参麦颗粒中红参掺伪研究

目的建立参麦颗粒中红参掺伪的检查方法。方法采用固相萃取-超高效液相色谱串联质谱(SPE-UPLC-MS/MS)法,色谱柱为Shimadzu Shim-pack GIST C18柱(100 mm×2.1 mm,2μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为0.35 mL/min,柱温为40℃,进样量为5μL。电喷雾离子源、负离子模式(ESI-),多反应监测(MRM)模式。结果拟人参皂苷F11质量浓度在9.030~344.0 ng/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9992,n=5),检测限和定量限分别为1.1288,22.8 ng/mL;精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于4.0%;平均加样回收率为108.17%,RSD为4.24%(n=6)。以0.051μg/g为掺伪判定限度,3家企业的85批样品中有9批超出限度(检出率为10.59%)。结论所建立的方法简便快速、准确度高、专属性强,可作为参麦颗粒中红参掺伪的检查方法。

人参提取物治疗阿尔茨海默病药理作用及机制研究进展

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)已逐渐成为危害老年人健康的重大疾病之一。开发高效低毒的AD防治药物是目前面临的重大医学问题之一。中药在AD防治方面具有一定的研发价值。越来越多的研究表明,人参作为一种传统名贵中药,在改善学习记忆能力和防治AD方面具有良好作用。本文主要对人参提取物改善AD症状及其作用机制进行了综述,以期为人参提取物在临床中改善学习记忆能力和防治AD提供依据。

人参三七提取物抗疲劳作用的研究

[目的]研究人参三七提取物缓解体力疲劳的作用,为进一步开发利用人参三七提供试验依据。[方法]将小鼠分为4批,每批48只,随机分为4组,分别为对照组和50、100、300 mg/kg 3个给药组,各组小鼠经口灌胃给药30 d后,分别测定其负重游泳时间及血清尿素氮、血乳酸、肝糖原含量。[结果]100和300 mg/kg剂量组人参三七提取物小鼠负重游泳时间显著长于对照组(P<0.01),血清中尿素氮含量显著低于对照组(P<0.01;P<0.05),小鼠肝糖原水平明显高于对照组(P<0.01;P<0.05);小鼠游泳后血乳酸含量显著低于对照组(P<0.01;P<0.05)。[结论]人参三七提取物具有缓解体力疲劳的作用。

人参三七川芎提取物对高糖高脂诱导的衰老血管内皮细胞自噬的影响

目的观察人参三七川芎提取物对血管内皮细胞自噬流的影响,探讨其延缓高糖高脂诱导血管内皮细胞衰老的作用机制。方法采用40 mmol/L葡萄糖和100μmol/L棕榈酸钠造模,实验分为空白对照组、衰老模型组和中药组(200 mg/L),干预48 h。采用CCK-8检测细胞增殖能力;β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老程度;Western blot检测细胞p16、p21、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3B-Ⅱ)和p62蛋白表达;免疫荧光检测自噬流变化。结果与空白对照组比较,衰老模型组细胞增殖能力和LC3B-Ⅱ表达降低,β-半乳糖苷酶蓝染细胞数量和p16、p21、p62蛋白表达增加,并存在自噬流阻滞;与衰老模型组比较,中药组细胞增殖能力增强,LC3B-Ⅱ表达升高,β-半乳糖苷酶蓝染细胞数量减少,p16、p21和p62表达降低,自噬流畅通。结论人参三七川芎提取物可延缓高糖高脂引起的血管内皮细胞衰老,其机制可能与增强细胞自噬活性有关。

人参提取物对Ⅰ型干扰素及下游基因表达的调节作用

目的探讨人参提取物对Ⅰ型干扰素及下游基因表达的调节作用。方法培养THP-1细胞并加入人参提取物后,ELISA检测干扰素-α、干扰素-β分泌水平,Real-time PCR检测BST-2、APOBEC3G表达。结果与空白组比较,人参提取物组干扰素-α分泌水平显著提高(P<0. 01),但对干扰素-β无明显影响(P>0. 05);与对照siRNA组比较,该组BST-2、APOBEC3G表达显著提高(P<0. 01),并与干扰素-α诱导呈正相关。结论人参提取物可通过Toll样受体途径诱导单核细胞分泌干扰素-α,从而提高抗病毒因子表达。

