,与癌细胞的生长、增殖、侵袭、转移关系密切,并通过参与细胞周期的调控影响多种生物学特性。现就GINS2基因在各肿瘤中的相关研究现状进行综述。 展开更多
关键词 gins2基因 肿瘤 生物学特性 基因表达
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GINS2蛋白在宫颈癌患者宫颈组织中的表达情况及与患者临床特征的相关性
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作者 娄艳芳 《河南医学研究》 CAS 2020年第15期2838-2840,共3页
目的观察GINS2蛋白在宫颈癌患者宫颈组织中的表达情况及与患者临床特征的相关性。方法将2015年1月至2019年1月在通许县人民医院就诊的90例宫颈癌患者(宫颈癌组)及同时期在通许县人民医院体检的90例健康女性(健康对照组)纳入研究。使用EL... 目的观察GINS2蛋白在宫颈癌患者宫颈组织中的表达情况及与患者临床特征的相关性。方法将2015年1月至2019年1月在通许县人民医院就诊的90例宫颈癌患者(宫颈癌组)及同时期在通许县人民医院体检的90例健康女性(健康对照组)纳入研究。使用ELISA试剂盒检测GINS2蛋白表达情况。对比两组患者GINS2蛋白表达阳性率和表达量;观察临床特征与GINS2蛋白表达的相关性。结果宫颈癌组患者GINS2蛋白表达阳性率和相对表达量均高于健康对照组(P<0.05)。病理类型、TNM分期、组织分化程度、浸润程度以及是否存在淋巴血管间隙浸润和淋巴结转移影响宫颈组织GINS2蛋白的表达(P<0.05)。结论 GINS2蛋白在宫颈癌患者宫颈组织中的表达阳性率和相对表达量均高于正常宫颈组织,且鳞癌、高TNM分期、高组织分化程度、高浸润程度以及存在淋巴血管间隙浸润和淋巴结转移患者GINS2蛋白表达明显上升。 展开更多
关键词 宫颈癌 gins2蛋白 临床特征 相关性
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