人参提取物及皂苷类成分对2型糖尿病作用机制的研究进展

2型糖尿病是由胰岛β细胞功能障碍和(或)胰岛素抵抗引起的以慢性高血糖为主要特征的代谢性疾病,因其目前患病率的日益增加,使得防治2型糖尿病已然成为急需攻破的重要难题。近年来,中药以有效性、多靶点、毒副作用低的特点成为研究的热点,其中有关人参提取物及皂苷类成分抗炎抗菌、抗肿瘤、抗氧化以及对心血管系统、中枢神经系统的研究较多,而对改善2型糖尿病等代谢性疾病作用机制的研究相对较少。本文就近年来人参提取物及皂苷类成分对2型糖尿病作用机制的研究情况展开综述,并指出存在问题及发展趋势,以期对人参作为2型糖尿病潜在防治药物的早期临床应用提供参考依据。

人参提取物吸湿特性及其数学模型

目的拟合人参提取物(GRRE)吸湿过程数学模型并分析其吸湿特性。方法用称量法测试GRRE在25、35、45℃下吸附/解吸等温线,用7个非线性回归方程对等温线进行描述,借助1st Opt统计分析软件拟合,以均方根误差(RMSE)、残差平方和(RSS)和决定系数(R^2)为评价指标,筛选最佳拟合模型,结合25、35、45℃下吸附等温线计算吸附热。结果 25、35、45℃下,GRRE吸附/解吸等温线都是Peleg模型拟合效果较好,都属于第II种类型,解吸等温线因较高的平衡含水量而出现明显的滞后现象,该滞后现象属于H_3型。随着温度升高这种滞后现象变弱。吸附热随着平衡吸湿量的增大而增大。结论 Peleg模型较好地拟合GRRE的吸附/解吸等温线,且吸附/解吸等温线存在滞后现象,该滞后现象随温度升高而变弱,吸附热与平衡吸湿量密切相关。

乳剂对人参有效成分透皮吸收的影响

目的:考察人参提取液和人参乳膏中有效成分的体外透皮吸收能力。方法:采用智能透皮吸收仪,以人参总皂苷和总多糖为考察指标,采用UV测定指标成分含量,通过体外释药试验考察人参提取液制备成乳膏前后指标成分的透皮吸收能力变化。结果:人参乳膏中总皂苷透皮吸收过程符合一级方程,而人参乳膏中总多糖、人参提取液中总皂苷和总多糖的透皮吸收过程均符合Higuchi方程,2种成分的累积释药率分别为82.30%,67.53%。结论:人参乳膏具有良好的透皮能力,可增加有效成分的透皮吸收,为其他透皮给药剂型的研制提供科学依据。

人参花中总皂苷的提取工艺优选

目的:优选人参花中总皂苷的提取工艺条件。方法:采用UV测定总皂苷含量,以人参皂苷Re为指标成分,检测波长550 nm。以总皂苷提取量为指标,通过正交试验考察料液比、乙醇体积分数、提取时间和提取次数对人参花中总皂苷提取工艺的影响。结果:总皂苷最佳提取工艺为料液比1∶10,乙醇体积分数80%,提取温度85℃,提取时间1 h,提取数3次;总皂苷得率18.66%。结论:优选的提取工艺稳定、合理,有效成分提取率高,为人参花资源的开发利用提供参考。

人参-三七-川芎提取物对过氧化氢诱导内皮细胞衰老SIRT1自噬通路的机制研究

观察人参-三七-川芎提取物对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的内皮细胞衰老SIRT1-自噬通路的影响。该研究以血管内皮细胞作为研究对象,过氧化氢诱导内皮细胞衰老作为模型,实验分为空白对照组(control),模型组(model)、模型+DMSO组(DMSO),白藜芦醇组(RESV)及人参-三七-川芎提取物低(GNS-L)、中(GNS-M)、高(GNS-H)剂量组,药物干预时间为24 h。应用倒置显微镜观察细胞生长状态,透射电子显微镜观察自噬小体的形成,免疫荧光染色观察细胞微管相关蛋白1轻链3β(LC3)的变化,自噬双标腺病毒(mRFP-GFP-LC3)双荧光体系融合蛋白示踪自噬流,单丹磺酰尸胺(dansylcadaverine,MDC)染色检测自噬囊泡,蛋白质免疫印迹(Western blot)检测蛋白沉默信息调节因子2相关酶1(sirtuin 1,SIRT1)、泛素结合蛋白p62及LC3Ⅱ的表达。H_(2)O_(2)造模后,细胞生长速度放慢,细胞贴壁能力下降,SA-β-gal染色蓝染细胞增多,胞质内出现一定数量的双层膜结构的自噬小体及次级溶酶体,自噬流水平略增。给予药物干预后,与模型组相比,各剂量组细胞形态改善,贴壁能力尚可,细胞膜相对完整光滑,SA-β-gal染色蓝染细胞减少,胞质中出现较多自噬小体、自噬空泡及次级溶酶体,自噬溶酶体数量增多,自噬流增加,LC3及MDC染色的荧光强度明显提高,SIRT1及LC3Ⅱ蛋白表达增加,同时p62蛋白表达下调,表明用药后可以提高细胞自噬水平。中药人参-三七-川芎提取物可以延缓血管内皮细胞的衰老,且药物干预后,自噬流及相关蛋白SIRT1、LC3Ⅱ及p62变化明显,自噬水平明显提升,且EX527削弱了中药延缓血管衰老的作用,中药人参-三七-川芎提取物可能通过SIRT1自噬通路延缓血管内皮细胞的衰老。

动态优化方法在人参提取工艺优化中的应用

目的:采用动态优化方法优选人参中人参皂苷提取工艺。方法:采用HPLC测定人参中人参皂苷Rg1,人参皂苷Re和人参皂苷Rb1的含量变化,Diamonsil RP-18e色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈(A)-水(B)梯度洗脱(0~7 min,16%~18%A;7~27 min,18%~30%A),流速3.0 m L·min-1,柱温35℃,DAD检测波长203 nm,进样量20μL。通过比较动态优化工艺与文献提取工艺所得人参提取物中浸膏得率、指标成分含量和指纹图谱的相似度,评价动态优化方法应用于人参中人参皂苷提取工艺优化的可行性。结果:动态优化提取工艺为8倍量70%乙醇提取3次,提取时间为第1次40 min,第2次20 min,第3次40 min,总提取物的浸膏得率为41.3 mg·g-1。动态优化提取工艺与文献提取工艺的提取物中指标成分含量及浸膏得率的RSD均<5%,指纹图谱相似度为100%,表明2种提取方法的提取物基本一致,但是动态优化提取工艺提取时间节约63%,耗电量节约60%。结论:动态优化方法可以用于人参中人参皂苷提取的工业化生产,该工艺能大幅减少提取时间,缩短生产周期,降低能耗,能够产生明显的经济价值,具有很好的应用前景。

人参三七川芎提取物对复制性衰老血管平滑肌细胞SM22α蛋白的影响

目的:观察人参三七川芎提取物对复制性衰老血管平滑肌细胞及其骨架蛋白相关蛋白平滑肌22α(SM22α)的影响。方法:以人主动脉平滑肌细胞作为研究对象,复制性衰老9代细胞作为衰老模型,实验分为青年组(5代细胞),模型组(9代细胞),人参三七川芎提取物低、中、高(100,200,400 mg·L-1)剂量组及白藜芦醇组(10μmol·L-1),药物干预时间为48 h。采用β-半乳糖苷酶特异染色法计算蓝染细胞比率,流式细胞技术分析细胞周期,免疫荧光染色观察细胞SM22α形态的改变,实时荧光定量-聚合酶链式反应(q PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)检测SM22α的mRNA及蛋白表达情况。结果:与青年组比较,模型组细胞体积增大,形态不规则,G0/G1期数量增多,S期数量减少,且β-半乳糖苷酶染色蓝染数量减少(P<0.01),符合衰老模型特点,且SM22α染色模糊暗淡,边缘不显,荧光强度明显减弱,SM22αmRNA及蛋白表达均下降(P<0.01)。与模型组比较,药物干预后,可以有效的增加β-半乳糖苷酶染色蓝染细胞数量,减少G0/G1期的细胞数量,同时增加S期的细胞数量,增强SM22α荧光染色强度,使得SM22αmRNA及蛋白表达均增加,并具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:复制性衰老的血管平滑肌细胞可以作为衰老研究的模型;骨架蛋白相关蛋白SM22α的形态、基因表达和蛋白表达在细胞衰老过程中改变明显,其可能与骨架蛋白一同参与了平滑肌细胞衰老的进程;人参三七川芎提取物一定程度上延缓了血管平滑肌细胞的老化,且对于SM22α有明显干预作用,并可能通过此作用及对骨架蛋白的作用一同延缓血管老化的进程。

人参三七川芎提取物对复制性衰老内皮细胞的影响和钙黏蛋白的作用

目的:观察人参三七川芎提取物对复制性衰老人心脏微血管内皮细胞(HCMEC)的影响和血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)的作用。方法:以HCMEC为研究对象,第8代HCMEC建立复制性衰老HCMEC模型,实验分为衰老模型组(衰老组)、白藜芦醇组(10μmol·L-1)、人参三七川芎低、中、高剂量组(50,100,200 mg·L-1),相应药物作用24 h后,采用β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)衰老染色鉴定,CCK-8检测细胞增殖能力,流式细胞仪分析细胞周期,采用激光免疫共聚焦显微镜观察VEcadherin的形态学改变,Western blot检测VE-cadherin蛋白的表达情况。结果:与衰老组比较,人参三七川芎提取物各剂量组减少SA-β-gal衰老染色比例,促进细胞的增殖,减少G0/G1期细胞比例,增加G2/M期细胞比例,保持VE-cadherin形态的完整性,升高VE-cadherin蛋白的表达,均具有明显的统计学差异(P<0.05,P<0.01)。结论:人参三七川芎提取物能够延缓衰老,促进增殖和有丝分裂,保持复制性衰老HCMEC VE-cadherin的完整性和蛋白的表达,这可能是益气活血中药延缓内皮衰老的重要机制所在。

人参-三七-川芎提取物对高糖高脂诱导血管内皮细胞衰老的影响

目的:观察益气活血中药人参、三七、川芎提取物延缓高糖高脂诱导的血管内皮细胞衰老的分子生物学机制。方法:采用40mmol·L^-1葡萄糖和100μmol·L^-1棕榈酸钠造模,实验分为空白组、模型组和中药低、中、高剂量组(50,100,200mg·L^-1),干预48h。采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)检测细胞增殖能力;细胞衰老β-半乳糖苷酸(SA-gal)染色检测细胞衰老程度;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞p16,p21蛋白表达水平的变化;免疫荧光检测p-H2A.X(Ser139)表达,线粒体ROS(mtROS)产生和线粒体膜电位(MMP)改变。结果:与空白组比较,模型组细胞增殖能力及MMP水平降低(P<0.01),SA-β-gal蓝染细胞数量,mtROS生成和p16,p21,p-H2A.X(Ser139)表达增加(P<0.05,P<0.01);而与模型组比较,人参-三七-川芎提取物可提高细胞增殖能力和MMP水平(P<0.01),减少SA-β-gal蓝染细胞数量和mtROS生成(P<0.01),并能够降低p16,p21和p-H2A.X(Ser139)的表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论:益气活血中药人参-三七-川芎提取物能够延缓高糖高脂引起的血管内皮细胞衰老,其机制可能与升高线粒体膜电位,减少ROS生成引起的DNA损伤累积有关。

人参三七川芎提取物对衰老大鼠免疫器官及行为学的影响

目的：观察人参三七川芎提取物对老龄大鼠免疫器官功能及行为学的影响。方法：选取100只SD大鼠,饲养至18~19月龄,建立自然衰老大鼠模型。按体重水平分层后将成模大鼠随机分为5组,分别为衰老模型组、人参三七川芎中药低、中、高剂量组（2 305.64,1 152.82,576.41 mg·kg^-1）和白藜芦醇组（50 mg·kg^-1）,另设2月龄SD大鼠做为青年对照组。干预3个月后,进行旷场实验,记录大鼠跨越方格总数和总行径距离,检测大鼠血清活性氧族（reactive oxygen species,ROS）含量,胸腺系数和脾脏系数。结果：与青年组大鼠比较,自然衰老组大鼠跨格总数减少（P〈0.01）,总行径距离减少（P〈0.05）,血清ROS含量增高（P〈0.01）,胸腺系数和脾脏指数下降（均P〈0.01）。与衰老模型组比较,中药各组和白藜芦醇组大鼠的跨格次数和总行径距离均有增加（P〈0.05）;血清活性氧族（ROS）含量降低（P〈0.05）;中药高剂量组和白藜芦醇组可以增高大鼠的胸腺系数和脾脏系数（均P〈0.01）,中药中剂量组可以增高大鼠的胸腺系数（P〈0.05）。结论：人参三七川芎提取物可以改善自然衰老大鼠精神迟缓状态,增强其空间探索性,同时能够提高免疫器官功能和降低血清活性氧含量。

正交设计结合药效学实验优选四君子汤颗粒水提及精制工艺

目的优选四君子汤颗粒最佳水提及精制工艺。方法采取正交试验法,以人参皂苷Rg_1、Re、Rb_1及甘草酸、甘草苷的含量及出膏率为指标,考察浸泡时间、加水量、提取时间、提取次数4个因素,优选四君子汤颗粒最佳水提工艺;以药液质量浓度、药液含醇量、醇沉时间为考察因素,优选四君子汤颗粒最佳水提醇沉工艺;通过干预脾虚证药效学实验对醇沉前后提取物进行比较。结果四君子汤颗粒最佳水提工艺为加10倍量的水浸泡60 min,煎煮3次,每次30 min;最佳水提醇沉工艺为水提滤液浓缩至1 mL药液相当于原药材0.5 g,药液含醇量为80%,醇沉时间为12 h。与模型组比较,四君子汤颗粒水提物组、水提醇沉物组大鼠唾液淀粉酶活性和血清胃泌素含量均显著升高(P<0.05),且能提高脾虚大鼠小肠木糖吸收功能(P<0.05);与四君子汤颗粒的水提物组比较,四君子汤颗粒水提醇沉物组D-木糖排泄率有显著性差异(P<0.05),但唾液淀粉酶活性和血清胃泌素含量无显著性差异(P>0.05)。结论四君子汤颗粒不宜采用醇沉工艺进行精制,因此,选择水提工艺作为四君子汤颗粒的最佳提取工艺。

人参茎叶提取物及配伍石菖蒲挥发油的大鼠在体肠吸收动力学的研究

该试验通过研究复方金思维方中君药人参茎叶提取物配伍使药石菖蒲挥发油后有效成分人参皂苷Rg1,人参皂苷Re,人参皂苷Rd肠吸收的变化,验证该方中佐药石菖蒲能否协助君药人参茎叶总皂苷加强其疗效。试验采用大鼠在体单向肠吸收模型考察3种皂苷成分及配伍石菖蒲挥发油后的肠吸收情况,以高效液相色谱法测定灌流液中人参皂苷Rg1,人参皂苷Re,人参皂苷Rd的质量浓度,计算其肠吸收动力学参数;人参茎叶提取物中人参皂苷Rg1,人参皂苷Re,人参皂苷Rd在小肠上段吸收速率较大;药物浓度对其吸收速率没有显著性影响,提示吸收机制为被动扩散;石菖蒲挥发油对其在小肠的吸收有显著促进作用,说明方中人参皂苷提取物与石菖蒲的配伍科学合理。

人参三七川芎提取物对高糖高脂诱导血管衰老小鼠肠道菌群的影响

观察血管衰老小鼠肠道菌群的变化,探究血管衰老与肠道菌群的关系及人参三七川芎提取物对血管衰老小鼠肠道菌群的影响。以腹腔注射链脲佐菌素(STZ)联合喂养高脂饲料诱导小鼠血管衰老模型,生化法检测血清胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)以及血糖(GLU),HE染色法检测小鼠胸主动脉形态,Western blot法检测小鼠胸主动脉周期蛋白依赖激酶抑制因子2A(p16)、周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(p21)蛋白表达。用Illumina MiSeq高通量测序技术检测小鼠肠道菌群16S rDNA基因,探索各组小鼠肠道菌群的变化。结果显示,中药低、高剂量组小鼠GLU水平降低,但各项血脂指标变化不明显,而二甲双胍能够明显下调小鼠GLU(P<0.01)、CHO和LDL-C水平(P<0.05),给药各组血管内膜损伤不明显,中膜少量增生,p16和p21蛋白表达明显下降(P<0.05)。各组小鼠肠道菌群在门水平上均由厚壁菌门(Firmicutes,F)和拟杆菌门(Bacteroidetes,B)组成为主,但是B/F比值有差异,与青年组和对照组相比,模型组B/F比值显著降低(P<0.01);与模型组相比,中药高剂量组和二甲双胍组B/F比值显著升高(P<0.05)。各组小鼠肠道中都存在优势菌群和差异菌群。结果表明,人参三七川芎提取物可以通过升高B/F比值,改善肠道菌群结构,营造良好的肠道环境,为其降低血糖血脂,延缓血管衰老提供新的可能通路。

人参-三七-川芎提取物延缓过氧化氢诱导的内皮细胞衰老中线粒体氧化应激的作用

目的:通过观察人参-三七-川芎提取物(GNC)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)衰老中线粒体氧化应激的影响,探讨GNC对衰老HUVECs的治疗机制。方法:本研究以HUVECs作为研究对象,H_(2)O_(2)诱导内皮细胞衰老作为模型,实验分为空白组,H_(2)O_(2)组,H_(2)O_(2)+DMSO组(DMSO),白藜芦醇组(Resv)及GNC提取物低(GNC-L),中(GNC-M),高(GNC-H)质量浓度组,除空白组,H_(2)O_(2)组外,其余各组分别给予DMSO 1 mL·L^(-1),Resv 8μmol·L^(-1),GNC 400,300,200 mg·L^(-1)药物干预,24 h后除空白组外给予300μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)诱导HUVECs衰老,再给予正常培养基培养24 h。采用衰老特异性β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法鉴定细胞衰老程度,流式细胞仪分析细胞周期,采用Mito SOX RED荧光染色法测定细胞内线粒体活性氧(mtROS)水平,以JC-10为荧光探针检测细胞内线粒体膜电位变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测含锰超氧化物歧化酶(MnSOD)与磷酸化(p-)p66的蛋白表达。结果:SA-β-gal染色结果显示,与空白组比较,H_(2)O_(2)组SA-β-gal染色蓝染细胞显著增多(P<0.01);与H_(2)O_(2)组比较,各浓度组SA-β-gal染色蓝染细胞显著减少(P<0.01);细胞周期结果显示,与空白组比较,H_(2)O_(2)组G0/G1期细胞数量比例明显增多(P<0.05),G2/M期细胞比例明显减少(P<0.05);与H_(2)O_(2)组比较,GNC各组及Resv组G0/G1期细胞数量比例明显减少(P<0.05),GNC-H组,Resv组在G2/M期细胞比例明显增加(P<0.05)。线粒体ROS荧光结果显示,与空白组比较,H_(2)O_(2)组强度明显减弱(P<0.05);与H_(2)O_(2)组比较,GNC-H,GNC-M组强度明显增高(P<0.05);线粒体膜电位结果显示,与空白组比较,H_(2)O_(2)组荧光强度显著下降(P<0.01);与H_(2)O_(2)组比较,GNC-H,GNC-M,GNC-L组线粒体膜电位荧光强度显著增高(P<0.01),Resv组明显增高(P<0.05);Western blot结果显示,与空白组比较,H_(2)O_(2)组MnSOD含量明显降低(P<0.05);与H_(2)O_(2)组比较,GNC-H与GNC-M组表达明显增多(P<0.05);与空白组比较,H_(2)O_(2)组p-p66含量显著增高(P<0.01);与H_(2)O_(2)组比较,各用药组表达显著降低(P<0.01),表明用药后可减轻细胞内线粒体氧化应激反应。结论:中药人参-三七-川芎提取物可以延缓H_(2)O_(2)诱导的血管内皮细胞的衰老,药物干预后,细胞线粒体活性氧、线粒体膜电位及相关蛋白MnSOD,p-p66蛋白发生明显改善,氧化应激反应减轻,其机制可能是中药通过抑制线粒体氧化应激反应延缓血管内皮细胞衰老的进程。

人参-三七-川芎提取物延缓高糖诱导的小鼠血管衰老的机制探讨

目的:从单磷酸腺苷活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(AMPK/mTOR)通路探讨人参-三七-川芎提取物对高糖诱导的小鼠血管衰老的保护作用。方法:130只雄性C57BL/6小鼠先随机分为空白组和高糖组,高糖组腹腔注射链脲佐菌素(STZ),并用高脂饮食连续性喂养7个月后再次随机分组,分为模型组、人参-三七-川芎提取物低剂量组(0.819 g·kg^(-1))、人参-三七-川芎提取物高剂量组(1.638 g·kg^(-1))及二甲双胍组(150 mg·kg^(-1)),灌胃给药,每天1次,连续9周,期间检测小鼠体质量和血糖变化。给药结束后,苏木素-伊红(HE)染色检测小鼠胸主动脉形态,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠胸主动脉周期蛋白依赖激酶抑制因子2A(p16),周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(p21),AMPK,p-AMPK,mTOR,pmTOR,肝激酶B1(LKB1),p-LKB1,核糖体蛋白s6激酶(p70s6k),p-p70s6k蛋白表达情况。结果:与空白组相比,模型组小鼠体质量显著降低、血糖显著升高(P<0.01),在药物干预9周后,各给药组小鼠体质量无明显差异,血糖值较模型组明显下降(P<0.05,P<0.01)。与空白组相比,模型组内膜损伤严重且有增生,中膜明显增生且排列不整齐,给药各组内膜损伤不明显,中膜少量增生,p16,p21,mTOR,p-mTOR,p70s6k,p-p70s6k蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01),AMPK,p-AMPK,LKB1,p-LKB1蛋白表达明显下降(P<0.05,P<0.01)。药物干预后,各给药组p16,p21,mTOR,p-mTOR,p70s6k,p-p70s6k蛋白表达明显下降(P<0.05,P<0.01),AMPK,p-AMPK,LKB1,p-LKB1蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:高糖能够诱导小鼠主动脉衰老,人参-三七-川芎提取物可能通过AMPK/mTOR通路改善由高糖诱导的小鼠主动脉衰老。